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一种分离乳清蛋白诱导的层层自组装益生菌微胶囊及其制备方法与流程

2022-03-16 01:22:27 来源:中国专利 TAG:

技术特征:
1.一种分离乳清蛋白诱导的层层自组装益生菌微胶囊的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)向多孔淀粉中加入缓冲液,静置,加入聚乙烯亚胺,恒温振荡反应,洗涤,干燥,得多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体;(2)将上述多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体、固体油脂混合,加入乳化剂的溶液,40℃~50℃恒温乳化,冷却,得填充固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体;(3)向上述填充固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体的溶液中,加入三乙胺、二甲亚砜,搅拌,加入乙酸酐,反应,然后透析,产物冷冻干燥,得乙酰化的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体;(4)向上述乙酰化的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体中,加入乳化剂的溶液,40℃~50℃乳化,加入脂肪酶,40~50℃反应10~20min,离心,产物冷冻干燥,得去除固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体;(5)将最外层带负电的多层益生菌湿胶囊置于上述去除固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体的溶液中,搅拌,干燥,得层层自组装益生菌微胶囊;(6)将上述层层自组装益生菌微胶囊与分离乳清蛋白溶液两者混合,然后加入植物油,再加入谷氨酰胺转氨酶诱导凝胶化,再水浴磁力搅拌,然后离心得到微胶囊;用吐温80溶液洗涤两次沉淀,再用无菌生理盐水洗涤微胶囊两次,得分离乳清蛋白诱导的层层自组装益生菌微胶囊。2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,所述淀粉包括玉米淀粉、木薯淀粉、大米淀粉、甘薯淀粉、马铃薯淀粉中至少一种;步骤(1)中,多孔淀粉、聚乙烯亚胺的质量比为1~3:1;步骤(1)中,恒温振荡为30~50℃震荡8~16h;步骤(1)中,缓冲液为磷酸盐缓冲液。3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体、固体油脂、乳化剂的质量比为1:1~4:0.32~0.6;步骤(2)中,所述乳化剂包括聚乙烯醇、十二烷基三聚乙醇磺酸钠、十二烷基苯磺酸钠中至少一种。4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述填充固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体、三乙胺、二甲亚砜、乙酸酐的比例0.2~1.5g:2~10ml:10~50ml:1~5ml;步骤(3)中,反应的时间为20~26h;步骤(3)中,反应的温度为20~35℃。5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(4)中,乙酰化的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体、乳化剂、脂肪酶的质量比为1.0g:0.32~0.6g:0.1~1mg。6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(5)中,所述最外层带负电的多层益生菌湿胶囊的制备方法包括:
将带正电的生物聚电解质溶液与菌悬液混合,搅拌,离心,洗涤,得一层生物聚电解质吸附的益生菌湿胶囊;然后,将一层生物聚电解质吸附的益生菌湿胶囊置于带负电的生物聚电解质溶液中,搅拌,离心,洗涤,得二层生物聚电解质吸附后的益生菌湿胶囊;重复上述步骤,得最外层带负电的至少二层生物聚电解质吸附的益生菌湿胶囊。7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述步骤(5)中,带正电的生物聚电解质包括壳聚糖;带负电的生物聚电解质包括果胶、海藻酸钠、羟甲基纤维素钠、植酸钠、硫酸葡聚糖中至少一种。8.根据权利要求6或7所述的制备方法,其特征在于,步骤(5)中,所述菌悬液为经mrs液体培养基培养的益生菌溶液;所述菌悬液的浓度为1.0
×
109~1.0
×
10
10
cfu/ml。9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(6)中,层层自组装益生菌微胶囊与分离乳清蛋白溶液的比例为1~2g:20~40ml;所述分离乳清蛋白溶液质量分数为1%~10%;植物油包括大豆油、橄榄油、葵花籽油、棕榈油中至少一种;植物油与分离乳清蛋白溶液的体积比为1:3~1:7;磁力搅拌为40~50℃搅拌0.5~1h;吐温80溶液质量分数为0.1%~0.5%。10.权利要求1~9任一项所述的方法制备得到的分离乳清蛋白诱导的层层自组装益生菌微胶囊。

技术总结
本发明提出一种分离乳清蛋白诱导的层层自组装益生菌微胶囊及其制备方法,属于微胶囊技术领域。所述制备方法包括如下步骤:分别制备多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体、填充固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体、乙酰化的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体、去除固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体,制备层层自组装益生菌湿胶囊,最终制备得分离乳清蛋白诱导的层层自组装益生菌微胶囊。本发明所得益生菌微胶囊,显著提高了益生菌的存活率。高了益生菌的存活率。高了益生菌的存活率。


技术研发人员:刘欢 王倩玉 袁聪 胡婕伦 聂少平 谢明勇
受保护的技术使用者:南昌大学
技术研发日:2021.03.18
技术公布日:2022/3/15
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