一种高含量莲子多酚提取物及其制备方法与流程

1.本发明涉及一种莲子多酚提取物，特别是一种高含量莲子多酚提取物及其制备方法。


背景技术：

2.莲，属于睡莲科莲属的多年水生草本植物，在中国已有2000多年的栽种历史。莲富含生物碱、多酚、多糖等活性物质。其中莲藕和莲子是最主要的食用部位，莲子中富含多酚类活性成分。莲子多酚是莲子中所含多元酚类化合物的总称，其中没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、咖啡酸等酚酸类化合物，作为一类生理活性物质，具有较强的抗氧化、抗老化、抗癌、抑菌等多种功效。目前，莲子多酚常用的提取技术包括溶剂提取法、微波提取法、超声波提取法以及树脂富集法，但是上述方法都存在各自的缺点。其中，溶剂提取法使用的有机溶剂回收难、有毒性、会污染环境，操作不安全、操纵时间长，而且需要高温提取，容易导致莲子中部分多酚类物质氧化分解；单纯的微波提取法和超声波提取法得到的莲子多酚中杂质较多，高抗氧化活性的酚酸类化合物含量低；树脂富集法也存在提取到的莲子多酚中高抗氧化活性的酚酸类化合物含量低的问题。因此，现有技术中并没有较好的环保、可富集高抗氧化活性的酚酸类化合物的提取莲子多酚的方法。


