嘧啶基氨基-吡唑化合物的改良释放配制品和治疗方法与流程

嘧啶基氨基-吡唑化合物的改良释放配制品和治疗方法
1.相关申请的交叉引用
2.本技术要求2019年5月31日提交的美国临时专利申请号62/855,740的优先权，所述临时专利申请的公开内容出于所有目的通过引用以其整体并入本文。
技术领域
3.本公开文本涉及2-甲基-2-(3-甲基-4-((4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基)氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈的配制品，其用于治疗包括帕金森病在内的外周和神经退行性疾病。本公开文本还涉及获得改良释放配制品的方法。


背景技术：

4.帕金森综合征是涵盖几种病症的术语，所述病症包括帕金森病(pd)和其他具有诸如运动缓慢、僵硬(僵直)和行走问题等类似症状的病症，统称为帕金森综合征。大多数患有帕金森综合征的人患有特发性帕金森病，也称为帕金森氏病。特发性是指病因未知。特发性帕金森病的最常见症状是震颤、僵硬和运动缓慢。尽管帕金森病的确切病因未知，但认为遗传因素和环境因素的组合促于所述疾病的病因。批准用于治疗帕金森病的药物包括多巴胺替代疗法(左旋多巴/卡比多巴)、多巴胺激动剂(普拉克索、罗匹尼罗、罗替戈汀、阿朴吗啡)、儿茶酚-o-甲基转移酶(comt)抑制剂(恩他卡朋、左旋多巴/卡比多巴/恩他卡朋、托卡朋、奥匹匹朋)、单胺氧化酶b(mao-b)抑制剂(盐酸司来吉兰、雷沙吉兰、沙芬酰胺)、金刚烷胺、抗胆碱能药物(苯海索、甲磺苯扎托品)、乙酰胆碱酯酶抑制剂(卡巴拉汀)、血清素5-ht
2a
受体激动剂(哌马色林)和用于成像的多巴胺转运蛋白(碘氟潘i-123)。然而，这些药物为帕金森病患者提供了对症益处，但不会减少疾病的进展。
5.组合的遗传和生化证据表明，某些激酶在神经退行性障碍的发病机制中发挥作用(christensen,k.v.(2017)progress in medicinal chemistry 56:37-80；fuji,r.n.等人(2015)science translational medicine 7(273):273ra15；taymans,j.m.等人(2016)current neuropharmacology 14(3):214-225)。在帕金森病中涉及的基因是编码富亮氨酸重复激酶2(lrrk2)的park8，所述富亮氨酸重复激酶2是一种复杂的信号传导蛋白，是一种关键的治疗靶标，特别是在帕金森病(pd)中。在帕金森病的家族性形式和非家族性(散发性)形式中都发现了park8中的突变，并且在帕金森病的发病机制中涉及lrrk2的激酶活性增加。lrrk2基因中的突变是家族性帕金森病的最常见遗传原因和溶酶体功能障碍的主要驱动者，其促成路易体蛋白聚集体的形成和神经变性。lrrk2调节溶酶体的生成和功能，所述溶酶体的生成和功能在帕金森病中受损并可以通过lrrk2抑制而恢复，从而潜在地降低遗传lrrk2突变患者以及散发性或特发性帕金森病患者的疾病进展。
6.lrrk2激酶抑制剂代表了一类新的治疗剂，其具有解决帕金森病、als和其他神经退行性疾病的潜在生物学的潜力(estrada,a.a.等人(2015)jour.med.chem.58(17):6733-6746；estrada,a.a.等人(2013)jour.med.chem.57:921-936；chen,h.等人(2012)jour.med.chem.55:5536-5545；estrada,a.a.等人(2015)jour.med.chem.58:6733-6746；
chan,b.k.等人(2013)acs med.chem.lett.4:85-90；us 8354420；us 8569281；us 8791130；us 8796296；us 8802674；us 8809331；us 8815882；us 9145402；us 9212173；us 9212186；us 9932325；wo 2011/151360；wo 2012/062783；wo 2013/079493)。lrrk2活性通过其在溶酶体功能中的作用而与帕金森病病理的中枢机制有关。lrrk2激酶(一种遗传上验证的靶标)的抑制剂可以改善lrrk2-pd中的溶酶体功能，并且潜在地改善特发性帕金森病中的溶酶体功能。因此，lrrk2抑制可以干预帕金森病中的重要疾病途径，并且预防或抑制限定帕金森病进展的运动和非运动障碍的积累。
7.需要旨在减轻或延迟神经退行性障碍的疾病进展和晚期运动并发症延缓的新疗法。此外，需要有效药物组合物的固体口服剂型以实现在最大耐受剂量与最小有效剂量之间的最优血药浓度。优化的固体口服剂型调节释放和药代动力学概况，使给药频率最小化，并使具有有限吞咽能力和其他依从性因素的患者的药丸负担最小化。


技术实现要素：

8.本公开文本涉及以下物质的改良释放配制品：嘧啶基氨基-吡唑激酶抑制剂，本文中称为式i化合物，命名为2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈，并且具有结构：
[0009][0010]
或其互变异构体、多晶型物或药学上可接受的盐。
[0011]
本公开文本的一个方面包括一种改良释放配制品，其包含治疗有效量的2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈和至少一种释放改良剂。
[0012]
所述配制品的一个示例性实施方案包括含有2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈且包衣有所述至少一种释放改良剂的丸粒。在另一个示例性实施方案中，所述丸粒在其芯内含有2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈。在另一个示例性实施方案中，丸粒含有用2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈包衣的惰性芯。
[0013]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中当使用usp ii型设备在50-75rpm和37℃下在ph 3mcllvine缓冲液中测试时，2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈的释放在两小时小于60％并且在8小时大于60％，其中所述配制品是片剂。
[0014]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中当使用usp ii型设备在100rpm和37℃下在ph 3mcllvine缓冲液中测试时，2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈的释放在一小时小于60％并且在8小时大于70％，其
中所述配制品是含有丸粒的胶囊。
[0015]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈的释放在一小时小于60％，其中配制品是含有丸粒的胶囊。在一些实施方案中，在2小时内释放小于60％(例如5％-40％和5％-15％)的式i的化合物。在一些实施方案中，在4小时内释放小于60％(例如15％-60％和15％-25％)的式i的化合物。在一些实施方案中，在12小时内释放小于60％(例如35％-55％和40％-60％)的式i的化合物。
[0016]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈在施用于受试者(例如人受试者)后具有相对于立即释放配制品降低的c
max
。
[0017]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中c
max
降低至少20％(例如20％-80％、40％-80％、60％-80％和65％-75％)。
[0018]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中在施用于受试者后的前12小时期间，血液中2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈的稳态c
max
/c
min
比率在约1.5至约4.5范围内。
[0019]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中改良释放配制品包含按重量计10％至50％的2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈。
[0020]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈是结晶。
[0021]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中结晶2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈是经研磨或微粉化的。
[0022]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中所述释放改良剂按重量计占所述配制品的3％至60％(例如3％-10％、约5％、约7％或约9％)。
[0023]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中所述释放改良剂选自mcc(微晶纤维素)、hpc(羟丙基纤维素)、hpmc(羟丙基甲基纤维素)、peg(聚乙二醇甘油酯)、pva(聚乙烯醇)、pvp(聚乙烯吡咯烷酮)、cap(乙酸邻苯二甲酸纤维素)、cmc-na(羧甲基纤维素钠)、hpmcas(乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素)、hpmcp(邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素)、聚(丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸)、聚(甲基丙烯酸-共-丙烯酸乙酯)、聚(甲基丙烯酸-共-甲基丙烯酸甲酯)、ca(乙酸纤维素)；cab(乙酸丁酸纤维素)；ec(乙基纤维素)、聚(丙烯酸乙酯-共-甲基丙烯酸甲酯)、聚(丙烯酸乙酯-共-甲基丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸乙酯三甲基氯化铵)、pvac(聚乙酸乙烯酯)和hpmc/cmc。
