Liproxstatin-1在制备防治主动脉夹层的药物中的应用和其药物组合物

ferroptosis-mediated anticancer effects[j].cell metabolism,2021.)。但其是否能用于预防和治疗主动脉夹层尚未见报道，因此，本发明申请试图liproxstatin-1对主动脉夹层的发病以及预防其破裂是否具有积极意义。


技术实现要素：

[0004]
针对上述现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种liproxstatin-1在制备防治主动脉夹层的药物中的应用和其药物组合物。该liproxstatin-1可以通过抑制主动脉中膜平滑肌的损失与弹性纤维的退行性变来防治主动脉夹层，降低主动脉夹层的发生率和死亡率。
[0005]
为达到上述目的，本发明通过下述技术方案实现：
[0006]
第一方面，本发明提供一种liproxstatin-1在制备防治主动脉夹层的药物中的应用。
[0007]
优选的是，liproxstatin-1用于通过抑制主动脉中膜平滑肌的损失与弹性纤维的退行性变来防治主动脉夹层。
[0008]
第二方面，本发明提供一种防治主动脉夹层的药物组合物，所述药物组合物包括有效剂量的liproxstatin-1、以及药学上可接受的载体。
[0009]
优选的是，所述药物组合物为药品和/或保健品。
[0010]
优选的是，所述药物组合物的给药方式采用口服给药、静脉注射给药和皮下包埋给药中的至少一种。
[0011]
进一步优选的是，所述药物组合物的给药方式采用口服给药。
[0012]
药物在需要的时候可以加入一种或多种药学上可接受的载体。所述载体包括但不限于稀释剂、赋形剂、填充剂、湿润剂、表面活性剂以及润滑剂等。此外，在药物组合物中还可以加入香味剂、甜味剂等其他辅助剂。
[0013]
本药物组合物在制备过程中可以按照药学领域常规的生产方法制备，将活性成分与一种或多种载体混合以制成注射剂、粉剂和片剂等多种形式。
[0014]
本发明与现有技术相比，具有如下优点及有益效果：该liproxstatin-1可以通过抑制主动脉中膜平滑肌的损失与弹性纤维的退行性变来防治主动脉夹层，降低主动脉夹层的发生率和死亡率。本发明阐述了liproxstatin-1的临床转化价值，也为研究主动脉疾病的早期防治提供了新思路。
附图说明
[0015]
图1为bapn诱导主动脉夹层小鼠及liproxstatin-1预防主动脉夹层发生的动物模型构建图。
[0016]
图2为对照组、bapn组、bapn liproxstatin-1预防组小鼠代表性主动脉大体解剖标本对比图。
[0017]
图3为bapn组、bapn liproxstatin-1预防组小鼠主动脉夹层的发病率与破裂死亡率对比图。
[0018]
图4为对照组、bapn组、bapn liproxstatin-1预防组小鼠代表性主动脉he和evg图片。
[0019]
图5为对照组、bapn组、bapn liproxstatin-1预防组小鼠主动脉中弹力纤维断裂情况对比图。
[0020]
图6为对照组、bapn组、bapn liproxstatin-1预防组小鼠在给药四周后升主动脉和主动脉弓的血管直径对比图。
[0021]
图7为bapn诱导主动脉夹层小鼠及liproxstatin-1治疗主动脉夹层发生的动物模型构建图。
[0022]
图8为bapn组、bapn liproxstatin-1治疗组小鼠代表性主动脉大体解剖标本对比图。
[0023]
图9为bapn组、bapn liproxstatin-1治疗组小鼠主动脉夹层的发病率与破裂死亡率对比图。
具体实施方式
[0024]
以下结合附图、实施例和实验例对本发明作进一步的详细描述。当然，本发明的保护范围并不限于下述实施例。本领域专业技术人员能够理解，在不背离本发明精神的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。本发明对实验中所使用到的材料以及试验方法进行一般性和/或具体的描述。虽然为实现本发明目的所使用的许多材料和操作方法是本领域公知的，但本发明仍然在此作尽可能详细的描述。以下实施例是进一步说明本发明，而不是限制本发明。任何依据本发明构思所作出的仅仅为形式上的而非实质性的等效变换都应视为本发明技术方案的范畴。
[0025]
下述实施例中所述试验方法或测试方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均从常规商业途径获得，或以常规方法制备。
