用于治疗眼部疾病的组合物和方法与流程

技术特征：
1.一种组合物，其包含：(i)第一多核苷酸，其中所述第一核苷酸包含与第一启动子可操作连接的第一序列和与第二启动子可操作连接的第二序列，所述第一序列编码腺相关病毒(aav)衣壳蛋白，所述第二序列编码aav rep蛋白，所述第一启动子和所述第二启动子适于在昆虫细胞中表达，以及(ii)第二多核苷酸，其中所述第二多核苷酸包含与cmv、cag、mndu3、pgk、ef1a启动子或眼部特异性启动子可操作连接的第三序列，所述第三序列编码血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，vegf)抑制剂。2.如权利要求1所述的组合物，其中所述vegf抑制剂是vegf抗体或其抗原结合片段。3.如权利要求1所述的组合物，其中所述vegf抑制剂包含seq id no 1、2和3的序列。4.如权利要求1所述的组合物，其中所述vegf抑制剂包含seq id no 4、5和6的序列。5.如权利要求1所述的组合物，其中所述vegf抑制剂包含seq id no 7的序列。6.如权利要求1所述的组合物，其中所述vegf抑制剂包含seq id no 8的序列。7.如权利要求1所述的组合物，其中所述昆虫细胞是sf9细胞。8.如权利要求1所述的组合物，其中所述第一启动子或第二启动子是p10启动子。9.如权利要求1所述的组合物，其中所述第一启动子或第二启动子是polh启动子。10.如权利要求1所述的组合物，其中所述眼部特异性启动子选自rpe 65基因启动子、人类视黄醛结合蛋白(cralbp)基因启动子、鼠类11-顺式视黄醇脱氢酶(rdh)基因启动子、视紫红质启动子，视紫红质激酶启动子(rhodoposin kinase promoter)、金属蛋白酶3的组织抑制剂(timp3)启动子、感光素类视黄醇结合蛋白启动子和玻璃体黄斑营养不良2(vitelliform macular dystrophy 2)启动子、光受体间类视色素结合蛋白(interphotoreceptor retinoid-binding protein，irbp)启动子。11.如权利要求1所述的组合物，其中所述第一序列在3’末端进一步包含多聚a序列。12.如权利要求1所述的组合物，其中所述第二序列在3’末端进一步包含多聚a序列。13.如权利要求1所述的组合物，其中所述第一序列和所述第二序列由编码接头的序列连接。14.如权利要求13所述的组合物，其中所述接头是可裂解接头。15.如权利要求13所述的组合物，其中所述接头包含2a肽的序列。16.如权利要求13所述的组合物，其中所述编码接头的序列进一步包含启动子。17.如权利要求16所述的组合物，其中所述启动子为fmdv启动子。18.如权利要求1所述的组合物，其中所述第三序列在3’末端进一步包含多聚a序列。19.如权利要求1所述的组合物，其中所述第二多核苷酸进一步包含填充序列。20.如权利要求1所述的组合物，其中所述第二多核苷酸进一步包含反向末端重复(itr)序列。21.如权利要求1所述的组合物，其中所述第二多核苷酸进一步包含编码其他治疗性蛋白的第四序列。22.如权利要求21所述的组合物，其中所述其他治疗性蛋白选自下组：vegf抑制剂、pdgf抑制剂、整联蛋白抑制剂、mtor抑制剂、血管生成素抑制剂和tgfβ抑制剂。23.如权利要求21所述的组合物，其中所述第三序列和所述第四序列由编码接头的序
列连接。24.如权利要求23所述的组合物，其中所述接头是可裂解接头。25.如权利要求23所述的组合物，其中所述接头包含2a肽的序列。26.一种重组腺相关病毒(raav)颗粒，其通过将权利要求1-25任一项的组合物转染至昆虫细胞制备。27.如权利要求26所述的raav颗粒，其中所述昆虫细胞为sf9细胞。28.一种在有需要的受试者中治疗眼部疾病的系统，其包括将权利要求26-27任一项的raav颗粒和药学上可接受的载体。29.一种在有需要的受试者中用于治疗眼部疾病的方法，其包括将治疗上有效量的权利要求28的系统施用至所述受试者。30.如权利要求29所述的方法，其中所述眼部疾病选自：湿性年龄相关性黄斑变性(wet amd)、糖尿病性视网膜病变、糖尿病性黄斑水肿、增生性糖尿病性视网膜病变和黄斑水肿。31.一种试剂盒，其包含如权利要求28所述的系统和说明书。

技术总结
本发明涉及一种用于治疗眼部疾病的系统，以及使用所述系统治疗眼部疾病的方法。以及使用所述系统治疗眼部疾病的方法。


技术研发人员：赵巍 施中东
受保护的技术使用者：英斯培瑞有限公司
技术研发日：2020.07.21
技术公布日：2022/1/21