一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物和应用的制作方法

1.本发明属于生物发酵技术领域，涉及一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物和应用，尤其涉及一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物和在制备日化产品中的应用。


背景技术：

2.生姜为姜科姜属草本宿根植物，地下茎药食两用多年生栽培作物，具有芳香和辛辣味。生姜可以降低胆固醇，防止血液凝块、稀释血液，止吐强心、抗运动病、杀菌抗炎症等，对消化系统的疾病、心血管疾病、肿瘤癌症等有防治作用。我国生姜加工过程中常常产生大量的副产物，例如姜汁生产过程中，产生了大量的生姜渣，生姜渣中含有有效成分：生姜蛋白酶、姜油树脂、生姜多糖、生姜纤维等，如果姜渣得不到妥善的处理和有效的利用，很容易腐烂变臭，污染环境，也造成生姜原料浪费。
3.乳酸菌是一组利用碳源发酵且主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称。乳酸菌发酵提取物在化妆品、护肤品里主要作用是皮肤调理剂，其发酵产物和提取物主要都是乳酸，外加一些蛋白酶，维生素系列，有机物(醇，酚，不饱和脂肪酸)等，成分含量多，营养丰富，因此乳酸菌发酵产物在日化领域应用颇多。
4.cn107384594a公开了一种具有祛头屑活性的珊瑚姜精油及其制备方法和应用，包含以下步骤：1)将珊瑚姜残渣干燥粉碎，得珊瑚姜残渣粉末；2)将珊瑚姜残渣粉末121℃高温灭菌30min，然后冷却，取出；3)将灭菌冷却后的珊瑚姜残渣粉末，加入0.1％乳酸菌粉，加入20倍重量份蒸馏水混匀，封口，于40℃中连续发酵6d；4)发酵结束后，取出样品，45℃水浴蒸干，得发酵珊瑚姜残渣粉末；5)将发酵后的珊瑚姜残渣粉末加入25倍重量份的蒸馏水浸泡1.0～1.5h后进行水蒸气蒸馏；收集蒸馏液，加入nacl，然后用亲脂性有机溶剂萃取3次，收集有机萃取液；6)将所得有机萃取液使用无水na2so4干燥后，于45℃水浴中回收乙醚，即得。该发明产物具有抑菌抗炎、抗氧化、祛头屑功效。
5.现有技术中利用乳酸菌对姜提取物进行发酵的策略还较少，且乳酸菌发酵的程度十分有限，难以使发酵产物的功效充分显现。因此，如何为乳酸菌提供更好的发酵条件，同时高效转化生姜资源，增加生姜生产的附加值，延伸生姜产业链的深加工是十分有意义的。


技术实现要素：

6.针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物和应用，尤其涉及一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物和在制备日化产品中的应用。
7.为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
8.第一方面，本发明提供一种姜提取物的发酵工艺，所述发酵工艺包括：配制含有姜提取物的发酵培养基，然后将乳酸菌种子液接种于含有姜提取物的发酵培养基中进行发酵，得到发酵液；将发酵液离心，得到姜提取物的发酵滤液。
9.本发明所涉及的发酵工艺以含有姜提取物的培养基为发酵基质，以乳酸菌为发酵
菌种，使得乳酸菌能充分发酵，得到的发酵产物功效丰富且显著，具有较强的抑菌消炎效果；抗氧化效果，能延缓皮肤衰老；还能软化角质、光滑嫩肤，很适合头皮去屑和油性皮肤；还具有良好的保湿效果，少量添加就有不错的保湿滋润肌肤的效果；还具有美白效果，增进上皮细胞新陈代谢的速度，促使肌肤更新，抑制黑色素酶的活性。且发酵产物温和，去除了姜渣提取液的辛辣感，具有温和肤感，特征性姜香气味。
10.优选地，所述姜提取物包括生姜提取物和/或姜渣提取物，更优选姜渣提取物。
11.本发明所涉及的发酵工艺所使用的姜提取物既可以是生姜提取物，也可以是工业副产物姜渣的提取物，优选姜渣提取物，这样能使姜渣得到妥善的处理和有效的利用，物尽其用，高效转化生姜资源，增加生姜生产的附加值，延伸生姜产业链的深加工，为生姜残渣工业化综合利用生产奠定基础。
