基于超高效液相色谱荧光检测器检测白酒中尿素的方法与流程

技术特征：
1.基于超高效液相色谱荧光检测器检测白酒中尿素的方法，其特征在于，包括如下步骤：s001、吸取0.8ml试样，并将试样置于棕色储液瓶；s002、加入0.6ml、0.02mol/l的9
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羟基占吨醇溶液、0.2ml、1.5mol/l的盐酸溶液，振荡混匀；s003、室温条件下避光衍生40min；s004、使用0.22μm有机系滤膜过滤；s005、取滤液，并用于超高效液相色谱仪测定。2.根据权利要求1所述基于超高效液相色谱荧光检测器检测白酒中尿素的方法，其特征在于，包括溶液的配制步骤：配制体积分数1.0％的乙酸溶液：吸取1.0ml冰乙酸于100ml容量瓶中，用水定容至刻度，混匀；配制0.02mol/l的乙酸钠溶液：称取1.64g无水乙酸钠，超纯水溶解并定容至1000ml，用1.0％乙酸溶液调ph至7.2，过滤后超声脱气15min备用；配制1.5mol/l的盐酸溶液：吸取6.2ml的浓盐酸于50ml容量瓶中，用水定容至50ml刻度，旋涡混合器振荡1min，混匀；配制0.02mol/l的9
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羟基占吨醇溶液：称取0.198g 9
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羟基占吨，用正丙醇溶液在50ml容量瓶中定容至50ml刻度线，混匀后超声15min备用；配制1.0mg/ml尿素标准储备液：称取0.100g尿素标准品，用无水乙醇溶解并定容至100ml容量瓶刻度线，旋涡混合器振荡1min，混匀后备用；配制100mg/l尿素中间液：吸取1ml尿素标准储备液到10ml容量瓶，用无水乙醇定容至10ml刻度线，旋涡混合器振荡1min，混匀后备用。3.根据权利要求1所述基于超高效液相色谱荧光检测器检测白酒中尿素的方法，其特征在于，所述超高效液相色谱仪的液相色谱条件如下：色谱柱：型号为2.1x100mm，2μm的c
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色谱柱；柱温：35℃；检测波长：λex213nm，λem308nm；流速：0.2ml/min；进样体积：10μl；流动相a为：ph 7.2、0.02mol/l乙酸钠溶液；流动相b为：乙腈。4.根据权利要求3所述基于超高效液相色谱荧光检测器检测白酒中尿素的方法，其特征在于，所述流动相b的洗脱梯度为0～4.5min，流动相b 80～65％；4.5～12min，流动相b 65～70％；12～18min，流动相b 70～0％；18～21min，流动相b 0
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80％；21～25min流动相b，80％。5.根据权利要求1所述基于超高效液相色谱荧光检测器检测白酒中尿素的方法，其特征在于，包括进样量选择实验步骤：将浓度为5.0mg/l的标准工作液衍生后，分别设置2μl、5μl、10μl进样分析，当进样量为10μl时，分离效果最好。6.根据权利要求1所述基于超高效液相色谱荧光检测器检测白酒中尿素的方法，其特征在于，包括尿素的标准曲线绘制步骤：吸取一定体积的100mg/l尿素中间液于10ml容量瓶中，用无水乙醇依次配制成0.05mg/l、0.1mg/l、0.4mg/l、1mg/l、5mg/l、10mg/l、20mg/l尿素标准曲线工作液；使用旋涡混合器振荡1min混匀，且现配现用地进行液相分析；以目标色谱峰的面积对标准曲线工作液做图，得到回归方程及相关系数；所述回归方程为y＝1.0
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107x 3
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106，r2＝0.9994；加标回收率为102.46％；进样精密度为1.44％、样品的重复性为1.90％。7.根据权利要求1所述基于超高效液相色谱荧光检测器检测白酒中尿素的方法，其特征在于，包括精密度试验步骤：取浓度为6.0mg/l的标准工作液，衍生及过滤后连续进样6次，计算目标峰浓度的rsd；衍生物的平均浓度为6.15mg/l、rsd为1.44％。8.根据权利要求1所述基于超高效液相色谱荧光检测器检测白酒中尿素的方法，其特征在于，包括重复性研究步骤：取多份凤香型白酒样品衍生后，按色谱条件进行进样分析：样品平均浓度为1.50mg/l，相对标准偏差为1.90％。9.根据权利要求1所述基于超高效液相色谱荧光检测器检测白酒中尿素的方法，其特征在于，包括准确度试验步骤：取6份凤香型酒样，分别编号为1#、2#、3#、4#、5#、6#；在1#、2#中加入4μl浓度为1.0mg/l的标准工作液；在3#、4#中加入5μl浓度为1.0mg/l的标准工作液；在5#、6#中加入6μl浓度为1.0mg/l的标准液标准工作液；衍生及过滤后进行液相分析，得出实际测得的尿素含量，计算各样品的加标回收率：平均加标回收率为102.46％，且各回收率在80～120％之间。10.根据权利要求1所述基于超高效液相色谱荧光检测器检测白酒中尿素的方法，其特征在于，所述方法的检测限lod为0.030mg/l；所述方法的定量限loq为0.093mg/l。

技术总结
提供一种基于超高效液相色谱荧光检测器定量白酒中尿素的方法。通过单因素试验，优化最佳的衍生剂量、衍生时间、洗脱梯度和进样量，最终确定检测方法为：吸取0.8mL试样，并将试样置于棕色储液瓶；加入0.6mL、0.02mol/L的9


技术研发人员：朱瑞雪 刘丽丽 路广程 辛茜 韩海涛 牛力
受保护的技术使用者：陕西西凤酒股份有限公司
技术研发日：2021.11.03
技术公布日：2022/1/4