一种固体废物中杀菌剂的检测方法与流程

1.本发明涉及杀菌剂的检测方法，具体涉及一种水性建筑墙面涂料及乳液生产过程中产生的固体废物中杀菌剂的检测方法。


背景技术：

2.水性建筑涂料是指以合成树脂乳液、天然树脂乳液等为主要成膜物质，加入助剂、水、或助溶剂等配制而成，涂覆在水泥基及其他非金属材料为基材的建筑物内表面和外表面的墙面涂料。水性建筑涂料以水为分散介质，并富含多种可以滋养微生物的成分，因此是微生物生长繁殖的理想温床，导致防水涂料的性能出现变化，进而威胁到防水涂料的质量，因此，恰当添加杀菌剂是确保水性建筑涂料质量的必要保证措施。在gb5085.6
‑
2007中有限量值的有毒有害物质多菌灵、敌草隆和百菌清均被用于水性涂料中，起到防霉抗菌的作用，这3种生物杀菌剂均对人体和环境具有一定的危害，在绿色标准gb/t35602
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2017中被明文限制，规定了水性涂料中多菌灵、敌草隆、百菌清3种杀菌剂的限量要求为质量分数不大于50mg/kg。所以，准确监测水性涂料中三种杀菌剂的用量，确认涂料是否满足上述要求是十分必要的。
3.理化检验
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化学分册，2019，55(8)：923
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926中公开了高效液相色谱法测定水性涂料中4种生物杀伤剂(多菌灵、敌草隆、百菌清、三氯生)，具体为：将水性涂料样品用20ml的1％乙酸甲醇溶液超声提取20min，冷却室温后，用1％乙酸甲醇溶液稀释至25ml，摇匀后，以2000r/min转速离心20min，上清液用滤膜过滤，最后用高效液相色谱法测定。
4.公开号为cn 111610283 a的专利中公开了一种环境水体中异噻唑啉酮类杀菌剂和三氯生类杀菌剂的检测方法，将样品经过粗滤和细滤，并加入内标物，使用固相萃取小柱提取、净化，最后用高效液相色谱法测定。
5.以上公开方法对待测样品均进行简单提取过滤或者简单的净化富集后再进行测定；对于复杂样品(例如：水性建筑墙面涂料及乳液生产过程中产生的固体废物样品)中杀菌剂进行检测时，由于该类固废样品成分基质比较复杂，检测时干扰很大，上述方法不能去除油脂色素等杂质、减少基质效应、消除假阳性结果。
6.目前，现行的关于固体废物中多菌灵的前处理分析方法是gb5085.3
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2007附录l，采用加水调ph，有机试剂多次萃取浓缩，转溶剂浓缩，该前处理方法萃取试剂量大，萃取时间长，转换过程多，回收率低，基质效应干扰大，假阳性结果偏高。敌草隆的前处理分析方法是gb5085.6
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2007附录m，此标准方法是针对水样，采用c18固相提取小柱提取净化浓缩，百菌清的前处理分析方法是gb5085.3
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2007附录h，采用索氏提取，硅酸镁柱净化，仅c18固相提取小柱或者硅酸镁柱对水性建筑墙面涂料及乳液生产过程中产生的固体废物中的油脂色度净化效果不理想，且回收率低。
7.因此，提供一种快速、准确检测多菌灵、敌草隆和百菌清的方法，适用于水性建筑墙面涂料及乳液生产过程中产生的固体废物中多菌灵、敌草隆和百菌清的定性和定量分析是十分有必要的。