12.优选地，所述姜渣提取物的制备方法包括：将姜渣与水混合进行水解反应，得到水解产物；然后将水解产物与复合酶混合进行酶解反应，过滤收集上清液，即为姜渣提取物；所述复合酶包括淀粉酶、糖化酶、纤维素酶和果胶酶。
13.该方法能使姜渣得到妥善的处理和有效的利用，物尽其用，高效转化生姜资源，增加生姜生产的附加值，延伸生姜产业链的深加工，为生姜残渣工业化综合利用生产奠定基础。通过水解结合复合酶酶解的工艺，其中淀粉酶、糖化酶、纤维素酶和果胶酶相互配合协同增效，能够最大程度地使生姜渣中的活性物质充分释放出来，最终使得提取物功效丰富且显著，具有较强的抑菌消炎效果；抗氧化效果，能延缓皮肤衰老；还能软化角质、光滑嫩肤，很适合头皮去屑和油性皮肤；还具有良好的保湿效果，少量添加就有不错的保湿滋润肌肤的效果；还具有美白效果，增进上皮细胞新陈代谢的速度，促使肌肤更新，抑制黑色素酶的活性。
14.优选地，所述淀粉酶、糖化酶、纤维素酶与果胶酶的质量比为(3-5):(1-3):(1-3):2，例如3:1:1:2、4:1:1:2、5:1:1:2、3:2:1:2、3:3:1:2、3:1:2:2、3:1:3:2、4:2:3:2、5:3:3:2等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
15.所述淀粉酶、糖化酶、纤维素酶与果胶酶的质量比特定选择为(3-5):(1-3):(1-3):2的范围，是因为在此条件下，四者在促进生姜渣中活性物质释放的效果更加显著。
16.优选地，所述淀粉酶的加入量与姜渣的质量比为(1-3):500，例如1:500、2:500、3:500等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
17.优选地，所述姜渣与水的质量比为1:(2-8)，例如1:2、1:3、1:4、1:5、1:6、1:7、1:8等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
18.优选地，所述水解反应的温度为80-95℃，例如80℃、82℃、85℃、87℃、90℃、92℃、95℃等；时间为1-3h，例如1h、1.5h、2h、2.5h、3h等；上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
19.优选地，所述水解反应过程中保持搅拌，搅拌的转速为50-300rpm，例如50rpm、100rpm、150rpm、200rpm、250rpm、300rpm等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
20.优选地，所述酶解反应的温度为35-65℃，例如35℃、40℃、42℃、45℃、48℃、50℃、55℃、60℃、65℃等；时间为1-3h，例如1h、1.5h、2h、2.5h、3h等；上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
21.优选地，所述过滤收集上清液后还进行冷冻干燥处理。
22.作为本发明的优选技术方案，所述姜渣提取物的制备方法包括：
23.(1)将姜渣与水混合进行水解反应，得到水解产物；
24.(2)然后将水解产物与淀粉酶及糖化酶混合，进行酶解反应；
25.(3)将步骤(2)得到的酶解产物与纤维素酶和果胶酶混合，进行酶解反应，过滤收集上清液，即为姜渣提取物。
26.优选地，步骤(2)所述酶解反应在50-60℃(例如50℃、55℃、60℃等)下进行1-3h(例如1h、1.5h、2h、2.5h、3h等)。
27.优选地，步骤(3)所述酶解反应在40-50℃(例如40℃、45℃、50℃等)下进行1-3h(例如1h、1.5h、2h、2.5h、3h等)。
28.优选地，所述含有姜提取物的发酵培养基包括姜提取物、碳源、氮源、无机盐、乳化剂和水。
29.优选地，所述含有姜提取物的发酵培养基以质量份数计包括姜提取物5-30份、碳源10-30份、氮源3-10份、无机盐5-15份、乳化剂0.5-1.5份和水1000份。
30.所述姜提取物的质量份数可以选择5份、8份、10份、15份、18份、20份、25份、28份、30份等。
