一种含有抗衰活性成分的组合物及在面部抗衰中的应用的制作方法

1.本发明属于日化用品技术领域，具体地说，本发明涉及一种含有抗衰活性成分的组合物及在面部抗衰中应用的技术领域。
技术背景
2.皮肤是人体的第一道重要屏障，而面部皮肤长期暴露在外，风吹日晒后表皮细胞容易被氧化，使得面部皮肤变得干燥。紫外线过强时有可能会造成面部皮肤灼伤、发炎，从而留下疤痕。并且随着年龄的增加，皮肤细胞更新减慢，导致表皮细胞衰老和凋亡，皮肤内胶原蛋白流失，造成色素沉淀并留下雀斑。到老年期颗粒层逐渐萎缩至消失，棘细胞生存期缩短。表皮细胞核分裂增加，黑色素增多，故老年人肤色多呈现棕黑色。此外，未脱落的老化细胞附着于角质层，使皮肤表面变硬无光泽。
3.常见的抗衰老的机制：一种是基因水平的改善，遗传基因是决定皮肤衰老的最为关键的内源性因素。皮肤衰老的本质是细胞分裂增殖速度与老化速度之间的失衡，因此从细胞水平而言，抗衰应从促进细胞分裂、增殖的角度出发来平衡细胞的增殖和老化。另一种是抗紫外线、抗氧化，随着年龄的增加和紫外线照射，皮肤弹力纤维逐渐变性、增厚，胶原蛋白含量逐渐减少。紫外线诱导产生自由基，过量的自由基增加了细胞膜内磷脂的过氧化作用，并产生弹性酶，使弹性纤维性质发生改变。此外，过量的自由基直接损伤血管，诱导炎症，释放胶原酶，进一步加速真皮结缔组织破坏，同时血管炎症使血管壁通透性降低，造成血液循环障碍，导致代谢产物堆积，因此，抗紫外线和抗氧化是皮肤抗衰老的重要方法。
4.抗衰活性成分的组合物主要是柿叶果酸，它是从柿科植物柿叶中提取的果酸类物质，其酸性较弱，不会引起过敏、灼伤等不良反应，其最主要作用是祛斑美白。瑞士antny实验室曾用透明玻璃测定柿叶果酸阻断紫外线的能力，经测定，仅有8％的紫外线能穿透涂有柿叶果酸的玻璃，其阻断紫外线的能力达92％，比天然橄榄油稍弱。涂有柿叶果酸的皮肤在两小时内能抵御大部分紫外线的侵袭，两小时后，随着皮肤的吸收和汗液(碱性)的中和，抵御紫外线能力将迅速下降。因此，柿叶果酸不仅在基因水平，改善皮肤细胞的新陈代谢，而且也有效抵御紫外线、抵抗自由基的侵袭。
5.柿叶果酸目前提取方法很多，主要有回流提取法、索氏提取、浸提法、超声波提取法、微波提取、超临界萃取法、亚临界水萃取、双水相萃取法网、常温超高压提取法、沉淀吸附法、微波预处理-回流提取联合工艺法等。实验室常用的主要是回流提取法、索氏提取法、微波辅助提取、超声辅助法，其中超声提取法得率较低，且需要多次提取，试剂需求量较大，产物生物活性不高，而回流提取法、浸提法和索氏提取所用时间较长、效率低下，其他方法如超临界流体萃取等萃取法和超高压提取法等对设备要求高、成本高。


技术实现要素：

6.本发明针对现有技术中抗衰活性成分的组合物提取方式存在效率低、试剂需求量大以及对设备要求高成本高等的技术问题。本发明旨在于如何改善现有报道中关于抗衰活
性成分的组合物的提取成本高、对设备要求高以及提取活性低等技术现状。本发明具体提供一种抗衰活性成分的组合物的提取方法及其应用，该提取方法通过优化原料处理、浸提、离心、蒸馏等工艺获得高生物活性的抗衰活性成分的组合物，将其应用于护肤品中，通过面部渗透吸收，抗衰活性成分的组合物在维持皮肤和肌肉组织的正常代谢基础上，抵抗自由基能力增强，皮肤胶原蛋白的更替进行顺畅，有效地延长了皮肤出现皱纹的时间。同时该提取物能水解酪氨酸酶的肽健，从而彻底抑制酪氨酸酶的活性，避免皮肤色斑的形成；并能穿透黑色素细胞膜与细胞核结合，阻断黑色素的营养来源，在皮肤新陈代谢过程中将黑色素逐渐分解，本发明提供组合物的提取方法得到的抗衰活性成分的组合物，不仅成本低、操作简单、试剂容易回收，且提取物活性更高，能够有效分解皮肤中的黑色素，解决了现有产品无法将黑色素分解的技术问题，在护肤品中的应用开发领域具有广泛的实用价值。
