一种防治家禽肝脏损伤的组合物及其应用的制作方法

1.本发明涉及饲料添加剂技术领域，具体涉及一种防治家禽肝脏损伤的组合物及其应用。


背景技术：

2.肝脏是保障家禽正常生产的主要器官，也是脂肪酸代谢的中心器官，在营养过剩和肥胖的情况下，肝脏脂肪酸代谢发生改变，通常会使肝细胞内甘油三酯堆积，并导致非酒精性脂肪肝的发生；肝脏还是关键的前线免疫组织，含有体内最大的网状内皮细胞吞噬系统，是机体与外界交互的重要屏障。家禽肝脏损伤会造成家禽代谢紊乱，免疫力下降，进而影响家禽的存活率、生长性能及产蛋量等。
3.近年来，随着我国集约化养殖的飞速发展，饲料发霉，药物的不正确使用所引起的中毒，细菌、寄生虫或病毒以及环境因素所导致的家禽肝脏损害越来越多。肝脏的损伤造成了动物物质代谢障碍、胆汁的形成和排泄障碍等一系列病理变化及相应的综合征，极大的降低了解毒能力，严重影响了动物的生产性能，危害家禽养殖业。
4.因此，如何在干细胞功能性损伤之前，从源头上进行早期的干预措施，对动物肝脏疾病进行有效治疗和控制，防止肝脏损伤的增加，是目前迫切需要解决的重要问题。