[0024]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中所述释放改良剂选自hp 50/hp 55、fs 30d、l 30d-55/l 100-55、l 12,5/l 100、s 12,5/s 100、聚合物、eastman ca、eastman cab、eastman cab、ethocel
tm
、ecd、或或甘油酯gattecoat
tm
、ne 30d、nm 30d、rl 30d、rl 100/rl po、rs 30d、rs 100/rs、sr 30d、hm-ppa、
mae 30dp/100p和eastacryl 30d。
[0025]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中所述释放改良剂选自微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯、聚乙烯吡咯烷酮、基甲基纤维素、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯、聚乙烯吡咯烷酮、和aquacoat。
[0026]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中所述释放改良剂是聚乙酸乙烯酯。
[0027]
所述释放改良剂的一个示例性实施方案是聚乙酸乙烯酯、聚乙烯吡咯烷酮和十二烷基硫酸钠的混合物。在一些实施方案中，聚乙酸乙烯酯、聚乙烯吡咯烷酮和十二烷基硫酸钠的混合物以约90:9:1比率存在。在一些实施方案中，所述混合物为含有2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈的丸粒提供增重约5％-9％的包衣。在一些实施方案中，所述混合物为所述丸粒提供增重约5％的包衣。在一些实施方案中，所述混合物为所述丸粒提供增重约6％的包衣。在一些实施方案中，所述混合物为所述丸粒提供增重约7％的包衣。在一些实施方案中，所述混合物为所述丸粒提供增重约8％的包衣。在一些实施方案中，所述混合物为所述丸粒提供增重约9％的包衣。
[0028]
在所述配制品的一个示例性实施方案中，所述释放改良剂是sr 30d。在所述配制品的一个示例性实施方案中，sr 30d为所述丸粒提供增重约5％-9％的包衣。在所述配制品的一个示例性实施方案中，sr 30d为所述丸粒提供增重约5％的包衣。在所述配制品的一个示例性实施方案中，sr30d为所述丸粒提供增重约6％的包衣。在所述配制品的一个示例性实施方案中，sr 30d为所述丸粒提供增重约7％的包衣。在所述配制品的一个示例性实施方案中，sr 30d为所述丸粒提供增重约8％的包衣。在所述配制品的一个示例性实施方案中，sr 30d为所述丸粒提供增重约9％的包衣。
[0029]
所述配制品的一个示例性实施方案包含一种或多种赋形剂和一种包衣，所述赋形剂选自微晶纤维素、羟丙基甲基纤维素、交联羧甲基纤维素钠、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚乙酸乙烯酯、聚乙烯吡咯烷酮、纯化的滑石粉、胶态二氧化硅和硬脂酸镁。
[0030]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中所述配制品是片剂。
[0031]
所述配制品的一个示例性实施方案，其中所述片剂包含10至500mg的2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈。
[0032]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中片剂包含40至120mg的2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈。
[0033]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中片剂包含30至80mg的2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈。
[0034]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中所述释放改良剂是hpmc。
[0035]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中所述释放改良剂是聚合物。
[0036]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中所述释放改良剂占所述配制品的20％-30％w/w。
[0037]
所述配制品的一个示例性实施方案，其中配制品是含有丸粒的胶囊。
[0038]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中所述胶囊是包含在所述胶囊中的立即释放丸粒和改良释放丸粒的多单位微粒组合。
[0039]
所述配制品的一个示例性实施方案是其中所述丸粒包含选自
1h-吡唑-1-基)丙腈、聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、二氧化硅、滑石粉、微晶纤维素和硬脂酸镁的干燥混合物；
[0060]
(b)通过碾压将所述干燥混合物干法制粒制备成颗粒；
[0061]
(c)研磨所述颗粒；
[0062]
(d)将交联羧甲基纤维素钠、二氧化硅、滑石粉和硬脂酸镁添加到经研磨的颗粒中，形成颗粒外混合物；
[0063]
(e)将所述颗粒外混合物压缩成片剂；并且
[0064]
(f)用选自和的包衣剂包衣所述片剂。
[0065]
本公开文本的一个方面包括一种治疗lrrk2介导的疾病的方法，其包括向有需要的受试者施用本公开文本的配制品。
[0066]
所述治疗lrrk2介导的疾病的方法的一个示例性实施方案是其中向所述受试者每天一次、每天两次或每天三次施用所述配制品中的一种或多种。
[0067]
所述治疗lrrk2介导的疾病的方法的一个示例性实施方案是其中向所述受试者每天两次施用所述配制品。
[0068]
所述治疗lrrk2介导的疾病的方法的一个示例性实施方案是其中所述lrrk2介导的疾病是神经退行性疾病。
[0069]
所述治疗lrrk2介导的疾病的方法的一个示例性实施方案是其中所述lrrk2介导的疾病是帕金森病。
[0070]
根据本发明的一个方面，提供了在至少12小时的时间段内在约0.2μm至约1.2μm的治疗范围内的式i化合物的改良释放配制品的稳定且一致的血液水平。血药浓度可以测量为来自多个受试者或研究的平均血浆或血清浓度。可以在施用时和在不同时间点测量血药浓度，以建立在施用式i化合物的改良释放配制品后受试者的血药浓度随时间的概况。
[0071]
本发明的递送改良释放方法可以通过施用多个单一单位剂型的相等或不同浓度的式i化合物来实现。每个这样的单位将被指定在至少十二小时的时间段内在不同的时间释放其内容物，以将式i化合物的血液水平维持在前述的治疗范围内。
[0072]
本发明的一个优选实施方案提供了待治疗的患者在单一时间点摄入能够在至少12小时的时间段内将患者的血药浓度维持在约0.2μm至约1.2μm的含有式i化合物的剂型。这种剂型可以由一个或多个单位组成，具有相同或不同浓度的式i化合物，设计成在不同的时间释放其内容物，以将式i化合物的血药浓度水平维持在前述治疗范围内并维持前述时间段。
[0073]
一个实施方案可以包括一种单一剂型，其内含有多个单位，这些单位能够在不同时间释放其内容物(us 5326570)。单一剂型的另一实施方案也可以由一个单位组成，所述单位能够立即释放一定浓度的式i化合物，然后按需要在其他时间点改良释放式i化合物，以维持血液水平在治疗范围内。另一个实施方案可以是，剂型将处于能够在不同时间释放式i化合物的多个独立单位，如上描述的多个独立单位将在同一时间点全部被待治疗的患者摄取。多微粒允许灵活地改变治疗剂量。胶囊可以用不同量的微粒或丸粒填充，而无需任何另外的加工或配制。
附图说明
[0074]
图1示出了在给予最小有效剂量的立即释放(ir)配制品、改良释放(mr-i)配制品和降低剂量的改良释放配制品(mr-ii)后式i化合物的理想血药浓度。
[0075]
图2示出了在每天两次(bid)给予不同剂量的式i化合物的立即释放胶囊配制品的方案的第10天，健康(非pd)年轻患者和健康老年患者中式i化合物的脑脊液(csf)浓度与血浆浓度的比率。平均csf与未结合血浆比率为约1.0。示出的数据来自25、80和100mg bid多剂量群组。
[0076]
图3示出了具有成孔剂的改良释放片剂，其中式i化合物和其他赋形剂构成芯，所述芯具有包括聚维酮k30和聚乙酸乙烯酯的包衣。
[0077]
图4示出了改良释放骨架片，其中式i化合物和其他赋形剂与聚乙烯吡咯烷酮和聚乙酸乙烯酯一起配制在骨架中。
[0078]
图5示出了用于多单位丸粒系统(mups)配制品的丸粒的图示，其中丸粒的内芯是惰性材料如糖、微晶纤维素(mcc)或酒石酸，覆盖有药物层，所述药物层是密封包衣的。外层是聚合物包衣，如用于改良释放的(相对于待包衣材料的质量增量约5％-12％)或
[0079]
图6示出了骨架改良释放(mr)80mg片剂的对比配方(批次1-3)的表，其中使用30％、40％和50％w/w聚合物。
[0080]
图7示出了图6的式i化合物mr片剂的对比溶出数据。在12小时时间段内，观察到批次1-3中每一批次的改良释放效果。在批次1和2的整个释放概况中分别观察到较高％rsd(相对标准偏差)。所有三个批次的释放概况都是类似的，而与srp 80的量无关。与分别含有30％和40％srp 80的批次1和2相比，含有50％w/wsrp 80的批次3展现出低％rsd。
[0081]
图8示出了具有10％、15％和20％w/w hpmc k-15m的mr骨架片(颗粒内，直接压缩)。
[0082]
图9示出了图8的mr片剂的对比溶出数据。
[0083]
图10示出了具有srp80的mr骨架片(颗粒外，直接压缩)。
[0084]
图11示出了图10的mr骨架片的对比溶出数据。
[0085]
图12示出了mr(mups)丸粒，80mg的组成。
[0086]
图13示出了具有不同成孔剂(聚维酮)水平的各批次的对比药物释放数据。
[0087]
图14示出了具有不同mr丸粒和ir mr丸粒的多单位丸粒系统(mups)胶囊在ph 3mcllvaine缓冲液900ml(37℃)在50rpm桨速下在用助沉物的情况下的对比溶出曲线：样品：12.02％w/w mr丸粒；5.2％w/w mr丸粒；8.2％w/w mr丸粒；和40mg ir丸粒 40mg 12.02％w/w mr丸粒。
