具有广谱抗菌性的荞麦组合物提取物、制备方法及应用与流程

1.本发明属于抗菌技术领域，具体涉及一种具有广谱抗菌性的荞麦组合物提取物、制备方法及应用。


背景技术：

2.荞麦是一种双子叶植物，其具有适应力强、可在多种环境中生长、生长周期短、春夏秋季均可种植的特点，其形态异于小麦，直立茎、具纵棱、叶呈三角形或卵状、伞房状花、籽粒呈三角形、外有黑色硬壳麸皮。荞麦作为一种小宗粮食作物，可以用于制作面条、凉粉等食品。
3.荞麦的栽培在我国分布极为广泛，东南西北均有种植，我国常年播种面积约为100万平方公顷，产量约70万吨，不仅年产量高而且出口量也排在全世界第一位。随着对荞麦的关注度不断提高，人们对其食用价值之外的应用价值进行了研究。曹良顺等人对荞麦花叶有效成分及药理作用进行了综述，总结出荞麦花叶在心血管疾病防治、糖尿病及其并发症治疗、抗氧化和抗疲劳方面具有应用价值
1.。张国涛等人对荞麦提取物的抗氧化性进行了研究，通过乙醇提取获得其中黄酮类物质，发现荞麦提取物中的黄酮类物质是发挥抗氧化性的重要成分
2.。郭兰等人对荞麦花叶提取物对荷瘤小鼠免疫功能的影响进行了研究，发现其可以减轻ctx所致小鼠免疫抑制
3.。王建行等人发现荞麦花叶发酵提取物可改善自发肥胖2型糖尿病db/db小鼠肾损伤
4.。李秀等人考察了荞麦麸皮提取物安全性毒理学，发现荞麦麸皮提取物对精子或者染色体无明显的致畸作用
5.。
4.除了上述在疾病治疗和保健方面的用途之外，荞麦在抗菌方面的应用价值也同样受到人们的关注。周玉岩等人对金荞麦提取物体外抗菌活性进行了研究，发现其对猪胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌抑菌效果较好
6.。乔红杰等人也发现金荞麦根提取物具有良好的体外抗菌活性
7.。
5.虽然已有的研究证明荞麦提取物具有一定的抗菌作用，但其抗菌谱较窄，对于诸如黑曲霉、镰刀菌、柑橘绿霉和灰绿青霉等菌均无抑菌作用
[8-9]
。同时，目前所得的荞麦提取物的抑菌能力不强，对于大部分已知有效的菌(如大肠杆菌、金黄色葡萄球菌)的mic一般不低于1mg/ml，这极大的限制了其在作为抗菌材料方面的应用价值。另外，荞麦提取物的抗菌效果还受限于提取的部位和提取方法。一般而言，水体产物的抗菌性均弱于醇提产物
[6][8]
；同时，不同荞麦部分的提取物的抗菌效果也有较大的差异，如荞麦壳水提物对金黄色葡萄球菌没有抑菌作用
[10]
。因此，荞麦提取物目前还难以作为良好的抑菌剂使用，这使得进一步开发荞麦的抑菌价值，推动利用荞麦制备相关高效的抑菌产品，成为必要的研究方向。
[0006]
在进一步开发荞麦的抑菌价值方面，研究者们主要从精炼抑菌活性成分和制备抑菌组合物这两个方向开展研究。董晓宁等人从苦荞麦中提取其中的芦丁并发现其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的mic可降低至0.4mg/ml和0.2mg/ml，抑菌效果优于常规的荞麦醇提物或水提物
[11]
。姜忠丽等人通过将苦荞麦与丁香和蒲公英互配，发现互配后的醇提物具有更好的抑菌效果
[12]
。然而，现有研究成果在扩大抗菌谱和提高抗菌效果方面仍不尽人意。
[0007]
综上所述，如何基于荞麦开发具有更好抑菌效果的产品，是本领域亟待解决的技术问题。
[0008]
本部分参考文献：
[0009]
[1]曹良顺,张英,张赛航,等.荞麦花叶有效成分及药理作用研究现状[j].亚太传统医药,2015,011(004):64-66.
