一种改善记忆力降血脂的组合物及其制备方法和应用与流程

1.本发明涉及食品、保健品和药品领域，具体涉及一种改善记忆力降血脂的组合物、其制备方法及其应用。


背景技术：

2.高血脂症是当今社会常见的一种疾病，发病率在逐渐上升，高血脂可以导致动脉粥样硬化，诱发多种疾病，对人体的危害十分严重。中国约有9000万人患有高血脂，知晓率仅有25％，它的致病是一个非常缓慢的过程，因为缺乏不舒服的感觉，往往不能及时发现。目前对高血脂的治疗大部分还是依靠药物治疗，但是药物的副作用也是不容忽视的，因此，健康无副作用的降血脂类产品正被越来越多的人所期盼。
3.学习和记忆是人类智力的主要功能组成部分，是脑的高级机能之一，随着社会的发展，人类所面临的压力也越来越大，许多人由于精神原因导致记忆力减退。此外，随着年龄的增长，记忆力也会逐渐下降。且随着社会人口的老龄化，老年人的人口比例不断上升，记忆力减退人群的比例正逐年加大。因此，健康无副作用的改善记忆类产品也将被越来越多的人所需要。
4.现代医学研究结果表明，高血脂可导致脑动脉和毛细血管内皮细胞功能受损，降低大脑血流量，减少脑动脉的营养和氧供应，从而增加认知功能障碍和痴呆的危险性，临床上老年痴呆患者中伴有血脂高的人所占比例较高，也提示了高血脂与痴呆的发生有一定的关联。大部分高血脂患者同时会伴有头晕、头疼、失眠、记忆力下降、记忆力不集中等症状。
5.所以，人们迫切希望有方便服用、能同时降血脂和改善记忆的产品来满足需要，尽快研究开发具有降血脂和改善记忆双重功能的产品，具有重要社会意义。
6.核桃为胡桃科胡桃属植物。核桃仁含有丰富的蛋白质、磷脂、多种维生素，并含有比例适宜的亚油酸、亚麻酸，享有益智果、长寿果、养人之宝的美称。核桃油集核桃之精华，是我国传统的药食两用佳品，具有多重保健及药用功效。其中富含的多不饱和脂肪酸是一种特殊的生物活性物质，对心脑血管疾病有良好保健和治疗作用。管伟举等指出亚油酸是人体合成前列腺素前驱物质，具有调节血脂、降低胆固醇，提高记忆能力等作用。李建科等研究了核桃油对小鼠血脂的影响，结果核桃油试验组小鼠的血清甘油三脂(tg)、总胆固醇(tc)和动脉硬化指数(ai)均不同程度低于高脂模型组，而高密度脂蛋白(hdl
‑
c)却显著高于高脂模型组。结果表明核桃油有显著降低血脂的作用。杨栓平等研究了核桃油和核桃油复合维生素e对大鼠血浆脂质的影响，结果核桃油能明显降低雄性高脂血症大鼠血中的总胆固醇(tc)、甘油三酯(tg)、升高载脂蛋白ai(apo
‑
ai)，明显降低雌性高脂血症大鼠血中的tg水平，升高其apo
‑
ai，表明其具有降血脂的作用。核桃油含有比例适宜的亚油酸、亚麻酸。戴毅等研究了α
‑
亚麻酸和γ
‑
亚麻酸对高脂血症人群的降血脂作用，结果试验组血清tc、tg水平显著降低，血清hdl
‑
c水平显著上升；试验组自身比较，试验后血清tc和tg水平显著降低，血清hdl
‑
c水平显著升高。结果表明其具有辅助降血脂功能。张清安等研究了核桃油对小鼠学习记忆能力的影响，结果核桃油可使sdl(跳台潜伏期)延长30.4％
‑
102.5％，使el
(逃避潜伏期)缩短35.3％
‑
58.9％，使迷宫觅食时间减少3.3％
‑
37％，并能明显改善nano2和乙醇引起的记忆损害。研究结果表明核桃油可明显改善小鼠学习记忆能力。王志平等研究了核桃油及维生素e复合核桃油对小鼠记忆的影响。实验结果表明核桃油高剂量组能显著延长小鼠存活时间和促进戊巴比妥钠的催眠，说明核桃油有改善脑缺血，促进睡眠的作用。而核桃油及ve核桃油均具有显著的提高大鼠学习记忆的能力。
7.大豆磷脂是存在于大豆中的各种磷酸甘油酯及其衍生物的总称，包括甘油醇磷脂和神经醇磷脂两大类，其中甘油醇磷脂主要包括磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇和丝氨酸磷脂。大豆磷脂具有较广泛的生理活性功能，能调节人体细胞膜，防治动脉硬化，保持血管壁细胞的流动性，改善脂质代谢，澄清血液，防治高血脂症；改善肝脏脂质代谢、糖代谢、蛋白质代谢，改善和提高神经功能，防老年痴呆。何新霞等研究了大豆磷脂对大鼠实验性高脂血症的预防作用，大鼠在食用高脂饲料的同时，灌服大豆磷脂血清hdl
‑
c浓度显著升高，ldl
‑
c浓度显著降低，说明大豆磷脂对大鼠实验性高脂血症有预防作用。邵邻相等研究了复合磷脂和大豆磷脂对大鼠血脂和心肌丙二醛及脉搏波的影响，结果大豆磷脂能明显降低大鼠血清胆固醇(tc)、甘油三脂(tg)及低密度脂蛋白胆固醇(ldl)的含量。结果表明大豆磷脂具有降血脂的作用。池莉平等研究了大豆卵磷脂辅助降血脂功能实验，结果大豆卵磷脂三个剂量组的tc、tg水平均较高脂模型对照组降低，结果表明大豆卵磷脂具有调节血脂作用。巩菊芳等研究了大豆磷脂对小鼠学习记忆及海马脂肪酸含量的影响，结果与对照组比较，高、中剂量组小鼠学习记忆能力均显著增强；低剂量组小鼠记忆力明显改善。结果表明大豆磷脂能明显提高小鼠学习记忆能力。池莉平等研究了大豆卵磷脂改善记忆作用动物实验，通过跳台实验、避暗实验及水迷宫试验，对喂饲大豆卵磷脂高、中、低三种剂量的小鼠记忆改善情况进行观察。结果对动物的被动回避反应及空间辨别能力的记忆获得有改善作用。结果表明大豆卵磷脂具有改善记忆的功能。巩菊芳等研究了大豆磷脂对小鼠学习记忆及脑组织脂类成分的影响，结果大豆磷脂可明显提高小鼠脑组织中蛋白质、pufa(脂肪酸)和pl(磷脂)的含量，显著改善小鼠学习记忆能力。