[0088]
图15示出了在小型猪中配制品1-5的剂量归一化平均浓度-时间曲线。改良释放(mr)配制品显示出比胶囊中的式i化合物(api，活性药物成分)或ir片剂更低的剂量归一化cmax和总体更慢的吸收。样品：在明胶胶囊中的api(1mg/kg)；(4mg/kg)；40％mr片剂(80mg；4mg/kg)；30％mr片剂(80mg；4mg/kg)；和30％mr片剂(80mg；4mg/kg)；和
[0089]
图16示出了在小型猪中图15中示出的配制品1-5的剂量归一化数据汇总。
[0090]
图17a示出了在小型猪中丸粒配制品1-5的平均口服浓度-时间图。丸粒显示出较慢的吸收速率。肠溶包衣丸粒实现与ir丸粒类似的暴露。样品：1.胶囊中的未包衣丸粒(立即释放)；2.胶囊中的8％丸粒；4.胶囊中的肠溶包衣丸粒；和5.胶囊中的5％丸粒。
[0091]
图17b示出了在单次口服施用作为胶囊中的未包衣丸粒(立即释放)和mups配制品的式i化合物(1mg/kg)后，在小型猪(n＝3)中式i化合物的平均浓度-时间图。
[0092]
图18示出了小型猪pk：在1mg/kg下的改良释放配制品。丸粒展现出与ir丸粒相比较慢的吸收速率和降低的c
max
。8％的生物利用度：相对于ir为73％。5％的生物利用度：相对于ir为86％。肠溶包衣丸粒达到与ir丸粒类似的c
max
和auc(曲线下面积)
[0093]
图19示出了食蟹猴pk：在2mg/kg下的改良释放(mr)配制品。
[0094]
图20a示出了在食蟹猴中对于配制品的pk研究。样品：1.胶囊中的未包衣丸粒(立即释放)；2.胶囊中的8％丸粒；3.胶囊中的api(式i化合物)；4.胶囊中的肠溶包衣丸粒；5.胶囊中的5％丸粒；6.胶囊中的3％丸粒。
[0095]
图20b示出了在单次口服施用作为胶囊中的未包衣丸粒和胶囊中的api(两者立即释放，没有聚合物包衣)和mups配制品的式i化合物(2mg/kg)后，在猴(n＝4)中式i化合物的平均浓度-时间图。
[0096]
图21示出了在具有在包衣阶段施用的l30d55和的胶囊中的改良释放(mr)丸粒配制品。
[0097]
图22示出了在具有在包衣阶段施用的和的胶囊中的改良释放(mr)丸粒配制品。
[0098]
图23示出了在具有在包衣阶段施用的和的胶囊中的改良释放(mr)丸粒配制品。
[0099]
图24示出了40、80、100、106.68和160mg的式i化合物片剂的组成。
[0100]
图25示出了制备40、80、100、106.68和160mg的式i化合物片剂的制造过程步骤。
[0101]
图26示出了具有hmpc聚合物配制品的四种改良释放片剂的平均溶出曲线，表示为药物释放百分比与时间的关系。
[0102]
图27示出了具有hmpc聚合物配制品的四种改良释放片剂的平均溶出曲线，表示为以mg为单位的药物释放百分比与时间的关系。
[0103]
图28示出了具有聚合物配制品的40mg低剂量(1a)片剂和120mg高剂量(2a)片剂的平均溶出曲线，表示为药物释放百分比与时间的关系。
[0104]
图29示出了具有聚合物配制品的40mg低剂量(1a)片剂和120mg高剂量(2a)片剂的平均溶出曲线，表示为累积药物释放量与时间的关系。
[0105]
图30示出了具有不同聚合物包衣的mr丸粒在ph 3mcllvaine缓冲液(900ml，usp ii型设备，100rpm，37℃，采用助沉物)中的平均溶出曲线，表示为药物释放量与时间的关系。
[0106]
图31示出了实施例4的包衣mups的平均溶出曲线。
[0107]
定义
[0108]
除非另外定义，否则本文使用的技术和科学术语具有与本发明所属领域的普通技
术人员通常所理解的含义相同的含义，并且与下文一致：
[0109]
词语“包含(comprise/comprising)”和“包括(include/including/includes)”在用于本说明书和权利要求中时意在指明存在所陈述的特征、整体、部件或步骤，但它们不排除存在或添加一个或多个其他特征、整体、部件、步骤或它们的组。
[0110]
关于规定的参数(例如配制品中成分的量、水含量、c
max
、t
max
、auc、固有溶出速率、温度和时间)的术语“约”或“大约”表明例如测量参数或获得参数时的固有可变性。受益于本公开文本，本领域技术人员将理解如通过使用词语“约”或“大约”所意味的参数可变性。当结合数字使用时，术语“约”或“大约”包括该数字的 /-(加或减)10％范围。
[0111]
如本文所用，“多晶型物”是指出现化合物的堆积或构象/构型不同但具有相同化学组成的不同结晶形式。结晶形式在晶格中具有分子的不同排列和/或构象。因此，单一化合物可以产生多种多晶型形式，其中每种形式具有不同且独特的物理特性，如溶解度概况、熔点温度、吸湿性、粒子形状、形态、密度、流动性、压实性和/或x射线衍射峰。每种多晶型物的溶解度可以变化，因此，鉴定药物多晶型物的存在对于提供具有可预测溶解度概况的药物是必要的。期望表征和研究药物的所有固态形式，包括所有多晶型形式，并确定每种多晶型形式的稳定性、溶解性和流动特性。化合物的多晶型形式可以在实验室中通过x射线衍射法和其他方法如红外或拉曼或固态nmr光谱法来区分。关于多晶型物和多晶型物的药物应用的一般性综述，参见g.m.wall,pharm manuf.3:33(1986)；j.k.haleblian和w.mccrone,j.pharm.sci.,(1969)58:911；"polymorphism in pharmaceutical solids,second edition(drugs and the pharmaceutical sciences)",harry g.brittain,编辑(2011)crc press(2009)；以及j.k.haleblian,j.pharm.sci.,64,1269(1975)，所有文献都通过引用并入本文。
[0112]“溶剂合物”是含有化学计量或非化学计量的溶剂的晶体形式。如果并入的溶剂是水，则溶剂合物通常称为水合物。水合物/溶剂合物可以作为具有相同溶剂含量但具有不同晶格堆积或构象的化合物的多晶型物存在。
[0113]
术语“水合物”是指其中溶剂分子是水的复合物。
[0114]
如本文所用，短语“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的药学上可接受的有机盐或无机盐。示例性盐包括但不限于硫酸盐、柠檬酸盐、乙酸盐、草酸盐、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸盐、硫酸氢盐、磷酸盐、酸式磷酸盐、异烟酸盐、乳酸盐、水杨酸盐、酸式柠檬酸盐、酒石酸盐、油酸盐、丹宁酸盐、泛酸盐、酒石酸氢盐、抗坏血酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、龙胆酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、蔗糖酸盐、甲酸盐、苯甲酸盐、谷氨酸盐、甲基磺酸盐(“甲磺酸盐”)、乙磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐(即1,1'-亚甲基-双-(2-羟基-3-萘甲酸))盐。其他盐包括酸式盐，如上文描述的共形成物。药学上可接受的盐可以涉及包含另一种分子，如乙酸根离子、琥珀酸根离子或其他抗衡离子。抗衡离子可以是使母体化合物上的电荷稳定化的任何有机或无机部分。此外，药学上可接受的盐在其结构中可以具有多于一个带电荷的原子。多个带电荷的原子是药学上可接受的盐的一部分的例子可以具有多个抗衡离子。因此，药学上可接受的盐可以具有一个或多个带电荷的原子和/或一个或多个抗衡离子。
[0115]
所需的药学上可接受的盐可以通过本领域可获得的任何合适的方法制备。例如，用以下物质处理游离碱：无机酸，如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或有机酸，如乙酸、马
来酸、琥珀酸、扁桃酸、甲磺酸、富马酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水杨酸、吡喃糖苷酸(如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α-羟基酸(如柠檬酸或酒石酸)、氨基酸(如天冬氨酸或谷氨酸)、芳族酸(如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(如对甲苯磺酸或乙磺酸)等。通常认为适于由碱性药物化合物形成药学上有用或可接受的盐的酸例如由以下文献论述：stahl ph，wermuth cg编辑.handbook of pharmaceutical salts；properties,selection and use,第2版修订(international union of pure and applied chemistry).2012,new york:wiley-vch；s.berge等人,journal of pharmaceutical sciences(1977)66(1)1 19；p.gould,international j.of pharmaceutics(1986)33 201 217；anderson等人,the practice of medicinal chemistry(1996),academic press,new york；remington’s pharmaceutical sciences,第18版,(1995)mack publishing co.,easton pa；以及the orange book(food&drug administration,washington,d.c.，在他们的网站上).这些披露内容通过引用并入本文。
[0116]
短语“药学上可接受的”表明物质或组合物必须在化学和/或毒理学上与构成配制品的其他成分和/或用其治疗的哺乳动物相容。
[0117]
术语“治疗有效量”是足够低至无毒，但又足以实现治疗结果的药量，所述治疗结果包括消除、减少和/或减缓病症或其症状的进展。治疗有效量可以取决于生物学因素。实现治疗结果可以由医生或其他有资格的医务人员使用本领域已知的客观评价来测量，或者可以通过个体、主观患者评估来测量。
[0118]
术语“受试者”是指被施用药物组合物的哺乳动物。示例性受试者包括人，以及兽医和实验室动物，如猴、马、猪、小型猪、牛、犬、猫、兔、大鼠、小鼠和水生哺乳动物。
[0119]
