一种部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数数据库的构建及应用的制作方法

技术特征：
1.一种单糖部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数分析数据库，其特征在于，其构建方法包括：(1)将不同中性单糖制备成部分甲基化糖腈乙酸酯衍生物；(2)采用气质联用仪和毛细管柱梯度分离不同苷键连接的部分甲基化糖腈乙酸酯衍生物；(3)依据部分甲基化糖腈乙酸酯衍生物的裂解规律并完善ei-ms数据库，对分离的化合物进行了结构确证；(4)根据程序升温保留指数的计算公式计算保留指数，建立包含不同苷键连接类型的部分甲基化糖腈乙酸酯衍生物保留指数分析数据库。2.根据权利要求1所述的单糖部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数分析数据库，其特征在于，步骤(1)中所述的部分甲基化糖腈乙酸酯衍生物的制备方法包括：将各种中性单糖依次进行盐酸甲醇解、部分甲基化、水解、还原和乙酰化处理得到部分甲基化糖腈乙酸酯衍生物。3.根据权利要求1所述的单糖部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数分析数据库，其特征在于，所述的单糖包括但不限于葡萄糖、甘露糖、半乳糖、阿拉伯糖、木糖、核糖、鼠李糖或岩藻糖中的任何一种。4.根据权利要求1所述的单糖部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数分析数据库，其特征在于，步骤(2)中所述的采用气质联用仪梯度分离不同单糖的方法包括：采用agilent 7890a-5975c气质联用仪，采用毛细管柱，氦气作载气，进样口温度250℃，柱流速1.2ml/min；ei70 ev，接口温度250℃，离子源温度230℃，扫描范围:m/z 50-550，扫描率：2.5scan/s；洗脱梯度的参数采用以下2种方式的任何一种：(1)柱温130℃，平衡1min，以5℃/min至230℃平衡2min，以10℃/min至280℃平衡2min；(2)柱温100℃，平衡2min，以8℃/min至150℃平衡2min，以3℃/min至240℃平衡2min；所述的毛细管柱包括但不限于下述毛细管柱中的任何一种：db-5ms，其规格为60m
×
0.25mm
×
0.25μm；db-1701，其规格为60m
×
0.25mm
×
0.25μm；db-225ms，其规格为60m
×
0.25mm
×
0.25μm；db-210，其规格为30m
×
0.25mm
×
0.25μm；步骤(3)中所述完善ei-ms数据库的方法包括：步骤(2)中所述的采用气质联用仪梯度分离不同单糖部分甲基化糖腈乙酸酯衍生物，通过总结其裂解规律，阐释不同单糖部分甲基化糖腈乙酸酯衍生物的化学结构，明确其ei-ms质谱信息用作各种商品化气相色谱质谱数据库的补充；步骤(4)中所述程序升温保留指数的计算公式如下：ri＝100z 100[t
r(x)-t
r(z)
]/[t
r(z 1)-t
r(z)
]；式中，t
r
代表保留时间，x表示待分析的化合物，z和z 1分别表示正构烷烃的碳原子数，且t
r(z)
<t
r(x)
<t
r(z 1)
。5.权利要求1所述的单糖部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数分析数据库在鉴别同种单糖同分异构体中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，包括：(1)获得同种类糖不同甲基化位点得到衍生物ei-ms质谱图；(2)根据线性程序升温条件下的保留指数计算公式计算出保留指数；(3)根据保留指数辅助质谱信息对同种单糖的同分异构体进行鉴别。7.权利要求1所述的单糖部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数分析数据库在鉴别异构单糖
的同分异构体中的应用。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，包括：根据线性程序升温条件下的保留指数计算公式计算出保留指数；根据保留指数的差异对于异构单糖的同分异构体进行鉴别。9.权利要求1所述的单糖部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数分析数据库在对皂苷类化合物中单糖的连接方式进行分析鉴别中的应用；优选的，所述的应用包括：(1)实际测定皂苷类化合物的保留指数；(2)将实际测定皂苷类化合物的保留指数和本发明构建的部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数进行比较，对皂苷类化合物中单糖的苷连接方式进行鉴别；优选的，所述的皂苷类化合物包括但不限于桔梗皂苷、松果菊苷、金石蚕甘、巴豆苷、桔梗皂苷d、人参皂苷rc或金丝桃苷中的任何一种。10.权利要求1所述的单糖部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数分析数据库在对中药多糖甲基化分析中的应用；优选的，所述的应用包括：(1)对中药多糖色谱峰对应的质谱图进行分析，通过总结的ei-ms裂解规律对其鉴定，同时结合本发明自建的ei-ms质谱数据库和各种商品化气相色谱质谱数据库检索的质谱图，初步确定其可能的结构；(2)通过比较各个异构体实测的保留指数和本发明构建的部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数数据库中保留指数，对多糖甲基化的结构进行准确鉴别；优选的，所述中药多糖包括但不限于木耳多糖、猴头多糖、川芎多糖、桔梗多糖或香菇多糖中的任何一种。

技术总结
本发明公开了一种部分甲基化糖腈乙酸酯保留指数数据库的构建及应用。本发明采用气质的分离技术对不同苷键连接类型单糖部分甲基化糖腈乙酸酯衍生物(PMAN)进行分离，结合衍生物的裂解规律和EI-MS数据库检索，对化合物进行结构确证，完善单糖不同苷键连接类型的PMAN衍生物的EI-MS数据库信息同时计算其保留指数，建立包含不同苷键连接类型的PMAN衍生物保留指数的分析数据库，采用所构建的保留指数分析数据库对中药糖苷类化合物中糖苷键连接位置和顺序进行综合定性鉴定，成功应用于中药糖苷类化合物中各种糖残基连接位置和顺序分析，在同种单糖、异构体单糖和对称性单糖的鉴别上相比现有的鉴别方法具有显著优势。相比现有的鉴别方法具有显著优势。相比现有的鉴别方法具有显著优势。


技术研发人员：夏永刚 梁军 李野 高佳宁
受保护的技术使用者：夏永刚
技术研发日：2021.08.24
技术公布日：2022/3/3