8.银杏叶为银杏科植物银杏ginkgo biloba l.的干燥叶。现代研究表明银杏叶提取物具有抗血小板活化因子(paf)、抗脑缺血缺氧、降血脂、清除自由基、松弛支气管平滑肌、抗炎及增强神经系统活性等作用，对冠心病、高血压、心绞痛、动脉硬化、脑功能减退、老年性痴呆、记忆减退、衰老等与心脑血管循环有关的疾病有显著的预防和治疗效果。张琪等研究了银杏叶提取物对实验性高脂血症大鼠的调脂机制，结果银杏叶提取物对大鼠实验性高脂血症具有显著的预防和治疗作用。其作用机制可能与药物提高lpl(脂蛋白脂酶)和hl(肝脂酶)的活性并加速体内胆固醇的代谢有关。苗军等研究了银杏叶提取物对实验性高脂血症血脂代谢的影响实验，研究表明银杏叶提取物通过调整脂蛋白
‑
胆固醇代谢，纠正自由基代谢紊乱，增强抗氧化酶活性等途径发挥调血脂作用。李健等研究了低温游泳结合银杏叶提取物给药对高脂血症大鼠血脂代谢的影响的实验，低温游泳联合银杏叶提取物给药可以调节高血脂大鼠血脂代谢，明显降低血液总胆固醇和甘油三酯，有助于高脂血症的改善。吴禹等研究了银杏叶提取物对大鼠学习记忆能力的影响，结果银杏叶提取物可增强缺血脑组织sod(超氧化物歧化酶)和gsh
‑
px(谷胱甘肽过氧化物酶)活力，降低mda(丙二醛)含量，清除氧自由基，抑制神经细胞凋亡，改善血管性痴呆大鼠学习记忆能力。杨占军等研究了银杏叶提取物对衰老小鼠学习记忆障碍的改善作用，结果银杏叶提取物对于衰老小鼠的学习、
记忆障碍有明显的改善作用。邢淑华等研究了银杏叶提取物对小鼠学习记忆的影响，结果银杏叶提取物可减少小鼠跳台错误次数，延长sdl，缩短el；并能显著提高小鼠的空间辨别学习成绩，改善氯胺酮、地西泮引起的学习记忆障碍。结果表明银杏叶提取物可提高小鼠的学习记忆功能。
9.维生素e是最主要的抗氧化剂之一。其具有增强免疫、抗氧化、调节血脂、改善记忆等多种功能。周泉城等研究了维生素e对小鼠高血脂的预防作用，结果表明维生素e可以降低低密度脂蛋白，调节胆固醇的吸收率，增加脂质的排泄，从而起到明显降血脂的效果。王爱华等研究了维生素e对脑血管病血脂影响，研究结果表明维生素e是自由基清除剂，具有抗氧化作用，能调节脂质异常代谢。庞婧等研究了低温与维生素e对笼养蛋雏鸭生长性能、抗氧化能力及血糖血脂的影响的实验，研究结果表明维生素e能显著改善生长性能，提高机体抗氧化能力，在一定程度上调节机体血脂代谢。赵琳等研究了维生素e对阿尔茨海默病模型鼠学习记忆能力的影响，结果维生素e可预防化学诱导的小鼠学习记忆能力损伤，机制与提高sod(超氧化物歧化酶)活性、降低mda(丙二醛)含量、降低ache(乙酰胆碱酯酶)活性等相关。修彬华等研究了维生素e对癫痫大鼠认知功能障碍的治疗作用，结果维生素e可改善癫痫持续状态后大鼠认知功能。潘天荣等研究了甲状腺素和维生素e干预对甲减大鼠认知能力的影响，结果维生素e能够改善甲状腺功能减退大鼠的认知功能。
10.专利文献已公开了一些降血脂或改善记忆的保健品，多数配方简单，难以达到同时具备很好的降血脂和改善记忆双重功能的效果。如申请号为cn201510685443.3一种改善记忆功能保健茶的制备方法的中国发明专利公开了一种改善记忆力的保健食品，配方是以银杏叶、葛根、山楂为主要原料，经粉碎、灭菌而制成，不但工艺过于简单，服用量大，未进行功能验证和安全性评价，而且仅标称有改善记忆的功能，没有降低血脂的功能。申请号为201510234146.7一种降低血脂粘稠度的中药组合物及制备方法及应用的发明专利公开了一种含有银杏叶、葛根原料的降低血脂的产品制备方法，所用药材品种数高达38味，不但组方过于庞杂，银杏叶、葛根作为主要功能原料，工艺简单、功能和安全性试验评价资料缺乏，难以评估其降低血脂的功能，而且仅标称有降低血脂的功能，没有改善记忆的功能。所以这些多为仅具有改善记忆或降血脂单方面作用的配方产品。也有部分产品为了达到降血脂和改善记忆双重功能的效果，就选用了多种植物原料，如申请号为cn201810149312.7的一种降血脂和/或改善记忆力的中药组合物及其应用，是由银杏叶、葛根、山楂、葡萄籽、生姜和绿茶或这些的提取物组成，但是因为其都是植物或其提取物，为了达到一定的效果，就不得不选用多达6种植物，且服用量不得不特别大，且因为葡萄籽、生姜和绿茶都是味道比较大的材料，口感就不好，人们往往不愿意服用，难以发挥其保健功效。
11.综上所述，现有技术中具有降血脂或改善记忆的保健品中，有的组分过于简单，难以达到效果，有的配方过于复杂、服用量大且功能和安全性评价缺乏，难以评估其效果，而且大都仅有单一功效。即使个别的配方为了达到降血脂和改善记忆的双重功效，也因服用量太大，口感不好，难以发挥其作用。