技术实现要素：

3.本发明的目的在于，提供一种高含量莲子多酚提取物及其制备方法。本发明具有提取方法简单环保、莲子多酚提取率高、并富集了高抗氧化活性的酚酸类物质，提取得到的莲子多酚的酚酸类化合物含量高达86％的特点。
4.本发明的技术方案：一种高含量莲子多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
5.a、将莲子烘干至水分含量为10～15％，粉碎得莲子粉末，为a品；
6.b、将a品与双水相体系按照质量比为1：40～60混合，超声萃取莲子多酚，取上相料液，经抽滤和减压蒸馏后得到粗莲子多酚萃取液，为b品；
7.c、将b品过hpd100大孔吸附树脂，以2～3个柱体积的水洗后用6～8个柱体积的体积分数为30～70％的乙醇洗脱，取洗脱液减压蒸馏，得c品；
8.d、将c品过mci树脂，以2～4个柱体积的体积分数为5～15％的乙醇洗脱，再用6～8个柱体积的体积分数为30～60％的乙醇洗脱，减压干燥得成品。
9.前述的一种高含量莲子多酚提取物的制备方法中，所述步骤a具体为，将莲子于50～60℃烘干至水分含量为10～15％，粉碎过40～80目筛，得莲子粉末，密封避光保存，为a品。
10.前述的一种高含量莲子多酚提取物的制备方法中，所述步骤a具体为，将莲子于50℃烘干至水分含量为13％，粉碎过60目筛，得莲子粉末，密封避光保存，为a品。
11.前述的一种高含量莲子多酚提取物的制备方法中，所述步骤b中，双水相体系由无水乙醇、硫酸铵和水按质量比为35～45：16～20：35～49组成。
12.前述的一种高含量莲子多酚提取物的制备方法中，所述步骤b中，超声萃取的超声温度30～60℃，超声功率为200～250w,超声频率为15～25khz，超声时间为40～80min。
13.前述的一种高含量莲子多酚提取物的制备方法中，所述步骤b中，超声萃取的超声温度45℃，超声功率为220w,超声频率为20khz，超声时间为60min。
14.前述的一种高含量莲子多酚提取物的制备方法中，所述步骤b中，减压蒸馏的温度为60～80℃，减压蒸馏的真空度为
‑
0.08～
‑
0.1mpa。
15.前述的一种高含量莲子多酚提取物的制备方法中，所述步骤c中，减压蒸馏的温度为60～80℃，减压蒸馏的真空度为
‑
0.08～
‑
0.1mpa。
16.前述的一种高含量莲子多酚提取物的制备方法中，所述步骤d中，将c品过mci树脂，以2～3个柱体积的体积分数为8～12％的乙醇洗脱，再用6～8个柱体积的体积分数为35～55％的乙醇洗脱，减压干燥得成品。
17.一种高含量莲子多酚提取物，由以上制备方法提取得到，包括没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸，其中，没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸的质量总和占莲子多酚提取物总质量的80％～86％，没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸的重量之比依次为3～10：32～55：34～58：4～12。
18.与现有技术相比，本技术将双水相提取法与超声提取法协同使用，并限制了双水相提取法中各个成分的比例，实现了同时实现了对莲子多酚中酚酸类物质的充分提取和富集，减少了杂质影响，提高了纯度，工艺简单、成本较低、周期短、易于放大，适合工业化生产，在保持生物活性的同时，同步完成对简单酚酸类物质的提取和分离。
19.本发明将经过双水相提取得到的粗莲子多酚萃取液，再次经过大孔吸附树脂吸附和mci树脂柱层析，通过mci树脂柱的反相和分子筛作用，将中等极性和大极性多酚类化合物有效分离，并限定洗脱溶剂比例和使用量，通过多种提取分离方法的组合使用，使酚酸类化合物得到了有效的富集，获得了高纯度的莲子多酚，尤其富集了莲子中具有高抗氧化活性的没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、咖啡酸等酚酸类物质。
20.以一水合没食子酸为标准品，采用folin
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ciocal
‑
teus法测定总多酚含量，经检测，成品中，总多酚含量达到98％～99.3％。通过外标法，经hplc
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dad检测，检测条件为c
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色谱柱(250
×
4.6mm,5μm)，流动相为0.5％乙酸水溶液(a相)，乙腈(b相)，洗脱程序为0～5min，10％b相；5～14min，10％～20％b相；14～15min，20％～40％b相；15～19min，40％～45％b相；19～20min，45％～10％b相；流速1ml/min，进样量10μl，检测波长为280nm。其中，没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸、咖啡酸的质量总和占总提取物质量的80％～86％，其中四种成分的含量之比依次为3～10：32～55：34～58：4～12。
21.本方法采用的工艺无毒环保、经济，操作安全，耗能少，采用的乙醇、硫酸铵和大孔吸附树脂均易于回收利用，不采用高温，有利于提取、富集了受高温易氧化的莲子多酚，得到的成品中杂质少，具有优良的水溶性，可广泛适用于化妆品、食品等领域。
22.因此，本发明具有提取方法简单环保、莲子多酚提取率高、并富集了高抗氧化活性的酚酸类物质的特点。
具体实施方式
23.下面结合实施例对本发明作进一步的说明，但并不作为对本发明限制的依据。
24.实施例1：
25.一种高含量莲子多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
26.步骤a、将莲子于50～60℃烘干至水分含量为10～15％，使莲子自身的酶失活，粉碎过40～80目筛，得莲子粉末，密封避光保存，为a品；
27.步骤b、将a品与双水相体系按照质量比为1：40～60混合，双水相体系由无水乙醇、硫酸铵和水按质量比为35～45：16～20：35～49组成。超声萃取莲子多酚，超声萃取的超声温度30～60℃，超声功率为200～250w，超声频率为15～25khz，超声时间为40～80min。取上相料液，经抽滤和减压蒸馏后得到粗莲子多酚萃取液，减压蒸馏的温度为60～80℃，减压蒸馏的真空度为
