碳酸氢钠预防与治疗人冠状病毒感染新用途的制作方法

1.本发明属于医药领域，具体涉及碳酸氢钠用于溶脂破坏病毒包膜脂质体，预防与治疗人冠状病毒感染新用途。


背景技术：

2.冠状病毒是rna病毒，属于巢病毒目、冠状病毒科(coronavirdae)，正冠状病毒亚科。冠状病毒是一个大家族，广泛存在于动物体内，明显的特点是必须依赖宿主细胞才能繁衍。已知的人类冠状病毒共有七型，其中三种引起对人类杀伤力巨大的呼吸道传染病包括新冠病毒、sars病毒、mers病毒。还有四种冠状病毒在人群中较为常见，可引起普通的呼吸道传染病，包括人冠状病毒229e、人冠状病毒dc43、人冠状病毒nl63和人冠状病毒hku1，其中新冠病毒引发新型冠状病毒肺炎(corona virus disease 2019,cov1d-19),简称新冠肺炎，是世界卫生组织命名的2019年发生的新型冠状病毒感染导致的肺炎，是一种由新冠病毒感染的急性呼吸道传染病。世界卫生组织经过评估，已认定为全球大流行疾病，目前已在200多个国家爆发流行，感染与发病人数将达数百万乃至数千万，致死人数将逾数十万。
3.冠状病毒传染病与新冠肺炎治疗迄今还没有特效药，新冠肺炎的疫苗尚在研究中。新冠肺炎与sars、mers传染病的预防目前还限于戴口罩，勤洗手和居家隔离。已有的能够杀灭病毒的消毒剂，包括醇类消毒剂、含氯消毒剂、过氧乙酸消毒剂、含碘消毒剂、含溴消毒剂、酚类消毒剂，对杀灭环境中的新冠病毒有效，但由于对人体毒性很大，均不能用于人体内呼吸道与细胞杀灭新冠病毒。