12.产品的原料中核桃油、天然维生素e均为油状，适宜做成软胶囊。相对于其他剂型，软胶囊具有以下优点：
13.吸收快；含量准确；生物利用度高，减少患者的服用剂量；稳定性好，不易吸潮；密封性好，遮盖了药物的不良气味；服用方便，外观美观，受人欢迎。因此，选用软胶囊作为本
产品的剂型，能够更好地的挥本产品的改善记忆降血脂的作用，具有更好的经济效益和社会效益。


技术实现要素：

14.本发明提供了一种改善记忆力降血脂的组合物及其制备方法和应用，目的是为了解决现有技术中具有降血脂或改善记忆的保健品中，有的组分过于简单，难以达到效果，有的配方过于复杂、服用量大且功能和安全性评价缺乏，难以评估其效果，而且大都仅有单一功效的问题，解决个别的配方为了达到降血脂和改善记忆的双重功效，但是服用量太大，口感不好，难以发挥其作用的问题。
15.本发明的技术方案如下：
16.本发明提供一种改善记忆力降血脂的组合物，是主要由核桃油、大豆磷脂、银杏叶提取物、天然维生素e作为原料组成，加上合适的辅料，采用科学合理的生产工艺加工制成合适的产品，达到降血脂和改善记忆的功能效果，所用辅料为大豆油、蜂蜡、明胶、甘油、纯化水、二氧化钛、可可壳色素。
17.本发明优选剂型为软胶囊剂。
18.上述组合物按重量份数计为核桃油280
‑
320份、大豆磷脂45
‑
55份、银杏叶提取物18
‑
22份、天然维生素e7.6
‑
8.6份。
19.辅料为按重量份数计的大豆油130
‑
150份、蜂蜡17
‑
20份、明胶450
‑
520份、甘油200
‑
220份、纯化水450
‑
480份、二氧化钛1.6
‑
2.0份、可可壳色素0.76
‑
0.86份。
20.作为优选，组合物配方比例按重量份数计为核桃油300份、大豆磷脂50份、银杏叶提取物20份、天然维生素e8份、大豆油140份、蜂蜡18份、明胶500份、甘油210份、纯化水470份、二氧化钛1.8份、可可壳色素0.8份。
21.上述改善记忆力降血脂的组合物主要应用于制成食品、药物或保健品领域。
22.上述改善记忆力降血脂的组合物应用于制备软胶囊、胶囊、颗粒、片剂、丸剂、口服液等可接受的口服剂型。
23.上述改善记忆力降血脂的组合物的制备方法为：
24.(1)将所述核桃油和所述大豆油混合，搅拌使混合均匀，加热至70
‑
80℃，加入蜂蜡，使蜂蜡完全熔融，搅拌使混合均匀，得油蜡混合液；
25.(2)将所述银杏叶提取物、大豆磷脂、天然维生素e加入到步骤(1)所述的油蜡混合液中，搅拌30min，通过胶体磨处理3次，再通过100目滤网过滤，于真空度
‑
0.06mpa条件下抽真空脱气泡，得囊芯料液；
26.(3)将纯化水加入化胶罐中，加热至60℃，加入明胶、甘油，加热至70℃，搅拌使之成为均匀的胶液后，加入可可壳色素和二氧化钛，搅拌使混合均匀，恒温2小时，于真空度
‑
0.06mpa条件下抽真空脱气泡，再通过100目滤网过滤，得囊皮胶液，60
‑
65℃保温，备用；
27.(4)取囊芯料液和囊皮胶液，用制丸机制丸，制成0.6g/粒的胶丸，在温度18
‑
26℃、湿度30
‑
40％的条件下定型胶丸，然后用95％乙醇洗涤胶丸，洗过的胶丸于温度20
‑
25℃、湿度20
‑
30％的条件下干燥，将囊扁丸、漏油丸等不合格丸挑出，合格的胶丸装成90粒/瓶，得成品软胶囊。
28.其中：
29.核桃油提取制备工艺为：将品质完好的核桃果剥除去外壳，得核桃仁，将核桃仁洗净，干燥，采用冷榨型榨油机，直接冷榨，得到核桃油，将核桃油静置24小时，取上清液过滤，弃其滤渣，滤液灌装，即得核桃油产品；
30.大豆磷脂提取制备工艺为：挑选成熟饱满大小均匀的优质大豆,用清水洗净，放入烘箱中，于50
‑
70℃温度烘干，用超微粉碎机粉碎成细粉，加入大豆份重量比2.5
‑
3.5％的10％纤维素酶溶液，加入大豆粉1倍体积的水，搅拌均匀，在45
‑
60℃温度保温1
‑
2小时,再向溶液中加入大豆粉2倍体积的水，加热煮沸，用纱布过滤，除去大颗粒杂质，留下的溶液通过超滤膜处理，收集超滤透过液，加热浓缩，收集浓缩液，真空低温(小于80℃)干燥，得成品。
31.银杏叶提取物制备工艺为：选取干净无杂的银杏叶，加入银杏叶3倍量的70％乙醇，回流提取2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，加银杏叶1.5倍体积的水，搅拌均匀，离心，上清液过滤，滤液通过大孔吸附树脂柱，保持滤液高度高于树脂，保持3小时，然后用银杏叶3倍体积的水洗涤，再用银杏叶4倍量的70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.08
‑
1.12的浸膏液，喷雾干燥，得干浸膏粉，粉碎，过筛，即得银杏叶提取物。
32.天然维生素e制备工艺为：取用大豆制备了大豆油的大豆剩余固体物料，加入1倍量的水，搅拌混合均匀，置刮膜蒸发器中，于真空度
‑
0.06mpa条件下蒸发，除去其中的水和挥发性物质，然后在处理后的油状物中加入2倍量的乙醇，搅拌混合均匀，再加入油状物重量0.04
‑
0.06％的氯化锌和0.6
‑