术语“手性”是指具有镜像配偶体非重叠性特性的分子，而术语“非手性”是指在其镜像配偶体上可重叠的分子。
[0120]
术语“立体异构体”是指具有相同化学组成但原子或基团在空间上的排列方面不同的化合物。
[0121]“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心并且其分子不是彼此的镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理特性，例如熔点、沸点、光谱特性和反应性。非对映异构体的混合物可以在高分辨率分析程序如电泳和色谱法下分离。
[0122]“对映异构体”是指化合物的两种立体异构体，它们彼此是不可重叠的镜像。
[0123]
本文使用的立体化学定义和惯例通常遵循s.p.parker,编辑，mcgraw-hill dictionary of chemical terms(1984)mcgraw-hill book company，new york；以及eliel，e.和wilen,s.,“stereochemistry of organic compounds,”john wiley&sons,inc.,new york,1994。本发明的化合物可以含有不对称或手性中心，且因此以不同的立体异构形式存在。预期本发明化合物的所有立体异构形式构成本发明的一部分，这些立体异构形式包括但不限于非对映异构体、对映异构体和阻转异构体以及它们的混合物如外消旋混合物。许多有机化合物以光学活性形式存在，即它们具有使平面偏振光的平面旋转的能力。在描述光学活性化合物时，前缀d和l或者r和s用于表示分子关于其一个或多个手性中心的绝对构型。采用前缀d和l或者( )和(-)来指示化合物对平面偏振光的旋转的符号，其中(-)或1是指该化合物是左旋的。具有前缀( )或d的化合物是右旋的。对于给定的化学结构，这些立体异构体是相同的，不同的是它们是彼此的镜像。具体的立体异构体也可以称为
对映体，并且这样的异构体的混合物通常称为对映体混合物。对映异构体的50:50混合物称为外消旋混合物或外消旋体，其可能在化学反应或过程中没有立体选择性或立体定向性的情况下出现。术语“外消旋混合物”和“外消旋体”是指两种对映异构物质的等摩尔混合物，没有光学活性。
[0124]
术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指不同能量的结构异构体，其可经由低能垒互变。例如，质子互变异构体(也称为质子异构互变异构体)包括经由质子迁移实现的相互转化，如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过重新组织一些键合电子实现的相互转化。
[0125]“固体口服剂型”是指准备经由口服途径施用于受试者的配制品。示例性口服剂型包括但不限于片剂、微片、胶囊、囊片、粉剂、丸粒、珠粒、颗粒剂和含有聚合物包衣的丸粒的丸粒状片剂。剂型可以是“单位剂型”，其旨在每次施用递送一个治疗剂量。
[0126]
术语“赋形剂”是指与治疗药物的活性药物成分(api)一起配制的物质，被包含在内以用于长期稳定、增量含有少量有效活性成分的固体配制品或赋予最终剂型中的活性成分治疗增强如促进药物吸收、降低粘度或增强溶解度的目的。赋形剂也可以用于制造过程，以有助于处理相关的活性物质，如通过促进粉末流动性或非粘性，以及有助于体外稳定性，如防止在预期的保存期限内变性或聚集。适当赋形剂的选择还取决于施用途径和剂型，以及活性成分和其他因素。在一些配制品中，赋形剂可以是对药效学和药代动力学有影响的剂型性能的关键决定因素。用于口服剂型配制品的赋形剂的类型包括抗粘附剂、粘合剂、包衣剂、着色剂、崩解剂、矫味剂、助流剂、润滑剂、防腐剂、吸附剂、甜味剂和媒介物。
[0127]
术语“丸粒”包括任何形状的粒子，包括珠粒、颗粒、不规则形状的粒子和/或球形粒子。颗粒可以具有任何合适的大小，例如约0.1mm至约1.0mm。在一个实施方案中，如通过本领域熟知的方法所测量，丸粒大小为约100μm(微米)至约1200μm(微米)、约100μm至约1100μm、约150μm至约600μm或约100μm至约400μm。
[0128]“滚圆”是一种将药物产品制成小球的快速且灵活的过程，通常涉及将包含api、填充剂、滚圆剂、粘合剂超级崩解剂或其他赋形剂的干燥混合物用制粒流体(例如任选与醇混合的水)润湿，将润湿的混合物制粒，挤出所得的制粒团块，将挤出物滚圆以提供珠粒，以及干燥珠粒。球的流动特征使它们适合运输和移动。球提供最低的表面积与体积比率，并且因此药物化合物可以用最少的包衣材料包衣。
[0129]
术语“改良释放”意指这种药物释放不同于立即释放，即在约2小时内在体内释放约60％或更多药物的剂型。替代性地，药物释放可以根据本领域已知的方法通过药物在溶出介质中的溶出在体外测量。改良释放概况的例子包括但不限于改良释放、缓慢释放、延迟释放和脉冲释放。
[0130]“释放改良剂”是一种组合物，其包括聚合材料，所述聚合材料可以是不同聚合物主链、链长和支链的混合物，其具有调节配制品内药物的释放速率的特性。释放改良剂改变药物从剂型中的释放速率，使得在相同条件下，具有释放改良剂的剂型的释放速率不同于其他方面相同但不含释放改良剂的剂型的释放速率。释放改良剂的例子包括：mcc(微晶纤维素)；hpc(羟丙基纤维素)；hpmc(羟丙基甲基纤维素)；peg(聚乙二醇甘油酯)；pva(聚乙烯醇)；pvp(聚乙烯吡咯烷酮)；卡波普；(a)用于肠溶包衣的聚合物，包括：cap(乙酸邻苯二甲酸纤维素)如cmc-na(羧甲基纤维素钠)如hpmcas(乙酸琥珀
酸羟丙基甲基纤维素)如hpmcp(邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素)如hp 50/hp 55；聚(丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸)如fs 30d；聚(甲基丙烯酸-共-丙烯酸乙酯)如l 30d-55/l 100-55或mae 30dp/100p或eastacryl 30d；聚(甲基丙烯酸-共-甲基丙烯酸甲酯)如l 12,5/l 100或s 12,5/s 100等；(b)用于时间控制释放的聚合物，例如：ca(乙酸纤维素)如eastman ca和eastman cab；(乙酸丁酸纤维素)如eastman cab；ec(乙基纤维素)ethocel
tm
、或ecd、或(即用型)、或甘油酯gattecoat
tm
；聚(丙烯酸乙酯-共-甲基丙烯酸甲酯)如ne 30d或nm 30d；聚(丙烯酸乙酯-共-甲基丙烯酸甲酯-共-甲基丙烯酸甲酯三甲基氯化铵)如rl 30d、rl 100/rl po、rs 30d或rs 100/rs；pvac(聚乙酸乙烯酯)如sr 30d；hpmc/cmc如hm-ppa等。
[0131]
式i化合物和药物组合物
[0132]
本公开文本包括式i化合物(cas登记号1374828-69-9)的多晶型物和无定形形式，所述式i化合物具有以下结构：
[0133][0134]
并命名为：2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈(wo 2012/062783；us 8815882；us 2012/0157427，将其各自通过引用并入)。如本文所用，式i化合物包括其互变异构体或药学上可接受的盐。式i化合物是本文所述的用于治疗帕金森病和帕金森综合征的配制品中的api(活性药物成分)。
[0135]
药代动力学
[0136]
剂型组分和构型对溶出速率和血药浓度可以具有大的影响。
[0137]
图1示出了在给予最小有效剂量的立即释放(ir)配制品、改良释放(mr)配制品和降低剂量的mr配制品后式i化合物的理想血药浓度。
[0138]
图2示出了在每天两次(bid)给予不同剂量的式i化合物的立即释放胶囊配制品的方案的第10天，健康(非pd)年轻患者和健康老年患者中式i化合物的脑脊液(csf)浓度与血浆浓度的比率。平均csf与未结合血浆比率为约1.0。示出的数据来自25、80和100mg bid多剂量群组。
[0139]
式i化合物作为胶囊配制品内api以25mg、40mg、80mg和100mg bid的剂量施用于健康年轻人受试者，和以80mg bid施用于健康老年受试者。在第1天和第10天以及在10天施用期间选定的那天的波谷处测定式i化合物的浓度。给药后第10天获得的血浆浓度的药代动力学分析表明，血浆中的终末半衰期为14至26小时。波谷(最小)浓度的平台证实到第10天达到稳态。血浆c
max
和auc在25至100mg bid剂量范围内以剂量比例方式增加。终末半衰期和
血浆浓度以及波谷(最小值)处的ps935抑制与作为有效方案的每日两次施用一致。
[0140]
对于以25、40、80和100mg bid的剂量给予的胶囊配制品中的api，稳态式i化合物c
max
/c
min
(c
max
/c
谷
)比率为2.6至12(均值为5.3)。由于研究设计的平行(非交叉)性质，观察到了受试者内比率可变性。尽管通常耐受良好，但在较高剂量下注意到轻微的脉搏率和血压变化。使用基于生理学的pk建模，预测含有不同量的聚合物的mups配制品的c
max
/c
min
比率。对于含有3％、5％和8％聚合物的mups配制品，在bid下预测的c
max
/c
min
比率在1.5至2.6范围内。
[0141]
固体口服剂型
[0142]
本发明提供了令人惊奇地发现的式i化合物的新改良释放配制品，其实现了期望的改良释放概况；以及制备它们的新方法。
[0143]
式i化合物的固体口服剂型包括递送系统，其大致分为单一单位剂型(胶囊或片剂)和多单位剂型或丸粒状剂型(丸粒或胶囊或片剂中的丸粒)。丸粒由于它们在整个胃肠道均匀地扩散而提供某些治疗优势。丸粒还可以从胃中逐渐排空，个体内和个体间的差异较小，因此给出施用剂量的更好的可预测性。使用丸粒可以避免局部药物浓度高和与摄入局部受限片剂相关的毒性的风险。由于包衣丸粒运输时间快，因此用包衣丸粒也可以减少药物在胃中从肠溶包衣片剂过早释放，这可能导致药物降解或胃粘膜刺激。丸粒在胃肠道中的更好分布也可以改善它们所含药物的生物利用度，从而可能减少药物剂量和副作用(kushae，s等人(2011)asian j pharm,5:203-8)。
[0144]
配制立即释放(ir)剂型以在施用后实现药物向患者血液的快速或不受控制的释放。
[0145]
改良释放(mr)实现比常规的立即释放剂型慢的药物释放。改良释放剂型的优点包括给药频率降低、患者接受性和依从性更好、胃肠(gi)副作用减少、血浆药物水平波动较小(如通过c
max
/c
min