[0010]
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[0011]
[3]郭兰,吴爱萍,赵志宇,等.荞麦花叶提取物对荷瘤小鼠免疫功能的影响[j].医药导报,2013,32(11):1421-1424.
[0012]
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[0013]
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[0017]
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[0018]
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[0019]
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[0020]
[12]姜忠丽,王俊伟.丁香、苦荞麦及蒲公英的复配抑菌作用[j].粮食与饲料工业,2011,12(008):39-41.


技术实现要素：

[0021]
针对现有技术的不足，本发明的目的之一在于提供一种具有广谱抗菌性的荞麦组合物提取物。该提取物需满足对多种菌的mic达到微克每毫升级别、抗菌谱广、获取方式简单和成本低廉的技术要求，以克服现有技术存在的难以利用荞麦提取物作为高效抗菌剂使用的缺点。
[0022]
为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
[0023]
一种具有广谱抗菌性的荞麦组合物提取物，所述荞麦组合物，按重量份计，包括20～30份荞麦、5～8份两面针、10～12份山楂叶和5～8份沙棘叶；所述提取物为水提产物。
[0024]
如前所述，荞麦提取物在抗菌方面存在多方面的缺点，主要体现在：(1)抗菌性不强，对常见菌的mic仅在毫克每毫升级别；(2)抗菌性受提取部位影响大，荞麦壳抗菌谱更窄；(3)现有技术主要用乙醇提取，成本高昂，安全隐患大，难以规模化。
[0025]
受到姜忠丽等人通过将苦荞麦与丁香和蒲公英互配，发现互配后的醇提物具有更好的抑菌效果的启发
1.，本专利的发明人考虑选择其它具有抗菌性的常见植物进行互配提取。
[0026]
两面针为芸香科花椒属植物，目前已发现其提取物具有抗菌性。叶玉珊等人通过多级提取从两面针根中获得了多个化合物，发现这些化合物对金黄色葡萄球菌具有显著的抑菌效果，其中一个化合物还能有效抑制耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
2.。黄依玲等人考察了不同提取方法对两面针不同部位提取所得物的抗菌性能，发现提取物的抗菌谱同样受到提取方法和提取部位的巨大影响，其中水提物的抗菌谱最窄，对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌在其考察浓度范围内没有抑菌作用
3.。韦盘秋等人考察了两面针提取物对于常见水产菌的抗菌效果，但发现两面针水提物对常见水产菌没有抑菌效果
4.。王春娟等人考察了两面针醇提物的抑菌性，发现其对标准金黄色葡萄球菌以及多种耐甲氧西林金黄色葡萄球菌均有较好的抑菌效果，但还未考察其水提物的抗菌性
5.。
[0027]
基于上述报道显示两面针提取物具有一定的抑菌效果，本专利发明人考虑将两面针和荞麦进行互配并以水作为提取试剂进行提取，并考察所得提取物的抑菌性。在初步实验中，我们优先考虑互配后对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌这两种常见菌株的抗菌性的影响，通过实验，我们发现两者互配并不产生相应的协同作用，抗菌性能没有得到明显提高。通过大量的实验，我们考察了将荞麦与其它植物(如赤芍、黄芩或艾叶)互配提取所得提取物的抗菌性，同样发现所得提取物对于常见菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌性没有明显改变。
[0028]
基于此，我们考虑将荞麦与至少两种其它植物互配，并考察其水提物的抗菌性能。然而，在以荞麦、两面针、赤芍、黄芩和艾叶作为选择对象的基础上，经考察，从其中选择包含荞麦的任意三种作为互配组合物进行提取，所得提取物针对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌性也均没有明显改变。
[0029]
