错误折叠蛋白检测试纸条及试剂盒的制作方法

1.本实用新型涉及检测技术领域，特别是涉及一种错误折叠蛋白检测试纸条及试剂盒。


背景技术：

2.孕妇血压升高并伴随有一种或多种器官、系统的异常例如蛋白尿、肾功能异常、头痛眼花、恶心呕吐、肝功能损伤等，严重到发生抽搐、昏迷现象的称为子痫。子痫前期是妊娠20周后出现的、症状复杂多变的、对孕妇和胎儿危害性很高的一种综合症。子痫前期的发病率在2-8％，在不发达国家包括非洲超过10％。子痫前期危害很大，可导致多种并发症和后遗症。事实上，子痫前期是导致孕妇死亡的第二大原因，全球每年有8万孕妇和50万胎儿因为子痫前期而死亡，子痫前期每年也导致了250万例的早产。
3.先兆子痫患者的尿液及胎盘中含有错误折叠蛋白的聚集体。这提示，妊娠常见并发症先兆子痫发病的病理生理学特点是存在蛋白质的错误折叠。与现有蛋白尿评估方法相比，刚果红试验能反映错误折叠蛋白的情况，从而更好地预测先兆子痫，判断患者是否需要进行引产，并有助于在症状出现前实现对先兆子痫的早期预防、诊断与干预。
4.传统技术中，如申请号为cn201580031385.0的专利申请中载明了一种检测人尿液样本中错误折叠蛋白的试剂盒，其内容为将尿液与刚果红染色液混匀，用加样装置加载到纤维素表面，形成斑点，没有错误折叠蛋白时，染色液与结合纤维素表面，斑点不扩散，有错误折叠蛋白时，斑点径向扩散，形成图像，可观测。但是该方法具有如下缺点：(1)对用户操作要求高，滴加样本需要非常一致的操作，否则导致斑点的大小形态不一致，影响结果判断。(2)斑点的扩散图像对操作者的判读要求高，并且主观性因素影响结果判读，即使借助其他设备判读，其结果也受斑点扩散的状态影响。
5.再如申请号为cn201680041285.0的专利中载明了一种检测人尿液样本中错误折叠蛋白的试剂盒，其内容为一种试纸条，分别由样品接受材料(样品垫)、检测试剂(将刚果红染色液置于试纸条上)、捕获器、毛细管床(显示条)组成，以上材料按顺序依次组装，将尿液滴加到样品接受材料，样品层析与刚果红染色液混合，流经捕获器，没有错误折叠蛋白，染色液被捕获器捕获，显示条没有颜色，有错误折叠蛋白时，染色液流过捕获器，显示条显示颜色。但是该方法具有如下缺点：(1)组成材料多且复杂，成本高，效率低。(2)各组成材料生产优化要求高，组装复杂，对产品一致性影响大。(3)染色液干燥在试纸条上，每个试纸条染色液的量不一致，且测试时染色液释放不均一，带来极大的误差和重复性性问题。(4)经过多个材料反应，每个材料都有误差性，误差叠加放大。


技术实现要素：

6.基于此，有必要提供一种错误折叠蛋白检测试纸条。本实用新型的错误折叠蛋白检测试纸条操作简单、判读直观、测试重复性好，具有极高的灵敏度、重复性，操作方法快速、简便。
7.一种错误折叠蛋白检测试纸条，包括检测底板以及检测试纸，所述检测试纸连接于所述检测底板，所述检测试纸为纤维素材料，所述检测试纸上具有加样区以及检测区，所述加样区与所述检测区间隔分布。
8.在其中一些实施例中，还包括试剂卡套，所述试剂卡套设置有腔体以及与所述腔体相通的加样窗口、检测窗口，所述加样窗口与所述加样区相对，所述检测底板与所述检测试纸均设置于所述腔体内，所述检测试纸靠近于所述加样窗口与所述检测窗口，所述检测窗口与所述检测区相对。
9.在其中一些实施例中，所述检测窗口呈长条形窗口。
10.在其中一些实施例中，所述检测窗口的长度为1cm-5cm。
11.在其中一些实施例中，所述加样窗口呈圆形窗口。
12.在其中一些实施例中，所述加样区与所述检测区之间的间隔的距离为0.3cm-5cm。
13.在其中一些实施例中，所述腔体内设置有卡槽，所述检测底板与所述检测试纸均设置于所述卡槽内，所述卡槽的尺寸与检测底板适配。
14.在其中一些实施例中，所述试剂卡套上还设置有用于盛放染色液的染色液槽，所述染色液槽的槽口处设置有密封件。
15.在其中一些实施例中，所述密封件为密封膜。
16.在其中一些实施例中，所述检测试纸的厚度为0.1mm-5mm。
17.本实用新型的另一目的还在于提供一种错误折叠蛋白检测试剂盒。
18.一种错误折叠蛋白检测试剂盒，包括所述的错误折叠蛋白检测试纸条。
