一种苦瓜霜的质量控制方法与流程

1.本发明属于中医药领域，具体地说，涉及一种苦瓜霜的质量控制方法。


背景技术：

2.苦瓜霜为葫芦科植物苦瓜(momordica charantia l.)的成熟新鲜果实与皮硝经加工制成，具有清热泻火、解毒消肿、清利咽喉、清心明目的功效；用于咽喉肿痛，口舌热疮，乳蛾喉痹，火眼赤痛，外用擦痱子等，有较高的药用价值。
3.申请号为cn1977879的中国专利提供了一种苦瓜霜的制法及苦瓜霜的制品。苦瓜霜的制法是将芒硝，或芒硝、火硝与苦瓜果肉切片浸泡或煮沸加工制成白色结晶性粉末产品。苦瓜霜的制品是将苦瓜霜与其他药物、适宜的辅料配合，采用相应的制剂技术及设备制成片剂、滴丸剂、药效糖、散剂、糖浆剂、颗粒剂、包衣片剂、胶囊剂、滴眼液、滴鼻液、口服液及药效牙膏等。
4.苦瓜果实中含有苦瓜混苷，是β-谷甾醇-β-d-葡萄糖苷和5，25-豆甾二烯醇-3-葡萄糖苷等分子混合物。还含有5-羟色胺和谷氨酸、丙氨酸、β-丙氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸等多种氨基酸以及半乳糖醛酸、果胶、类脂、多种微量元素等成分。
5.然而，目前的文献中还没有苦瓜霜薄层色谱鉴别或者液相色谱鉴别方法的相关报道，也还没有苦瓜霜的相关质量标准。另外，由于市场上销售的苦瓜苷对照品均为各实验室自制，较难购买获得，也不方便用于鉴别苦瓜霜。因此，寻找易于获得的鉴别指标是需要解决的问题，倘若能够建立针对苦瓜霜的准确有效的鉴别方法，对于苦瓜霜的产品质量控制则具有重要意义，有利于保证临床用药效果。
6.有鉴于此特提出本发明。


技术实现要素：

7.本发明要解决的技术问题在于克服现有技术的不足，提供一种苦瓜霜的质量控制方法，因此针对苦瓜霜建立了准确有效的鉴别方法，对于苦瓜霜的产品质量控制具有重要意义，有利于保证临床用药效果。
8.为解决上述技术问题，本发明采用技术方案的基本构思是：
9.本发明的第一目的是提供一种苦瓜霜的质量控制方法，包括薄层色谱鉴别方法，所述的薄层色谱鉴别方法包括以下步骤：
10.(1)制备苦瓜霜的供试品溶液；
11.(2)选择谷氨酸和丙氨酸作为对照，制备对照品溶液；
12.(3)利用薄层色谱法，将供试品和对照品点样于薄层板上，将薄层板放入展开剂中，展开，取出，晾干，进行显色和检视。
13.目前的文献中还没有苦瓜霜薄层色谱鉴别或者液相色谱鉴别方法的相关报道，也还没有苦瓜霜的相关质量标准。本发明提供了薄层色谱鉴别方法，建立了针对苦瓜霜的准确有效的鉴别方法，经过筛选，选择了谷氨酸和丙氨酸作为鉴别指标，对应斑点明显，干扰
小，指示清晰明确，能够起到很好的指示作用，为鉴别苦瓜霜提供了基础。
14.进一步的方案，步骤(3)中，所述的展开剂为正丙醇-浓氨体系、或正丙醇-正丁醇-浓氨体系，或异丙醇-浓氨体系。
15.进一步的方案，所述的展开剂包括：体积比为7:3的正丙醇-浓氨，体积比为6:1:3的正丙醇-正丁醇-浓氨，体积比为2:1的异丙醇-浓氨。
16.本发明的薄层色谱鉴别方法中，采用正丙醇-浓氨体系、或正丙醇-正丁醇-浓氨体系，或异丙醇-浓氨体系，能够达到展开效果。尤其是采用体积比为7:3的正丙醇-浓氨，体积比为6:1:3的正丙醇-正丁醇-浓氨，体积比为2:1的异丙醇-浓氨作为展开剂，分离度好、斑点清晰明显，重现性、专属性好，阴性对照无干扰。尤其是采用体积比为6:1:3的正丙醇-正丁醇-浓氨为展开剂展开效果更优。
17.进一步的方案，步骤(1)中，取苦瓜霜样品，加6mol/l盐酸溶液，置沸水浴中加热回流，放冷，滤过，滤液蒸干，用60-80％乙醇分次洗涤残渣及析出的结晶，搅拌，滤过，合并滤液，蒸干，残渣用水使溶解，加在732型强酸性阳离子交换树脂柱上，用水洗脱，弃去水液，再用氨溶液洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加70％乙醇使溶解，作为供试品溶液。
18.进一步的方案，步骤(1)中，取苦瓜霜1g，加6mol/l盐酸溶液15ml，置沸水浴中加热回流2小时，放冷，滤过，滤液蒸干，用70％乙醇20ml分次洗涤残渣及析出的结晶，搅拌，滤过，合并滤液，蒸干，残渣用水20ml使溶解，加在732型强酸性阳离子交换树脂柱上，用水200ml洗脱，弃去水液，再用氨溶液100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加70％乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。
19.进一步的方案，步骤(2)中，取丙氨酸对照品和谷氨酸对照品，加70％乙醇制成每1ml含丙氨酸0.3mg，谷氨酸0.6mg的溶液，作为对照品溶液。