通过不断的摸索，我们发现将荞麦、两面针和山楂叶互配后进行水提后，所得提取物针对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌性能得到了大幅提升。受此鼓舞下，发明人考察了所得提取物的抗菌谱，遗憾的是，虽然所得提取物可以对一些常见菌具有优异的抗菌效果，但抗菌谱仍然比较窄。
[0030]
在此基础上，我们进一步增加互配的植物，发现在荞麦、两面针和山楂叶的基础上，再增加沙棘叶后，不仅没有影响对常见菌的抗菌效果，同时还扩大了提取物的抗菌谱。
[0031]
高语考察了35味中草药提取物体外抑菌活性，发现沙棘对于14种标准菌的抑菌效果虽然不高于100mg/ml，但可以增强氯霉素和氧氟沙星针对铜绿假单胞菌的抑菌性能
[9]
。该研究发现，不同中草药的大分子或小分子提取物对提取物之间在抑菌方面的协同作用的有无，有着重要的影响。因此认为中草药的抑菌是多靶点的，且认为针对不同的菌株，中草药成分的药效作用机制不同。
[0032]
高语的发现不仅揭示了中草药抗菌具有多靶点特点，表明中草药提取物在抗菌机制较为复杂，同时也说明本发明中荞麦、两面针、山楂叶和沙棘叶的水提物组合依据其具体的抗菌靶点特性产生了协同作用，从而具有抗菌谱广、抗菌效果强的特点。
[0033]
除了上述关于荞麦、两面针和沙棘叶提取物的抗菌性能的报道之外，山楂叶提取物的抗菌性研究也有一些报道。申笑菡等人考察了山楂的乙醇提取物对于金黄色葡萄球菌
的抑菌活性，发现其mic为0.625mg/ml
6.。许瑞波等人同样也发现山楂叶中的黄酮对于大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌具有抑制作用
7.。林春梅等人考察了山楂叶、果和籽提取物的抗菌效果，发现对所得提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌具有抑制效果明显，但对黑曲霉没有抑制效果
[8]
。
[0034]
根据本发明所得的抗菌结果可知，本发明的组合物克服了组合物中各组分在抗菌谱和抗菌效果方面的缺点，如解决了荞麦提取物对黑曲霉、镰刀菌、柑橘绿霉和灰绿青霉等菌无抑菌性，山楂叶对黑曲霉没有抑制效果，两面针水提物对常见水产菌没有抑菌效果等抗菌谱的缺陷；再如解决了组合物中各组分提取物的mic一般只能达到毫克每毫升级别的缺陷。
[0035]
作为本发明的优选技术方案，所述荞麦组合物，按重量份计，包括25份荞麦、6份两面针、11份山楂叶和7份沙棘叶。
[0036]
如本发明的一个实施例所示，当组合物中的各组分按重量份计，以25份荞麦、6份两面针、11份山楂叶和7份沙棘叶组合时，所得组合物的抗菌性最佳。
[0037]
本发明所述荞麦包括苦荞、金荞麦或甜荞。可以是荞麦根、荞麦茎、荞麦叶和荞麦壳中的一种或多种。
[0038]
相对于现有技术而言，本发明中，虽然荞麦的类别和所取部位对抗菌性也有一定影响，但总体而言，各种荞麦及其各部位均能与两面针、山楂叶和沙棘叶配合并增强抗菌性能和抗菌谱。不难看出，本发明克服了现有技术在利用荞麦提取物作为抗菌物质使用时，所受到荞麦类别和所取部位的限制，进一步增强了荞麦在制备抗菌剂方面的应用价值。
[0039]
所述水提产物为利用水对组合物进行提取并去渣后所得液相物；所述液相物包括过滤滤液、浓缩浸膏或滤液冻干粉。
[0040]
本发明的另外一个目的在于提供上述荞麦组合物提取物的制备方法，所述方法包括如下步骤：
[0041]
(1)按所述重量份，将荞麦、两面针、山楂叶和沙棘叶混合；
[0042]
(2)向所得混合物加入水，加温提取，取提取后的上清液，即得。
[0043]
作为本发明的优选技术方案，步骤(1)中，所述荞麦、两面针、山楂叶和沙棘叶为干燥后过筛粉末；和/或，所述提取物包括过滤滤液、浓缩浸膏或滤液冻干粉。
[0044]
作为本发明的优选技术方案，步骤(2)中，提取时，料液比为1g：15～18ml；水温为30～80℃；提取时间为0.5～2小时。
[0045]
本发明还有一个目的在于提供所述荞麦组合物提取物在作为抑菌剂方面的应用。
[0046]
作为本发明的一个技术方案，所述荞麦组合物提取物作为食品包装材料抑菌剂使用。
[0047]
本发明的有益效果：
[0048]
本发明所得荞麦组合物具有抗菌谱广、抗菌性能优异的优点，对30余种菌具有高效的抑菌效果，具备作为高效抗菌剂的应用潜力。本发明解决了荞麦提取物在抗菌方面的缺陷，扩大了荞麦的应用价值。
[0049]
本部分参考文献：
[0050]
[1]姜忠丽,王俊伟.丁香、苦荞麦及蒲公英的复配抑菌作用[j].粮食与饲料工业,2011,12(008):39-41.