比率测量)、功效/安全性参数改善以及特征明确且可再现的剂型。优化的改良释放概况可以使患者在施用后更长的持续时间内处于大于药物的最小有效浓度但小于药物的最大耐受剂量的治疗窗中。改良释放(mr)配制品可以在施用后实现药物向患者血液的延迟释放，以便维持药物在血液中的恒定浓度。
[0146]
多单位丸粒系统(mups)是多相或程序化释放剂型，用作常规片剂或胶囊的替代物。多单位丸粒系统(mups)片剂或胶囊是一种多微粒系统，其已经成为用于口服施用的立即或改良药物释放的重要且成功的剂型。这些多个单位由含有允许改良药物释放的未包衣或包衣丸粒的片剂或胶囊构成。在与简单的片剂或胶囊相比时，这些系统的优点包括减少了由于简单单位的药物降解而引起的胃粘膜刺激，以及改善了剂量调节。其由于是多微粒系统，还提供了施用不相容药物的可能性。mups片剂或胶囊中的丸粒可以是未包衣的或包衣的。药物可以包含在芯中或作为施用到丸粒的惰性芯上的层。惰性芯可以是由糖、微晶纤维素(mcc)、多元醇、巴西棕榈蜡或二氧化硅构成的中性起始丸粒。另外，丸粒可以具有一个或多个层，所述层可以包含用于改良释放的合适赋形剂，如用于肠溶包衣的聚合物或用于改良释放的聚合物。未包衣丸粒由合适的药物赋形剂如乳糖和微晶纤维素(mcc)等制成。丸粒可以填充到胶囊中或压缩成供口服施用的片剂。
[0147]
包衣丸粒用形成包衣薄膜的适当聚合物和量产生。聚合物的强度、延展性和厚度特性将影响压片时丸粒的破裂和可变形能力。另外，丸粒的包衣薄膜的稳定性取决于所施
加的压缩力。
[0148]
用于产生丸粒的包衣薄膜的聚合物包括纤维素类聚合物和丙烯酸类聚合物。丙烯酸类聚合物的优点是具有能够实现压片过程而不会使丸粒的包衣薄膜破裂的柔性和特征。将两种类型的聚合物组合可以改善包衣薄膜的柔性，这对于包衣丸粒的细化以及以一定比例添加增塑剂是合乎需要的。
[0149]
丸粒芯可以影响药物从mups的释放。未包衣丸粒和包衣丸粒两者的丸粒孔隙度都影响改良药物释放概况。
[0150]
用于产生丸粒芯的赋形剂和粘合剂液体可以影响压缩期间丸粒的变形和粘弹特性，并且因此引起药物释放概况的变化。在丸粒的生产/制造中使用其他组分如角叉菜胶多糖，允许它们快速崩解并因此快速药物释放(kranz h.等人:eur.j.pharm.biopharm.73:302-309(2009)；ghanam d.和kleinebudde.p.:int.j.pharm.409:9-18(2011)。
[0151]
包衣丸粒的制造过程可以分为两个步骤，即丸粒制造和含丸粒片剂的制造。首先，药物-丸粒制造过程从共混丸粒组分开始，所述丸粒组分例如药物、缓冲赋形剂如微晶纤维素、单硬脂酸甘油酯(gms)和乳糖一水合物(lm)，它们广泛用于这种配制品中。粘合剂液体如水或甘油可以用于湿法混合。所获得的物质继续进行挤出-滚圆过程，并且可以在流化床干燥器中进行新近形成的丸粒的干燥。下一步，丸粒包衣形成包衣薄膜以获得所需药物释放(bashaiwoldu a.b.等人:advan.powder technol.(2011)22:340-353)。
[0152]
压片过程可以通过具有受控参数如主压缩力和速度的旋转压片机进行。可以添加丸粒和缓冲赋形剂用于压片，以优化包括承受高压缩力的能力的某些特性。
[0153]
然后，具有形状、重量、厚度和硬度的具体特征的含丸粒片剂继续进行片剂薄膜包衣过程。施加片剂薄膜包衣以改善药物组合物的稳定性和外观。
[0154]
薄膜包衣经常应用于固体口服剂型的药学药物递送。包衣剂型的动机包括装饰考虑(颜色、光泽)、改善稳定性(光保护、湿气和气体屏障)和使片剂更容易吞咽。另外，功能性包衣可以用于改变药物从剂型中的释放行为。根据所用的聚合物，可以延迟药物的释放(如在肠溶包衣中)或使用包衣以在延长的时间段内使药物从剂型中持续释放。
[0155]
薄膜包衣是施加到固体剂型如片剂上的薄的基于聚合物的涂层。这种包衣的厚度通常在20μm和100μm之间。通过使用非破坏性分析方法，可以跟踪片剂包衣结构的动态固化效应。
[0156]
设计多单位丸粒系统(mups)以获得药物的改良释放概况。这种改良释放可以被认为是延迟释放或改良释放。例如，延迟释放可以通过肠溶包衣的丸粒实现。肠溶包衣允许在胃介质中不稳定或可能引起胃刺激的活性药物成分受到肠溶包衣的保护。甲基丙烯酸共聚物、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素和乙酸琥珀酸羟丙基甲基纤维素是常用于这种功能的肠溶包衣聚合物。
[0157]
含有改良释放丸粒的mups片剂可以实现缓释作用，并延长药理作用，延长给药间隔并且减少副作用。丸粒用不同聚合物和不同薄膜厚度包衣，这允许调节从丸粒的释放速率。所用的聚合物尤其可以是纤维素衍生物，如乙基纤维素和羟丙基甲基纤维素(hpmc)。未包衣丸粒可以作为骨架聚合物体系使用以用于药物的改良释放。在这组中，经常使用基于使用纤维素类聚合物、卡波姆或黄原胶等的亲水性骨架体系。
[0158]
图3示出了具有成孔剂的改良释放(mr)片剂，其中式i化合物和其他赋形剂构成
芯，所述芯具有包括ir、聚维酮k30和聚乙酸乙烯酯的包衣。
[0159]
图4示出了改良释放骨架片，其中式i化合物和其他赋形剂与聚乙烯吡咯烷酮和聚乙酸乙烯酯一起配制在骨架中。
[0160]
图5示出了用于多单位丸粒系统(mups)配制品的丸粒的图示，其中丸粒的内芯是惰性材料如糖、微晶纤维素(mcc)或酒石酸，覆盖有药物层，所述药物层是密封包衣的。外层是聚合物包衣，如用于改良释放的(约5％-12％)或用于延长释放的
[0161]
赋形剂
[0162]
合适的赋形剂是本领域技术人员已知的，并且包括如碳水化合物、蜡、水溶性和/或可溶胀性聚合物、亲水性或疏水性材料、明胶、油、溶剂、水等材料。赋形剂可以具有多种和多重效果和有用的特性。
[0163]
srp 80(emd millipore)是基于亲水性聚合物聚乙烯醇(pva)的功能性赋形剂。其形成可溶胀且可侵蚀的骨架，并用于配制显示出改良api释放的药物口服剂型片剂形式。srp 80含有单一成分pva 40-88，而不含其他添加剂，4％水溶液在20℃下以mpa计的粘度88：以摩尔％计的水解度(皂化)。srp 80是具有特定粒度的经研磨的聚乙烯醇(pva 40-88)。cas登记号9002-89-5sr 30d(basf)是用聚维酮和sls(十二烷基硫酸钠)稳定的聚乙酸乙烯酯的水性分散体。sr 30d含有约27％聚乙酸乙烯酯、约2.7％聚维酮k30、约0.3％十二烷基硫酸钠和约70％水(cas登记号9003-20-7)。聚乙酸乙烯酯、聚维酮(聚乙烯吡咯烷酮)和十二烷基硫酸钠以约90:9:1的比率存在。pva形成不溶性骨架并减少药物释放。添加到水性分散体中的聚维酮本质上是高度可溶的，并且当片剂与溶出介质接触时，其溶出并充当成孔剂。药物以受控速率溶出并通过孔隙扩散出来，留下空的聚合物壳。聚维酮(pvp k30与pvp k90)的粘度和其浓度两者都影响药物释放。随着pvp的粘度和浓度增加，药物释放增加。
[0164]
聚维酮(聚乙烯吡咯烷酮，pvp)是用于使药物分散和悬浮的合成聚合物媒介物。其还充当崩解剂和片剂粘合剂。它在纯形式时呈现为白色至灰白色吸湿粉末，并且易溶于水。
[0165]
羟丙甲纤维素(也称为羟丙基甲基纤维素和hpmc)是一种半合成的、惰性的、粘弹性的、水溶性聚合物，用作口服药物中的赋形剂和控制递送组分，并在各种商业产品中见到。hpmc用于其密封包衣效果，如产生光滑表面。在其他用途中，hpmc可以在片剂外皮上快速水合以形成胶质层。胶质层的快速形成防止内部润湿和片剂芯崩解。一旦形成了原始保护性凝胶层，其控制另外的水渗透到片剂中。当外部凝胶层完全水合并溶解时，新的内层就代替它，并且充分粘着和连续以阻碍水的流入和控制药物扩散。对于速率控制聚合物而言，需要快速水合然后快速胶凝和聚合物/聚合物聚结，以在骨架周围形成保护性胶质层。这防止了片剂的导致过早药物释放的立即崩解。骨架体系中最佳量的聚合物内含物如hpmc形成均匀的屏障，以保护药物免于立即释放到溶出介质中。如果聚合物水平太低，则可能无法形成完整的凝胶层。配制品中聚合物水平的增加导致药物释放速率的降低。因为含有hpmc的亲水性骨架片吸水并膨胀，所以最外面的水合层中的聚合物水平随时间而降低。骨架的最外层最终被稀释到单独的链从骨架上脱离并扩散到本体溶液中的程度。当表面浓度超过大分子解缠结或表面侵蚀的临界聚合物浓度时，聚合物链从骨架上脱离。骨架表面的聚合物浓度可以定义为聚合物解缠结浓度。(the dow chemical co.)是hpmc产品
的商业化生产线，指示为e、f、k等，并且常用于控制释放药物配制品。methocel产品在水中在一定浓度下粘度不同。k15m是指高分子量hpmc，其具有约19％-24％甲氧基、约7％-12％羟基丙氧基和10,000-18,000cp(厘泊)的粘度(2％，在水中，在20℃下)。k100lv是指低分子量hpmc，其具有约19％-24％甲氧基、约7％-12％羟基丙氧基和80-120cp(厘泊)的粘度(2％，在水中，在20℃下)。
[0166]
(evonik)是一族专有的靶向药物释放包衣聚甲基丙烯酸酯聚合物。聚合物可以是酸性、中性或碱性的，因此可以是控制的定时释放或ph依赖性的，并且因此也可以是延迟释放的或持续释放的。这些聚合物允许药物配制成肠溶的、保护性的或持续释放的配制品，以防止药物分解，直至其到达胃肠(gi)道中具有足够ph的区域。一旦药物到达其胃肠道(即十二指肠、胃)的靶区域，则其可以从聚合物骨架中释放并被吸收。
[0167]
(lubrizol)是一族用作包衣剂的高分子量、交联的聚丙烯酸聚合物。卡波普由于羧基的水合作用而在水或碱性溶液中形成水凝胶，并且可以用作片剂或丸粒配制品中的释放改良剂。
[0168]
交联羧甲基纤维素钠(sodium croscarmellose/croscarmellose sodium)是用作药物配制品中的崩解剂的内部交联羧甲基纤维素钠，提供药物溶出和崩解特征。
[0169]
(fmc biopolymer)是乙基纤维素(ec)聚合物的30％(w/w)水性分散体。乙基纤维素是一种疏水性包衣材料，其用于各种包衣应用中以实现持续释放、味道掩蔽和水分屏障/密封剂。ecd是按重量计30％的乙基纤维素聚合物的水性分散体。
[0170]
可以使用缓冲剂如聚乙二醇以防止压实期间的丸粒变形。
[0171]
非功能性“包衣剂”如提供装饰效果如颜色，而不改变配制品内药物的释放速率。
[0172]
改良释放配制品
[0173]
根据标准药学实践且根据实施例2的程序配制式i化合物，用于包括人在内的哺乳动物的治疗性治疗(包括预防性治疗)。本公开文本提供包含式i化合物以及一种或多种药学上可接受的赋形剂的各种配制品。改良释放药物配制品经数小时释放活性成分，以便维持药物在血液中的恒定浓度。