0.8％的四氢吡喃，室温搅拌，静置24小时，通过80目过滤，滤渣加入滤渣1倍量乙醇使溶解，再加入滤渣0.1倍量的10％乙酸水溶液，搅拌混合均匀，加热至45～55℃，保持温度搅拌2小时，静置24小时，通过100目过滤，滤液于真空度
‑
0.06mpa条件下蒸发浓缩，得到天然维生素e产品。
33.本发明所用的核桃油、大豆磷脂、银杏叶提取物、天然维生素e中的一种或者几种或者全部，可以自行制备，也可以从市场购买。
34.本发明的有益效果：
35.本发明提供的一种改善记忆力降血脂的组合物，配方合理，工艺简单可行，服用方便，服用量小，改善记忆、降血脂方面效果明显，无毒副作用，可以广泛应用。
36.本发明选用纯天然、无添加、未发生氧化、无副产物的核桃油；选用无添加、未发生氧化、无副产物、无溶剂残留、纯度高的大豆磷脂；选用无溶剂和添加剂的残留、没有发生热损失、纯度高、完整地保留了天然维生素e的四种生育酚成份的天然维生素e；核桃油、大豆磷脂、银杏叶提取物、天然维生素e几种成份配方合理，协同增效，使改善记忆、降血脂方面效果比任何一种和/或几种的效果提高了几倍，而且安全性好，可以长期服用，便于很好地发挥其改善记忆、降血脂的作用。本技术推广应用以后，能够很好地预防高血脂症，解决高血脂症发病率在逐渐上升，导致动脉粥样硬化，诱发多种疾病的问题。能够很好地解决记忆力减退的问题，降低认知功能障碍和痴呆的危险。本技术的实施，将对群众健康和生活质量的提高有很大的帮助，具有很好的经济效益和社会效益。
具体实施方式
37.以下为本发明的具体实施方式，所述的实施例是为了进一步描述本发明，而不是限制本发明。
38.实施例1
39.一种改善记忆力降血脂的组合物，按照以下配方比例取相应物料：按重量份数计的核桃油300份、大豆磷脂50份、银杏叶提取物20份、天然维生素e8份、大豆油140份、蜂蜡18份、明胶500份、甘油210份、纯化水470份、二氧化钛1.8份、可可壳色素0.8份。
40.其中，核桃油、大豆磷脂、银杏叶提取物、天然维生素e按照以下技术方案进行制备操作：
41.提取制备核桃油：将品质完好的核桃果剥除去外壳，得核桃仁，将核桃仁洗净，干燥，采用冷榨型榨油机，直接冷榨，得到核桃油，将核桃油静置24小时，取上清液过滤，弃其滤渣，滤液灌装，即得核桃油产品。
42.大豆磷脂提取：挑选成熟饱满大小均匀的优质大豆,用清水洗净，放入烘箱中，于50
‑
70℃温度烘干，用超微粉碎机粉碎成细粉，加入大豆粉重量比2.5
‑
3.5％的10％纤维素酶溶液，加入大豆粉1倍体积的水，搅拌均匀，在45
‑
60℃温度保温2小时,再向溶液中加入大豆粉2倍体积的水，加热煮沸，用纱布过滤，除去大颗粒杂质，留下的溶液通过超滤膜处理，收集超滤透过液，加热浓缩，收集浓缩液，真空低温(75℃)干燥，得成品。
43.银杏叶提取物制备：选取干净无杂的银杏叶，加入银杏叶3倍量的70％乙醇，回流提取2小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，加银杏叶1.5倍体积的水，搅拌均匀，离心，上清液过滤，滤液通过大孔吸附树脂柱，保持滤液高度高于树脂，保持3小时，然后用银杏叶3倍水洗涤，再用银杏叶4倍量的70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.08
‑
1.12的浸膏液，喷雾干燥，得干浸膏粉，粉碎，过筛，即得银杏叶提取物。
44.天然维生素e制备：取用大豆制备了大豆油的大豆剩余固体物料，加入大豆剩余固体物料1倍量的水，搅拌混合均匀，置刮膜蒸发器中，于真空度
‑
0.06mpa条件下蒸发，除去其中的水和挥发性物质，然后在处理后的油状物中加入油状物2倍量的乙醇，搅拌混合均匀，再加入油状物重量0.04
‑
0.06％的氯化锌和0.6
‑
0.8％的四氢吡喃，室温搅拌，静置24小时，通过80目过滤，滤渣加入1倍量乙醇使溶解，再加入滤渣0.1倍量的10％乙酸水溶液，搅拌混合均匀，加热至45～55℃，保持温度搅拌2小时，静置24小时，通过100目过滤，滤液于真空度
‑
0.06mpa条件下蒸发浓缩，得到天然维生素e产品。
45.软胶囊的制备：
46.将核桃油和大豆油混合，搅拌使混合均匀，加热至70
‑
80℃，加入蜂蜡，使蜂蜡完全熔融，搅拌使混合均匀，得油蜡混合液。将银杏叶提取物、大豆磷脂、天然维生素e加入到上述油蜡混合液中，搅拌30min，通过胶体磨处理3次，再通过100目滤网过滤，于真空度
‑
0.06mpa条件下抽真空脱气泡，得囊芯料液；
47.将纯化水加入至化胶罐中，加热至60℃，加入明胶、甘油，加热至70℃，搅拌使之成为均匀的胶液后，加入可可壳色素和二氧化钛，搅拌使混合均匀，恒温2小时，于真空度
‑
0.06mpa条件下抽真空脱气泡，再通过100目滤网过滤，得囊皮胶液，60
‑
65℃保温，备用；
48.用上述囊芯料液和囊皮胶液，用制丸机制丸，制成0.6g/粒的胶丸，在温度18
‑
26℃，湿度30
‑
40％的条件下定型胶丸，然后用95％乙醇洗涤胶丸，洗过的胶丸于温度20
‑
25℃，湿度20
‑