技术实现要素：

4.本发明的目的，是提供一种人体安全，可以在人体呼吸道灭活或抑制冠状病毒，预防和治疗冠状病毒传染病并且廉价的药物。
5.本发明发现碳酸氢钠用于溶脂破坏病毒包膜脂质体，破坏冠状病毒包膜，灭活冠状病毒，并阻断其包膜与其特异性受体如新冠肺炎的ace2受体结合功能，预防和治疗冠状病毒传染病的新用途。
6.本发明所述的碳酸氢钠，中文别名：小苏打、重碱、重碳酸钠；英文名称：sodium hydrogenocabonate,sobatum,sodium hydrogen carbonate；sodium acid carbonate,sodium bicarbonate；分子式：nahco3；分子量84.00660；熔点270℃(分解)；
7.所述的碳酸氢钠含nahco395-100％；
8.所述的碳酸氢钠用常规的工艺制备灭菌水溶液，制成喷雾剂(喷口鼻喉与雾化呼吸吸入肺部)、雾化剂与注射剂；
9.所述的碳酸氢钠灭菌水溶液ph值7.8-8.9；
10.所述的碳酸氢钠无菌水溶液碳酸氢钠含量4-8％，优选5％；
11.所述的碳酸氢钠无菌水溶液添加溶脂植物中药提取物；
12.所述的溶脂植物中药是紫草、板兰根、佩兰、芦根、金银花、菊花、丁香、栀子的一种
或几种。
13.所述的碳酸氢钠无菌水溶液添加聚乙烯吡咯烷酮。
14.所述的预防和治疗人冠状病毒传染病新用途，是用于人体上呼吸道与口腔咽部喷雾、下呼吸道雾化吸入或静脉注射，碱化呼吸道，溶脂破坏冠状病毒包膜脂质体灭活病毒；预防与治疗冠状病毒感染传染病；
15.本发明的技术进步在于：
16.本发明通过溶脂即破坏病毒包膜脂质体，直接灭活冠状病毒或直接抑制冠状病毒繁殖。冠状病毒是rna病毒，科学研究已经解析出该病毒的结构，已经确认冠状病毒是一种包膜病毒，它的包膜即是它的铠甲、外衣，同时也有识别宿主细胞的功能。这种识别功能在病毒感染繁殖中起关键作用。
17.病毒的基本化学组成非常简单，主要包括核酸和蛋白质，核酸携带遗传信息。冠状病毒的遗传物质是rna，冠状病毒虽然有繁殖所需要的遗传物质rna，但却无法独立完成繁殖过程，它必须通过识别吸附宿主细胞(如ace2受体)，侵入宿主细胞，借助宿主细胞提供的原料、能量和场所合成核酸和蛋白质，等大批量的病毒合成组装完成后，被感染的细胞瓦解，释放病毒颗粒，宿主细胞死亡，病毒颗粒立即识别吸附新的宿主细胞。因此，冠状病毒包膜是其感染繁殖的关键。如果破坏冠状病毒包膜，冠状病毒就失去了感染性。冠状病毒的包膜主要成份是脂类和蛋白质，本发明发现，碳酸氢钠是一种溶脂剂且对人体无害，可以通过溶脂作用，破坏冠状病毒的包膜脂质体，灭活病毒并阻断其包膜对受体识别与结合，使其无法识别与吸附宿主细胞，从而失去其感染性，达到预防与治疗冠状病毒传染病的效果。
18.冠状病毒的繁殖复制速度极快。已有研究证明，一个冠状病毒颗粒，通过其包膜识别吸附宿主细胞后，在一个细胞很快完成合成组装，然后瓦解宿主细胞，在瓦解的宿主细胞表面释放出上千颗冠状病毒颗粒，说明冠状病毒可以上千倍的比例复制，感染宿主细胞。同时，冠状病毒感染是一种急性呼吸道传染病，病毒感染与繁殖主要在呼吸道，首先是上呼吸道，然后进入下呼吸道。就是有个别通过眼结膜或皮肤感染者，研究证明也会很快转到上呼吸道与下呼吸道。所以，本发明通过在上呼吸道(包括口腔)喷雾，下呼吸道雾化给药，碱化呼吸道，一方面在冠状病毒进入呼吸道尚未进入宿主细胞前破坏病毒包膜脂质体，使病毒失去识别吸附宿主细胞能力而直接灭活；一方面在冠状病毒进入宿主细胞繁殖瓦解渗出到宿主细胞表面时破坏其病毒包膜脂质体，使病毒失去对新的宿主细胞识别吸附能力而灭活。
19.本发明溶脂破坏冠状病毒包膜用途原理与常规消毒性脂溶剂如乙醚、乙醇、氯仿、过氧乙酸、含氯消毒剂等杀灭病毒的原理是一致的。但是这些消毒剂，由于对人体危害很大，不能用于人体内杀灭病毒。本发明是一种经典的安全药品，药典已作为抗酸剂口服与静脉注射，安全使用上百年，而且，碳酸氢钠也作为食品添加剂与辅助剂，也安全使用逾百年。本发明能够在人体安全应用，灭活冠状病毒，控制冠状病毒感染。常规脂溶性消毒剂，虽然可以在环境中灭活冠状病毒，却不能应用于人体内。
20.本发明相对于其他可以进入人体的抗病毒药物，用于控制与治疗人冠状病毒性感染，本发明的成本极其低廉，其控制与治疗费用低于抗病毒药物几十倍以上。进入人体的抗病毒药物均对人体有毒副作用，而本发明人体应用，没有抗病毒药物的毒副作用。
具体实施例
21.实施例1