19.上述错误折叠蛋白检测试纸条的检测试纸的材料为纤维素材质，纤维素材质的纤维素膜能够捕获刚果红及其类似物染色液，并具有多空和毛细管作用，能够提供毛细作用，使液体侧向层析。上述错误折叠蛋白检测试纸条的检测原理如下：将尿液或脑脊液样本(10-100μl)与染色液(10-150μl)充分混匀后，使用移液器吸取一定量(20-150μl)的样本、染色液的混合液，加入到上述错误折叠蛋白检测试纸条的加样窗口内的加样区，染色液和样本的混合液进入纤维素膜的材料内，并沿纤维素膜侧向层析，如果样本中不含错误折叠蛋白，则样本能够全部被纤维素捕获，染色液不会层析至检测区，检测窗口处不会显示颜色，如果样本中含有错误折叠蛋白，则染色液和错误折叠蛋白蛋白的结合物则不被纤维素捕获，会层析到检测区，并在检测窗口处显示颜色，且颜色的长度，能够反应错误折叠蛋白含量的多少，两者呈正相关。
20.上述错误折叠蛋白检测试纸条设置加样窗口、检测窗口，实现了样本加载、染色液捕获、显色观察等功能，方便检测。
21.上述错误折叠蛋白检测试纸条的检测试纸具有一定的厚度，能够提供足够的床体积以结合一定量的染色液，优选地，检测试纸的厚度为0.1mm-5mm，检测试纸的厚度不宜于过大也不宜于过小，当检测试纸的厚度过大时，材料成本上升，当检测试纸的厚度过小时，不能过提供足够的床体积，检测液体会有外泄的现象，不利于检测。
22.上述错误折叠蛋白检测试纸条设置了染色液槽以用于盛放染色液，在检测时，使用者可直接将样本加入染色液槽内进行染色，染色后可直接滴加至加样窗口处的检测试纸上，使用便捷，另外，当有多个样本时，可以从染色液槽内吸取染色液，分别与多个样本混匀，如此能够保证同一批次检测的多个样本的染色液的均一性和稳定性，提高检测结果的
准确性。
附图说明
23.为了更清楚地说明本技术实施例中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单的介绍。显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本技术的一些实施例，对本领域技术人员来说，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
24.为了更完整地理解本技术及其有益效果，下面将结合附图来进行说明。其中，在下面的描述中相同的附图标号表示相同部分。
25.图1为本实用新型一实施例所述的错误折叠蛋白检测试纸条示意图；
26.图2为本实用新型一实施例所述的错误折叠蛋白检测试纸条部分结构示意图。
27.附图标记说明
28.10、错误折叠蛋白检测试纸条；100、检测底板；200、检测试纸；300、试剂卡套；301、加样窗口；302、检测窗口；303、染色液槽。
具体实施方式
29.为使本实用新型的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本实用新型的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本实用新型。但是本实用新型能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本实用新型内涵的情况下做类似改进，因此本实用新型不受下面公开的具体实施例的限制。
30.在本实用新型的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“厚度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”、“顺时针”、“逆时针”、“轴向”、“径向”、“周向”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本实用新型和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本实用新型的限制。
31.此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。在本实用新型的描述中，“多个”的含义是至少两个，例如两个，三个等，除非另有明确具体的限定。
