一种提高铁皮石斛中麦芽五糖和麦芽六糖的炮制方法与应用与流程

1.本发明涉及中药炮制、功能食品和化妆品领域，主要是涉及一种同时提高铁皮石斛中麦芽五糖和麦芽六塘的特殊炮制方法，及其所得的铁皮石斛炮制品在制备药品、功能食品和化妆品中的应用。


背景技术：

2.铁皮石斛又名“黑节草”，为兰科石斛属草本植物，始载于《神农本草经》且位列上品，具有国际“药界大熊猫”之称，居《道藏》“九大仙草”之首，作为一味珍稀中草药而备受瞩目。铁皮石斛药理作用广泛，拥有免疫调节、抗肿瘤、调节胃肠道、抗氧化、抗衰老、抗疲劳、降血糖、降血脂、降血压等多种生物活性。作为药食同源植物，铁皮石斛在医学辅助治疗、保健营养品，功能化妆品乃至药物原料均具有很高的应用价值。
3.麦芽五糖和麦芽六糖是一种直链麦芽低聚糖，由α(1
‑
4)链接d
‑
葡萄糖单体和痕迹量的(1
‑
6)链接葡萄糖缩合组成，聚合度分别为5和6。其不仅有良好的加工适应性，而且还具有独特的生理功能。由于麦芽五糖和麦芽六糖甜度低，在食品中常作为口感柔和的低甜味剂使用。同时，麦芽五糖和麦芽六糖具有较强的持水性，作为保湿剂被广泛应用于化妆品。此外，作为一种直链麦芽低聚糖，麦芽五糖和麦芽六糖可以不经胃的消化直接进入小肠，被小肠内的α
‑
葡萄糖苷酶水解进而进入血液迅速合成糖原，加速肌糖原和肝糖原的恢复，其所引起的胰岛素反应和血糖反应比葡萄糖平稳，能长时间的为人体提高能量。同时也能防止运动时大量乳酸的形成，对于运动员和肝、肾病患者是一种理想的能量补充来源。现代研究表明，麦芽五糖和麦芽六糖能有效促进人体对ga
2
离子的吸收，进而预防中老年骨质疏松。而且，其能够选择性抑制肠道腐败微生物的生长而促进有益微生物的增值，从而维持并改善肠道内环境的健康。因此，在食品、医药、化妆品等领域被广泛应用。
4.目前，麦芽五糖和麦芽六糖的制备以酶法为主，方法不仅被日本垄断而且转化率较低，成本高。大量研究表明，中药及其提取物具有性质平和，耐受性好，作用持久等优点。植物来源的功能食品和化妆品更符合消费者的安全需求。近年来，铁皮石斛因为其广泛的药理作用备受关注。作为传统中草药，铁皮石斛在调节肠道微生物和维持肠道健康上具有坚实的使用基础，而且在化妆品的应用中正受到越来越多消费者青睐。麦芽五糖和麦芽六糖作为铁皮石斛的次级代谢产物，其含量对于铁皮石斛的药理活性具有重要作用。因此，提高铁皮石斛中麦芽五糖和麦芽六糖的含量是非常有必要的。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于提供一种现有技术中未见报道的，能同时提高铁皮石斛中麦芽五糖和麦芽六糖的特殊炮制方法，以及依据该方法所制得的铁皮石斛炮制品，及其在制备药物、功能食品和化妆品中的应用。
6.本发明的上述目的是通过以下技术方案来完成的。
7.铁皮石斛炮制品，其是由下述方法制备而得：
8.(1)选取铁皮石斛鲜茎，去除须根、叶和杂质，保留茎部清洗后室内晾干；
9.(2)将晾干后的鲜茎于
‑
20℃冰箱中冷冻12h；
10.(3)将冷冻后的鲜条取出，置于烘箱中于50
‑
80℃下烘烤至叶鞘张开时取出，揉搓去除膜质叶鞘，揉搓过程避免损伤茎表皮引起内部肉质外露，从而导致化合物被氧化；
11.(4)将去除膜质叶鞘的铁皮石斛茎继续置于烘箱中于50
‑
80℃下烘烤24h得到铁皮石斛炮制品。