技术实现要素：

5.针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种防治家禽肝脏损伤的组合物及其应用。本发明的组合物能减轻肝细胞变性坏死，促进肝细胞再生，还能增强肝脏的解毒功能。将本发明的组合物制成饲料添加剂并应用于家禽，能够降低家禽的死淘率和肝病率，提高家禽的生产性能。
6.为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
7.本发明的第一方面，提供一种防治家禽肝脏损伤的组合物，由以下重量份的原料组成：
8.白芍提取物8-12份、黄芪提取物6-8份、当归提取物4-6份、甘草提取物4-6份、枸杞提取物2-4份。
9.优选的，上述防治家禽肝脏损伤的组合物，由以下重量份的原料组成：
10.白芍提取物10份、黄芪提取物7份、当归提取物5份、甘草提取物5份、枸杞提取物3份。
11.本发明的第二方面，提供上述防治家禽肝脏损伤的组合物的制备方法，包括以下步骤：
12.将白芍提取物、黄芪提取物、当归提取物、甘草提取物和枸杞提取物按重量份混合均匀，即得。
13.本发明的第三方面，提供上述组合物在制备防治家禽肝脏损伤的药物制剂中的应用。
14.本发明的第四方面，提供上述组合物在制备饲料添加剂中的应用。
15.本发明的第五方面，提供一种饲料添加剂，所述饲料添加剂以上述组合物为有效成分。
16.进一步的，所述饲料添加剂中还可以包含载体和或/辅料，例如：加益粉、蔗糖、明胶、玉米淀粉等。
17.优选的，所述饲料添加剂的剂型可以为粉剂、颗粒剂、微丸剂等。
18.所述饲料添加剂的使用方法为：将饲料添加剂按每公斤兑水4000-6000斤，集中4-5时间饮用，连用3-5天。
19.本发明的有益效果：
20.(1)本发明的组合物中，白芍提取物对d-半乳糖胺所致肝损伤和血清谷丙转氨酶升高有明显对抗作用，修复肝细胞；黄芪提取物有抗氧化及稳定肝细胞膜作用，能促进胆红素代谢，减少肝细胞坏死，促进肝细胞再生；当归提取物能减轻肝细胞变性坏死，促进肝细胞再生，抑制肝纤维化，还可使血清谷丙转氨酶降低；甘草提取物可减轻肝细胞变性和坏死程度，提高肝细胞内的糖元含量，促进肝细胞再生，对肝炎有抑制作用，还能增强肝脏的解毒功能；枸杞提取物有护肝及防治脂肪肝的作用，能抑制脂肪在肝细胞内沉积、促进肝细胞再生，对肝功能紊乱以及体内脂质代谢的异常也有一定的调节作用。将白芍提取物、黄芪提取物、当归提取物、甘草提取物和枸杞提取物组合使用具有协同增效的作用，能够提高肝损伤的预防和治疗效果。
21.(2)将本发明的组合物作为饲料添加剂在家禽生产中进行应用，能够降低家禽的死淘率、肝病率和料肉比，提高家禽的采食量、成活率和产蛋率。
具体实施方式
22.应该指出，以下详细说明都是例示性的，旨在对本技术提供进一步的说明。除非另有指明，本文使用的所有技术和科学术语具有与本技术所属技术领域的普通技术人员通常理解的相同含义。
23.正如背景技术部分介绍的，肝脏的损伤造成了动物物质代谢障碍、胆汁的形成和排泄障碍等一系列病理变化及相应的综合征，极大的降低了解毒能力，严重影响了动物的生产性能，危害家禽养殖业。
24.基于此，本发明从中医药的角度入手，以疏肝气、清肝毒、降肝火、养肝血、强分解、促转化为目标，进行药物的筛选。最终选择白芍提取物、黄芪提取物、当归提取物、甘草提取物和枸杞提取物作为原料组成，上述原料组成具有协同增效作用，能够回归本元，提高对肝脏的保护作用。
25.为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本技术的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本技术的技术方案。
26.本发明实施例和对比例中所用的试验材料均为本领域常规的试验材料，均可通过商业渠道购买得到。其中：
27.白芍提取物购自四川恒瑞通达生物科技有限公司，产品批号：180801；
28.黄芪提取物购自四川恒瑞通达生物科技有限公司，产品批号：180601；
29.当归提取物购自四川恒瑞通达生物科技有限公司，产品批号：180712；
30.甘草提取物购自四川恒瑞通达生物科技有限公司，产品批号：180904；
31.枸杞提取物购自四川恒瑞通达生物科技有限公司，产品批号：180901。
32.实施例1：防治家禽肝脏损伤的组合物
33.1、原料组成：
34.白芍提取物10kg、黄芪提取物7kg、当归提取物5kg、甘草提取物5kg、枸杞提取物3kg。
35.2、制备方法：
36.将白芍提取物、黄芪提取物、当归提取物、甘草提取物和枸杞提取物按重量份混合均匀，即得。
37.实施例2：防治家禽肝脏损伤的组合物
38.1、原料组成：
39.白芍提取物8kg、黄芪提取物8kg、当归提取物4kg、甘草提取物6kg、枸杞提取物2kg。
40.2、制备方法：
41.将白芍提取物、黄芪提取物、当归提取物、甘草提取物和枸杞提取物按重量份混合均匀，即得。
42.实施例3：防治家禽肝脏损伤的组合物
43.1、原料组成：
44.白芍提取物12kg、黄芪提取物6kg、当归提取物6kg、甘草提取物4kg、枸杞提取物4kg。
45.2、制备方法：
46.将白芍提取物、黄芪提取物、当归提取物、甘草提取物和枸杞提取物按重量份混合均匀，即得。
47.试验例1：对鸡干细胞损伤的保护作用研究
48.1、试验方法：
49.参照“lps联合恩诺沙星致鸡干细胞损伤模型的建立及复方甘草酸单胺保护机理研究”(南京农业大学硕士学位论文，刘腾飞，2014年)的方法构建lps联合恩诺沙星诱导鸡肝细胞损伤体外模型。相关步骤如下：
50.从40-50龄健康公鸡中分离肝脏并获得肝细胞；用生长培养液(含10％胎牛血清、0.5g/l人胰岛素、2％双抗(100u/ml青霉素及100μg/ml链霉素)的williams＇medium e培养液)将获得的干细胞稀释成5
×
105cell/ml，接种于细胞培养板中，在37℃、5％co2、饱和湿度下进行鸡肝细胞原代培养。
51.肝细胞正常培养48h后，吸弃上清，无菌d-hanks轻轻冲洗细胞两次，将待用细胞分成8组，各组具体处理为：
52.空白对照组：用不含任何药物的生长培养液培养48h，每24h换液1次；
53.损伤模型组：用含有30μg/ml lps 80μg/ml恩诺沙星的生长培养液；培养48h，每24h换液1次；