[0026]
1、预防作用小鼠主动脉夹层模型的建立
[0027]
本研究采用β-氨基丙腈(β-aminopropionitrile,bapn,a3134；sigma-aldrich)建立小鼠主动脉夹层模型，模型建立方法与步骤如图1。c57bl/6j雄性小鼠购买于南京集萃药康公司。在小鼠三周时将bapn加入小鼠的日常自由饮用水中，浓度为0.6mg/ml，检测小鼠每日生命体征。若出现死亡则立即尸检，观察并判断其是否死于主动脉夹层。给药4周后，通过超声测量其主动脉直径，并进行解剖判断其是否发生主动脉夹层，部分所取主动脉标本如图2。后将获得的主动脉标本保存于4％多聚甲醛，经脱水包埋为石蜡标本以作进一步病理学研究。
[0028]
2、liproxstatin-1对小鼠主动脉夹层形成的预防作用
[0029]
通过腹腔注射的方式，将liproxstatin-1以5mg/kg的给药量注入小鼠体内。首先将药物溶解于dmso中，再依次加入peg300和tween 80，最后加入灭菌水，按5％dmso 40％peg300 10％tween 80 45％h2o比例溶解药物，混匀并观察无析出后打药。由于小鼠周龄较小，频繁腹腔注射可能会影响其生存率，入组后第一周采取隔日打药的方法给药，第二周到第四周每日打药至实验结束。四周后解剖bapn组与bapn liproxstatin-1组，观察并评估其是否发生主动脉夹层并将获得的主动脉标本保存于4％多聚甲醛以留存病理学标本。结果如图3显示，bapn给药四周小鼠的夹层发生率为91.67％，夹层破裂死亡率为66.67％；而给与liproxstatin-1的小鼠夹层发生率为58.33％，破裂死亡率为33.33％，较bapn组有显著且具有统计学意义的下降。此外liproxstatin-1也能够明显抑制小鼠升主动脉与主动脉弓
部的扩张，如图6。
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3、免疫组化分析liproxstatin-1对小鼠主动脉夹层发生的预防作用
[0031]
通过苏木素-伊红染色(he，切片脱蜡水合，苏木精中浸泡10min后蒸馏水冲洗，在1％盐酸酒精中浸泡2s后蒸馏水冲洗，用1％伊红浸泡组织5min后蒸馏水水冲洗，脱水后进行封片)和弹力纤维染色(evg，切片脱蜡水合，按照5:2:2的比例将酒精苏木素、碘液和10％三氯化铁混合，用混合液孵育组织30分钟，通过2％三氯化铁分化组织并在显微镜下观察，van gieson染液染色1分钟，浸泡95％乙醇1s后置于100％乙醇5min浸泡两次，最后二甲苯5min浸泡三次后封片)评判小鼠血管结构和弹力纤维断裂情况。结果显示如图4，bapn组小鼠主动脉假腔形成且伴有弹性纤维的断裂，而bapn liproxstatin-1组小鼠主动脉血管完整，弹性纤维的断裂程度较bapn组有明显下降，如图5。提示liproxstatin-1可以预防主动脉夹层的发生。上述实施方式均为常规实验方法，所用材料和试剂均可从商家正规途径购买。
[0032]
4、治疗作用小鼠模型建立与治疗作用分析
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本研究采用β-氨基丙腈(β-aminopropionitrile,bapn,a3134；sigma-aldrich)建立小鼠主动脉夹层模型。c57bl/6j雄性小鼠购买于南京集萃药康公司。在小鼠三周时将bapn溶于小鼠日常自由饮用水中，浓度为0.6mg/ml。十天后将小鼠分为实验组与对照组，对照组每日通过腹腔注射5mg/kg的dmso溶液。实验组将liproxstatin-1溶于dmso，以5％dmso 40％peg300 10％tween 80 45％h2o比例配药，以5mg/kg的剂量通过腹腔注射入小鼠体内，如图7。每日观测小鼠生命体征，在给药两周后统计由于夹层破裂死亡的小鼠，并取出主动脉标本如图8，拍照标记后保存于4％多聚甲醛以留存病理学标本。可得出对照组与实验组的夹层发生率分别为89.5％与71.4％，破裂死亡率分别为63.2％与42.9％，如图9。较对照组相比，给予liproxstatin-1的实验组在夹层发病率与破裂死亡率上都有统计学意义的降低。证明liproxstatin-1对治疗小鼠主动脉夹层有较好的作用。
[0034]
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修饰、等同替换、改进等等，均应包含在本发明的保护范围之内。