[0174]
可以使用常规的溶解、共混和混合程序制备配制品。典型地将本公开文本的化合物配制成药物剂型，以提供可容易控制的药物剂量并使患者能够依从处方方案。
[0175]
取决于用于施用药物的方法，用于应用的药物组合物(或配制品)可以以各种方式包装。通常，用于分配的制品包括其中以适当形式沉积药物配制品的容器。合适的容器是本领域技术人员熟知的，并且包括诸如瓶子(塑料和玻璃)、小袋、安瓿、塑料袋、金属圆筒等材料。容器还可以包括防干扰组件以防止对包装内容物的不当接触。另外，容器在其上放置有描述容器内容物的标签。标签还可以包括适当的警告。
[0176]
mr配制品在猴和小型猪中的药代动力学
[0177]
图15示出了在小型猪中配制品1-5的剂量归一化平均浓度-时间曲线。改良释放(mr)配制品显示出比胶囊中的式i化合物(api)或ir片剂更低的剂量归一化c
max
和通常更慢的吸收。样品：在明胶胶囊中的api(1mg/kg)；40％mr片剂(80mg；4mg/kg)；
30％mr片剂(80mg；4mg/kg)；和rs/rl mups胶囊(1mg/kg；实施例4)。
[0178]
图16示出了在小型猪中图15中示出的配制品1-5的剂量归一化数据汇总。
[0179]
图17a示出了在小型猪中配制品1-5的平均口服浓度-时间图。在禁食的哥廷根小型猪(n＝3)中使用交叉设计评价未包衣的药物丸粒(ir)和在胶囊中的5％和8％配制品。丸粒显示出较慢的吸收速率。肠溶包衣丸粒实现与ir丸粒类似的暴露。1.胶囊中的ir丸粒；2.胶囊中的8％丸粒；3.iv(0.5mg/kg)；4.胶囊中的肠溶包衣丸粒；和5.胶囊中的5％丸粒。5％和8％配制品在1mg/kg下展现出式i化合物的较慢吸收。未包衣丸粒以及5％和8％配制品的中值t
max
值分别为2.0小时、2.5小时和4.0小时，而对应的c
max
值分别为0.197μm、0.0940μm和0.0469μm。
[0180]
图17b示出了在单次口服施用作为立即释放和mups配制品的式i化合物(1mg/kg)后，在小型猪(n＝3)中式i化合物的平均浓度-时间图。与在猴中的情况形成对照，配制品的生物利用度类似于或略低于未包衣丸粒配制品；5％和8％配制品的相对生物利用度分别为86％和73％。总之，mups配制品展现出比立即释放配制品更慢的吸收速率和更低的c
max
。
[0181]
图18示出了小型猪pk：在1mg/kg下的改良释放配制品。丸粒展现出与ir丸粒相比较慢的吸收速率和降低的c
max
。8％的生物利用度：相对于ir为73％。5％的生物利用度：相对于ir为86％。肠溶包衣丸粒达到与ir丸粒类似的c
max
和auc。
[0182]
图19示出了食蟹猴pk：在2mg/kg下的改良释放(mr)配制品。丸粒配制品展现出较慢的吸收速率。生物利用度的降低是相对于立即释放胶囊配制品而言的。降低的程度取决于丸粒包衣％，其中较高程度的包衣给出较低的f。肠溶包衣丸粒配制品相对于立即释放配制品(ir)没有改善。
[0183]
图20a示出了在食蟹猴(体重大约5kg)中对于配制品的pk研究。1.胶囊中的ir丸粒；2.胶囊中的8％丸粒；3.胶囊中的api(式i化合物)；4.胶囊中的肠溶包衣丸粒；5.胶囊中的5％丸粒；6.胶囊中的3％丸粒。mups配制品含有式i化合物，其被配制成用sr 30d聚合物以设计成提供不同药物释放速率的各种水平(3％、5％和8％w/w)包衣的药物分层丸粒。体外溶出结果支持用体内pk研究进行进一步表征。在食蟹猴中使用交叉设计以最少一周清除期评价mups配制品。未包衣丸粒(ir)和在胶囊配制品中的api用作具有立即释放速率的比较物。向禁食动物(n＝4)施用每种配制品的单一剂量(2mg/kg式i化合物)，并在给药后经24小时获得定时血液样品。
[0184]
禁食猴口服施用后，未包衣丸粒和在胶囊配制品中的api达到类似的t
max
、c
max
和auc
0-inf
。含有sr 30d包衣丸粒的配制品相对于两种立即释放配制品展现出式i化合物的更慢吸收，如由更久的t
max
和降低的c
max
所示。图20b示出了在单次口服施用作为立即释放和mups配制品的式i化合物(2mg/kg)后，在猴(n＝4)中式i化合物的平均浓度-时间图。在胶囊配制品中的api的中值t
max
为1.25小时，相比之下，3％、5％和8％配制品的中值t
max
分别为2.0小时、1.75小时和7.5小时，而对应的平均c
max
值分别为
1.14μm、0.585μm、0.190μm和0.0660μm。与胶囊中的api相比，基于auc比率，3％、5％和8％配制品的相对生物利用度分别为84％、40％和20％，这表明具有较高聚合物含量的两种配制品的较低c
max
归因于较慢吸收速率和吸收程度降低的组合。
[0185]
图21示出了在具有在包衣阶段施用的l30d55和的胶囊中的改良释放(mr)丸粒配制品。
[0186]
图22示出了在具有在包衣阶段施用的和的胶囊中的改良释放(mr)丸粒配制品。
[0187]
图23示出了在具有在包衣阶段施用的和的胶囊中的改良释放(mr)丸粒配制品。
[0188]
图24示出了40、80、100、106.68和160mg的式i mr片剂的组成。
[0189]
图25示出了制备40、80、100、106.68和160mg的式i化合物片剂的制造过程步骤。
[0190]
治疗帕金森病和帕金森综合征的方法
[0191]
在另一方面，本公开文本涉及一种用改良释放配制品治疗至少部分地由富亮氨酸重复激酶2(lrrk2)介导的疾病或病症的方法，所述改良释放配制品包含治疗有效量的式i化合物和一种或多种本文所述的赋形剂。具体而言，本公开文本提供了预防或治疗哺乳动物中与lrrk2相关的障碍的方法，其包括向所述哺乳动物施用治疗有效量的式i化合物的步骤。在一些实施方案中，至少部分地由lrrk2介导的疾病或病症是神经退行性疾病，例如中枢神经系统(cns)障碍，如帕金森病(pd)、帕金森综合征、阿尔茨海默病(ad)、痴呆(包括路易体痴呆和血管性痴呆)、肌萎缩侧索硬化(als)、年龄相关的记忆功能障碍、轻度认知障碍(例如包括从轻度认知障碍转变为阿尔茨海默病)、嗜银颗粒病、溶酶体障碍(例如c型尼曼-皮克病、戈谢病)、皮层基底节变性、进行性核上性麻痹、与17号染色体相关的遗传性额颞叶痴呆合并帕金森综合征(ftdp-17)、与药物成瘾相关的戒断症状/复发、l-多巴诱导的运动障碍、亨廷顿病(hd)和hiv相关性痴呆(had)。在其他实施方案中，所述障碍是器官(包括但不限于脑、心脏、肾脏和肝脏)的缺血性疾病。在一些实施方案中，所述疾病是克罗恩病。
实施例
[0192]
实施例1式i化合物的分离和物理化学特征
[0193]
将根据us 8815882的实施例394制备的式i化合物2-甲基-2-(3-甲基-4-(4-(甲基氨基)-5-(三氟甲基)嘧啶-2-基氨基)-1h-吡唑-1-基)丙腈(cas登记号1374828-69-9)和estrada,a.a.等人(2013)j.med.chem.57:921-936的化合物12溶解于甲基三丁基醚(mtbe，10vol，200ml)中，得到棕色溶液，所述文献各自具体地通过引用并入本文。以3ml/min经3m zeta plus活性碳片(r55sp，5cm直径)过滤该溶液。用mtbe(5vol，100ml)洗涤过滤器。将澄清的无色溶液(300ml)浓缩至8vol(160ml)并装入500ml反应器中。在20℃下添加正庚烷(8vol，160ml)。溶液最初保持澄清，但然后在2分钟后开始结晶。逐渐升高温度(速率2℃/min)。仅在69℃下实现完全溶解。在70℃下进一步添加庚烷(4vol，80ml)；在70℃下视觉观察到澄清溶液。将温度设定为65℃(1.0℃/min)。在65℃下，在溶液澄清的情况下，添加式i化合物的晶种(200mg，同一批次)，并且它们未溶解。然后经8小时的历程使温度降低到20℃。在20℃下搅拌过夜。将固体过滤并用母液洗涤两次。在40℃下真空干燥2小时，得到15.91g结晶式i化合物(79.6％收率)。将母液蒸发至干，得到另外的3.47g(17.4％回收率)。
[0194]
经由在室温下液体蒸气扩散，在乙酸正丁酯/环己烷溶剂混合物体系(乙酸正丁酯是溶剂，而环己烷是反溶剂)中，由块状单晶获得式i化合物的形式c多晶型物。
[0195]
经由在室温下缓慢蒸发，在丙酮/正庚烷(1:10，v/v)溶剂混合物体系中，由块状单晶获得式i化合物的形式d多晶型物。
[0196]
由选自形式c单晶或形式d单晶并用paratone-n(油基冷冻保护剂)包裹的无色块状单晶进行单晶结构确定。晶体以随机取向安装在密拉环(mylar loop)上，并浸入150k的氮气流中。初步检查和数据收集在agilent氮气流中。初步检查和数据收集在agilent衍射仪上进行并使用(agilent，版本：1.171.38.41)软件包分析。
[0197]
形式c单晶的数据收集细节如下：通过软件，使用在4.0790
°
＜θ＜70.0660
°
范围内的6568个反射的设定角度调取并精修用于数据收集的晶胞参数和取向矩阵。在150.2(2)k下收集数据直至最大衍射角(θ)为70.266
°
。数据集为99.9％完整的，平均i/σ为19.4且d min(cu)为
[0198]
形式c单晶的数据简化细节如下：数据帧用版本：1.171.38.41软件整合。总共收集12836个反射，其中6205个反射是独特的。对数据应用洛伦兹和偏极校正。使用在scale3 abspack缩放算法中实施的球谐函数来进行经验吸收校正。该材料在该波长下的吸收系数μ为0.964mm-1
，且最小透射和最大透射为0.80956和1.00000。对等效反射的强度取平均值。基于强度，取平均的一致性因子(agreement factor)为2.08％。
[0199]
使用shelxs
tm
结构解析程序(sheldrick,g.m.(2008).acta cryst.a64:112-122)通过直接方法将形式c的结构解析在空间群c2/c中，并用shelxs
tm 2014/7版精修包，使用olex2中所含的关于f2的全矩阵最小二乘方进行精修(dolomanov,o.v.,等人,(2009)j.appl.cryst.42:339-341)。对所有非氢原子进行各向异性精修。以几何方式计算在碳原子上存在的氢原子的位置并且使用骑式模型(riding model)精修，但是根据傅立叶图(fourier maps)对氮原子上存在的氢原子进行自由精修。
[0200]
形式d单晶的数据收集细节如下：通过软件，使用在4.0180
°
＜θ＜70.5190
°