20.进一步的方案，步骤(3)中，所述薄层色谱法的条件包括：温度为8-35℃，相对湿度为30-90％，展距为8.5cm，对照品点样量为1～5μl，供试品点样量为1-2μl。
21.进一步的方案，还包括：
22.重金属检测：取苦瓜霜1.0g，参照中国药典2015年版四部通则0821第二法测定重金属含量，含重金属不超过10mg/kg。
23.进一步的方案，还包括：
24.砷盐检测：取苦瓜霜0.20g，加水23ml溶解，加盐酸5ml，参照中国药典2015年版四部通则0822第一法测定砷盐含量，含砷量不超过10mg/kg。
25.进一步的方案，还包括硫酸钠检测：
26.取苦瓜霜0.4g，精密称定，加水150ml，振摇溶解后，滤过，沉淀用水50ml分3次洗涤，滤过，合并滤液，加盐酸1ml，煮沸，不断搅拌，并缓缓加入热氯化钡试液，至不再生成沉淀，置水浴上加热30分钟，静置1小时，用无灰滤纸或称定重量的古氏坩埚滤过，沉淀用水分次洗涤，至洗液不再显氯化物的反应，干燥，并炽灼至恒重，精密称定，与0.6086相乘，即得供试品中含有硫酸钠的重量。
27.本品按干燥品计算，含硫酸钠(na2so4)不得少于75.0％。
28.采用上述技术方案后，本发明与现有技术相比具有以下有益效果：
29.1、本发明提供了一种苦瓜霜的质量控制方法，特别是薄层色谱鉴别方法，建立了针对苦瓜霜的准确有效的鉴别方法，对于苦瓜霜的产品质量控制具有重要意义，有利于保
证临床用药效果。
30.2、本发明的薄层色谱鉴别方法中，经过筛选，选择了谷氨酸和丙氨酸作为鉴别指标，对应斑点明显，干扰小，指示清晰明确，能够起到很好的指示作用，为鉴别苦瓜霜提供了基础。
31.3、本发明的薄层色谱鉴别方法中，采用正丙醇-浓氨体系、或正丙醇-正丁醇-浓氨体系，或异丙醇-浓氨体系，能够达到展开效果。尤其是采用体积比为7:3的正丙醇-浓氨，体积比为6:1:3的正丙醇-正丁醇-浓氨，体积比为2:1的异丙醇-浓氨作为展开剂，分离度好、斑点清晰明显，重现性、专属性好，阴性对照无干扰。尤其是采用体积比为6:1:3的正丙醇-正丁醇-浓氨为展开剂展开效果更优。
32.下面结合附图对本发明的具体实施方式作进一步详细的描述。
附图说明
33.附图作为本发明的一部分，用来提供对本发明的进一步的理解，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，但不构成对本发明的不当限定。显然，下面描述中的附图仅仅是一些实施例，对于本领域普通技术人员来说，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他附图。在附图中：
34.图1是本发明实施例一中5-羟色胺盐酸盐鉴别指标筛选的薄层色谱图；
35.图2是本发明实施例一中氨基酸类指标筛选的薄层色谱图；
36.图3是本发明实施例一中谷氨酸和丙氨酸作为鉴别指标的薄层色谱图；
37.图4是本发明实施例三中采用不同展开剂的薄层色谱图；
38.图5是本发明实施例三中采用不同点样量的薄层色谱图；
39.图6是本发明实施例三中采用阴性对照样品与样品的薄层色谱图；
40.图7是本发明实施例三中比较不同薄层板的薄层色谱图；
41.图8是本发明实施例三中采用不同温度、湿度条件下的薄层色谱图；
42.图9是本发明试验例一中，正丙醇-正丁醇-浓氨(2:1:1)为展开剂的薄层色谱图；
43.图10是本发明试验例一中，正丙醇-正丁醇-浓氨(6:2:3)为展开剂的薄层色谱图；
44.图11是本发明试验例一中，异丙醇-正丁醇-浓氨(6:2:3)为展开剂的薄层色谱图；
45.图12是本发明试验例一中，正丙醇-正丁醇-浓氨(7:1:3)为展开剂的薄层色谱图；
46.图13是本发明试验例一中，异丙醇-浓氨(5:3)为展开剂的薄层色谱图。
47.需要说明的是，这些附图和文字描述并不旨在以任何方式限制本发明的构思范围，而是通过参考特定实施例为本领域技术人员说明本发明的概念。
具体实施方式
48.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
49.实施例一苦瓜霜鉴别指标的筛选
50.尝试选择5-羟色胺、酪氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、丙氨酸、精氨酸、组氨酸以及赖氨酸作为鉴别指标进行筛选。
51.1、苦瓜霜鉴别指标筛选
52.(1)5-羟色胺盐酸盐鉴别指标筛选
