一种丙泊酚混合胶束及其制备方法与流程

1.本发明属于医药制剂技术领域，具体涉及一种丙泊酚混合胶束及其制备方法。


背景技术：

2.丙泊酚(propofol，prop)是一种临床常用静脉麻醉药，具有起效快、作用时间短的特点，常用于麻醉的诱导与维持。丙泊酚疏水性强，最初上市的制剂是一种以聚氧乙烯蓖麻油(cremophor el)胶束增溶的注射液，但由于聚氧乙烯蓖麻油所致的过敏反应和制剂的注射疼痛很快撤出了市场。目前使用其o/w型脂肪乳注射液，临床应用浓度10mg/ml，用大豆油为油相、磷脂为乳化剂、甘油为渗透压调节剂，解决丙泊酚难溶于水的问题并降低疼痛发生率。但国内的临床研究表明，脂肪乳注射液的注射疼痛发生率仍高达40％。由于脂肪乳为热力学不稳定体系，不耐热和冰冻，对贮存温度要求较高。因此急需提供一种可以提高丙泊酚溶解度和稳定性，并降低其注射疼痛的新型注射制剂，以满足临床需求。
3.cn200710188561.9公开了一种含有镇痛药的复方丙泊酚注射剂及其制备方法，虽然具有麻醉和镇痛的双重作用，但处方中引入额外的镇痛药物，进一步增加了病人的不良反应和用药风险。
4.cn200710017685.0公开了一种长循环脂肪乳丙泊酚制剂，将丙泊酚、植物油、卵磷脂、聚乙二醇磷脂、油酸和维生素e等制备成脂肪乳，所得制剂可抑制体内药物的清除，提高药物疗效，但成分复杂，制备工艺繁琐，而且制备方法中需要加热，会导致丙泊酚稳定性下降。
5.cn200710169846.8公开了一种丙泊酚的微乳组合物，其含有丙泊酚，solutol hs 15，注射用油，磷脂和其他水溶性成分。虽然一定程度上改善了丙泊酚的溶血效果，但制备工艺复杂繁琐，而且需要加热，会导致对温度敏感的丙泊酚结构改变，引起杂质含量升高，增加用药的风险。
6.cn201110320553.1公开了一种丙泊酚中长链脂肪乳，成分包括丙泊酚、大豆油、中链甘油三酸酯、甘油、卵磷脂、碳酸氢钠、油酸和注射用水。该工艺通过加热的方式制备，会导致丙泊酚结构改变，稳定性下降。
7.现有技术中，普遍存在制备的丙泊酚脂肪乳游离药物浓度过高，制备工艺复杂且需要加热，导致丙泊酚稳定性下降，进而导致病人顺应性下降，用药风险增加。