‑
0.08～
‑
0.1mpa，为b品；此阶段，莲子多酚的提取量为8.5～9.5mg/g。
28.步骤c、将b品过hpd100大孔吸附树脂，以2～3个柱体积的水洗后用6～8个柱体积的体积分数为30～70％的乙醇洗脱，取洗脱液减压蒸馏，减压蒸馏的温度为60～80℃，减压蒸馏的真空度为
‑
0.08～
‑
0.1mpa，得c品；
29.步骤d、将c品过mci树脂，以2～4个柱体积的体积分数为5～15％的乙醇洗脱，再用6～8个柱体积的体积分数为30～60％的乙醇洗脱，减压干燥得成品。
30.一种高含量莲子多酚提取物，由以上制备方法提取得到，包括没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸，其中，没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸的质量总和占莲子多酚提取物总质量的80％～86％，没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸的重量之比依次为3～10：32～55：34～58：4～12。
31.实施例2：
32.一种高含量莲子多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
33.步骤a、将莲子于50～60℃烘干至水分含量为10～12％，使莲子自身的酶失活，粉碎过60目筛，得莲子粉末，密封避光保存，为a品；
34.步骤b、将a品与双水相体系按照质量比为1：50混合，双水相体系由无水乙醇、硫酸铵和水按质量比为40：18：40组成。超声萃取莲子多酚，超声萃取的超声温度45℃，超声功率为220w，超声频率为20khz，超声时间为60min。取上相料液，经抽滤和减压蒸馏后得到粗莲子多酚萃取液，减压蒸馏的温度为70℃，减压蒸馏的真空度为
‑
0.1mpa，为b品；此阶段，莲子多酚的提取量为9mg/g。
35.步骤c、将b品过hpd100大孔吸附树脂，以2个柱体积的水洗后用7个柱体积的体积分数为45％的乙醇洗脱，取洗脱液减压蒸馏，减压蒸馏的温度为70℃，减压蒸馏的真空度为
‑
0.1mpa，得c品；
36.步骤d、将c品过mci树脂，以3个柱体积的体积分数为10％的乙醇洗脱，再用7个柱体积的体积分数为40％的乙醇洗脱，减压干燥得成品。
37.一种高含量莲子多酚提取物，由以上制备方法提取得到，包括没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸，其中，没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸的质量总和占莲子多酚提取物总质量的86％，没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸的重量之比依次为6：40：45：8。
38.实施例3：
39.一种高含量莲子多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
40.步骤a、将莲子于55～60℃烘干至水分含量为12～14％，使莲子自身的酶失活，粉
碎过80目筛，得莲子粉末，密封避光保存，为a品；
41.步骤b、将a品与双水相体系按照质量比为1：40混合，双水相体系由无水乙醇、硫酸铵和水按质量比为45：20：49组成。超声萃取莲子多酚，超声萃取的超声温度60℃，超声功率为250w，超声频率为25khz，超声时间为80min。取上相料液，经抽滤和减压蒸馏后得到粗莲子多酚萃取液，减压蒸馏的温度为80℃，减压蒸馏的真空度为
‑
0.08mpa，为b品；此阶段，莲子多酚的提取量为9.5mg/g。
42.步骤c、将b品过hpd100大孔吸附树脂，以2～3个柱体积的水洗后用6～8个柱体积的体积分数为70％的乙醇洗脱，取洗脱液减压蒸馏，减压蒸馏的温度为80℃，减压蒸馏的真空度为
‑
0.08mpa，得c品；
43.步骤d、将c品过mci树脂，以4个柱体积的体积分数为15％的乙醇洗脱，再用8个柱体积的体积分数为60％的乙醇洗脱，减压干燥得成品。
44.一种高含量莲子多酚提取物，由以上制备方法提取得到，包括没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸，其中，没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸的质量总和占莲子多酚提取物总质量的85％，没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸的重量之比依次为8：40：45：10。
45.实施例4：
46.一种高含量莲子多酚提取物的制备方法，包括以下步骤：
47.步骤a、将莲子于55℃烘干至水分含量为12％，使莲子自身的酶失活，粉碎过60目筛，得莲子粉末，密封避光保存，为a品；
48.步骤b、将a品与双水相体系按照质量比为1：60混合，双水相体系由无水乙醇、硫酸铵和水按质量比为35：16：35组成。超声萃取莲子多酚，超声萃取的超声温度50℃，超声功率为200w,超声频率为15khz，超声时间为40min。取上相料液，经抽滤和减压蒸馏后得到粗莲子多酚萃取液，减压蒸馏的温度为60℃，减压蒸馏的真空度为
‑
0.08mpa，为b品；此阶段，莲子多酚的提取量为8.5mg/g。
49.步骤c、将b品过hpd100大孔吸附树脂，以2个柱体积的水洗后用6个柱体积的体积分数为30％的乙醇洗脱，取洗脱液减压蒸馏，减压蒸馏的温度为60℃，减压蒸馏的真空度为
‑
0.1mpa，得c品；
50.步骤d、将c品过mci树脂，以2个柱体积的体积分数为5％的乙醇洗脱，再用6个柱体积的体积分数为30％的乙醇洗脱，减压干燥得成品。
51.一种高含量莲子多酚提取物，由以上制备方法提取得到，包括没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸，其中，没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸的质量总和占莲子多酚提取物总质量的84％，没食子酸、对羟基苯甲酸、绿原酸和咖啡酸的重量之比依次为6：42：38：7。