7.本发明提供的一种抗衰活性成分的组合物的提取方法，包括以下步骤：
8.(1)将新鲜柿叶放入水中清洗干净，再以1:5-50的料液比放入蒸馏水中煮沸20min后捞出柿叶。
9.(2)将步骤(1)处理好的柿叶干燥至恒重，放入超微粉碎机中粉碎，再过100目筛网，得柿叶粉。
10.(3)向步骤(2)制得的柿子粉中加入1:5-50的75％乙醇，然后将混合溶液放置到微波功率为100～500w的微波炉中进行30s的微波处理。
11.(4)将步骤(3)的混合溶液用冰水浴迅速冷却至2-8℃，再转移至温度为10℃转速为50-300r/min的恒温摇床，震荡20-60min。
12.(5)将步骤(4)制得的样品转移至用无水乙醇洗涤3次的50ml的离心管中，于4500r/min离心10min。
13.(6)取出步骤(5)离心后样品的上清液转入旋转蒸发仪蒸馏圆底烧瓶中，温度设置为43℃，转速为75r/min，蒸干乙醇，即得一种抗衰活性成分的组合物。
14.同时本发明提供一种柿叶果酸提取方法获得的柿叶果酸提取物在护肤品中的应用应用。
15.通过本发明提供的上述技术方案实施本发明内容，可以达到以下有益效果：
16.(1)本发明中，抗衰活性成分的组合物采用微波提取加蒸馏的方式，设备简单，且蒸馏的气体主要为乙醇，回收后可再次利用，成本低且安全。
17.(2)抗衰活性成分组合物在水中的溶解度极低、油相中溶解度不理想，在表面活性剂及溶剂中溶解度较好，特别是cremopher el、tween80、乙醇、peg400以及transcutol p中溶解度较高，本发明主要使用乙醇提取，提取浓度更高，产品品质更好。
18.(3)本发明提取的抗衰活性成分的组合物用于防晒霜中不仅有抑制黑色素生成的功效，还能促进胶原蛋白的正常生成，增强皮肤弹性，减缓衰老。安全可靠温和不伤肤，连续涂抹可改善皮肤肤质。这也表明本发明提取方法获得的柿叶果酸提取物活性更高，能有效抑制黑色素的生成，从而减少色斑的生成。
19.说明书附图
20.无
具体实施方式
21.下面，举实施例说明本发明，但是，本发明并不限于下述的实施例。本发明中选用的所有原辅材料都为本领域熟知选用的。
22.实施例1：一种抗衰活性成分的组合物提取方法
23.一种柿叶果酸的提取方法，包括以下步骤：
24.(1)将新鲜柿叶放入水中清洗干净，再以1:5-50的料液比放入蒸馏水中煮沸20min后捞出柿叶。
25.(2)将步骤(1)处理好的柿叶干燥至恒重，放入超微粉碎机中粉碎，再过100目筛网，得柿叶粉。
26.(3)向步骤(2)制得的柿子粉中加入1:5-50的75％乙醇，然后将混合溶液放置到微波功率为100～500w的微波炉中进行30s的微波处理。
27.(4)将步骤(3)的混合溶液用冰水浴迅速冷却至2-8℃，再转移至温度为10℃转速为50-300r/min的恒温摇床，震荡20-60min。
28.(5)将步骤(4)制得的样品转移至用无水乙醇洗涤3次的50ml的离心管中，于4500r/min离心10min。