30％的条件下干燥，将囊扁丸、漏油丸等不合格丸挑出，合格的胶丸装成90粒/瓶，得成品软胶囊。
49.实施例2
50.一种改善记忆力降血脂的组合物，按照以下配方比例取相应物料：核桃油320份、大豆磷脂55份、银杏叶提取物22份、天然维生素e8.6份、大豆油150份、蜂蜡20份、明胶520份、甘油220份、纯化水480份、二氧化钛2.0份、可可壳色素0.86份。
51.其中，核桃油、大豆磷脂、银杏叶提取物按照以下技术方案进行制备操作：
52.提取制备核桃油：将品质完好的核桃果剥除去外壳，得核桃仁，将核桃仁洗净，干燥，采用冷榨型榨油机，直接冷榨，得到核桃油，将核桃油静置24小时，取上清液过滤，弃其滤渣，滤液灌装，即得核桃油产品。
53.提取制备大豆磷脂：挑选成熟饱满大小均匀的优质大豆,用清水洗净，放入烘箱中，于55
‑
75℃温度烘干，用超微粉碎机粉碎成细粉，加入大豆粉重量比2.5
‑
3.5％的10％纤维素酶溶液，加入大豆粉1.2倍体积的水，搅拌均匀，在48
‑
58℃温度保温1.5小时,再向溶液中加入大豆粉2倍体积的水，加热煮沸，用纱布过滤，除去大颗粒杂质，留下的溶液通过超滤膜处理，收集超滤透过液，加热浓缩，收集浓缩液，真空低温(70℃)干燥，得成品。
54.提取制备银杏叶：选取干净无杂的银杏叶，加入银杏叶4倍量的70％乙醇，回流提取1.5小时，滤过，合并滤液，回收乙醇，加银杏叶1.2倍体积的水，搅拌均匀，离心，上清液过滤，滤液通过大孔吸附树脂柱，保持滤液高度高于树脂，保持2小时，然后用银杏叶2倍水洗涤，再用银杏叶4倍量的70％乙醇洗脱，收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩至相对密度为1.07
‑
1.13的浸膏液，喷雾干燥，得干浸膏粉，粉碎，过筛，即得银杏叶提取物。
55.制备软胶囊：将核桃油和大豆油混合，搅拌使混合均匀，加热至72
‑
78℃，加入蜂蜡，使蜂蜡完全熔融，搅拌使混合均匀，得油蜡混合液，将银杏叶提取物、大豆磷脂、天然维生素e加入到上述油蜡混合液中，搅拌25min，通过胶体磨处理3次，再通过100目滤网过滤，于真空度
‑
0.05mpa条件下抽真空脱气泡，得囊芯料液；
56.将纯化水加入至化胶罐中，加热至58℃，加入明胶、甘油，加热至68℃，搅拌使之成为均匀的胶液后，加入可可壳色素和二氧化钛，搅拌使混合均匀，恒温2.5小时，于真空度
‑
0.05mpa条件下抽真空脱气泡，再通过100目滤网过滤，得囊皮胶液，61
‑
66℃保温，备用；
57.用上述囊芯料液和囊皮胶液，用制丸机制丸，制成0.6g/粒的胶丸，在温度20
‑
28℃，湿度35
‑
45％的条件下定型胶丸，然后用95％乙醇洗涤胶丸，洗过的胶丸于温度23
‑
29℃，湿度22
‑
32％的条件下干燥，将囊扁丸、漏油丸等不合格丸挑出，合格的胶丸装成90粒/瓶，得成品软胶囊。
58.实施例3
59.一种改善记忆力降血脂的组合物，按照以下配方比例取相应物料：核桃油280份、大豆磷脂45份、银杏叶提取物18份、天然维生素e7.6份、大豆油130份、蜂蜡17份、明胶450份、甘油200份、纯化水450份、二氧化钛1.6份、可可壳色素0.76份。
60.制备软胶囊：将核桃油和大豆油混合，搅拌使混合均匀，加热至72
‑
78℃，加入蜂蜡，使蜂蜡完全熔融，搅拌使混合均匀，得油蜡混合液。将银杏叶提取物、大豆磷脂、天然维生素e加入到上述油蜡混合液中，搅拌25min，通过胶体磨处理3次，再通过100目滤网过滤，于真空度
‑
0.05mpa条件下抽真空脱气泡，得囊芯料液；
61.将纯化水加入至化胶罐中，加热至58℃，加入明胶、甘油，加热至68℃，搅拌使之成为均匀的胶液后，加入可可壳色素和二氧化钛，搅拌使混合均匀，恒温2.5小时，于真空度
‑
0.05mpa条件下抽真空脱气泡，再通过100目滤网过滤，得囊皮胶液，61
‑
66℃保温，备用；
62.用上述囊芯料液和囊皮胶液，用制丸机制丸，制成0.6g/粒的胶丸，在温度20
‑
28℃，湿度35
‑
45％的条件下定型胶丸，然后用95％乙醇洗涤胶丸，洗过的胶丸于温度23
‑
29℃，湿度22
‑
32％的条件下干燥，将囊扁丸、漏油丸等不合格丸挑出，合格的胶丸装成90粒/瓶，得成品软胶囊。
63.实施例4
64.一种改善记忆力降血脂的组合物，按照以下配方比例取相应物料：核桃油300份、大豆磷脂50份、银杏叶提取物20份、天然维生素e8份、大豆油140份、甘油200份、纯化水470份、杏仁香精10份、环拉酸钠5份。
65.将核桃油、大豆油和甘油混合，搅拌使混合均匀，加热至75
‑
85℃，加入蜂蜡，使蜂蜡完全熔融，搅拌使混合均匀，得油蜡混合液，将银杏叶提取物、大豆磷脂、天然维生素e加入到上述油蜡混合液中，搅拌25min，通过胶体磨处理3次，再通过100目滤网过滤，得混合液a。
66.另取杏仁香精、环拉酸钠，加入纯化水，搅拌25min使溶解和混合均匀，得混合液b。
67.将以上混合液b加入到混合液a中，搅拌25min，使两种混合液再混合均匀，分装成100ml/瓶，即得成品。