31.所述碳源的质量份数可以选择10份、15份、18份、20份、25份、28份、30份等。
32.所述氮源的质量份数可以选择3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份、10份等。
33.所述无机盐的质量份数可以选择5份、6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份等。
34.所述乳化剂的质量份数可以选择0.5份、0.6份、0.7份、0.8份、0.9份、1.0份、1.1份、1.2份、1.3份、1.4份、1.5份等。
35.上述各项数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
36.优选地，所述含有姜提取物的发酵培养基的ph值为6-7，例如ph＝6、ph＝6.2、ph＝6.3、ph＝6.4、ph＝6.5、ph＝6.7、ph＝6.8、ph＝7等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
37.所述含有姜提取物的发酵培养基的ph值特定选择为6-7是因为在此ph环境下乳酸菌的发酵效果更好，制得的发酵产物在抑菌消炎、保湿、软化角质、抗衰方面的效果更加显著。
38.优选地，所述氮源包括蛋白胨和/或酵母粉，优选蛋白胨和酵母粉的组合。
39.优选地，所述蛋白胨与酵母粉的质量比为(1-3):1，例如1:1、2:1、3:1等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
40.本发明所使用的发酵培养基中的氮源优选蛋白胨和酵母粉的组合且在满足上述特定的比例关系下，获得的发酵产物在抑菌消炎、保湿、软化角质、抗衰方面的效果更加显著。
41.优选地，所述蛋白胨包括胰蛋白胨、牛骨蛋白胨、大豆蛋白胨、小麦蛋白胨或酵母蛋白胨中的任意一种或至少两种的组合，优选胰蛋白胨。是因为相对其他类型的蛋白胨，选用胰蛋白胨能使获得的发酵产物在抑菌消炎、保湿、软化角质、抗衰方面的效果更加显著。
42.优选地，所述碳源包括葡萄糖、蔗糖或果糖中的任意一种或至少两种的组合；所述
至少两种的组合例如葡萄糖和蔗糖的组合、蔗糖和果糖的组合、葡萄糖和果糖的组合等，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
43.优选地，所述无机盐包括柠檬酸三胺、乙酸钠、硫酸镁、硫酸锰、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾、氯化钠、硫酸亚铁、硫酸氨或硝酸钾中的任意一种或至少两种的组合；所述至少两种的组合例如柠檬酸三胺和乙酸钠的组合、硫酸镁、硫酸锰和磷酸氢二钾的组合、氯化钠、硫酸亚铁和硫酸氨的组合，其他任意的组合方式均可选择，在此便不再一一赘述。
44.优选柠檬酸三胺、乙酸钠、硫酸镁、硫酸锰和磷酸氢二钾的组合。
45.本发明所使用的发酵培养基中的无机盐优选柠檬酸三胺、乙酸钠、硫酸镁、硫酸锰和磷酸氢二钾的组合，获得的发酵产物在抑菌消炎、保湿、软化角质、抗衰方面的效果更加显著。
46.优选地，所述乳化剂包括吐温-80。
47.优选地，所述含有姜提取物的发酵培养基以质量份数计包括姜渣提取物5-30份、葡萄糖10-30份、胰蛋白胨2-5份、酵母粉1-5份、柠檬酸三胺1-3份、乙酸钠3-7份、硫酸镁0.1-0.3份、硫酸锰0.01-0.1份、磷酸氢二钾1-3份、吐温-80 0.8-1.2份和水1000份。
48.优选地，所述乳酸菌为从与生姜共生的细胞中筛选出的乳酸菌菌株。
49.本发明所涉及的发酵工艺中所使用的乳酸菌优选从生姜共生的益生菌中筛选出来，可以更好地与姜渣提取物相互协同进行发酵。
50.优选地，所述乳酸菌在所述发酵培养基中的接种量为3-5％，例如3％、3.5％、4％、4.5％、5％等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