29.(6)取出步骤(5)离心后样品的上清液转入旋转蒸发仪蒸馏圆底烧瓶中，温度设置为43℃，转速为75r/min，蒸干乙醇，即得一种抗衰活性成分组合物。
30.实施例2：一种抗衰活性成分的组合物提取方法
31.在实施例1的提取方法的基础上，提供一种抗衰活性成分的提取方法，将新鲜柿叶以1:5的液料比放入蒸馏水中煮沸，干燥后粉碎，过100目筛网，得柿子粉。再以1:5的液料比向柿子粉中加入75％乙醇，将混合溶液以功率100w进行微波处理30s后冰水浴冷却至2-8℃，再把样液转移至温度为10℃的恒温摇床，以转速50r/min震荡20min。
32.实施例3：一种抗衰活性成分的组合物提取方法
33.在实施例1的提取方法的基础上，提供一种抗衰活性成分的提取方法，将新鲜柿叶以1:10的液料比放入蒸馏水中煮沸，干燥后粉碎，过100目筛网，得柿子粉。再以1:10的液料比向柿子粉中加入75％乙醇，将混合溶液以功率200w进行微波处理30s后冰水浴冷却至2-8℃，再把样液转移至温度为10℃的恒温摇床，以转速100r/min震荡25min。
34.实施例4：一种抗衰活性成分的组合物提取方法
35.在实施例1的提取方法的基础上，提供一种抗衰活性成分的提取方法，将新鲜柿叶以1:20的液料比放入蒸馏水中煮沸，干燥后粉碎，过100目筛网，得柿子粉。再以1:15的液料比向柿子粉中加入75％乙醇，将混合溶液以功率300w进行微波处理30s后冰水浴冷却至2-8℃，再把样液转移至温度为10℃的恒温摇床，以转速150r/min震荡30min。
36.实施例5：一种抗衰活性成分的组合物提取方法
37.在实施例1的提取方法的基础上，提供一种抗衰活性成分的提取方法，将新鲜柿叶以1:25的液料比放入蒸馏水中煮沸，干燥后粉碎，过100目筛网，得柿子粉。再以1:20的液料比向柿子粉中加入75％乙醇，将混合溶液以功率350w进行微波处理30s后冰水浴冷却至2-8℃，再把样液转移至温度为10℃的恒温摇床，以转速200r/min震荡30min。
38.实施例6：一种抗衰活性成分的组合物提取方法
39.在实施例1的提取方法的基础上，提供一种抗衰活性成分的提取方法，将新鲜柿叶
以1:40的液料比放入蒸馏水中煮沸，干燥后粉碎，过100目筛网，得柿子粉。再以1:40的液料比向柿子粉中加入75％乙醇，将混合溶液以功率400w进行微波处理30s后冰水浴冷却至2-8℃，再把样液转移至温度为10℃的恒温摇床，以转速250r/min震荡45min。
40.实施例7：一种抗衰活性成分的组合物提取方法
41.在实施例1的提取方法的基础上，提供一种抗衰活性成分的提取方法，将新鲜柿叶以1:50的液料比放入蒸馏水中煮沸，干燥后粉碎，过100目筛网，得柿子粉。再以1:50的液料比向柿子粉中加入75％乙醇，将混合溶液以功率500w进行微波处理30s后冰水浴冷却至2-8℃，再把样液转移至温度为10℃的恒温摇床，以转速300r/min震荡60min。
42.实施例8：一种抗衰活性成分的组合物提取方法的正交试验
43.基于上述实施例2-实施例7，以微波功率(a)、恒温摇床转速(b)、恒温摇床震荡时间(c)为试验因素，以抗衰活性成分提取量为考察指标，综合评分法，选用l9(33)正交试验优化抗衰活性成分的组合物制备方法，每个因素设置三个水平见表1。
44.表1：l9(33)正交试验因素水平设计表
[0045][0046]
表2：柿叶果酸的制备方法l9(34)正交优化试验结果