范围内的30349个反射的设定角度调取并精修用于数据收集的晶胞参数和取向矩阵。在150k下收集数据直至最大衍射角(θ)为70.562
°
。数据集为89.9％完整的，平均i/σ为29.3且d min(cu)为
[0201]
形式d单晶的数据简化细节如下：数据帧用版本：1.171.38.41软件整合。总共收集47670个反射，其中11179个反射是独特的。对数据应用洛伦兹和偏极校正。使用在scale3 abspack缩放算法中实施的球谐函数来进行经验吸收校正。该材料在该波长下的吸收系数μ为0.980mm-1
，且最小透射和最大透射为0.83622和1.00000。对等效反射的强度取平均值。基于强度，取平均的一致性因子(agreement factor)为2.69％。
[0202]
使用shelxs
tm
结构解析程序通过直接方法将形式d的结构解析在空间群pca21中，并用shelxs
tm 2014/7版精修包，使用olex2中所含的关于f2的全矩阵最小二乘方进行精修。对所有非氢原子进行各向异性精修。以几何方式计算氢原子位置并使用骑式模型精修。
[0203]
表1.单晶x射线衍射(scxrd)仪器参数
[0204][0205]
使用shelxt(sheldrick,g.m.(2015).acta cryst.a71，3-8)结构解析程序(固有定相法)解析式i化合物的多晶型物形式并使用olex2中所含的shelxl-2015精修包(sheldrick,g.m.(2015).acta cryst.a71，3-8))(关于f2的全矩阵最小二乘方)进行精修(dolomanov，o.v.等人,"olex2:a complete structure solution,refinement and analysisprogram".j.appl.cryst.2009,42,339-341)。通过mercury获得所计算的xrpd图(macrae,c.f.,等人,appl.cryst.(2006)39:453-457)，并通过diamond产生晶体结构表示。在296k下使用bruker d8 venture衍射仪(mo/kα辐射，)收集单晶x射线衍射数据。表2示出了形式c和形式d的结晶学数据和结构精修。
[0206]
表2.式i单晶多晶型物形式c和形式d的结晶学数据和结构精修
[0207]
[0208][0209]
制备形式c和形式d的单晶，并通过单晶x射线衍射(scxrd)分析。成功地确定了形式c和形式d的单晶结构。
[0210]
scxrd表征证实形式c以单斜晶系和c2/c空间群结晶，晶胞参数为{scxrd表征证实形式c以单斜晶系和c2/c空间群结晶，晶胞参数为{α＝90
°
，β＝91.982(2)
°
，γ＝90
°
}。晶胞体积v经计算为不对称单元由两个分子构成，表明形式c是无水物。形式c的计算密度为1.367g/cm3。单晶的晶胞由十六个分子构成。
[0211]
scxrd表征证实形式d以正交晶系和pca21空间群结晶，晶胞参数为{a＝17.63410(10)α＝90
°
，β＝90
°
，γ＝90
°
}。晶胞体积v经计算为不对称单元由四个分子构成，表明形式d是无水物。形式d的计算密度为1.390g/cm3。单晶的晶胞由十六个分子构成。
[0212]
式i化合物的形式c多晶型物展现出具有在大约6.4、15.1、21.2、25.7和27.8处的2θ度数表示的特征峰的x射线粉末衍射图。式i化合物的形式c多晶型物的x射线粉末衍射图进一步包括在16.5和22.1
±
0.05度2θ处的峰。
[0213]
式i化合物的形式c多晶型物展现出具有在大约6.4、8.1、8.6、8.8、9.9、10.2、12.9、13.8、15.1、15.4、16.5、19.8、21.2、22.1、23.7、25.7和27.8处的2θ度数表示的特征峰
的x射线粉末衍射图。
[0214]
式i化合物的形式c多晶型物展现出基本上不含在13.6和14.8
±
0.05度2θ处的峰的x射线粉末衍射图。
[0215]
式i化合物的形式d多晶型物展现出具有在大约9.2、14.0、14.8、19.7和20.0处的2θ度数表示的特征峰的x射线粉末衍射图。
[0216]
式i化合物的形式d多晶型物展现出具有在大约8.0、8.7、9.2、9.8、10.4、12.9、13.4、14.0、14.8、16.4、18.5、19.7、20.0、20.8、23.1、23.3、23.9、25.5和25.7处的2θ度数表示的特征峰的x射线粉末衍射图。
[0217]
式i化合物的形式d多晶型物展现出基本上不含在13.6
±
0.05度2θ处的峰的x射线粉末衍射图。
[0218]
实施例2配制方法
[0219]
部分1：api药物ir(立即释放)丸粒的制造
[0220]
通过混合纯净水、羟丙甲纤维素和聚乙烯吡咯烷酮制备初始聚合物溶液。将式i化合物(api原料药)添加到聚合物溶液中并混合。然后将混合物筛分以产生药物分散体。将微晶纤维素球形晶种芯装入流化床处理器料盆中，并将药物分散体喷洒到微晶纤维素上。在干燥失重(lod)和测定过程中控制后，将所得粒子按大小制成api药物芯丸粒。
[0221]
通过混合纯净水、羟丙甲纤维素和聚乙二醇制备ir包衣溶液。将api药物芯丸粒装入流化床处理器料盆中，并将ir包衣溶液喷洒到丸粒上，直至达到所需的增重(1.5％-3.0％)。在lod过程中控制后，将所得粒子按尺寸制成api药物ir丸粒，将其包装并测试。
[0222]
部分2：api药物改良释放丸粒(mups)的制造
[0223]
通过混合纯净水、聚乙二醇和聚乙烯吡咯烷酮制备初始改良释放聚合物溶液。将滑石粉添加到溶液中以产生无团块的分散体。将30％的聚(乙酸乙烯酯)分散体添加到该分散体中并混合。过滤所得分散体以产生mr包衣分散体。将api药物ir丸粒装入流化床中，并将mr包衣分散体喷洒到丸粒上，直至达到所需的增重(3％-60％)。然后将包衣丸粒在约40℃-60℃的产品温度下固化约30分钟至约2小时。在干燥失重过程中控制后，将所得粒子按尺寸制成api药物mr丸粒，将其包装并测试。
[0224]
部分3：api药物mups(多单位丸粒系统)胶囊的制造
[0225]
将所需量的api药物ir丸粒(如果需要的话)和随后所需量的api药物mr丸粒(如果需要的话)单独手动称重到每个明胶胶囊中。将胶囊密封、视觉评估、称重并包装。
[0226]
实施例3改良释放片剂中的式i化合物的配制
[0227]
3.1.具有hpmc聚合物的改良释放片剂
[0228]
制备四种具有hpmc的片剂配制品以控制api释放，这些片剂含有下表3中的组分。释放速率可以通过添加hpmc聚合物来调节。hpmc k100 lv产生比单独使用hpmc(methocel k-15m cr)更快的释放。
[0229]
表3.具有hpmc聚合物的改良释放片剂
[0230][0231][0232]
称量过量的亲水性气相二氧化硅aerosil 200，并使其通过干净、干燥的850μm筛，然后转移到1-l粉末瓶中，并且记录重量。将该瓶置于32rpm下的turbula混合器中持续1分钟。称量过量的mcc、api和甘露醇，然后使其通过干净、干燥的600μm筛。将所需量的mcc、api和甘露醇转移到粉末瓶中，并且记录重量。使用刮勺手动混合粉末瓶中的内容物30秒，并将瓶置于在32rpm下的turbula混合器中持续5分钟。经由干净、干燥的600μm筛来筛分瓶内容物。称量过量的hpmc和聚维酮，然后使其通过干净、干燥的600μm筛。将所需量的hpmc和聚维酮转移到粉末瓶中，并且记录重量。使用刮勺手动混合粉末瓶中的内容物30秒并将瓶置于在32rpm下的turbula混合器中持续5分钟。视觉检查共混物，没有看到团块，因此，不筛分共混物。接下来，使过量的硬脂酸镁通过干净、干燥的600μm筛。将所需量的经筛分的硬脂酸镁转移到粉末瓶中，并且记录重量。将瓶置于在32rpm下的turbula混合器中持续3分钟，然后将共混物准备用于压片。在natoli压片机上使用椭圆形工具实现压片，以达到所有四种配制品的合适填充深度。
[0233]
使用表4方法测定的片剂的溶出曲线示于图26和图27中。
[0234]
表4.hpmc片剂的溶出测试方法
[0235][0236]
3.2.具有聚合物的改良释放片剂
[0237]
根据表5，制造两批次的sr pva骨架片(sr pva骨架片，40mg和sr pva骨架片，120mg)。
[0238]
表5.
[0239][0240]
除api、滑石粉和aerosil 200外，还使50％的总微晶纤维素ph102通过相同的600μm筛并收集在1-l瓶中。将瓶置于turbula混合器中并在23rpm下混合5分钟。除了聚维酮k30
外，还使其余50％的微晶纤维素ph102通过相同的600μm筛并收集在1-l瓶中。将瓶置于turbula混合器中并在23rpm下混合5分钟。使过量的硬脂酸镁单独通过干净、干燥的600μm筛。将所需量的硬脂酸镁添加到1-l瓶中。将瓶置于turbula混合器中并在23rpm下混合5分钟。将所需量的共混物溢流填充到坯块工具(22.00mm圆形扁平工具)的模具中以压缩成坯块。使用以下方程(重量/((厚度x 380.13))/1.4)施加所需的压缩力以获得可接受的固体分数(0.60至0.70)。计算所有坯块的固体分数。目标重量范围为2000mg
±
5％。记录前两个坯块的硬度，并重击整个共混物。将坯块置于研钵中，并使用研杵轻轻压碎成颗粒，注意不要产生细小粒子。使压碎的坯块通过1.18mm筛，然后通过850μm筛进入筛接收盘。根据需要使过大的材料返回到研钵和研杵以进一步减小大小。该步骤首先在1.18μm筛上进行，然后在850μm筛上进行)。如上所述压碎保留在筛上的部分，直至所有颗粒都通过850μm筛。称重研磨的颗粒并将其收集到适当大小的琥珀色玻璃瓶中，并且发现40mg低剂量配制品的收率为85.98％，且高剂量配制品的收率为69.07％。使pva(parteck srp80)、胶态无水二氧化硅200(aerosil)和滑石粉通过相同的600μm筛并收集在瓶中。将瓶置于turbula混合器中并在23rpm下混合5分钟。使大约110％的硬脂酸镁通过250μm筛并收集，记录重量。使过量的硬脂酸镁单独通过干净、干燥的600μm筛。将所需量的硬脂酸镁添加到1-l瓶中。将瓶置于turbula混合器中并在23rpm下混合5分钟。将所需量的片剂共混物溢流填充到片剂工具(15
×
7mm椭圆形)的模具中以压缩成第一片剂。调节填充深度以达到所需的填充重量(400mg
±
5％)。调节压缩力以达到所需的硬度(12kp
±
2kp)。检查并记录片剂的重量和厚度(重量范围：400mg
±
5％)。记录前两个片剂的硬度。将共混物压片以获得约30个片剂，并且在生产结束时从另外两个片剂收集硬度。将可接受的片剂包装在60ml duma容器中。