51.优选地，所述发酵的温度为35-40℃，例如35℃、36℃、37℃、38℃、39℃、40℃等；时间为16-30h，例如16h、18h、20h、22h、25h、28h、30h等；溶氧量为5-20％，例如5％、8％、10％、12％、15％、18％、20％等；上述数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
52.优选地，所述发酵在搅拌下进行，所述搅拌的转速为200-600rpm，例如200rpm、300rpm、400rpm、500rpm、600rpm等，该数值范围内的其他具体点值均可选择，在此便不再一一赘述。
53.优选地，所述发酵的终点为发酵液的od600值不再升高，且发酵液的ph值降为4。
54.本发明所涉及的发酵工艺中各发酵条件例如发酵温度、发酵时间、溶氧量、搅拌参数、发酵终点相互配合，共同综合作用使得制得的产物具有更良好的抑菌消炎、保湿、软化角质、抗衰效果。
55.第二方面，本发明提供一种如第一方面所述的姜提取物的发酵工艺制得的发酵滤液。
56.第三方面，本发明提供一种如第二方面所述的发酵滤液在制备日化产品中的应用。
57.优选地，所述日化产品包括洗发水、护发素、沐浴露、洗面奶、精华水、精华液或面霜。
58.与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
59.本发明所涉及的发酵工艺以含有姜提取物的培养基为发酵基质，以乳酸菌为发酵菌种，使得乳酸菌能充分发酵，得到的发酵产物功效丰富且显著，具有较强的抑菌消炎效
果；抗氧化效果，能延缓皮肤衰老；还能软化角质、光滑嫩肤，很适合头皮去屑和油性皮肤；还具有良好的保湿效果，少量添加就有不错的保湿滋润肌肤的效果；还具有美白效果，增进上皮细胞新陈代谢的速度，促使肌肤更新，抑制黑色素酶的活性。且发酵产物温和，去除了姜渣提取液的辛辣感，具有温和肤感，特征性姜香气味。
附图说明
60.图1是测试例1细胞活性实验的统计结果图。
具体实施方式
61.下面通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案。本领域技术人员应该明了，所述实施例仅仅是帮助理解本发明，不应视为对本发明的具体限制。
62.下述实施例所使用的乳酸菌来源于市售菌株，来源于中国典型培养物保藏中心，型号为cctcc no:m 2017233(植物乳杆菌tr22)。
63.制备例1
64.本制备例提供一种姜渣提取物，制备方法如下：
65.(1)收集鲜姜榨汁剩余的姜渣，按照料液比(姜渣:去离子水＝1:5(质量比))，90℃水解2h，水解过程中保持搅拌(转速100转/分钟)。
66.(2)降温冷却，冷却过程中一直保持相同转速搅拌；当温度降至60℃时加入淀粉酶及糖化酶，加入酶之后调整搅拌转速(200转/分钟)，混合2h。
67.(3)当温度降至40℃时加入纤维素酶和果胶酶，继续搅拌2h。其中，淀粉酶、糖化酶、纤维素酶与果胶酶的质量比为2:1:1:1，淀粉酶的加入量与姜渣的质量比为2:500。
68.(4)放料，400目纱布过滤，收集姜渣提取滤液，冷冻干燥即得。
69.制备例2
70.本制备例提供一种姜渣提取物，制备方法如下：
71.(1)收集鲜姜榨汁剩余的姜渣，按照料液比(姜渣:去离子水＝1:8(质量比))，95℃水解1h，水解过程中保持搅拌(转速300转/分钟)。
72.(2)降温冷却，冷却过程中一直保持相同转速搅拌；当温度降至60℃时加入淀粉酶及糖化酶，加入酶之后调整搅拌转速(200转/分钟)，混合2h。
73.(3)当温度降至50℃时加入纤维素酶和果胶酶，继续搅拌1h。其中，淀粉酶、糖化酶、纤维素酶与果胶酶的质量比为5:3:3:2，淀粉酶的加入量与姜渣的质量比为1:500。
74.(4)放料，400目纱布过滤，收集姜渣提取滤液，冷冻干燥即得。
75.制备例3
76.本制备例提供一种姜渣提取物，制备方法如下：
77.(1)收集鲜姜榨汁剩余的姜渣，按照料液比(姜渣:去离子水＝1:2(质量比))，85℃水解3h，水解过程中保持搅拌(转速200转/分钟)。
78.(2)降温冷却，冷却过程中一直保持相同转速搅拌；当温度降至60℃时加入淀粉酶及糖化酶，加入酶之后调整搅拌转速(200转/分钟)，混合2h。