68.实验1：本发明提供的组合物用于降血脂作用的动物实验观察
69.为验证本发明提供的组合物具备降血脂作用，发明人进行相关的动物实验，具体实验如下：
70.1.样品
71.本发明技术方案制备的组合物成品，人口服推荐剂量为每日5.4g，体重按60kg计算，折合剂量0.09g/kg
·
bw。
72.2.实验动物及环境条件
73.采用spf级雄性sd大鼠40只，实验条件为屏障环境，实验期间实验环境温度22～24℃,湿度50～56％。饲喂高脂饲料：78.8％基础饲料，1％胆固醇，10％蛋黄粉，10％猪油，0.2％胆盐。
74.3.实验方法
75.据人体口服推荐量，本发明技术方案制备的组合物成品的低、中、高剂量分别为0.45g/kg
·
bw、0.90g/kg
·
bw、2.70g/kg
·
bw(分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍)。试验时，低、中、高剂量受试液配制时分别取样品18.00g、36.00g、108.00g加植物油至200ml，按0.5ml/100g
·
bw体积给大鼠灌胃，每天一次，连续灌胃30天。对照组灌胃予以等体积的溶剂。
76.以基础饲料喂饲大鼠观察一周后，禁食16小时，取尾血，用olyn4pus au400全自动生化分析仪测定血清总胆固醇(tc)、甘油三酯(tg)、高密度脂蛋白胆固醇(hdl
‑
c)，根据tc水平兼顾tg将动物随机分为4组：高脂对照组和低、中、高三个受试物组。自正式试验开始，各组动物换用高脂饲料，同时按剂量设计给各组受试动物灌胃。
77.指标测定：每周称体重一次，于实验结束禁食16小时，拔眼球釆血测定血清tc、tg、hdl
‑
c
78.表1实验前后各组大鼠血清tc水平
[0079][0080]
表2实验前后各组大鼠血清tg水平
[0081][0082]
表3实验前后各组大鼠血清hdl
‑
c水平
[0083][0084]
由表1
‑
3可知，实验后，高脂对照组血清tc、tg均明显升高，与实验前比较，差异具有显著性(p<0.05),表明造模成功。与高脂对照组比较，高剂量可显著降低大鼠血清总胆固醇及甘油三酯水平(p<0.05),各剂量对大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇水平无显著影响(p＞0.05)。提示试验样品对动物具有降血脂功能。
[0085]
实验2：本发明提供的组合物用于改善记忆作用的动物实验观察
[0086]
为验证本发明提供的组合物具备改善记忆的作用，发明人进行了动物实验，表明其具有改善记忆作用，且无毒副作用，具体实验如下：
[0087]
1.样品
[0088]
本发明技术方案制备的组合物成品，人口服推荐剂量为每日5.4g，体重按60kg计算，折合剂量0.09g/kg
·
bw。
[0089]
2.实验动物及环境条件
[0090]
spf级雄性昆明种小鼠共240只，体重为18g～22g，实验条件为屏障环境，实验期间实验环境温度22℃～24℃，湿度50％～56％。
[0091]
3.剂量组选择与受试物给予方式
[0092]
据人体口服推荐量，本发明技术方案制备的组合物成品的低、中、高剂量分别为0.45g/kg
·
bw、0.90g/kg
·
bw、2.70g/kg
·
bw(分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍)。低、中、高剂量受试液配制时分别取组合物成品胶囊内容物9.00g、18.00g、54.00g加植物油至200ml，对照组予以等体积的溶剂，每天灌胃一次，灌胃体积为0.1ml/10g
·
bw，连续30天。
[0093]
4.实验方法
[0094]
跳台试验：体重18～22g的雄性小鼠，随机分为三个剂量组和一个对照组，每组10只。连续灌胃30天后进行跳台试验。将动物放入反应箱内适应3min，立即通以36伏交流电刺激小鼠。然后将小鼠放在绝缘平台上，记录各鼠第一次跳下平台时潜伏期、5min内每鼠受到电击的次数(跳下平台的错误次数)和各组跳下平台的动物数，以此作为学习成绩。24h后重复测验，记录第一次跳下平台的潜伏期、3min内的跳下平台的错误次数和各组跳下平台的动物数。停止训练5天后进行消退试验。
[0095]
避暗试验：动物选择，试验分组，给受试物的剂量、途径、时间均同跳台试验。连续灌胃30天后开始进行避暗试验。记录每鼠从放入明室至进入暗室遭电击所需的时间(潜伏期)、5min内进入暗室的错误次数和各组进入暗室的动物数。24h后同一时间，再进行测验，记录每鼠进入暗室的潜伏期、5min内进入暗室的错误次数和各组进入暗室的动物数。停止训练5天后进行消退试验。
[0096]
水迷宫试验：体重18～22g的雄性小鼠，随机分为三个剂量组和一个对照组，每组10只。给受试物30天后开始进行水迷宫试验。训练期间继续给予受试物。每天训练一次，连续5天。第一天训练前将小鼠放在梯子附近，使其自动爬上3次，以后每次训练前将小鼠放在梯子附近，使其自动爬上1次。第一天训练时，用挡板在a处挡死，从a点开始进行训练；第二天从b处开始，此路程训练3天，至80％的动物在2min内到达终点；第五天从起点开始训练；最后以5天的总学习成绩进行评价(即各组5天到达终点的总时间、总错误次数和各组两分钟内到达终点的动物数)。停止训练5天后进行消退试验。