[0241]
根据表6测定的片剂的溶出曲线示于图28和图29中。
[0242]
表6.片剂的溶出测试方法。
[0243][0244]
实施例4在改良释放包衣mups中的式i化合物的配制。
[0245]
使用比率为9:1的rs 30d和rl 30d作为改良释放聚合物。通过首先制备api(250g)和水(2.1l)的均匀分散体，然后向其中添加peg 6000(8.33g)、hpmc e5(83.33g)和水(约1l)的澄清溶液来制备药物层悬浮液。喷洒10小时30分钟后，获得微晶珠粒(cp 102，500g)的药物分层。在用hpmc e5密封包衣过程期间，将药物分层产品维持在42℃下。通过在搅拌下将hpmc e5(22.5g)粉末缓慢添加到水(258.8g)中，直至聚合物完全溶解来制备密封包衣溶液。将丸粒干燥10分钟，然后筛选以保留300-425μm之间的珠粒，并且产生762.3g密封包衣的药物分层产品。
[0246]
将抗粘剂滑石粉(35.0g，基于干聚合物为50％)和增塑剂柠檬酸三乙酯(tec)(24.0g，基于干聚合物为50％)添加到水(312.7g)中，然后使用均化器均化10分钟。在低剪切速度下搅拌rs 30d(210.0g)和rl 30d(23.3g)10分钟。将赋形剂悬浮液缓慢倒入分散体中，同时用常规搅拌器轻轻搅拌30分钟。使用0.25mm筛目大小过滤最终悬浮液。在整个包衣过程中，悬浮液保持在低速混合下。使用该方法制备具有5％、10％和15％w/w包衣的丸粒。将具有15％w/w包衣的配制品施用于小型猪。
[0247]
接下来，测量随时间的药物释放。将式i化合物配制品溶解在由柠檬酸和磷酸氢二钠构成的mcllvaine缓冲液(ph 3)中，所述缓冲液也称为柠檬酸盐-磷酸盐缓冲液。api(80mg)，密封包衣的药物分层丸粒，5％、10％和15％w/w包衣丸粒的溶出速率的比较示于图31中。
[0248]
实施例5食蟹猴pk研究
[0249]
将具有手术植入的csf收集口的食蟹猴圈养，并根据测试设施iacuc指南和sop接受护理。
[0250]
全血收集和血浆加工(药代动力学)：在适当的时间点(参见下文)经由直接针刺从外周静脉收集血液样品。根据测试设施sop，将全血置于湿冰上，直至血浆处理。将血浆在-80℃下储存，直至在完成研究时在干冰上运送至分析实验室。
[0251]
用于药效学的全血收集：在适当的时间点经由直接针刺从外周静脉收集血液样品。将100μl(微升)全血移液至1.5ml弹扣盖管中，在液氮中快速冷冻，并在-80℃下储存，直至研究结束时在干冰上运送至发起人。
[0252]
csf收集：使用无菌技术从经由皮下口进入的留置鞘内导管收集csf样品。进入口，并且在收集csf前从管线中移除约180μl的流体。快速评估csf中红细胞的存在，在微量离心机中在室温下在2000g下离心10分钟，并且将上清液等分，在ln2中快速冷冻，并在-80℃下储存，直至研究结束时在干冰上运送至发起人。在收集csf后，用约140μl无菌0.9％氯化钠溶液锁住口/导管。
[0253]
csf开口食蟹猴中的药代动力学研究：在给药的第一天前，向所有动物(n＝16)每天一次口服给予媒介物(在反渗透水中的0.5％w/v甲基纤维素、0.1％w/v吐温80)，持续5天。从给药的第一天开始，10只动物接受每天一次口服剂量的式i化合物配制品，持续三或七天，而其余动物继续每天给予媒介物，持续三天或七天。在给药之前隔夜以及给药之后至少一小时(不超过3小时)动物禁食。
[0254]
在食蟹猴(体重大约5kg)中评价三种mups胶囊配制品。mups配制品含有式i化合物，其被配制成用sr 30d聚合物以设计成提供不同药物释放速率的各种水平(3％、5％和8％w/w)包衣的药物分层丸粒。体外溶出结果支持用体内pk研究进行进一步表征。在食蟹猴中使用交叉设计以最少一周清除期评价mups配制品。未包衣丸粒和在胶囊配制品中的api用作具有立即释放速率的比较物。向禁食动物(n＝4)施用每种配制品的单一剂量(2mg/kg式i化合物)，并在给药后经24小时获得定时血液样品。图20a示出了在食蟹猴中对于配制品的pk研究。1.胶囊中的ir丸粒；2.胶囊中的8％丸粒；3.胶囊中的纯api(式i化合物)；4.胶囊中的肠溶包衣丸粒；5.胶囊中的5％丸粒；6.胶囊中的3％丸粒。
[0255]
禁食猴口服施用后，未包衣丸粒和pic配制品达到类似的t
max
、c
max
和auc
0-inf
。含有sr 30d包衣丸粒的配制品相对于两种立即释放配制品展现出式i化合物的更慢吸收，如由更久的t
max
和降低的c
max
所示。图20b示出了在单次口服施用作为立即释放和mups配制品的式i化合物(2mg/kg)后，在猴(n＝4)中式i化合物的平均浓度-时间图。在胶囊配制品中的api的中值t
max
为1.25小时，相比之下，3％、5％和8％配制品的中值t
max
分别为2.0小时、1.75小时和7.5小时，而对应的平均c
max
值分别为1.14μm、0.585μm、0.190μm和0.0660μm。与胶囊中的api相比，基于auc比率，3％、5％和8％配制品的相对生物利用度分别为84％、40％和20％，这表明具有较高聚合物含量的两种配制品的较低c
max
归因于较慢吸收速率和吸收程度降低的组合。
[0256]
实施例6小型猪pk研究
[0257]
自小型猪受试者的血液收集与实施例5的食蟹猴受试者类似。
[0258]
在禁食的哥廷根小型猪(n＝3)中使用交叉设计评价未包衣的药物丸粒和在胶囊中的5％和8％配制品。图17a示出了在小型猪中配制品1-5的平均口服浓度-时间图。丸粒显示出较慢的吸收速率。肠溶包衣丸粒实现与ir丸粒类似的暴
露。1.胶囊中的ir丸粒；2.胶囊中的8％丸粒；3.iv(0.5mg/kg)；4.胶囊中的肠溶包衣丸粒；和5.胶囊中的5％丸粒。5％和8％配制品在1mg/kg下展现出式i化合物的较慢吸收。未包衣丸粒以及5％和8％配制品的中值t
max
值分别为2.0小时、2.5小时和4.0小时，而对应的c
max
值分别为0.197μm、0.0940μm和0.0469μm。图17b示出了在单次口服施用作为立即释放和mups配制品的式i化合物(1mg/kg)后，在小型猪(n＝3)中式i化合物的平均浓度-时间图。
[0259]
实施例7mups丸粒
[0260]
根据前述实施例制备含有80mg式i化合物的mups丸粒。发现相对于未包衣丸粒具有5％、7％和9％增重的sr 30d包衣的丸粒具有表7中示出的溶出概况。未用改良释放聚合物包衣的mups丸粒的溶出概况示于表8中。5％和7％sr30d包衣的组分和药物分层步骤示于表9和表10中。
[0261]
表7.用包衣达到不同增重的改良释放mups丸粒的溶出。
[0262][0263]
表8.立即释放mups丸粒的溶出
[0264]
时间(min)溶出％(均值)5910481582209030934595609612098
[0265]
表9.具有80mg api和达到5％增重的sr 30d包衣的mups丸粒。
[0266][0267][0268]
表10.具有80mg api和达到7％增重的sr 30d包衣的mups丸粒。
[0269][0270]
实施例8改良释放片剂
[0271]
如表11和表12中所示，用pva或hpmc释放改良剂制备含有80mg式1化合物(api)的片剂。它们的溶出概况示于表13中。作为比较，在胶囊配制品(在明胶胶囊中80mg式i化合物，没有任何添加的赋形剂)中的api的溶出概况示于表14中。
[0272]
表11.基于聚乙烯醇的持续释放80mg片剂
[0273]
成分％w/wapi20微晶纤维素43聚乙烯吡咯烷酮3聚乙烯醇30胶态二氧化硅，无水1滑石粉2硬脂酸镁1总计100
[0274]
表12.基于hpmc的持续释放80mg片剂
[0275]
成分％w/wapi20.0甘露醇10.0微晶纤维素45.7hpmc k15m10hpmc k100lv10聚维酮3胶态二氧化硅，无水0.5硬脂酸镁0.8总计100
[0276]
表13.hpmc和pva片剂的溶出概况
[0277][0278]
表14.胶囊中的api的溶出概况
[0279]
时间(min)溶出％005410242065
308745100
[0280]
实施例9药代动力学(pk)和生物利用度研究以研究人体内的改良释放配制品：
[0281]
在健康志愿者生物利用度和药代动力学研究中，使用交叉设计以最少一周清除期，评估上述实施例中描述的某些改良释放(mr)配制品的体内人生物利用度。使用作为胶囊包api配制品的式i化合物的立即释放(ir)配制品作为比较物和参照。向禁食的人受试者给予单一80mg剂量的作为胶囊中的api、胶囊中的sr 30d 5％丸粒或胶囊配制品中的sr 30d 7％的式i化合物。在给药后经72小时获得定时血液样品。根据需要重复上述给药周期以获得上述每种配制品的pk和生物利用度数据。以规则的间隔从受试者采集血液样品。使用标准技术测量pk参数。进行与给药后安全性有关的另外测量，包括安全性实验室测试(血液学、临床化学和尿分析)、生命体征、ecg、体检和任何不良事件(ae)的评估。测试的配制品的pk特性示于下表中。
[0282]
表15.与胶囊中的api相比，mups胶囊的药代动力学特性
[0283][0284]
mupssr 30d 5％和7％胶囊包丸粒配制品相对于立即释放配制品展现出降低的c
max
和c
max
/c
12h
，并且发现是良好耐受的和生物可利用的。
[0285]
在类似的研究设计中，在健康人志愿者中评价两种片剂配制品。对hpmc片剂(80mg)和pvc片剂(80mg)以交叉方式用在给药后经72小时获得的定时血液样品研究。胶囊配制品中的api(80mg)用作比较物。发现与禁食的健康受试者相比，口服施用hpmc片剂和pva片剂实现了c
max
的降低，并且是良好耐受的和生物可利用的。
[0286]
表16.改良释放片剂与胶囊中的api相比的药代动力学特性
[0287][0288]
总之，临床研究证实，改良释放的胶囊和片剂具有良好的耐受性，并实现较低的c
max
和降低的c
max
/c
12h
，同时维持口服生物利用度(与胶囊中的api相比，相对口服生物利用度大于30％)。未观察到对脉搏率或血压有临床显著影响。降低c
max
同时保持口服生物利用度的配制品可以允许更高和/或降低的给药频率，并提供更大的耐受性和安全性。
[0289]
尽管出于清楚理解的目的，已通过说明和实施例详细地描述了前述发明，但描述和实施例不应被解释为限制本发明的范围。因此，所有合适的修改和等效物都可以被视为落入如下文权利要求所限定的本发明范围内。本文引用的所有专利和科学文献的公开内容通过引用以其整体明确地并入。