12.根据所述的铁皮石斛炮制品，其中铁皮石斛炮制品中麦芽五糖含量比鲜条提高4.49x10
11
‑
1.65x10
12
倍，麦芽六糖的含量比鲜条提高6.16x10
11
‑
9.11x10
11
倍。
13.本发明还提供了一种能同时提高铁皮石斛中麦芽五糖和麦芽六糖的炮制方法，该方法包括下述步骤：
14.(1)选取铁皮石斛鲜茎，去除须根、叶和杂质，保留茎部清洗后室内晾干；
15.(2)将晾干后的鲜茎于
‑
20℃冰箱中冷冻12h；
16.(3)将冷冻后的鲜条取出，置于烘箱中于50
‑
80℃下烘烤至叶鞘张开时取出，揉搓去除膜质叶鞘，揉搓过程避免损伤茎表皮引起内部肉质外露，从而导致化合物被氧化；
17.(4)将去除膜质叶鞘的铁皮石斛茎继续置于烘箱中于50
‑
80℃下烘烤24h得到铁皮石斛炮制品；
18.其中，铁皮石斛炮制品中麦芽五糖含量比鲜条提高4.49x10
11
‑
1.65x10
12
倍，麦芽六糖的含量比鲜条提高6.16x10
11
‑
9.11x10
11
倍。
19.此外，本发明还提供了所述的铁皮石斛炮制品在制备治疗骨质疏松、肠道疾病中和抗衰老的药物中的应用。
20.所述的铁皮石斛炮制品在制备功能食品中的应用。
21.所述的铁皮石斛炮制品在制备保湿性化妆品中的应用，所述保湿性化妆品中含有铁皮石斛炮制品提取物的质量分数为1
‑
30％。
22.所述的铁皮石斛炮制品在制备能量补充性功能饮料中的应用，所述能量补充性功能饮料中含有铁皮石斛炮制品提取物的质量分数为10
‑
50％。
23.所述的铁皮石斛炮制品在制备维持肠道健康性功能饮料中的应用，所述维持肠道健康性功能饮料中含有铁皮石斛炮制品提取物的质量分数为20
‑
60％。
24.所述的铁皮石斛炮制品在制备抗衰老和美白化妆品中的应用。
25.另外，本发明还提供了一种铁皮石斛功能饮料，其由下述组分以质量百分比组成：铁皮石斛提取物50.00％，维生素c0.20％，柠檬酸0.01％，去离子水加至100；其中铁皮石斛提取物是将权利要求1的铁皮石斛炮制品以20:1的液料比在80℃下回流提取4次，合并滤液后冷冻干燥所得。
26.以及，一种铁皮石斛护肤精华液，其由下述组分以质量百分比组成：铁皮石斛提取物5.00％，透明质酸钠1.00％，1,3
‑
丙二醇4.00％，聚丙烯酸酯交联聚合物
‑
60.50％，peg
‑
40氢化蓖麻油0.20％，peg
‑
60氢化蓖麻油0.10％，氢化卵磷脂0.05％，edta二钠0.05％，苯氧乙醇0.40％，去离子水加至100；其中铁皮石斛提取物是将权利要求1的铁皮石斛炮制品以20:1的液料比在80℃下回流提取4次，合并滤液后冷冻干燥所得。
27.与现有技术相比，本发明的优点在于：
28.本发明的方法中，所述技术关键在于温度和时间控制，通过本发明的特殊炮制方
法，所得的铁皮石斛炮制品中麦芽五糖和麦芽六糖含量相比鲜条得到了显著提高。当炮制温度为50
‑
80℃，烘烤24h时，铁皮石斛炮制品中麦芽五糖含量比鲜条提高4.49x10
11
‑
1.65x10
12
倍，麦芽六糖的含量比鲜条提高6.16x10
11
‑
9.11x10
11
倍，温度低于50℃或高于80℃时，铁皮石斛炮制品中麦芽五糖和麦芽六糖的含量相比鲜条提升显著，其可直接作为功能食品进行食用或其提取物应用于功能饮料等食品和化妆品、药品。
具体实施方式