53.参考《中国药典》2015年版一部西瓜霜鉴别(2)项下的方法制备苦瓜霜供试品溶液，取苦瓜霜2g，加6mol/l盐酸溶液15ml，置沸水浴加热回流2小时，放冷，滤过，滤液蒸干，用70％乙醇20ml分次洗涤残渣及析出的结晶，搅拌，滤过，合并滤液，蒸干，残渣用水20ml使溶解，加在732型强酸性阳离子交换树脂柱(内径为1.5～2cm，柱长为8cm)上，用水200ml洗脱，弃去水液，再用氨溶液(浓氨溶液10ml
→
l00ml)100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加70％乙醇lm l使溶解，作为供试品溶液。
54.取丙氨酸、酪氨酸、盐酸组氨酸、盐酸赖氨酸以及5-羟色胺盐酸盐对照品，加70％乙醇制成每lm l各含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。
55.参照薄层色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验：
56.色谱条件：温度：35℃相对湿度：90％展距：8.0cm；
57.对照品点样量：1μl供试品点样量：2μl；
58.薄层板：青岛海洋化工有限公司硅胶预制g板(批号：20150318)；
59.展开剂：正丁醇-冰醋酸-水(3:1:1)；
60.显色与检视：喷以5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
61.结果如图1所示，图1中，点样的样品分别为：1.供试品(批号：180801)，2.丙氨酸(140680-201604，中国食品药品检定研究院)，3.酪氨酸(140609-201513，中国食品药品检定研究院)，4.盐酸组氨酸(140693-201803，中国食品药品检定研究院)，5.盐酸赖氨酸(140673-201509，中国食品药品检定研究院)，6.5-羟色胺盐酸盐(111656-200401，中国食品药品检定研究院)。
62.图1的薄层色谱结果显示，苦瓜霜供试品与5-羟色胺盐酸盐对照品无对应斑点。上述试验表明，苦瓜霜中可能无5-羟色胺成分或含量较低，或者该薄层色谱方法可能并不适用于5-羟色胺的鉴别以致无法检出，故不选择5-羟色胺作为苦瓜霜薄层色谱鉴别指标。
63.(2)氨基酸类指标筛选
64.具体选用酪氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸、丙氨酸、精氨酸、组氨酸以及赖氨酸7中氨基酸作为鉴别指标进行筛选。
65.参考《中国药典》2015年版一部西瓜霜鉴别(2)项下的方法制备苦瓜霜供试品溶液和对照品溶液。
66.色谱条件：温度：8℃
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相对湿度：35％
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展距：8.0cm；
67.对照品点样量：1～3、10、12、13：1ul
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11：2ul；
68.供试品点样量：4、5、7、8：1ul
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6、9：2ul；
69.薄层板：青岛海洋化工有限公司硅胶预制g板(批号：20150318)；
70.展开剂：正丁醇-冰醋酸-水(3:1:1)；
71.显色与检视：喷以5％茚三酮乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。
72.结果如图2所示，图2中点样的样品分别为：1.谷氨酸(140690-201203，中国食品药品检定研究院)，2.苯丙氨酸(111615-200301，中国食品药品检定研究院)，3.精氨酸(140685-201104，中国食品药品检定研究院)，4～9.供试品(批号：180801)，10.丙氨酸(140680-201604，中国食品药品检定研究院)，11.酪氨酸(140609-201513，中国食品药品检
定研究院)，12.盐酸组氨酸(140693-201803，中国食品药品检定研究院)，13.盐酸赖氨酸(140673-201509，中国食品药品检定研究院)。
73.图2的薄层色谱结果显示，各对照品均有较清晰斑点，其中谷氨酸、丙氨酸对照品能与苦瓜霜供试品斑点对应，酪氨酸与苯丙氨酸rf值比较接近，在供试品色谱中难以判定，故不选择酪氨酸与苯丙氨酸。
74.(3)选定鉴别指标
75.经过多次实验研究，最终选定斑点清晰明显，分离度和重现性较好的谷氨酸和丙氨酸作为苦瓜霜薄层色谱鉴别指标，参考《中国药典》2015年版一部西瓜霜鉴别(2)项下的方法制备苦瓜霜供试品溶液和对照品溶液，并参考《中国药典》2015年版二部甘氨酸薄层色谱展开条件进行初试。