技术实现要素：

8.鉴于现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种成分简单、安全有效的丙泊酚混合胶束及其制备方法。本发明通过将两亲性聚合物聚乙二醇-二硬脂酸酰基磷脂酰乙醇胺(peg-dspe)和聚乙二醇-15羟基硬脂酸酯(solutol hs 15)组合使用，制备出优良的丙泊酚胶束制剂，有效提高了丙泊酚的溶解度，且游离药物少，包封率高，有效减轻了病人的痛苦，提高顺应性，制备工艺简单，易于生产。
9.本发明提供的一种丙泊酚混合胶束，其组成包含丙泊酚和聚乙二醇衍生物，所述
聚乙二醇衍生物为聚乙二醇-二硬脂酸酰基磷脂酰乙醇胺(peg-dspe)或聚乙二醇-15羟基硬脂酸酯(solutol hs 15)中的一种或两种，
10.各组分的浓度为：
11.丙泊酚
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0.1-10mg/ml
12.peg-dspe
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2-50mg/ml
13.solutol hs 15
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0-250mg/ml。
14.本发明中，所述聚乙二醇衍生物为peg-dspe和solutol hs 15的组合。
15.本发明中，所述peg-dspe为peg分子量为2000的peg
2000-dspe。
16.本发明中，各组分的浓度为：
17.丙泊酚
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0.1-10mg/ml
18.peg-dspe
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2-20mg/ml
19.solutol hs 15
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
0.5-100mg/ml。
20.本发明中，所述丙泊酚混合胶束与血浆是等渗的。
21.本发明中，丙泊酚混合胶束中添加有药学可接受的辅料。
22.本发明中，所述药学可接受的其他辅料为渗透压调节剂。
23.本发明中，所述渗透压调节剂为生理盐水。
24.本发明提供的一种丙泊酚混合胶束的制备方法，具体步骤为：先称取丙泊酚、聚乙二醇衍生物，加入有机溶剂溶解混合，旋蒸有机溶剂使其成一层薄膜，加入水相涡旋，磁力搅拌后过滤膜，即得所述丙泊酚混合胶束。
25.优选的，先称取丙泊酚、聚乙二醇衍生物peg-dspe和/或solutol hs 15，加入有机溶剂甲醇溶解混合，旋蒸有机溶剂甲醇使成一层薄膜，加入生理盐水涡旋，磁力搅拌后过0.45μm滤膜，即得所述丙泊酚混合胶束。
26.进一步优选的，在40℃温度下，先将solutol hs 15融化，称取丙泊酚、聚乙二醇-二硬脂酸酰基磷脂酰乙醇胺和融化后的solutol hs 15，加入有机溶剂甲醇溶解混合，旋蒸有机溶剂甲醇使成一层薄膜，加入生理盐水涡旋3-5min，磁力搅拌0.5-1h后过0.45μm滤膜，即得所述丙泊酚胶束。
27.与现有技术相比，本发明的有益效果如下：
28.(1)有效提高丙泊酚的溶解度；(2)降低了丙泊酚的游离药物浓度，提高了病人顺应性；
29.(3)降低了丙泊酚的溶血百分比，提高了用药安全性；(4)制备工艺简单，不需要加热，提高了丙泊酚的稳定性。
附图说明
30.图1为实施例1的丙泊酚胶束的粒度分布图。
具体实施方式
31.下面通过实施例来进一步说明本发明。应该正确理解的是：本发明的实施例仅仅是用于说明本发明而给出，而不是对本发明的限制，所以，在本发明的方法前提下对本发明的简单改进均属本发明要求保护的范围。
32.实施例1
33.1)丙泊酚混合胶束处方：
[0034][0035]
2)制备工艺：
[0036]
solutol hs 15于40℃融化，称取处方量的丙泊酚、peg
2000-dspe、solutol hs 15，加入甲醇溶解混合，采用薄膜分散法，旋蒸甲醇使成一层薄膜，加入生理盐水5ml涡旋5min，磁力搅拌1h后过0.45μm滤膜，即得混合胶束。
[0037]
实施例2
[0038]
1)丙泊酚混合胶束处方：
[0039][0040]
2)制备工艺：
[0041]
solutol hs 15于40℃融化，称取处方量的丙泊酚、peg
2000-dspe、solutol hs 15，加入甲醇溶解混合，采用薄膜分散法，旋蒸甲醇使成一层薄膜，加入生理盐水5ml涡旋5min，磁力搅拌1h后过0.45μm滤膜，即得混合胶束。
[0042]
实施例3
[0043]
1)丙泊酚混合胶束处方：
[0044][0045]
2)制备工艺：
[0046]
solutol hs 15于40℃融化，称取处方量的丙泊酚、peg
2000-dspe、solutol hs 15，加入甲醇溶解混合，采用薄膜分散法，旋蒸甲醇使成一层薄膜，加入生理盐水5ml涡旋5min，磁力搅拌1h后过0.45μm滤膜，即得混合胶束。
[0047]
实施例4
[0048]
1)丙泊酚混合胶束处方：
[0049][0050]
2)制备工艺：
[0051]
solutol hs 15于40℃融化，称取处方量的丙泊酚、peg
2000-dspe、solutol hs 15，加入甲醇溶解混合，采用薄膜分散法，旋蒸甲醇使成一层薄膜，加入生理盐水5ml涡旋3min，磁力搅拌0.5h后过0.45μm滤膜，即得混合胶束。
[0052]
实施例5
[0053]
1)丙泊酚混合胶束处方：
[0054][0055]
2)制备工艺：
[0056]
solutol hs 15于40℃融化，称取处方量的丙泊酚、peg
2000-dspe、solutol hs 15，加入甲醇溶解混合，采用薄膜分散法，旋蒸甲醇使成一层薄膜，加入生理盐水5ml涡旋5min，磁力搅拌1h后过0.45μm滤膜，即得混合胶束。
[0057]
实施例6
[0058]
1)丙泊酚混合胶束处方：
[0059][0060]
2)制备工艺：
[0061]