79.(3)当温度降至45℃时加入纤维素酶和果胶酶，继续搅拌1h。其中，淀粉酶、糖化酶、纤维素酶与果胶酶的质量比为3:1:1:2，淀粉酶的加入量与姜渣的质量比为3:500。
80.(4)放料，400目纱布过滤，收集姜渣提取滤液，冷冻干燥即得。
81.对比制备例1
82.本对比制备例提供一种姜渣提取物，其制备方法与制备例1的区别仅在于步骤(2)中不加入淀粉酶，但复合酶的加入总量保持不变，其他三种酶的质量比保持不变。其他条件均保持一致。
83.对比制备例2
84.本对比制备例提供一种姜渣提取物，其制备方法与制备例1的区别仅在于步骤(2)中不加入糖化酶，但复合酶的加入总量保持不变，其他三种酶的质量比保持不变。其他条件均保持一致。
85.对比制备例3
86.本对比制备例提供一种姜渣提取物，其制备方法与制备例1的区别仅在于步骤(3)中不加入纤维素酶，但复合酶的加入总量保持不变，其他三种酶的质量比保持不变。其他条件均保持一致。
87.对比制备例4
88.本对比制备例提供一种姜渣提取物，其制备方法与制备例1的区别仅在于步骤(3)中不加入果胶酶，但复合酶的加入总量保持不变，其他三种酶的质量比保持不变。其他条件均保持一致。
89.对比制备例5
90.本对比制备例提供一种姜渣提取物，其制备方法如下：
91.(1)收集鲜姜榨汁剩余的姜渣，按照料液比(姜渣:去离子水＝1:5(质量比))，90℃水解2h，水解过程中保持搅拌(转速100转/分钟)。
92.(2)降温冷却，冷却过程中一直保持相同转速搅拌；当温度降至60℃时加入淀粉酶，加入酶之后调整搅拌转速(200转/分钟)，混合均匀，搅拌2h。其中，淀粉酶的加入量与姜渣的质量比为1:100。
93.(3)放料，400目纱布过滤，收集姜渣提取滤液，冷冻干燥即得。
94.对比制备例6
95.本对比制备例提供一种姜渣提取物，其制备方法如下：
96.(1)收集鲜姜榨汁剩余的姜渣，按照料液比(姜渣:去离子水＝1:5(质量比))，90℃水解2h，水解过程中保持搅拌(转速100转/分钟)。
97.(2)降温冷却，冷却过程中一直保持相同转速搅拌；当温度降至60℃时加入糖化酶，加入酶之后调整搅拌转速(200转/分钟)，混合均匀，搅拌2h。其中，糖化酶的加入量与姜渣的质量比为1:100。
98.(3)放料，400目纱布过滤，收集姜渣提取滤液，冷冻干燥即得。
99.对比制备例7
100.本对比制备例提供一种姜渣提取物，其制备方法如下：
101.(1)收集鲜姜榨汁剩余的姜渣，按照料液比(姜渣:去离子水＝1:5(质量比))，90℃水解2h，水解过程中保持搅拌(转速100转/分钟)。
102.(2)降温冷却，冷却过程中一直保持相同转速搅拌；当温度降至40℃时加入纤维素酶，加入酶之后调整搅拌转速(200转/分钟)，混合均匀，搅拌2h。其中，纤维素酶的加入量与
姜渣的质量比为1:100。
103.(3)放料，400目纱布过滤，收集姜渣提取滤液，冷冻干燥即得。
104.对比制备例8
105.本对比制备例提供一种姜渣提取物，其制备方法如下：
106.(1)收集鲜姜榨汁剩余的姜渣，按照料液比(姜渣:去离子水＝1:5(质量比))，90℃水解2h，水解过程中保持搅拌(转速100转/分钟)。
107.(2)降温冷却，冷却过程中一直保持相同转速搅拌；当温度降至40℃时加入果胶酶，加入酶之后调整搅拌转速(200转/分钟)，混合均匀，搅拌2h。其中，果胶酶的加入量与姜渣的质量比为1:100。
108.(3)放料，400目纱布过滤，收集姜渣提取滤液，冷冻干燥即得。
109.实施例1
110.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体如下：
111.(1)配制发酵培养基，其配方含有：制备例1制得的姜渣提取物20份、葡萄糖20份、胰蛋白胨4份、酵母粉2份、柠檬酸三胺2份、乙酸钠5份、硫酸镁0.2份、硫酸锰0.05份、磷酸氢二钾2份、吐温-80 1.0份和水1000份，调整ph值为6.5；
112.(2)将乳酸菌进行菌种活化，将菌种以2％接种量接入到mrs培养基中，37℃培养12h，活化2次；再将活化的菌种于37℃培养12h，制得乳酸菌种子液；