[0097]
实验数据统计：水迷宫试验中到达终点的时间、总错误次数、跳台试验和避暗试验中的潜伏期、错误次数属计量资料，可用方差分析，但需先进行方差齐性检验，若方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现差异再用dunnett法进行多个剂量组与一个对照组均数间的两两比较。若方差不齐则对原始数据进行适当的变量转换，满足方差齐性检验后，用转换后的数据进行统计；若变量转换后仍未达到方差齐的目的，改用秩和检验进行统计，发现总体比较有差异，则采用不要求方差齐性的tamhane'st2检验进行两两比较。水迷宫试验中2min内到达终点的动物数(百分率)、跳台试验中跳下平台的动物数(百分率)、避暗试验中进入暗室的动物数(百分率)为计数资料，用x2检验，四格表总例数小于40，或总例数等于或大于40但出现理论数等于或小于1时，改用确切概率法。
[0098]
结果判定：跳台试验、避暗试验、水迷宫试验三项实验中任二项实验结果阳性。且重复实验结果一致(所重复的同一项实验两次结果均为阳性)，可以判定该受试样品改善记忆功能动物实验结果阳性。
[0099]
第一次试验结果：
[0100]
表4组合物胶囊对水迷宫试验中小鼠到达终点时间的影响
[0101][0102]
从表4可见，各剂量组小鼠到达终点的时间与对照组比较差异无显著性(p>0.05)。
[0103]
表5对水迷宫试验中小鼠到达终点前错误次数的影响
[0104][0105]
从表5可见，高剂量组小鼠到达终点前的错误次数与对照组比较差异有显著性(p<0.05)。
[0106]
表6组合物胶囊对水迷宮试验中2min内到达终点的动物数的影响
[0107]
组别动物数(只)试验次数2min内到达终点的动物数p值对照组10535/50—低剂量10541/500.160中剂量10543/500.053高剂量10543/500.053
[0108]
从表6可见，各剂量组小鼠2min内到达终点的动物数与对照组比较差异无显著性(p>0.05)。
[0109]
表7组合物胶囊对小鼠避暗试验潜伏期的影响
[0110][0111]
由表7可见，各剂量组小鼠进入暗室训练、测验潜伏期与对照组比较差异无显著性(p>0.05)。
[0112]
表8组合物胶囊对小鼠避暗试验错误次数的影响
[0113][0114]
由表8可见，各剂量组训练错误次数与对照组比较，差异无显著性(p>0.05)。高剂量组小鼠测验错误次数与对照组比较差异有显著性(p<05)。
[0115]
表9组合物胶囊对小鼠避暗试验测验错误反应率的影响
[0116][0117][0118]
由表9可见,各剂量组进入暗室的动物数与对照组比较差异无显著性(p>0.05)。
[0119]
表10组合物胶囊对小鼠跳台试验潜伏期的影响
[0120][0121]
由表10可见，各剂量组小鼠训练时及测验时跳下平台的潜伏期与对照组比较,差异无显著性(p>0.05)。
[0122]
表11组合物胶囊对小鼠跳台试验错误次数的影响
[0123][0124]
由表11可见，各剂量组小鼠训练错误次数对照组比较，差异无显著性(p>0.05)。高
剂量组小鼠测验错误次数与对照组比较差异有显著性(p<0.05)。
[0125]
表12组合物胶囊对小鼠跳台测验错误反应率的影响
[0126]
组别动物数(只)测试错误动物数/受试动物数p值对照组1010/10—低剂量109/101.000中剂量108/100.474高剂量107/100.211
[0127]
由表12可见，各剂量组小鼠测验时跳下平台的动物数与对照组比较，差异无显著性(p>0.05)。
[0128]
表13组合物胶囊对水迷宫试验中小鼠记忆再现的影响
‑‑
消退试验
[0129][0130]
由表13可见，水迷宫消退试验中各剂量组小鼠到达终点时间、到达终点的错误次数及2分钟内到达终点动物数与对照组比较，差异无显著性(p>0.05)。
[0131]
表14组合物胶囊对避暗试验中小鼠记忆再现的影响
‑‑
消退试验
[0132][0133]
表14可见，避暗消退试验中各剂量组小鼠进入暗室的潜伏期和进入暗室的动物数与对照组比较，差异均无显著性(p>0.05)。各剂量组小鼠进入暗室的错误次数与对照组比较差异均无显著性(p>0.05)。
[0134]
表15组合物胶囊对跳台试验中小鼠记忆再现的影响
‑‑
消退试验
[0135][0136][0137]
由表15可见，各剂量组小鼠跳下平台的潜伏期、错误次数、跳下平台的动物数与对照组比较差异无著性(p>0.05)。
[0138]
第二次试验结果：
[0139]
表16组合物胶囊对水迷宫试验中小鼠到达终点时间的影响
[0140][0141]
从表16可见，各剂量组小鼠到达终点的时间与对照组比较差异无显著性(p>0.05)。