技术实现要素：

8.本发明的目的在于：提供一种快速、准确检测固体废物(水性建筑墙面涂料及乳液生产过程中产生的固体废物)中多菌灵、敌草隆、百菌清的方法。
9.为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
10.一种固体废物中杀菌剂的检测方法，所述的杀菌剂为多菌灵、敌草隆和百菌清，所述的检测方法包括如下步骤：
11.s1：杀菌剂标准曲线的绘制：
12.配置不同浓度的杀菌剂标准溶液，采用高效液相色谱仪对杀菌剂标准溶液进行测定，以标准溶液浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线；
13.s2：对固体废物进行前处理；
14.向固体废物中加入提取液混匀，经超声提取后，加入净化剂净化，离心得液体，液体浓缩后用甲醇定容，过滤后得待测液；
15.s3：待测液中杀菌剂浓度的检测
16.采用高效液相色谱仪对待测液进行测定，记录色谱峰的保留时间和峰面积，根据色谱峰的保留时间定性，根据色谱峰的峰面积进行外标法定量，得出待测液中杀菌剂的浓度。
17.优选地，步骤s1中杀菌剂混合标准溶液由多菌灵、敌草隆、百菌清和甲醇配置而成。
18.优选地，所述的固体废物为水性建筑墙面涂料及乳液生产过程中产生的固体废物。
19.优选地，步骤s2中提取液为正己烷和丙酮混合溶液。
20.优选地，所述的正己烷和丙酮的体积比为1：1。
21.优选地，步骤s2中净化剂为弗罗里硅土和石墨化炭黑的混合物。
22.优选地，所述的弗罗里硅土与石墨化炭黑的质量比为1:(0.05
‑
0.1)，所述的净化剂的加入量为每毫升提取液加入30
‑
50mg的净化剂。
23.优选地，步骤s2中离心条件为：在4000
‑
8000r/min下离心5
‑
10min。
24.优选地，步骤s2中过滤采用0.45μm有机滤头进行过滤。
25.优选地，步骤s1和s3中高效液相色谱的检测条件相同，均设置如下：流动相a：超纯水，流动相b：甲醇，二元梯度洗脱：0
‑
8min，流动相b由55％升至95％，8
‑
15min流动相b由95％降至55％。
26.优选地，所述的色谱柱为inertsil ods
‑
sp，色谱柱的规格为250mm
×
4.6mm，填料粒度为5μm；色谱柱的检测条件：进样量为5
‑
20μl，流速为0.5
‑
1.5ml/min，柱温为25
‑
40℃。
27.优选地，所述的高效液相色谱中检测器的检测波长为240nm。
28.本发明的有益效果在于：
29.本发明的固体废物采用提取液提取可以减少干扰物(如部分脂类、色素)的提取量，提取后加入净化剂能够消除油脂色素，破乳，减少基质效应，去除假阳性结果，提高结果的准确性。离心后的液体浓缩，达到富集样品，提高灵敏度，降低检出限。
30.本发明的其它特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分地从说明书中变得显而易见，或者通过实施本发明而了解。本发明的目的和其他优点可通过在说明书、权利
要求书以及附图中所指出的结构来实现和获得。
附图说明
31.为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作一简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
32.图1多菌灵校准曲线和线性方程；
33.图2敌草隆校准曲线和线性方程；
34.图3百菌清校准曲线和线性方程；
35.图4多菌灵、敌草隆、百菌清标准溶液的hplc图谱色谱图。
具体实施方式
36.为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地说明，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
37.实施例1
38.一、水性建筑墙面涂料及乳液生产过程中产生的固体废物中多菌灵、敌草隆、百菌清的检测
39.(1)对待测样品(固体废弃物)进行前处理：
40.称取10g左右待测样品(固体废弃物)于50ml离心管中，加入正己烷：丙酮(体积比1:1)20ml，涡旋混匀后超声提取30min。加入弗罗里硅土1000mg，石墨化炭黑50mg，在4000r/min下离心5min(此处离心条件设置不仅仅限制于在4000r/min下离心5min，只要转速在4000
‑
8000r/min，时间在5
‑
10min内都可以)，离心后的提取液浓缩近干后用甲醇定容1ml，用0.45μm有机滤头过滤，得待测液。
41.(2)高效液相色谱系统测定：
42.按照色谱条件测定标准工作溶液和待测液，用标准曲线对待测液浓度进行校正，外标法定量。色谱条件：