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[0052]
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[0053]
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[0054]
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[0056]
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[0057]
[8]林春梅,刘云鹤,周鸣谦.山楂叶
·
果和籽提取物抑菌作用研究[j].安徽农业科学,2011,39(36):22582-22583.
[0058]
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具体实施方式
[0059]
下面通过实施例对本发明进行具体描述，有必要在此指出的是以下实施例只是用于对本发明进行进一步的说明，不能理解为对本发明保护范围的限制，该领域的技术熟练人员根据上述发明内容所做出的一些非本质的改进和调整，仍属于本发明的保护范围。
[0060]
在本发明下述预实验例和实施例中，实验菌株信息如下：
[0061]
金黄色葡萄球菌(atcc 29213)、大肠埃希菌(atcc 25922)、黑曲霉(atcc16404)、变紫青霉(atcc 40687)、黄曲霉菌(atcc 2003)、串珠镰刀菌(atcc 2490)、尖孢镰刀菌(atcc 41029)、白色念珠菌(atcc 10231)、铜绿假单胞菌(atcc9027)、伤寒沙门氏菌(cmcc 50071)、粘质沙雷氏菌(cmcc 41002)、肺炎克雷伯氏菌(atcc 13883)、鲍曼不动杆菌(atcc 19606)、粪产碱杆菌(cmcc 40001)、枯草芽孢杆菌(atcc 9372)、枯草芽孢杆菌(atcc 6633)、鲍曼不动杆菌(atcc 19606)、单增李斯特菌(atcc 19115)、阴沟肠杆菌(atcc 13047)、产气肠杆菌(atcc 13048)、鼠伤寒沙门菌(atcc 14028)、福氏志贺菌(atcc 12022)、表皮葡萄球菌(atcc 12228)、藤黄八叠球菌(atcc 11001)、蜡样芽胞杆菌(atcc 11778)、沙门氏菌(cmcc(b)50094)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(atcc 43300)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(atcc 25923)、炭疽芽孢杆菌(cmcc 63001)、乙型副伤寒沙门氏菌标准菌株(cmcc(b)50094)、普通变形杆菌(cmcc(b)49027)、嗜水气单胞菌(atcc 35654)、柑橘绿霉(发明人课题组实验室自有标准菌)和灰绿青霉(发明人课题组实验室自有标准菌)。
[0062]
本发明下述预实验例和实施例中所用的苦荞麦采自四川省凉山地区，甜荞麦采自内蒙古，两面针采自广西省，沙棘叶购自山西省，山楂叶购自江苏省，赤芍、黄芩和艾叶为市售。
[0063]
预实验例1
[0064]
本预实验例考察将荞麦和两面针混合，用水进行提取所得提取物在对金黄色葡萄
球菌(atcc 29213)和大肠埃希菌(atcc 25922)的抗菌效果。
[0065]
本预实验例设置4个实验组和3个对照组，分别为：
[0066]
实验组1：选用苦荞麦全草和两面针全草以重量5:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0067]
实验组2：选用甜荞麦全草和两面针全草以重量5:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0068]
实验组3：选用苦荞麦茎叶和两面针全草以重量5:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0069]
实验组4：选用苦荞麦根和两面针全草以重量5:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0070]