[0142]
表17组合物胶囊对水迷宫试验中小鼠到达终点前错误次数的影响
[0143][0144]
从表17可见，高剂量组小鼠到达终点前的错误次数与对照组比较差异有显著性(p<0.05)。
[0145]
表18组合物胶囊对水迷宫试验中2min内到达终点的小鼠数影响
[0146][0147][0148]
从表18可见，高剂量组小鼠2min内到达终点的动物数与对照组比较差异有显著性(p<0.05)。
[0149]
表19组合物胶囊对小鼠避暗试验潜伏期的影响
[0150][0151]
由表19可见，各剂量组小鼠训练、测验时进入暗室的潜伏期与对照组比较，差异均无显著性(p>0.05)。
[0152]
表20组合物胶囊对小鼠避暗试验错误次数的影响
[0153][0154]
由表20可见，各剂量组小鼠训练错误次数与对照组比较，差异无显著性(p>0.05)。高剂量组小鼠测验错误次数与对照组比较，差异有显著性(p<0.05)。
[0155]
表21组合物胶囊对小鼠避暗试验测验错误反应率的影响
[0156]
组别物数(只)试错误动物数/受试动物数p值对照组1010/10—低剂量109/101.000中剂量107/100.211高剂量107/100.211
[0157]
由表21可见，各剂量组小鼠测验错误动物数与对照组比较，差异无显著性(p>0.05)。
[0158]
表22组合物胶囊对小鼠跳台试验潜伏期的影响
[0159][0160]
由表22可见，各剂量组小鼠训练时及测验时跳下平台的潜伏期与对照组比较,差异无显著性(p>0.05)。
[0161]
表23组合物胶囊对小鼠跳台试验错误次数的影响
[0162][0163]
由表23可见，训练时及测验时各剂量组小鼠跳下平台的错误次数与对照组比较,差异均无显著性(p>0.05)。
[0164]
表24组合物胶囊对小鼠跳台测验错误反应率的影响
[0165][0166]
由表24可见，各剂量组小鼠跳下平台的动物只数与对照组比较，差异无显著性(p>0.05)。
[0167]
表25组合物胶囊对水迷宮试验中小鼠记忆再现的影响
‑
消退试验
[0168][0169]
由表25可见，水迷宫消退试验中各剂量组小鼠到达终点的时间、小鼠到达终点前的错误次数、2分钟内到达终点的动物数与对照组比较，差异无显著性(p>0.05)。
[0170]
表26组合物胶囊对避暗试验中小鼠记忆再现的影响
‑
消退试验
[0171][0172]
由表26可见，避暗消退试验中各剂量组小鼠进入暗室的潜伏期、进入暗室的错误次数和进入暗室的动物数与对照组比较，差异均无显著性(p>0.05)。
[0173]
表27组合物胶囊对跳台试验中小鼠记忆再现的影响
‑
消退试验
[0174][0175]
由表27可见，跳台消退试验中各剂量组小鼠跳下平台的潜伏期、错误次数和跳下平的动物数与对照组比较，差异均无显著性(p>0.05)。
[0176]
本实验室条件下，以0.45g/kg
·
bw、0.90g/kg
·
bw、2.70g/kg
·
bw剂量的组合物胶囊连续给小鼠灌胃30天，两次试验结果显示，水迷宫试验、避暗试验前后两次结果均为阳性。由此提示，本发明组合物胶囊对受试动物有改善记忆功能。
[0177]
实验3：本发明的组合物安全性毒理学实验观察
[0178]
为验证本发明的组合物的安全性，发明人按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)的规定进行了安全性毒理学实验，分别进行了急性经口毒性试验、三项遗传毒性试验(ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验及小鼠精子畸形试验)、30天喂养实验，对本发明组合物胶囊的毒理学实验结果如下：
[0179]
1、急性经口毒性试验：对昆明种雌、雄小鼠的最大耐受剂量(mtd)大于18.72g/kg
·
bw,属无毒级。
[0180]
2、三项遗传毒性试验：ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠精子畸形试验结果均为阴性。
[0181]
3、30天喂养试验：以2.25％、4.50％、9.00％的比例将样品掺入饲料喂饲大鼠30天，实验期间，动物生长发育良好，各剂量组体重、增重、食物利用率、血常规指标、血生化指标、脏器重量及脏器/体重比值与对照组比较，无显著性差异(p>0.05)o大体解剖和组织病理检查未见明显与样品有关的异常改变。提示本发明组合物胶囊30天喂养对大鼠未见明显毒副作用。
[0182]
实验4本发明的组合物降血脂作用人体试食实验和改善记忆作用人体试食实验
[0183]
为验证本发明的组合物的降血脂作用和改善记忆作用，发明人按照《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)评价标准，进行了人体试食实验，试验结果表明，本发明的组合物胶囊具有降血脂作用，且无毒副作用。进行了人体试食实验，试验结果表明，本发明组合物胶囊具有改善记忆功能，且无毒副作用。