可与底物结合的蛋白序列在制备抑制纤维蛋白组装的产品中的应用的制作方法

技术特征：
1.一种蛋白，其特征在于，所述蛋白含有可与底物gprp肽段结合的氨基酸序列，氨基酸序列的结构为：色氨酸—aa
n1
—酪氨酸—aa
n2
—半胱氨酸—aa
n3
—谷氨酸—天冬氨酸—aa
n4
—半胱氨酸—组氨酸—aa
n5
—天冬氨酸—aa
n6
—酪氨酸—aa
n7
—色氨酸，其中，aa为氨基酸，n1-n7为氨基酸数量，n1＝16-18个，n2＝2-4个，n3＝1-3个，n4＝7-9个，n5＝16-18个，n6＝4-6个，n7＝3-5个；优选地，所述氨基酸数量n1＝17个，n2＝3个，n3＝2个，n4＝8个，n5＝17个，n6＝5个，n7＝4个。2.纤维蛋白原相关蛋白1，其特征在于，所述纤维蛋白原相关蛋白1为如下任意一项所示的蛋白质并包含有权利要求1所述的氨基酸序列：(a1)氨基酸序列如seq id no.1或seq id no.1的第48-290位所示的蛋白质；(a2)将seq id no.1或seq id no.1的第48-290位所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；(a3)与(a1)-(a2)中任一所限定的氨基酸序列具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同源性且具有相同功能的蛋白质；(a4)在(a1)-(a3)中任一所限定的蛋白质的n端和/或c端连接标签后得到的融合蛋白。3.编码权利要求2所述纤维蛋白原相关蛋白1的核酸分子，其特征在于：所述核酸分子为基因；所述基因是如下任意一项所述的dna分子：(b1)seq id no.2或seq id no.2的第142-870位所示的dna分子；(b2)在严格条件下与(b1)限定的dna分子杂交且编码所述蛋白质的dna分子；(b3)与(b1)-(b2)限定的dna序列具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同源性且编码所述蛋白质的dna分子；(b4)编码(a3)中所述蛋白质的dna分子。4.含有权利要求3所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组菌或转基因细胞系。5.权利要求1所述的蛋白、权利要求2所述纤维蛋白原相关蛋白1或权利要求3所述的核酸分子或权利要求4所述的重组载体、重组菌或转基因细胞系的应用，其特征在于，所述应用至少为如下所述的任意一种：(c1)制备用于抑制血栓发生的产品；(c2)制备用于抑制血栓程度的产品；(c3)制备用于抑制血浆中纤维蛋白活性的产品；(c4)制备用于抑制血浆中纤维蛋白原组装的产品；(c5)制备用于增强溶纤能力的产品；(c6)制备用于延长血浆的活化部分凝血酶时间和/或凝血酶原时间和/或凝血酶时间的产品。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述蛋白质的制备方法为：将所述蛋白质的编码基因克隆入真核表达载体，以无血清培养基培养真核细胞表达所述蛋白质，采用ni-nta亲和力柱进行纯化，再使用superdex 200 10/300gl色谱柱通过凝胶过滤进一步纯化蛋白，得到高纯度纯化蛋白。7.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于，所述产品为药物产品，所述药物产品包括疫苗产品；优选地，所述药物产品类型包括mrna药物、dna药物、蛋白药物或腺病毒药物。8.根据权利要求5或6所述的应用，其特征在于，所述产品中还修饰有用于穿过血脑屏
障的结构；优选地，所述修饰的穿过血脑屏障的结构为大脑靶向配体；优选地，所述大脑靶向配体，包括但不限于rvg肽、硬脂酸-转铁蛋白、载体蛋白e。9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述药物中还包括有可联合使用的治疗用药；优选地，所述可联合使用的治疗用药分别为尿激酶、链激酶、阿替普酶、瑞替普酶或组织性纤维酶原激活剂。10.一种生物材料，其特征在于，所述生物材料为能够表达权利要求1所述蛋白的核酸分子或权利要求2所述纤维蛋白原相关蛋白1的核酸分子或含有所述核酸分子的表达盒、重组载体、重组菌或转基因细胞系。

技术总结
本发明提供了一种含有可与底物GPRP肽段结合的氨基酸序列的蛋白、含有此氨基酸序列的纤维蛋白原相关蛋白1(FGL1)以及其纤维原蛋白结构域(FD)，并且单独的FD结构域蛋白也具有与FGL1相同或类似的功能。FGL1和FD，与现有的药物具有不同的作用机制，可以通过竞争纤维蛋白底物结合口袋，从而抑制血栓形成过程中纤维蛋白的组装，通过突变，可以使其具有更强的底物亲和力，能够有效增强血栓治疗药物的使用效果。果。果。


技术研发人员：董咸池 刘雯 丁建平 石雨 徐曙彤 徐建波
受保护的技术使用者：中国科学院分子细胞科学卓越创新中心 华中农业大学
技术研发日：2021.11.02
技术公布日：2022/1/25