76.色谱条件：温度：14.6℃
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相对湿度：58％
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展距：8.0cm；
77.对照品点样量：1：0.5μl
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2、5、6：1μl；
78.供试品点样量：3：1μl
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4：2μl；
79.薄层板：青岛裕民源硅胶试剂厂硅胶预制g板(批号：150401)；
80.展开剂：正丙醇-浓氨(7:3)；
81.显色与检视：喷以茚三酮的正丙醇溶液(1
→
100)，在105℃加热至斑点出现，立即检视。
82.结果如图3所示，图3中点样的样品分别为：1、2.丙氨酸(140680-201604，中国食品药品检定研究院)，3、4.供试品(批号：180801)，5.谷氨酸(140690-201203，中国食品药品检定研究院)，6.缺苦瓜阴性对照品。
83.图3的薄层色谱结果显示，谷氨酸、丙氨酸对照品能与苦瓜霜供试品斑点对应，斑点清晰、分离度和重现性较好，作为苦瓜霜的鉴别指标。
84.实施例二苦瓜霜鉴别方法的建立
85.苦瓜霜薄层色谱鉴别方法为：
86.制备苦瓜霜供试品溶液：取苦瓜霜1g，加6mol/l盐酸溶液15ml，置沸水浴中加热回流2小时，放冷，滤过，滤液蒸干，用70％乙醇20ml分次洗涤残渣及析出的结晶，搅拌，滤过，合并滤液，蒸干，残渣用水20ml使溶解，加在732型强酸性阳离子交换树脂柱(内径为1.5～2cm，柱长为8cm)上，用水200ml洗脱，弃去水液，再用氨溶液(浓氨溶液10ml
→
100ml)100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加70％乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。
87.对照品溶液的制备：另取丙氨酸对照品、谷氨酸对照品，加70％乙醇制成每1ml含丙氨酸0.3mg，谷氨酸0.6mg的混合溶液，作为对照品溶液。
88.照薄层色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0502)试验，吸取供试品溶液1～2μl、对照品溶液1μl，分别点于同一硅胶g薄层板上，使成条状，以正丙醇-浓氨溶液(7:3)、或正丙醇-正丁醇-浓氨(6:1:3)、或异丙醇-浓氨(2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
89.实施例三苦瓜霜薄层色谱鉴别方法学验证
90.供试品溶液的制备：取本品1g，加6mol/l盐酸溶液15ml，置沸水浴中加热回流2小时，放冷，滤过，滤液蒸干，用70％乙醇20ml分次洗涤残渣及析出的结晶，搅拌，滤过，合并滤
液，蒸干，残渣用水20ml使溶解，加在732型强酸性阳离子交换树脂柱(内径为1.5～2cm，柱长为8cm)上，用水200ml洗脱，弃去水液，再用氨溶液(浓氨溶液10ml
→
100ml)100ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加70％乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。
91.对照品溶液的制备：取丙氨酸对照品(中国食品药品检定研究院，批号：140680-201604)、谷氨酸对照品(中国食品药品检定研究院，批号：140690-201604)，加70％乙醇制成每1ml含丙氨酸0.3mg，谷氨酸0.6mg的混合溶液，作为对照品溶液。
92.苦瓜阴性对照溶液的制备：取皮硝1g，照供试品溶液的制备方法，同法制成阴性对照溶液。
93.1、不同展开剂的比较
94.比较了正丙醇-浓氨(7:3)、正丙醇-正丁醇-浓氨(6:1:3)、异丙醇-浓氨(2:1)三种展开剂，各条件为：
95.样品(如图4)：1.由上至下分别为丙氨酸、谷氨酸
96.2～4.供试品(批号：190501、190601、190701)
97.色谱条件：温度：30℃
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相对湿度：60％