113.(3)将乳酸菌种子液以5％接种量接种于步骤(1)制得的发酵培养基中在400rpm搅拌速度下进行发酵，发酵的温度为37℃，溶氧量为15％，发酵的终点为发酵液的od600值不再升高，且发酵液的ph值降为4时，得到发酵液；
114.(4)将发酵液离心(离心机转速15000转/分钟；蠕动泵40l/小时)，得到姜提取物的发酵滤液。
115.实施例2
116.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体如下：
117.(1)配制发酵培养基，其配方含有：制备例2制得的姜渣提取物10份、葡萄糖10份、胰蛋白胨5份、酵母粉1份、柠檬酸三胺1份、乙酸钠3份、硫酸镁0.1份、硫酸锰0.01份、磷酸氢二钾1份、吐温-80 0.8份和水1000份，调整ph值为6.5；
118.(2)将乳酸菌进行菌种活化，将菌种以2％接种量接入到mrs培养基中，37℃培养12h，活化2次；再将活化的菌种于37℃培养12h，制得乳酸菌种子液；
119.(3)将乳酸菌种子液以3％接种量接种于步骤(1)制得的发酵培养基中在600rpm搅拌速度下进行发酵，发酵的温度为38℃，溶氧量为20％，发酵的终点为发酵液的od600值不再升高，且发酵液的ph值降为4时，得到发酵液；
120.(4)将发酵液离心(离心机转速15000转/分钟；蠕动泵40l/小时)，得到姜提取物的发酵滤液。
121.实施例3
122.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体如下：
123.(1)配制发酵培养基，其配方含有：制备例3制得的姜渣提取物30份、葡萄糖30份、胰蛋白胨3份、酵母粉3份、柠檬酸三胺3份、乙酸钠7份、硫酸镁0.3份、硫酸锰0.1份、磷酸氢二钾3份、吐温-80 1.2份和水1000份，调整ph值为6.5；
124.(2)将乳酸菌进行菌种活化，将菌种以2％接种量接入到mrs培养基中，37℃培养12h，活化2次；再将活化的菌种于37℃培养12h，制得乳酸菌种子液；
125.(3)将乳酸菌种子液以5％接种量接种于步骤(1)制得的发酵培养基中在200rpm搅拌速度下进行发酵，发酵的温度为37℃，溶氧量为10％，发酵的终点为发酵液的od600值不再升高，且发酵液的ph值降为4时，得到发酵液；
126.(4)将发酵液离心(离心机转速15000转/分钟；蠕动泵40l/小时)，得到姜提取物的发酵滤液。
127.实施例4
128.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(1)中将“葡萄糖20份”替换为“葡萄糖5份”，其他操作均保持不变。
129.实施例5
130.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(1)中将“葡萄糖20份”替换为“葡萄糖35份”，其他操作均保持不变。
131.实施例6
132.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(1)中将“胰蛋白胨4份、酵母粉2份”替换为“胰蛋白胨6份”，其他操作均保持不变。
133.实施例7
134.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(1)中将“胰蛋白胨4份、酵母粉2份”替换为“酵母粉6份”，其他操作均保持不变。
135.实施例8
136.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(1)中将“胰蛋白胨4份”替换为“小麦蛋白胨4份”，其他操作均保持不变。
137.实施例9
138.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(1)中将“胰蛋白胨4份”替换为“酵母蛋白胨4份”，其他操作均保持不变。
139.实施例10
140.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(3)中将“在200rpm搅拌速度下进行发酵，发酵的温度为35℃，溶氧量为10％”替换为“在100rpm搅拌速度下进行发酵，发酵的温度为37℃，溶氧量为25％”。其他操作均保持不变。