43.色谱柱：inertsil ods
‑
sp，5μm，4.6
×
250mm
44.紫外检测器波长：240nm
45.进样量：10μl
46.流速：0.8ml/min
47.柱温：35℃
48.流动相a：超纯水，流动相b：甲醇，二元梯度洗脱：0
‑
8min，流动相b由55％升至95％，8
‑
15min流动相b由95％降至55％。
49.(2.1)杀菌剂标准曲线的绘制：
50.将标准溶液逐级稀释，制备混合浓度为0.10、0.20、0.50、1.00、2.00、5.00、10.0μg/ml 7个不同浓度的系列混合标准溶液，按照浓度从低到高顺序，依照上述色谱条件测定。
按其标准溶液浓度(μg/ml)对峰面积a做标准曲线图，如图1
‑
3所示，线性关系的结果见表1。
51.表1线性关系表
52.目标物名称回归方程相关系数r2多菌灵y＝43727.4x
‑
2817.490.9998敌草隆y＝43626.9x
‑
1258.721.0000百菌清y＝53194.7x
‑
1304.350.9994
53.标准溶液的hplc图谱色谱图如图4所示：从图4中可以看出：本发明的标准溶液中含有多菌灵、敌草隆和百菌清。
54.(2.2)实际样品测定
55.选取a、b两个样品，按照步骤(1)进行前处理后得到待测液，对每个待测液平行测定三次，计算目标物的含量，测定结果结果见表2。
56.表2实际样品测定结果表
57.目标物名称a样品b样品多菌灵未检出0.69敌草隆未检出2.29百菌清未检出未检出
58.二、精密度实验和加标回收实验
59.精密度实验
60.采用a阴性样品进行加标，加标量为0.10μg(加标浓度为0.10μg/ml)测定其精密度，平行测定6组，结果见表3。
61.表3精密度测定结果表
[0062][0063]
从表3可以看出：本方法多菌灵的精密度相对偏差rsd为3.7％，敌草隆的精密度相对偏差rsd为5.6％，百菌清的精密度相对偏差rsd为4.6％，符合检测要求。
[0064]
加标回收实验
[0065]
采用a阴性样品做加标回收实验，样品分别添加0.20μg(加标浓度为0.20μg/ml)，依据本发明的方法进行测定含量，平行测定3组，计算回收率，结果见表4。
[0066]
表4加标0.20μg的回收率结果表
[0067][0068]
采用a阴性样品做加标回收实验，样品分别添加0.50μg(加标浓度为0.50μg/ml)，依据本发明的方法进行测定含量，平行测定3组，计算回收率，结果见表5。
[0069]
表5加标0.50μg的回收率结果表
[0070][0071][0072]
从表4、5可以看出：本方法平均加标回收率在85.0％
‑
99.9％之间，符合检测要求。
[0073]
实施例2
[0074]
实施例2与实施例1的区别仅仅在于步骤(1)的过程不同，其他操作均相同，不同之处如下：“加入弗罗里硅土1000mg，石墨化炭黑50mg”修改为“加入弗罗里硅土600mg，石墨化炭黑30mg”。得到实际样品测定结果如下表6所示：
[0075]
表6实际样品测定结果表
[0076]
目标物名称a样品b样品多菌灵未检出0.75敌草隆未检出2.39百菌清未检出未检出
[0077]
采用a阴性样品做加标回收实验，样品加标量为0.20μg(加标浓度为0.20μg/ml)，依据本发明的方法进行测定含量，平行测定3组，计算回收率，结果见表7。
[0078]
表7加标0.20μg的回收率结果表
[0079][0080]
采用a阴性样品做加标回收实验，样品加标量为0.50μg(加标浓度为0.50μg/ml)，依据本发明的方法进行测定含量，平行测定3组，计算回收率，结果见表8。
[0081]
表8加标0.50μg的回收率结果表
[0082][0083]
从表7、8可以看出：本方法平均加标回收率在89.3％
‑
102％之间，符合检测要求。
[0084]
对表4、5和表7、8可以看出，在提取液为20ml，折算弗罗里硅土600mg；石墨化炭黑30mg比弗罗里硅土1000mg；石墨化炭黑50mg时，回收率稍高。
[0085]
需要说明的是，实施例1
‑
2中指出的固体废物为水性建筑墙面涂料及乳液生产过程中产生的固体废物，可以是涂料生产乳液产生的污泥，也可以是生产涂料产生的漆渣和污泥。
[0086]
尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的普通技术人员应当理解：其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或者替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神和范围。