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展距：8.5cm
98.对照品点样量：1μl
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供试品点样量：2、3：1μl
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4：2μl
99.薄层板：青岛裕民源硅胶试剂厂硅胶预制g板(批号：2018年12月1日)
100.展开剂：
①
正丙醇-浓氨(7:3)
101.②
正丙醇-正丁醇-浓氨(6:1:3)
102.③
异丙醇-浓氨(2:1)
103.显色与检视：喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光下观察。
104.结果如图4所示，图4中
①②③
对应相应的展开剂，三种展开剂均能够实现较好的展开。后续实验发现正丙醇-正丁醇-浓氨(6:1:3)效果较好。
105.2、比较不同点样量
106.样品(如图5)：1～4.供试品(批号：190501)，6～9.供试品(批号：190601)，11～14.供试品(批号：190701)，5、10.由上至下分别为丙氨酸、谷氨酸；
107.色谱条件：温度：30℃
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相对湿度：60％
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展距：8.0cm；
108.对照品点样量：1μl；
109.供试品点样量：1、6、11：1μl
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2、7、12：2μl
110.ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
3、8、13：3μl
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4、9、14：5μl；
111.薄层板：青岛裕民源硅胶试剂厂硅胶预制g板；
112.展开剂：正丙醇-浓氨(7:3)；
113.显色与检视：喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光下观察。
114.结果如图5所示，比较3批供试品不同点样量，结果显示供试品点样量为1～2μl时，分离度较好。
115.3、比较了阴性对照样品与样品展开效果，结果如图7所示，结果显示阴性对照样品色谱无与对照品色谱相对应的斑点，说明阴性对照无干扰。各条件如下：
116.样品(如图6)：1.由上至下分别为丙氨酸、谷氨酸，2.缺苦瓜阴性对照品，
117.3～5.供试品(批号：190501、190601、190701)；
118.色谱条件：温度：30℃
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相对湿度：60％
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展距：8.5cm；
119.对照品点样量：1μl
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缺苦瓜阴性对照品点样量：2μl；
120.供试品点样量：3、4：1μl
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5：2μl；
121.薄层板：青岛裕民源硅胶试剂厂硅胶预制g板(批号：2018年12月1日)；
122.展开剂：正丙醇-浓氨(7:3)；
123.显色与检视：喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光下观察。
124.4、比较不同薄层板展开效果
125.比较不同厂家薄层板展开效果，结果如图7所示，结果显示各斑点均明显，分离度均良好，说明该薄层色谱鉴别方法耐用性良好。各条件如下所示：
126.样品(如图7)：1.由上至下分别为丙氨酸、谷氨酸，2～4.供试品(批号：190501、190601、190701)；
127.色谱条件：温度：25℃
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相对湿度：60％
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展距：8.5cm；
128.对照品点样量：1μl