141.实施例11
142.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(3)中将“在200rpm搅拌速度下进行发酵，发酵的温度为35℃，溶氧量为10％”替换为“在800rpm搅拌速度下进行发酵，发酵的温度为37℃，溶氧量为3％”。其他操作均保持不变。
143.实施例12
144.本实施例提供一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物，具体操作与实施例1的区
别仅在于步骤(1)中将“姜提取物20份”替换为“姜提取物35份”，其他操作均保持不变。
145.对比例1
146.本实施例提供一种乳酸菌发酵产物，其制备方法的具体操作与实施例1的区别仅在于步骤(1)中不添加姜提取物，其他操作均保持不变。
147.测试例1
148.细胞活性实验：
149.取对数生长期的raw264.7细胞铺板96孔板，在37℃下培养7h后吸弃培养基，加入含有不同浓度实施例1样品的基础培养基，37℃下孵育17h后用cck8法检测od450 nm，并通过t检验分析得出受检样品对raw264.7细胞活性的影响，结果如图1所示，由图1可知，受检样品在小于0.0781％(v/v)浓度下，对raw264.7细胞活性无抑制作用(图中*p＜0.05；**p＜0.01；***p＜0.001；****p＜0.0001)。
150.测试例2
151.对炎性分子的抑制效果评价实验：
152.no是重要的促炎介质，介导多种炎症反应的发生发展，通过降低其含量可抑制炎症反应，从而达到抗炎舒敏的效果。
153.取对数生长期的raw264.7细胞铺板12孔板，在37℃下培养7h后吸弃培养基，加入含有0.08(v/v,％)的实施例1-12及对比例1样品的基础培养基预处理1h，再加入终浓度为100ng/ml的lps诱导17h，收集各组细胞培养上清，检测no含量。其中，空白组为不加入样品和lps，模型组为不加入样品只有lps诱导，阳性对照组为40μm地塞米松，实施例1组还检测0.04(v/v,％)的样品的处理情况。结果如表1所示：
154.表1
155.[0156][0157]
由表1数据可知：本发明所涉及的姜提取物的发酵工艺制得的发酵产物对raw264.7细胞产生的no具有显著的抑制作用，具有显著的消炎效果，呈一定的浓度依赖性，且发酵培养的组成配方以及发酵工艺参数均显著影响上述技术效果。
[0158]
测试例3
[0159]
多糖含量测试实验：
[0160]
(1)对制备例1-3及对比制备例1-8获得的姜渣提取物进行多糖含量的测定，测定方法为：采用dns试剂(ny/t法)定量检测样品中的还原糖和总糖含量，进而计算多糖的含量。
[0161]
结果如表2所示(每组样品平行测试5次，取平均值)。
[0162]
表2
[0163]
[0164][0165]
(2)对实施例1-12及对比例1获得的发酵滤液进行胞外多糖含量的测定，测定方法为：采用dns试剂(ny/t法)定量检测样品中的还原糖和总糖含量，进而计算多糖的含量。
[0166]
结果如表3所示(每组样品平行测试5次，取平均值)。
[0167]
表3
[0168]
组别胞外多糖含量(mg/ml)实施例15.4实施例24.8实施例36.3实施例43.4实施例53.9实施例64.2实施例74.3实施例84.6实施例94.1实施例104.4实施例114.5实施例124.2对比例14.4
[0169]
由表3数据可知：本发明所涉及的姜提取物的发酵工艺制得的发酵产物能够高产胞外多糖，其具有显著的消炎保湿效果，且发酵培养的组成配方以及发酵工艺参数均显著影响胞外多糖的产量。
[0170]
测试例4
[0171]
乳酸含量测试实验：
[0172]
对实施例1-12和对比例1获得的发酵滤液进行乳酸含量的测定，测定采用hplc分析方法进行：
[0173]
(1)磷酸溶液的制备：量取25ml磷酸，缓慢加入到装有25ml水的试剂瓶中，摇匀。
[0174]
