电化学法检测尿液总胆汁酸试剂盒及其应用

技术特征：
1.一种电化学法检测尿液总胆汁酸的试剂盒，其特征在于：包括3α-羟基类固醇脱氢酶(3α-hsd)、氧化型辅酶ⅰ(nad

)、三联吡啶钌(ru(bpy)
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)、磷酸盐缓冲液和丝网印刷电极(spce)。2.根据权利要求1所述的电化学检测尿液总胆汁酸试剂盒，其中，所述丝网印刷电极包括——印制电极的聚对苯二甲酸乙二醇酯(pet)基片、pet基片上印制的外部绝缘层和基片上一端的导线接口，其特征在于所述的基片上还印制有三个电极，分别为碳工作电极、ag/agcl参比电极和碳对电极，三个电极形成一圆形工作区域，各电极通过绝缘膜下印制的导线与接口相连。3.根据权利要求1所述的电化学法检测尿液总胆汁酸的试剂盒，其中，所述3α-hsd的活度为10ku/l。4.根据权利要求1所述的电化学法检测尿液总胆汁酸的试剂盒，其中，所述nad

的浓度为100.0mmol/l。5.根据权利要求1所述的电化学法检测尿液总胆汁酸的试剂盒，其中，所述ru(bpy)
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的浓度为100.0mmol/l。6.根据权利要求1所述的电化学法检测尿液总胆汁酸的试剂盒，其中，所述磷酸盐缓冲液的浓度为100.0mmol/l，ph值为8.5。7.根据权利要求6所述的电化学法检测尿液总胆汁酸的试剂盒，其中，所述磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffer saline，pbs)由100.0mmol/l磷酸氢二钠溶液和100.0mmol/l磷酸钠溶液混合而配制。8.一种如权利要求1-6所述电化学法检测尿液总胆汁酸的试剂盒的应用，其特征在于，包括如下具体步骤：1)尿液样品预处理：分别取10μl尿液和990μl超纯水加入1.5ml e
p
管中涡旋混匀，得到一次稀释的尿液样品；再分别取一次稀释的尿液样品10μl和990μl超纯水加入1.5ml e
p
管中涡旋混匀，得到二次稀释的尿液样品；2)分别取8μl 100.0mmol/l nad

，12μl 10.0ku/l 3α-hsd，7μl 100.0mmol/lru(bpy)
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，23μl超纯水和50μl浓度为100.0mmol/l的pbs溶液，ph值为8.5，加入1.5ml e
p
管中涡旋混匀，得到检测混合液；3)取步骤2得到的混合液50μl滴加在spce的工作区域，所述spce与电化学工作站相连，在1.20v恒电位下进行电流-时间曲线分析，至基线恒定时加入步骤1)得到的5μl 104倍稀释的尿液样品于所述工作电极表面，计算i-t曲线中的峰电流，其氧化峰电流与尿液胆汁酸浓度的对数在一定范围内呈线性关系，从而对待测尿液样品中的总胆汁酸含量进行间接定量测定。

技术总结
本发明公开了一种电化学法检测尿液总胆汁酸的试剂盒及其应用。所采用的电化学法检测尿液中的总胆汁酸试剂盒包含试剂：磷酸盐缓冲溶液、3α-羟基类固醇脱氢酶(3α-HSD)、氧化型辅酶Ⅰ(NAD


技术研发人员：张晓清 李彦茹 丁敏 吕文静 朱阳 宋紫苹
受保护的技术使用者：重庆医科大学国际体外诊断研究院
技术研发日：2022.01.05
技术公布日：2022/4/15