使用金属螯合剂作为流动相添加剂改善基于RPLC的肽图分析色谱性能的制作方法

技术特征：
1.一种分析包含分析物的样品的方法，所述方法包括：将包含所述分析物的所述样品进样到包含浓度在约1ppm至约10ppm之间的金属螯合剂添加剂的流动相中；使用液相色谱分离所述分析物；以及使用质谱仪、紫外检测器或它们的组合分析所述分析物。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述金属螯合剂添加剂选自由以下项组成的组：柠檬酸、柠檬酸钠、异柠檬酸盐、柠檬酸二铵和柠檬酸三铵。3.根据权利要求2所述的方法，其中所述金属螯合剂添加剂为柠檬酸。4.根据权利要求3所述的方法，其中所述流动相中柠檬酸的浓度为约1ppm。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述流动相中柠檬酸的浓度为约10ppm。6.一种分析包含完整蛋白质的样品以进行肽图分析的方法，所述方法包括：将所述样品中的所述完整蛋白质还原为氨基酸直链；酶促处理所述氨基酸直链以产生肽混合物；将包含所述肽混合物的所述样品进样到包含柠檬酸的流动相中；使用反相液相色谱分离所述肽混合物；以及使用质谱仪、紫外检测器、荧光检测器或它们的组合分析所分离的肽。7.根据权利要求6所述的方法，其中所述肽混合物中的至少一种肽包含带电氨基酸残基。8.根据权利要求6所述的方法，其中所述肽混合物中的至少一种肽具有净电荷。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述净电荷为负的。10.根据权利要求6所述的方法，其中所述蛋白质为单克隆抗体。11.根据权利要求6所述的方法，其中所述蛋白质为合成蛋白质或重组蛋白质。12.根据权利要求6所述的方法，其中所述氨基酸为天冬氨酸、谷氨酸或异天冬氨酸。13.根据权利要求6所述的方法，其中所述肽混合物包含pennyk肽和所述pennyk肽的脱酰胺形式。14.根据权利要求6所述的方法，其中所述氨基酸用胰蛋白酶、lys-c、asp-n或它们的组合进行酶促处理。15.根据权利要求6所述的方法，其中色谱性能在约2天至约3天的时段内保持，其中平均usp拖尾值为约0.95至约1.30。16.根据权利要求6所述的方法，其中色谱性能在约48次连续进样内保持，其中平均usp拖尾值为约0.95至约1.30。17.根据权利要求6所述的方法，其中所述肽混合物包含肽和所述肽的脱酰胺物质。18.根据权利要求6所述的方法，其中所述流动相中柠檬酸的浓度为约1ppm至约10ppm。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述流动相中柠檬酸的浓度为约1ppm。20.根据权利要求6所述的方法，其中所述流动相还包括甲酸、乙酸、水、乙腈、甲醇、异丙醇、正丙醇、三氟乙酸、二氟乙酸或它们的组合。21.根据权利要求6所述的方法，所述方法还包括在分离所述肽混合物之前用柠檬酸钝化反相色谱柱。22.一种分析包含脂肪酸的样品的方法，所述方法包括：
将包含所述脂肪酸的所述样品进样到包含柠檬酸的流动相中；使用反相液相色谱分离所述脂肪酸；以及使用质谱仪、紫外检测器或它们的组合分析所分离的脂肪酸。23.根据权利要求22所述的方法，其中所述脂肪酸包括月桂酸。24.根据权利要求22所述的方法，其中所述流动相中柠檬酸的浓度为约1ppm至约10ppm。25.一种用于分析样品的套件，所述套件包括：液相色谱柱；包含柠檬酸流动相添加剂的小瓶；以及用于在用于分析包含分析物的样品的方法中使用所述柠檬酸流动相添加剂的说明书，其中所述方法包括：将所述柠檬酸流动相添加剂添加到流动相中；将包含所述分析物的所述样品进样到包含柠檬酸的所述流动相中；使用液相色谱分离所述分析物；以及使用质谱仪、紫外检测器或它们的组合分析所分离的分析物。26.根据权利要求25所述的套件，其中所述液相色谱柱为反相液相色谱柱。27.根据权利要求25所述的套件，其中将所述柠檬酸流动相添加剂以约1ppm至约10ppm的浓度添加到所述流动相中。28.根据权利要求25所述的套件，其中所述分析物为脂肪酸。29.根据权利要求25所述的套件，其中所述分析物为完整蛋白质。30.根据权利要求29所述的套件，其中所述方法还包括：将所述完整蛋白质还原为氨基酸直链；以及酶促处理所述氨基酸直链以产生肽混合物。31.一种用于分析样品的套件，所述套件包括：液相色谱柱；包含金属螯合剂流动相添加剂的小瓶；以及用于在用于分析包含分析物的样品的方法中使用所述金属螯合剂流动相添加剂的说明书，其中所述方法包括：将所述金属螯合剂流动相添加剂添加到流动相中以获得浓度在约1ppm至约10ppm之间的所述金属螯合剂流动相添加剂；将包含所述分析物的所述样品进样到包含所述金属螯合剂的所述流动相中；使用液相色谱分离所述分析物；以及使用质谱仪、紫外检测器、荧光检测器或它们的组合分析所分离的分析物。32.根据权利要求31所述的套件，其中所述金属螯合剂流动相添加剂选自由以下项组成的组：柠檬酸、柠檬酸钠、异柠檬酸盐、柠檬酸二铵、柠檬酸三铵和甲酸铵。

技术总结
本技术涉及一种分析包含分析物的样品的方法。该方法包括将包含该分析物的该样品进样到流动相中。该流动相包含浓度在约1ppm至约10ppm之间的金属螯合剂添加剂。该方法还包括使用液相色谱分离该分析物，并使用质谱仪、紫外检测器或它们的组合分析该分析物。外检测器或它们的组合分析该分析物。


技术研发人员：R
受保护的技术使用者：沃特世科技公司
技术研发日：2020.06.05
技术公布日：2022/1/28