(2)0.0025m磷酸二氢铵溶液的制备：称取0.2874g磷酸二氢铵，用超纯水溶解，然后用上述磷酸溶液调节ph为2.5，用水定容至1000ml。
[0175]
(3)标准曲线溶液的配制：准确称取0.1g乳酸至100ml容量瓶，用超纯水溶解并定容到100ml，为1000mg/l乳酸储备液，将其分别稀释至不同的浓度。
[0176]
(4)色谱柱：agilent poroshell 120ec-c18，4μm，4.6
×
150mm)；柱温25℃；进样体积10μl；流动相为a＝磷酸二氢铵，b＝甲醇；流速1.0ml/min；检测波长210nm。
[0177]
结果如表4所示。
[0178]
表4
[0179][0180][0181]
由表4数据可知：本发明所涉及的姜提取物的发酵工艺制得的发酵产物能够高产乳酸，其具有显著的软化角质、光滑嫩肤的效果，且发酵培养的组成配方以及发酵工艺参数均显著影响乳酸的产量。
[0182]
测试例5
[0183]
抗氧化功效评价实验：
[0184]
(1)对制备例1-3和对比制备例1-8获得的姜渣提取物进行抗氧化功效评价，评价方法为：抗氧化物质能使fe
3
还原成fe
2
，后者可与菲啉类物质形成稳定的络合物，通过比色可测出其抗氧化能力的高低(总抗氧化能力(t-aoc)测定试剂盒，南京建成科技有限公司)。
[0185]
结果如表5所示(每组样品平行测试5次，取平均值)。
[0186]
表5
[0187][0188][0189]
(2)对实施例1-10获得的发酵滤液进行抗氧化功效评价，评价方法同上。
[0190]
结果如表6所示(每组样品平行测试5次，取平均值)。
[0191]
表6
[0192]
组别总抗氧化能力(u)实施例120.2实施例217.6实施例322.1实施例418.5实施例518.2实施例616.6实施例716.2实施例817.1实施例917.9实施例1018.1实施例1118.0实施例1219.3对比例117.4
[0193]
由表6数据可知：本发明所涉及的姜提取物的发酵工艺制得的发酵产物具有显著的抗氧化能力，且发酵培养的组成配方以及发酵工艺参数均显著影响抗氧化效果。
[0194]
测试例6
[0195]
人群试用实验：
[0196]
(1)配制14种洗发水，第1-13种洗发水配方以质量百分含量计包括：10％的实施例
1-12和对比例1获得的发酵滤液、0.2％的瓜儿胶羟丙基三甲基氯化铵、18％的月桂醇聚醚硫酸酯钠、2％的椰油酰胺丙基甜菜碱、3％的氯化钠、1.5％的乙二醇二硬脂酸酯、0.1％的6-乙基己基甘油，0.5％的苯氧乙醇，余量为水补充至100％。第14种洗发水与上述的区别在于不含有发酵滤液，其减少部分由水补齐。
[0197]
(2)选140名受试者(平均年龄27.8岁(22-38岁)，随机分成14组，每组10人(头发油腻型5人，中性型3人，干燥型2人)，受试者均每3天使用等量的各组洗发水产品进行洗发，洗发时间保持一致，连续使用30天，受试者对14组产品进行打分评价如表7所示，表中所示为平均分，打分标准为1分、2分、3分、4分、5分，分值越大，效果越显著。
[0198]
表7
[0199][0200][0201]
由表7数据可知：由本发明所涉及的姜提取物的发酵工艺制得的发酵产物制得的洗发水具有显著的控油、止痒、去屑、保湿效果，且发酵培养的组成配方以及发酵工艺参数均显著影响上述效果。
[0202]
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的一种姜提取物的发酵工艺及其发酵产物和应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
[0203]
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中
的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
[0204]
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。
[0205]
另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。