54.处理组1：用含实施例1制备的组合物200μg/ml的生长培养液预处理细胞24h后，换含有30μg/ml lps 80μg/ml恩诺沙星的生长培养液，继续培养24h；
55.处理组2：用含白芍提取物200μg/ml的生长培养液预处理细胞24h后，换含有30μg/ml lps 80μg/ml恩诺沙星的生长培养液，继续培养24h；
56.处理组3：用含黄芪提取物200μg/ml的生长培养液预处理细胞24h后，换含有30μg/ml lps 80μg/ml恩诺沙星的生长培养液，继续培养24h；
57.处理组4：用含当归提取物200μg/ml的生长培养液预处理细胞24h后，换含有30μg/ml lps 80μg/ml恩诺沙星的生长培养液，继续培养24h；
58.处理组5：用含甘草提取物200μg/ml的生长培养液预处理细胞24h后，换含有30μg/ml lps 80μg/ml恩诺沙星的生长培养液，继续培养24h；
59.处理组6：用含枸杞提取物200μg/ml的生长培养液预处理细胞24h后，换含有30μg/ml lps 80μg/ml恩诺沙星的生长培养液，继续培养24h；
60.生长培养液的组成为：含10％胎牛血清、0.5g/l人胰岛素、2％双抗(100u/ml青霉素及100μg/ml链霉素)的williams＇medium e培养液。
61.采用mtt法测定各处理组的细胞存活率：各处理组细胞终止培养前加入20μl mtt(5g/l)，37℃、5％co2孵育4h，弃去上清液，每孔中加入dmso 150μl，震荡10min使之完全溶解。在酶标仪570nm下测定各孔吸光度值。
62.细胞存活率＝(od
实验孔-od
空白孔
)/(od
对照孔-od
空白孔
)
×
100％
63.2、试验结果：
64.各处理组的细胞存活率见表1。
65.表1：各处理组细胞存活率
66.组别细胞存活率空白对照组100％损伤模型组48.5％处理组196.2％处理组260.0％处理组352.4％处理组453.8％处理组557.6％处理组651.3％
67.结果表明：与空白对照组相比，损伤模型组的细胞存活率显著下降；与损伤模型组相比，采用实施例1的组合物对肝细胞进行预处理，能显著提高肝细胞在lps联合恩诺沙星诱导条件下的细胞存活率。
68.试验例2：在白羽肉鸡上的应用
69.1、试验方法：
70.(1)试验时间：2018年9月
71.(2)试验地点：烟台
72.(3)试验品种：科宝肉鸡
73.(4)饲养方式：三层笼养
74.(5)试验分组及处理：
75.1-5号鸡舍为对照组；6-10号鸡舍为实验组；对照组和实验组的鸡苗日龄、数量、性
别无显著差异。
76.实验组的处理方法为：将实施例1制备的组合物作为饲料添加剂进行应用，用法用量为：将每1公斤的组合物兑清水5000斤，在第10-12日龄、20-22日龄、30-32日龄时给予鸡群饮用，每次集中4-5小时饮用。
77.对照组在相应时间给予等量的清水。
78.实验组和对照组的鸡苗的其他饲养条件保持一致。统计对照组和实验组的出栏天数、均重、料肉比和成活率。
79.2、试验结果：
80.试验结果见表2。
81.表2：出栏数据对比
82.组别鸡舍号出栏天数均重料肉比成活率对照组1415.161.5796％对照组2415.121.5695.5％对照组3415.281.5794％对照组4425.381.5894％对照组5425.351.5795％实验组6415.491.5097％实验组7415.461.5297％实验组8415.551.5196.5％实验组9425.611.5098％实验组10425.711.4897.1％
83.由表2可以看出，以实施例1制备的组合物作为饲料添加剂进行使用，能降低鸡群的料肉比，说明对鸡群的饲料转化率有很好的作用；还能提高鸡群的成活率，说明对鸡群的抗病能力也有明显的提升。
84.试验例3：在育雏蛋鸡中的应用
85.1、试验方法：
86.将山东某蛋鸡场育雏蛋鸡分成试验组和对照组两个处理，其中：
87.试验组是将实施例1制备的组合物按1公斤组合物兑水4000斤，制成给药溶液；分别10-14日龄、免疫空白期(21-25日龄)和43-49日龄三个时期以饮水的方式给予上述给药溶液，每次集中4-5小时饮用。
88.对照组在相应时间段给予等量的清水。
89.试验组和对照组的其他饲养条件保持一致。
90.对每天死淘鸡进行剖检，记录肝病、腺肌胃炎的数量；并在8周末(第56天)对蛋鸡的胫骨长、均匀度进行检测。
91.2、试验结果：
92.试验结果见表3。
93.表3：对育雏蛋鸡的作用效果
[0094][0095]
结果表明：试验组比对照组死淘率低1.2％，直接经济效益近6000元；试验组比对照组的肝病率和腺肌胃炎的发病率大幅降低，节省了用药成本；试验组比对照组均匀度高7％，胫骨长度平均高5mm，证明鸡群发育比较好，饲料营养转化率比较高。
[0096]
试验例4：在开产蛋鸡中的应用
[0097]
1、试验方法：
[0098]
将山东某蛋鸡场开产蛋鸡分成试验组和对照组两个处理，其中：
[0099]
试验组是将实施例1制备的组合物按1公斤组合物兑水4000斤，制成给药溶液；在育成料换产蛋料时开始以饮水的方式给予上述给药溶液，连用7天，每次集中4-5小时饮用；以后每半月给予上述给药溶液3天，每次集中4-5小时饮用。
[0100]
对照组在相应时间段给予等量的清水。
[0101]
试验组和对照组的其他饲养条件保持一致。试验时间为开产至30周末。
[0102]
对每天死淘鸡进行剖检，记录肝病数量；并对鸡群抗应激能力、爬坡速度进行考察。
[0103]
2、试验结果：
[0104]
试验结果见表4。
[0105]
表4：对开产蛋鸡的作用效果
[0106][0107]
结果表明：试验组比对照组死淘率低1.48％，直接经济效益近2万元；试验组比对照组多产3718枚鸡蛋，直接经济效益900元左右；试验组比对照组少吃5吨饲料，直接经济效益近万元；试验组与比对照组相比，产蛋率爬升速度快，最高产蛋率高，料蛋比更低，生产性能更好。
[0108]
以上所述仅为本技术的优选实施例而已，并不用于限制本技术，对于本领域的技术人员来说，本技术可以有各种更改和变化。凡在本技术的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本技术的保护范围之内。