29.为了使本发明的目的，技术方案，功效及优点更加清晰易于明白，下面结合实例对本发明进行阐述，但并不以此来限定本发明。根据本发明的实质对本发明进行的简单改进都属于本发明的范围。
30.实施例1
31.特殊方法制备同时提高铁皮石斛中麦芽五糖和麦芽六糖的铁皮石斛炮制品。
32.(1)选取铁皮石斛鲜茎，去除须根、叶和杂质，保留茎部清洗后室内晾干。
33.(2)将晾干后的鲜茎于
‑
20℃冰箱中冷冻12h。
34.(3)将冷冻后的鲜条取出，置于烘箱中于60℃下烘烤至叶鞘张开时取出，揉搓去除膜质叶鞘，揉搓过程避免损伤茎表皮引起内部肉质外露，从而导致化合物被氧化。
35.(4)将去除膜质叶鞘的铁皮石斛茎继续置于烘箱中于60℃下烘烤24h得到铁皮石斛炮制品。
36.实施例2
37.本实施例主要是对实施例1制备的铁皮石斛炮制品中的中麦芽五糖和麦芽六糖的含量变化进行检测和分析，具体如下：
38.(1)所需药品：甲醇、甲酸、水、乙腈均购自thermo公司，l
‑2‑
氯苯丙氨酸购自上海恒创生物科技有限公司。所有化学药品和溶剂均为分析纯或色谱级。
39.(2)样品处理：分别称取500mg铁皮石斛鲜茎和实施例1制备的铁皮石斛炮制品，将样本完全研磨后，分别称取80mg样本，加入内标(l
‑2‑
氯苯丙氨酸，0.3mg/ml；甲醇配置)20μl，1ml的甲醇
‑
水(v:v＝7：3)；加入两个小钢珠，在
‑
20℃放置2min预冷，加入研磨机(60hz，2min)；冰水浴超声提取30min，
‑
20℃过夜静置；离心10min(13000rpm，4℃)，用注射器吸取150μl的上清液，使用0.22μm的有机相针孔过滤器过滤后，转移到lc进样小瓶，
‑
80℃下保存，直到进行lc
‑
ms分析。质控样本(qc)由所有样本的提取液等体积混合制备而成。所有提取试剂使用前均在
‑
20℃进行预冷。
40.(3)代谢产物分析：使用配备有加热电喷雾电离源(thermo fisher scientific)的质谱仪(q
‑
exactive 四极orbitrap)的超高效液相色谱仪(uhplc，dionex ultimate 3000rs)分析esi正离子和esi负离子模式下的代谢曲线。在0.35ml/min和40℃的柱温下，洗脱试剂为(a)含0.1％(v/v)甲酸的水和(b)含0.1％(v/v)甲酸的乙腈，梯度为0min，5％b；1min，5％b；2.5min，30％b；6min，50％b；7分钟，70％b；10min，80％b；12分钟，100％b；14min，100％b；14.2分钟，5％b；16min，5％b。在分析过程中，样品保持在4℃。注射量为5μl。完整ms扫描使用70000分辨率，高能碰撞离解ms/ms扫描使用17500分辨率，碰撞能量分别为10、20和40ev。检测到的质量范围介于100和1200质量
‑
电荷比(m/z)之间。质谱仪的工作方式如下：喷雾电压、3800v( )和3200v(
‑
)；护套气体流速，40个任意单位；辅助气体流速，15
个任意单位；毛细管温度，320℃；辅助气体加热器温度，350℃；每四个样品注入一个qc样品，以便本发明评估重复性。
41.(4)检测结果：
42.表1本发明特殊方法炮制的铁皮石斛中麦芽五糖和麦芽六糖的检测和分析结果
[0043][0044]
从上述检测及分析结果可以看出：
[0045]
实施例1所制备的铁皮石斛炮制品，在炮制温度为60℃，烘烤24h时，铁皮石斛炮制品中麦芽五糖和麦芽六糖的含量比鲜条分别提高1.65x10