实验组5：选用甜荞麦壳和两面针全草以重量5:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0071]
对照组1：选用苦荞麦全草，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0072]
对照组2：选用甜荞麦全草，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0073]
对照组3：选用两面针全草，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0074]
考察上述实验组和对照组所得提取物对金黄色葡萄球菌(atcc 29213)和大肠埃希菌(atcc 25922)的最小抑制浓度(mic)，结果如表1所示。
[0075]
注：本预实验例中，由于已知荞麦提取物抗菌活性较差，而本预实验例仅考察添加两面针是否能显著提高抗菌活性。因此，在设置浓度梯度时，取值间隔较大，分别为1mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、20、mg/ml、30mg/ml、40mg/ml、50mg/ml、100mg/ml、150mg/ml。因此，表1中的mic可能并非准确数值，如表1中的mic为50mg/ml时，准确的mic可能为50mg/ml，也可能介于40mg/ml至50mg/ml之间；其中，
“‑”
表示无抑菌活性(其余表中情况同此说明)。
[0076]
表1
[0077][0078]
预实验例2
[0079]
本预实验例考察将荞麦分别和赤芍、黄芩、艾叶混合，用水进行提取所得提取物对金黄色葡萄球菌(atcc 29213)和大肠埃希菌(atcc 25922)的抗菌效果。
[0080]
本预实验例设置4个实验组和3个对照组，分别为：
[0081]
实验组1：选用苦荞麦全草和赤芍以重量5:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：
15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0082]
实验组2：选用苦荞麦全草和黄芩以重量5:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0083]
实验组3：选用苦荞麦全草和艾叶以重量5:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0084]
对照组1：选用赤芍，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0085]
对照组2：选用黄芩，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0086]
对照组3：选用艾叶，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0087]
考察上述实验组和对照组所得提取物对金黄色葡萄球菌(atcc 29213)和大肠埃希菌(atcc 25922)的最小抑制浓度(mic)，结果如表2所示。
[0088]
表2
[0089][0090]
预实验例3
[0091]
本预实验例考察将选自赤芍、黄芩、艾叶中任意两种与苦荞麦混合，用水进行提取所得提取物在对金黄色葡萄球菌(atcc 29213)和大肠埃希菌(atcc 25922)的抗菌效果。
[0092]
本预实验例设置3个实验组，以预实验例2的对照组实验结果作为对比数据。
[0093]
实验组1：选用苦荞麦全草、黄芩和赤芍以重量5:1:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0094]
实验组2：选用苦荞麦全草、黄芩和艾叶以重量5:1:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0095]
实验组3：选用苦荞麦全草、赤芍和艾叶以重量5:1:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0096]
考察上述实验组所得提取物对金黄色葡萄球菌(atcc 29213)和大肠埃希菌(atcc 25922)的最小抑制浓度(mic)，结果如表3所示。
[0097]
表3
[0098][0099]
预实验例4
[0100]