22.取药品级碳酸氢纳原料(nahco3含量大于99.5％)100克，加入蒸馏水2000ml，摇动让碳酸氢钠原料完全溶解，常规灭菌，在避菌环境车间，将溶液用雾化剂常规工艺制成雾化液，分别加入常规喷雾器贮液罐(每罐20ml)，制备成喷雾剂。使用时，将雾化器喷嘴对准鼻腔、口腔、咽部上呼吸道喷雾雾化每次10-20喷，每日10-20次，预防或治疗新冠肺炎。
23.实施例2
24.取药品级碳酸氢钠原料(nahco3含量大于99.5％)50克,加入蒸馏水1000ml，摇动让碳酸氢钠完全溶解，常规灭菌，常规雾化剂工艺制备成雾化溶液系统，加入超声雾化器贮液罐(常规医疗器械)，或加入有雾化功能的呼吸机雾化器内，常规操作超声雾化机或呼吸机，将雾化溶液吸入气道预防或治疗新冠肺炎。
25.本发明委托美籍华人医生应用于新冠肺炎临床，基本资料如下：
26.1、一般资料：社区新型冠状病毒性肺炎60例，其中男性32例，女性28例。年龄50-60岁27例，61-70岁33例。随机编号选择30例为治疗组，30例为对照组。所有患者符合新型冠状病毒性肺炎轻症诊断标准。
27.3、治疗方案：对照组：给予常规西医治疗，常规抗病毒对症治疗，5天为1个疗程。治疗组：在对照组治疗的基础上，再给予碳酸氢钠喷雾剂，喷鼻、喷喉，每2小时喷1次，每次喷10-12喷。连续5天。
28.观察方法：观察医师通过电话或微信问诊患者治疗前、治疗5天后临床症状，并记录临床观察表。
29.4、结果：门诊电话回访患者顺从性良好，无脱落病例。治疗组治疗后发热头身痛、咽痛、鼻塞流涕、乏力、咳嗽、咳痰症状完全消失21例，改善8例，无效1例，显效率70％，总有效率96％，对照组症状完全消失12例，改善8例，5天无改善转重症住院10例，显效占40％，总有效率66％。治疗组与对照组比较有显著性差异。
30.本发明委托第三方方检测机构做冠状病毒灭活作用实验，基本资料如下：
31.样品描述：5％炭酸氢钠液体
[0032][0033]
一、器材
[0034]
1.试验用病毒株：人类冠状病毒229e(human coronavirus 229e，vr-740)。
[0035]
2.宿主细胞：mrc-5细胞(ccl-171)。
[0036]
3.消毒剂：5％炭酸氢钠液体。
[0037]
4.中和剂成分及浓度：d/e中和肉汤。
[0038]
5.细胞培养瓶与96孔培养板。
[0039]
6.有机干扰物质：3％牛血清白蛋白。
[0040]
7.标准硬水(硬度为342mg/l)。
[0041]
8.细胞维持培养基、细胞完全培养基和胎牛血清。
[0042]
9.恒温器、二氧化碳培养箱、生物安全柜和可调移液器及无菌器材。
[0043]
二、方法
[0044]
1.测试依据：《消毒技术规范》2002版第2.1.1.10.5项和2.1.1.10.7项。
[0045]
2.病毒悬液制备：试验用滴度106—107tcid
50
/0.1ml的hcov-229e病毒悬液与3％牛血清白蛋白有机干扰物质对倍稀释，置20℃恒温，备用。
[0046]
3.中和剂鉴定试验：试验用5％炭酸氢钠液体，作用时间为30.0min，试验温度为20℃恒温。试验重复3次。
[0047]
4.病毒灭活试验：试验用5％炭酸氢钠液体，作用时间为30.0min、60.0mim、90.0min，试验温度为20℃恒温。试验重复3次。
[0048]
三、结果
[0049]
1.中和剂鉴定试验
[0050]
经3次重复试验，在20℃恒温试验条件下，用5％炭酸氢钠液体的中和剂鉴定结果为：第1组病毒平均滴度值为1.56,第2组病毒平均滴度值为1.81。第3组、第4组和第5组病毒平均滴度值分别为6.11、5.98和6.08(见表1)。
[0051]
表1中和剂鉴定试验结果
[0052][0053]
2.对冠状病毒的灭活效果
[0054]
经3次重复试验，在20℃恒温试验条件下，5％炭酸氢钠液体，作用60.0min，对冠状病毒的平均灭活对数值>4.00，杀菌率>99.99％(见表2)。
[0055]
表2对人类冠状病毒229e株的灭活效果
[0056][0057]
注：阴性对照细胞生长良好，无细胞病变。
[0058]
四、结论
[0059]
1.经3次重复试验，含d/e中和肉汤溶液可有效中和5％炭酸氢钠液体对人类冠状病毒229e株的残留作用，且中和剂和中和产物对人类冠状病毒229e株及细胞的生长基本无影响。
[0060]
2.经3次重复试验，在20℃恒温试验条件下，应用5％炭酸氢钠液体，用60.0min，对人类冠状病毒229e株的平均灭活对数值>4.00，病毒灭活率>99.99％。