12
倍和9.11x10
11
倍。由此可以看出，本发明实施例制备的铁皮石斛炮制品中麦芽五糖和麦芽六糖的含量显著提高。因此，本发明实施例制备的铁皮石斛炮制品能同时提高麦芽五糖和麦芽六糖的含量，在功能食品、医药、化妆品等领域具有广泛应用。
[0046]
实施例3
[0047]
表2铁皮石斛功能饮料制备
[0048]
组分含量(％)铁皮石斛提取物50.00维生素c0.20柠檬酸0.01去离子水至100
[0049]
按以下步骤制备实施例3的铁皮石斛功能饮料：
[0050]
(1)铁皮石斛提取物制备：将经过本发明炮制的铁皮石斛干品以20:1的液料比在80℃下回流提取4次，合并滤液后冷冻干燥得铁皮石斛提取物。
[0051]
(2)按组分比例依次加入铁皮石斛提取物，维生素c和柠檬酸，用去离子水补至100％，混合均匀。
[0052]
(3)铁皮石斛提取物溶解后经过0.24um的滤膜进行除菌处理，所有操作菌在无菌条件下进行。
[0053]
实施例4
[0054]
表3铁皮石斛护肤精华液制备
[0055]
组分含量(％)铁皮石斛提取物5.00透明质酸钠1.001,3
‑
丙二醇4.00聚丙烯酸酯交联聚合物
‑
60.50peg
‑
40氢化蓖麻油0.20peg
‑
60氢化蓖麻油0.10氢化卵磷脂0.05edta二钠0.05
苯氧乙醇0.40去离子水至100
[0056]
按以下步骤制备实施例4的铁皮石斛护肤精华液：
[0057]
(1)铁皮石斛提取物制备：将经过本发明炮制的铁皮石斛干品以20:1的液料比在80℃下回流提取4次，合并滤液后冷冻干燥得铁皮石斛提取物。
[0058]
(2)将油，脂类和乳化剂加入到溶解锅中，在70
‑
80℃下加热并搅拌至完全融化。
[0059]
(3)将水溶性物质和去离子水加入到溶解锅中，在90
‑
100℃下加热并搅拌20
‑
30min至完全溶解，然后冷却至70
‑
80℃。
[0060]
(4)将上述制备的油相和水相加入到乳化锅中，在70
‑
80℃下加热搅拌进行乳化10
‑
20min，乳化后体系自然冷却至室温，加入热敏成分，充分搅拌均匀。
[0061]
实施例5
[0062]
药物制剂例：
[0063]
先进行铁皮石斛提取物制备：将经过本发明炮制的铁皮石斛干品以20:1的液料比在80℃下回流提取4次，合并滤液后冷冻干燥得铁皮石斛提取物。
[0064]
然后：
[0065]
1.取铁皮石斛提取物，用少量的dmso溶解后，按常规加注射用水，精滤，灌封灭菌制成注射液。
[0066]
2.取铁皮石斛提取物，用少量的dmso溶解后，将其溶于无菌注射用水中，搅拌使溶解，用无菌抽滤漏斗过滤，再无菌精滤，分装于安中，低温冷冻干燥后无菌熔封得粉针剂。
[0067]
3.取铁皮石斛提取物，按其与赋形剂重量比为9:1的比例加入赋形剂，制成粉剂。
[0068]
4.取铁皮石斛提取物，按其与赋形剂重量比为5:1的比例加入赋形剂，制成压片。
[0069]
5.取铁皮石斛提取物，按常规口服液制法制成口服液。
[0070]
6.取铁皮石斛提取物，按其与赋形剂重量比为5:1的比例加入赋形剂，制成胶囊。
[0071]
7.取铁皮石斛提取物，按其与赋形剂重量比为3:1的比例加入赋形剂，制成胶囊。
[0072]
8.取铁皮石斛提取物，按其与赋形剂重量比为5:1的比例加入赋形剂，制成颗粒剂。