本预实验例首先考察将苦荞麦、两面针和山楂叶混合，用水进行提取所得提取物在对金黄色葡萄球菌(atcc 29213)和大肠埃希菌(atcc 25922)的抗菌效果。
[0101]
选用苦荞麦全草、两面针全草和山楂叶以重量5:1:2混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0102]
实验结果表明，所得提取物针对金黄色葡萄球菌(atcc 29213)和大肠埃希菌(atcc 25922)的mic分别可达50μg/ml和20μg/ml，表明苦荞麦全草、两面针全草和山楂叶水提物在针对上述两种菌的抑菌性方面具有协同作用。
[0103]
本预实验例随后考察了所得提取物对黑曲霉(atcc16404)、串珠镰刀菌(atcc 2490)、尖孢镰刀菌(atcc 41029)、嗜水气单胞菌(atcc 35654)、柑橘绿霉和灰绿青霉的抑菌性。发现提取物黑曲霉(atcc16404)、嗜水气单胞菌(atcc 35654)、柑橘绿霉和灰绿青霉仍无抑菌效果，对串珠镰刀菌(atcc 2490)和尖孢镰刀菌(atcc 41029)的mic分别为100mg/ml和150mg/ml。这表明本预实验例的提取物仍未能很好的扩大抗菌谱，并没有解决荞麦、山楂叶和两面针提取物在抗菌谱方面的已知缺陷。
[0104]
实施例1
[0105]
选用苦荞麦全草、两面针全草、山楂叶和沙棘叶以重量5:1:2:1混合，粉碎后，加水，料液比为1g：15ml，于80℃下提取2小时，过滤后浓缩滤液，冻干燥至粉末，得到提取物。
[0106]
本实施例考察所得提取物对金黄色葡萄球菌(atcc 29213)和大肠埃希菌(atcc 25922)的抑菌活性，发现抑菌效果优异；在此基础上，再考察了提取物对对黑曲霉(atcc16404)、串珠镰刀菌(atcc 2490)、尖孢镰刀菌(atcc 41029)、嗜水气单胞菌(atcc 35654)、柑橘绿霉和灰绿青霉的抑菌活性，发现抑菌活性同样优异(结果见表4)。受此实验结果鼓舞，本实施例考察了其它多种实验菌，发现所得提取物对各受试菌均有良好的抑菌活性(结果见表4)。这表明本实施例所得提取物在抑菌方面具有抗菌谱广、抑菌活性好的特点。
[0107]
实施例2
[0108]
在实施例1的基础上，本实施例对荞麦种类及所取部位以及与其它各组分的配比关系进行了调整，将实施例1的组合物作为实验组1，并设置如下实验组2～5：
[0109]
实验组2：除各组分按重量份计，为20份荞麦、5份两面针、12份山楂叶和8份沙棘叶之外，其余与实验组1一致。
[0110]
实验组3：除各组分按重量份计，为30份荞麦、8份两面针、10份山楂叶和5份沙棘叶之外，其余与实验组1一致。
[0111]
实验组4：除各组分按重量份计，为25份荞麦、6份两面针、11份山楂叶和7份沙棘
叶。
[0112]
实验组5：除料液比为1g：18ml，水温为30℃，提取时间为0.5小时之外，其余与实验组1一致。
[0113]
实验组1～5所得提取物针对各受试菌的mic见表4所示，表中mic的单位为μm/ml。在本实施例中，考察mic时先进行初步实验确定大概的mic范围，并根据初步范围，设置相应浓度梯度最终确定精确的mic数值。
[0114]
表4 单位：μm/ml
[0115][0116]
如表4中抑菌结果所示，实验组1～5所得提取物的抗菌谱广，且抗菌活性高。在此
基础上，我们考察了将实验组4的配比将荞麦、两面针、山楂叶和沙棘叶混合后，参考《金荞麦提取物体外抗菌活性研究》(doi:10.13823/j.cnki.j tcvm.2009.05.045)的方法，利用70％的乙醇进行提取，用上述受试菌株进行抑菌实验，发现所得提取物仅对8种受试菌株的抑菌活性优于4mg/ml(即4000μm/ml)，同时仅对17种菌株具有抑菌效果，其余均无抑菌效果。这表明本发明组合物的乙醇提取物的抗菌性显著低于水提物，同时也提示组合物中产生协同作用的组分应为水溶性高的成分，可供后续机制研究提供方向。
[0117]
另外，发明人在实验组4的方案的基础上，将苦荞麦全草分别替换为苦荞麦根、苦荞麦壳和苦荞麦茎叶，发现所得提取物针对各个受试菌的mic变化幅度均不超过30％，这表明荞麦中与其它组合物发生协同作用的成分，在荞麦的各个部位均存在。发明人在实验组4的基础上，将苦荞麦全草替换为甜荞麦全草，发现所得提取物针对各个受试菌的mic变化幅度均不超过20％，这表明与其它组合物发生协同作用的成分，在苦荞麦和甜荞麦的水提物中均存在。