32.在本实用新型中，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”、“固定”等术语应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或成一体；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通或两个元件的相互作用关系，除非另有明确的限定。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本实用新型中的具体含义。
33.在本实用新型中，除非另有明确的规定和限定，第一特征在第二特征“上”或“下”可以是第一和第二特征直接接触，或第一和第二特征通过中间媒介间接接触。而且，第一特征在第二特征“之上”、“上方”和“上面”可是第一特征在第二特征正上方或斜上方，或仅仅表示第一特征水平高度高于第二特征。第一特征在第二特征“之下”、“下方”和“下面”可以
是第一特征在第二特征正下方或斜下方，或仅仅表示第一特征水平高度小于第二特征。
34.需要说明的是，当元件被称为“固定于”或“设置于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“上”、“下”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的，并不表示是唯一的实施方式。
35.除非另有定义，本文所使用的所有的技术和科学术语与属于本实用新型的技术领域的技术人员通常理解的含义相同。本文中在本实用新型的说明书中所使用的术语只是为了描述具体的实施例的目的，不是旨在于限制本实用新型。本文所使用的术语“和/或”包括一个或多个相关的所列项目的任意的和所有的组合。
36.本技术实施例提供一种错误折叠蛋白检测试纸条10，以解决现有的检测设备结构复杂、成本高、效率低的问题。以下将结合附图对进行说明。
37.本技术实施例提供的错误折叠蛋白检测试纸条10，示例性的，请参阅图1所示，图1为本技术实施例提供的错误折叠蛋白检测试纸条10的结构示意图。本技术的错误折叠蛋白检测试纸条10能够用于错误折叠蛋白检测。
38.为了更清楚的说明错误折叠蛋白检测试纸条10的结构，以下将结合附图对错误折叠蛋白检测试纸条10进行介绍。
39.示例性的，请参阅图1所示，一种错误折叠蛋白检测试纸条10，包括检测底板100以及检测试纸200。参见图2所示，检测试纸200重叠连接于检测底板100。检测试纸200为纤维素材料制成的纤维素膜。检测试纸200上具有加样区以及检测区。加样区与检测区间隔分布。
40.在其中一些实施例中，错误折叠蛋白检测试纸条10还包括试剂卡套300。试剂卡套300设置有腔体以及与腔体相通的加样窗口301、检测窗口302。检测底板100与检测试纸200均设置于腔体内，检测试纸200靠近于加样窗口301与检测窗口302，其中，加样窗口301与加样区相对，检测窗口302与检测区相对。上述错误折叠蛋白检测试纸条10设置加样窗口301、检测窗口302，实现了样本加载、染色液捕获、显色观察等功能，方便检测。
41.在其中一些实施例中，检测窗口302呈长条形窗口。检测时，如果样本中含有错误折叠蛋白，则染色液和错误折叠蛋白蛋白的结合物则不被纤维素捕获，会层析到检测区，并在检测窗口302处显示颜色，且颜色的长度，能够反应错误折叠蛋白含量的多少，两者呈正相关，因此，本实施例设置长条形窗口能够实现错误折叠蛋白含量多少的直观反馈。
42.在其中一些实施例中，检测窗口302的长度为1cm-5cm。检测窗口302的长度的具体长度可以根据需要进行设置。例如，在一个具体实施例中，检测窗口302的长度为2cm。在另一个具体实施例中，检测窗口302的长度为5cm。
43.在其中一些实施例中，加样窗口301呈圆形窗口。
44.在其中一些实施例中，加样区与检测区之间的间隔的距离为0.3cm-5cm。例如，在一个具体实施例中，加样区与检测区之间的间隔的距离为0.5cm。在另一个具体实施例中，加样区与检测区之间的间隔的距离为2cm。
45.在其中一些实施例中，腔体内设置有卡槽。检测底板100与检测试纸200均设置于卡槽内，卡槽的尺寸与检测底板100适配，卡槽能够实现对检测底板100的位置固定，卡槽可
以在加工试剂卡套300的时候一体成型。