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供试品点样量：2、3：1μl 4：2μl；
129.薄层板：青岛裕民源硅胶试剂厂硅胶预制g板(批号：2019年7月23日)；
130.青岛海洋化工有限公司硅胶预制g板(批号：2018年11月06日)；
131.merck硅胶预制g板(批号：hx87473226)；
132.展开剂：正丙醇-浓氨(7:3)；
133.显色与检视：喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光下观察。
134.5、比较不同温度、湿度条件下的展开效果，结果如图8所示，结果显示各斑点均明显，分离度良好，说明该薄层色谱鉴别方法耐用性良好。各条件如下所示：
135.样品(如图8)：1.由上至下分别为丙氨酸、谷氨酸，2～4.供试品(批号：190501、190601、190701)；
136.色谱条件：温度：25℃
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相对湿度：60％
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展距：8.5cm；
137.对照品点样量：1μl
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供试品点样量：2、3：1μl
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4：2μl；
138.薄层板：青岛裕民源硅胶试剂厂硅胶预制g板(批号：2019年7月23日)；
139.展开剂：正丙醇-浓氨(7:3)；
140.显色与检视：喷以茚三酮试液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光下观察。
141.综上，经以上方法验证，经以上方法验证，结果显示苦瓜霜薄层色谱分离效果好，斑点清晰明显，重现性、专属性好，阴性对照无干扰。
142.试验例一
143.本试验例采用不同的展开剂体系，其他方法参照实施例二的方法，考察展开效果。
144.1.正丙醇-正丁醇-浓氨(2:1:1)
145.样品：1.由上至下分别为丙氨酸、谷氨酸，2～4.供试品(批号：190501、190601、190701)
146.展开剂：正丙醇-正丁醇-浓氨(2:1:1)
147.如图9的结果显示，供试品的谷氨酸斑点与相邻斑点未分开，丙氨酸斑点模糊，与相邻斑点rf值接近，未达到理想的分离效果。
148.2.正丙醇-正丁醇-浓氨(6:2:3)
149.样品：1.由上至下分别为丙氨酸、谷氨酸，2～4.供试品(批号：190501、190601、190701)
150.展开剂：正丙醇-正丁醇-浓氨(6:2:3)
151.如图10的结果显示，供试品的谷氨酸斑点与相邻斑点未分开，丙氨酸斑点模糊，未达到理想的分离效果。
152.3.异丙醇-正丁醇-浓氨(6:2:3)
153.样品：1.由上至下分别为丙氨酸、谷氨酸，2～4.供试品(批号：190501、190601、190701)
154.展开剂：异丙醇-正丁醇-浓氨(6:2:3)
155.如图11的结果显示，供试品的谷氨酸斑点与相邻斑点未分开，丙氨酸斑点较大、模糊，未达到理想的分离效果。
156.4.正丙醇-正丁醇-浓氨(7:1:3)
157.样品：1.由上至下分别为丙氨酸、谷氨酸，2～4.供试品(批号：190501、190601、190701)
158.展开剂：正丙醇-正丁醇-浓氨(7:1:3)
159.如图12的结果显示，供试品的谷氨酸斑点与相邻斑点未分开，丙氨酸斑点模糊，未达到理想的分离效果。
160.5.异丙醇-浓氨(5:3)
161.样品：1.由上至下分别为丙氨酸、谷氨酸，2～4.供试品(批号：190501、190601、190701)
162.展开剂：异丙醇-浓氨(5:3)
163.如图13的结果显示，供试品的丙氨酸斑点较大、模糊，与其它斑点有重叠现象，未达到理想的分离效果。
164.综上，在正丙醇-正丁醇-浓氨(6:1:3)为展开剂的色谱条件下，其斑点数目较多且清晰，分离效果好，对苦瓜霜具有较好的鉴别效果。
165.以上所述仅是本发明的较佳实施例而已，并非对本发明作任何形式上的限制，虽然本发明已以较佳实施例揭露如上，然而并非用以限定本发明，任何熟悉本专利的技术人员在不脱离本发明技术方案范围内，当可利用上述提示的技术内容作出些许更动或修饰为等同变化的等效实施例，但凡是未脱离本发明技术方案的内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明方案的范围内。