solutol hs 15于40℃融化，称取处方量的丙泊酚、peg
2000-dspe、solutol hs 15，加入氯仿溶解混合，采用薄膜分散法，旋蒸甲醇使成一层薄膜，加入生理盐水5ml涡旋5min，磁力搅拌1h后过0.45μm滤膜，即得混合胶束。
[0062]
实施例7
[0063]
1)丙泊酚混合胶束处方：
[0064]
组份
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
浓度
[0065]
丙泊酚
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1mg/ml
[0066]
peg
2000-dspe
ꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀꢀ
20mg/ml
[0067]
2)制备工艺：
[0068]
称取处方量的丙泊酚、peg
2000-dspe，加入氯仿溶解混合，采用薄膜分散法，旋蒸甲
醇使成一层薄膜，加入生理盐水5ml涡旋5min，磁力搅拌1h后过0.45μm滤膜，即得混合胶束。
[0069]
实施例8
[0070]
1)丙泊酚混合胶束处方：
[0071][0072]
2)制备工艺：
[0073]
solutol hs 15于40℃融化，称取处方量的丙泊酚、peg
2000-dspe、solutol hs 15，加入氯仿溶解混合，采用薄膜分散法，旋蒸甲醇使成一层薄膜，加入生理盐水5ml涡旋5min，磁力搅拌1h后过0.45μm滤膜，即得混合胶束。
[0074]
对比实施例1：
[0075]
1)处方：
[0076][0077]
2)制备工艺：
[0078]
处方量的大豆油，卵磷脂，油酸钠、peg2000-dspe，在氮气保护下加热至75℃，搅拌10min使得添加辅料充分溶解，加入处方量丙泊酚和维生素e，溶解均匀，另取注射用水800ml，加入甘油，在氮气保护下，含有药物的油溶液在剪切搅拌的条件下加入甘油水溶液中，制成初乳，并调节总量至1000ml，高压均质5-8次，调节ph7.0-8.0过滤。
[0079]
对比实施例2：
[0080]
1)处方
[0081][0082]
2)制备工艺：
[0083]
在水浴65℃将卵磷脂溶于mct中，加入solutol hs 15、丙泊酚，搅拌均匀，得到油相；将甘氨胆酸、乙二胺四乙酸钠钙与甘油分散于约60ml水中，用氢氧化钠溶液调ph至7，使甘氨胆酸变为甘氨胆酸钠，得到水相；在60℃左右将水相在搅拌下加入油相中，持续搅拌，得到微乳，过滤，加水至100ml。
[0084]
验证实施例1：
[0085]
1.粒径分析
[0086]
实施例1-8及对比实施例1-2所得制剂溶液通过粒度测定仪检测动态光散射粒径、多分散指数(pdi)。
[0087]
表1.实施例及对比实施例粒径及多分散指数
[0088]
实施例粒径(nm)多分散指数(pdi)实施例129.90.166实施例233.420.201实施例321.080.193实施例413.550.110实施例515.960.151实施例612.570.199实施例728.130.199实施例825.240.242对比实施例1189.650.389对比实施例211.520.358
[0089]
本发明所制备的混合胶束粒径较小，且pdi小于0.3，分散均匀，显著优于现有技术。
[0090]
2.游离药物检测
[0091]
实施例1-8所得丙泊酚混合胶束，取400μl丙泊酚混合胶束装入超滤离心管(3k，millipore)中，3000rpm超速离心20min，取下层水相进行hplc分析，检测方法为色谱柱eclipse plus c185μm，4.6x250mm；流动相为ph＝2的磷酸水溶液(a)，乙腈(b)；检测波长
270nm；进样量20μl；流速1ml/min；梯度洗脱。
[0092]
表2.梯度洗脱方法
[0093]
时间(min)流动相a(％)流动相b(％)0505063070133070145050165050
[0094]
表3.实施例1-8和对比实施例1-2游离浓度检测结果
[0095][0096][0097]
本发明所得胶束游离药物浓度较小，相比于现有技术至少下降了68.1％，可以显著降低病人注射时的疼痛程度，有效提高了病人的顺应性。
[0098]
3.包封率检测
[0099]
实施例1-8所得丙泊酚混合胶束采用上述液相方法检测丙泊酚浓度，所得胶束溶液取100μl，加入900μl乙腈破乳，hplc检测丙泊酚浓度，按如下公式计算丙泊酚的包封率。
[0100][0101]
其中：c
总
为胶束中丙泊酚的总浓度，c
游离
为胶束中丙泊酚的游离浓度。
[0102]
表4.实施例1-8包封率检测结果
[0103]
实施例包封率(％)实施例176.9实施例269.9实施例353.9实施例470.3
实施例587.6实施例682.6实施例760.9实施例867.36
[0104]
4.溶血实验
[0105]
sd大鼠取血5ml，3000rpm离心10min去除血浆，留沉淀红细胞，再加入10倍量的生理盐水，重复离心步骤，反复洗涤三次，至上清液澄清无色，留得的红细胞沉淀用生理盐水配成2％的混悬液，待用。分别在ep管中加入800μl实施例1-8所得制剂，补加200μl红细胞悬液，摇匀后，置于37℃中缓慢摇晃2h，将温育好的试管溶液以3000rpm离心10min后，取上清液转入96孔板中，用酶标仪读取个试管溶液的od值，选择的波长为545nm，阳性对照为蒸馏水，阴性对照为生理盐水。用下列方程式计算溶血率百分比。
[0106]
溶血率(％)＝(odt-odnc)/(odpc-odnc)x100％
[0107]
odt
---
受试管吸光度；
[0108]
odnc—阴性管吸光度；
[0109]
odpc—阳性吸光度。
[0110]
表5.实施例1-8溶血结果
[0111]
实施例溶血百分比(％)实施例14.37实施例23.15实施例33.84实施例45.19实施例52.61实施例69.34实施例77.51实施例812.9
[0112]
本发明实施例1-8的溶血百分比小于15％，显著优于现有技术，有效提高了其安全性。