[0047]
[0048]
由表1、2可知，制备方法的各参数对抗衰活性成分提取量的综合评分影响顺序为a＞b＞c，即微波功率＞恒温摇床转速＞恒温摇床震荡时间，得到最佳的组合为a2b2c2，即最佳的改良参数为实施例5微波功率350w恒温摇床200r/min、恒温摇床震荡时间30min。
[0049]
实施例9：一种抗衰活性成分的组合物应用于护肤品的小鼠实验
[0050]
将本发明提供的制备方法获得的抗衰活性成分的组合物用于一款防晒霜的制备，将市售普通防晒霜作为对照。
[0051]
(1)试验设计
[0052]
试验动物：成年小鼠80只，雌雄各半，体重18-22g。
[0053]
试验方法：将所有小鼠随机分为试验组，对比组和空白组三大组，各组小鼠用0.8％的硫化钠背部脱毛，暴露4cm
×
4cm的测试区1块，涂抹测试品。涂抹受试样品前先用温水清洗皮肤，期间及时剃去新长出的鼠毛。每组10只，各组按照2g，1次/日涂抹，对比组涂抹市售普通防晒霜，空白组涂抹同体积的生理盐水，涂抹后放入阳光模拟试验箱中4h，连续涂抹30天后用自体黑色素细胞检测仪检测皮肤中黑色素含量值，试验结果见表3。
[0054]
表3：不同试验组对小鼠中黑色素含量值的影响试验
[0055][0056]
由表3数据可知，利用自体黑色素细胞检测仪检测，实施例2-7涂抹区的皮肤黑色素产生量量明显低于对照一组，尤其是实施例5组，并且在整个实验过程中未出现任何不良反应。说明本发明提供的抗衰活性成分组合物的防晒霜可以阻断黑色素的生成，随之减少色斑的生成，还具有安全可靠温和不伤肤的特性，连续涂抹可改善皮肤肤质，增强皮肤弹性。
[0057]
实施例10：一种抗衰活性成分的组合物应用于护肤品的对比实验
[0058]
以本发明实施例提供的制备方法制备的抗衰活性成分组合物的防晒霜与市售防晒霜(对照1)进行使用试验，验证本发明柿叶果酸对肤质的改善效果，同时对本发明实施例2-7以进行验证试验，每组经50名试验者试用(试用女性均为35-45岁之间，且面部皮肤粗糙、有色斑)，每天早起擦拭一次，连续一个月。考察使用效果，特别是对肤质改善的效果，再用羟脯氨酸检测法检测皮肤内胶原蛋白的含量，具体结果见表4所示。
[0059]
表4：本发明提供的制备方法制备的抗衰活性成分组合物的防晒霜与市售普通防晒霜应用验证对比
[0060][0061]
由表4数据可知，本发明提供的抗衰活性成分组合物的提取方法得到的抗衰防晒霜与市售普通防晒霜使用试验，结果发现，本发明提供的抗衰防晒霜在改善肤质效果上明显优于现有的市售防晒霜，尤其是实施例5组，且对皮肤的副作用小，这与原料的选择及原料的处理方法相关，也进一步证明了本发明提取的抗衰活性成分组合物用于防晒霜中不仅有抑制黑色素生成的功效，还能促进胶原蛋白的正常生成，增强皮肤弹性，减缓衰老。其中，本发明提供的技术方案中，实施例5提供的抗衰活性成分组合物提取工艺具有最佳效果。因此本发明开发的一种抗衰活性成分组合物具有很好的应用前景。
[0062]
需要说明的是：本发明实施例2-7制备的制备方法制备的细胞抗衰防晒霜同样具有上述试验效果，各实施例之间与上述试验效果差异不大。
[0063]
上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所延伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之中。