46.在其中一些实施例中，试剂卡套300上还设置有用于盛放染色液的染色液槽303，染色液槽303的槽口处设置有密封件。上述错误折叠蛋白检测试纸条10设置了染色液槽303以用于盛放染色液，在检测时，使用者可直接将样本加入染色液槽303内进行染色，染色后可直接滴加至加样窗口301处的检测试纸200上，使用便捷，另外，当有多个样本时，可以从染色液槽303内吸取染色液，分别与多个样本混匀，如此能够保证同一批次检测的多个样本的染色液的均一性和稳定性，提高检测结果的准确性。
47.在其中一些实施例中，密封件为密封膜。密封膜易于被移液枪穿刺，进行吸取染色液。
48.在其中一些实施例中，检测试纸200的厚度为0.1mm-5mm。上述错误折叠蛋白检测试纸条10的检测试纸200具有一定的厚度，能够提供足够的床体积以结合一定量的染色液，优选地，检测试纸200的厚度为0.1mm-1mm，检测试纸200的厚度不宜于过大也不宜于过小，当检测试纸200的厚度过大时，材料成本上升，当检测试纸200的厚度过小时，不能过提供足够的床体积，检测液体会有外泄的现象，不利于检测。
49.上述错误折叠蛋白检测试纸条10的检测试纸200的材料为纤维素材质，纤维素材质的纤维素膜能够捕获刚果红及其类似物染色液，并具有多空和毛细管作用，能够提供毛细作用，使液体侧向层析。上述错误折叠蛋白检测试纸条10的检测原理如下：将尿液或脑脊液样本(10-100μl)与染色液(10-150μl)充分混匀后，使用移液器吸取一定量(20-150μl)的样本、染色液的混合液，加入到上述错误折叠蛋白检测试纸条10的加样窗口301内的加样区，染色液和样本的混合液进入纤维素膜的材料内，并沿纤维素膜横向层析，如果样本中不含错误折叠蛋白，则样本能够全部被纤维素捕获，染色液不会层析至检测区，检测窗口302处不会显示颜色，如果样本中含有错误折叠蛋白，则染色液和错误折叠蛋白蛋白的结合物则不被纤维素捕获，会层析到检测区，并在检测窗口302处显示颜色，且颜色的长度，能够反应错误折叠蛋白含量的多少，两者呈正相关。
50.综上，上述的错误折叠蛋白检测试纸条10操作简单、判读直观、测试重复性好，具有极高的灵敏度、重复性，操作方法快速、简便，对使用者的操作要求低。错误折叠蛋白检测试纸条10的制备材料简单均一，能够很好的控制质量、保证产品测试结果的均一性。上述的错误折叠蛋白检测试纸条10结构简单，组装生产简单。上述的错误折叠蛋白检测试纸条10的检测结果判读标准化，根据有无颜色判断，而且可根据颜色带的长度，进行半定量观察，大大增加检测的临床价值。
51.本实用新型的另一目的还在于提供一种错误折叠蛋白检测试剂盒。
52.一种错误折叠蛋白检测试剂盒，包括染色液以及错误折叠蛋白检测试纸条10。
53.实施例1
54.本实施例采用上述的错误折叠蛋白检测试纸条10对子痫病人样品的进行检测。为判断上述的错误折叠蛋白检测试纸条10与临床子痫患者的符合率，取上述的错误折叠蛋白检测试纸条10进行了临床检测实验。采用第三方医疗机构提供的标本进行检测：10份已确诊子痫的患者尿液标本，10份体检健康人尿液标本，分别用上述的错误折叠蛋白检测试纸条10进行检测，结果见下表1所示。
55.表1
[0056][0057][0058]
由表1可知，本产品检测结果与临床诊断比较：正常符合率、异常符合率、总符合率均100％，一致性良好，满足临床标准要求。实验结果表明，上述的错误折叠蛋白检测试纸条10的错误折叠蛋白检测灵敏度高、准确度高，可进行半定量检测、观察。
[0059]
在上述实施例中，对各个实施例的描述都各有侧重，某个实施例中没有详述的部分，可以参见其他实施例的相关描述。
[0060]
以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
[0061]
以上所述实施例仅表达了本实用新型的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本实用新型专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本实用新型构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本实用新型的保护范围。因此，本实用新型专利的保护范围应以所附权利要求为准。