一种测定异丙托溴铵吸入剂中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯的方法与流程

1.本发明属于化学药物分析检测领域，具体涉及一种基于lc
‑
ms测定异丙托溴铵吸入剂中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯的方法。


背景技术：

2.异丙托溴铵吸入剂包装材料为聚乙烯塑料安瓿瓶，聚乙烯塑料安瓿瓶常见的添加剂有塑化剂，如邻苯二甲酸酯类塑化剂；防老剂，如酚类抗氧剂1010、抗氧剂1076等；这些添加剂在包装容器和药液的接触过程中往往容易形成单体或者降解产物，这些添加剂和产物均有可能浸出到药液中，影响药液的质量或者最终摄入人体产生直接的安全性隐患。其中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯就是塑料材质包装材料中常见的邻苯二甲酸酯类添加剂。
3.邻苯二甲酸二丁酯，室温下为无色油状液体，有芳香气味。邻苯二甲酸二丁酯是常用的增塑剂，可使制品具有良好的柔软性。结构式如下：
[0004][0005]
邻苯二甲酸二异丁酯，无色透明油状液体，略有芳香气味。邻苯二甲酸二异丁酯是常用的增塑剂，可使制品具有良好的柔软性。结构式如下：
[0006][0007]
异丙托溴铵，是一种支气管扩张药。临床上用于：
①
缓解慢性阻塞性肺病(copd)引起的支气管痉挛、喘息症状。
②
防治哮喘、尤适用于因用β受体激动药产生肌肉震颤、心动过速而不能耐受此类药物的患者。异丙托溴铵吸入剂包装材料为聚乙烯塑料安瓿瓶，常添加邻苯二甲酸酯类塑化剂，如邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯，有浸出到药液中的风险，所以需要一种快速并且准确的方法对异丙托溴铵吸入剂中的邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯进行定量检测。
[0008]
并且目前尚无关于通过lc
‑
ms分析方法检测异丙托溴铵吸入剂中的邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯含量的文献或专利公开。


技术实现要素：

[0009]
发明目的：本发明的目的是提供一种基于lc
‑
ms测定异丙托溴铵吸入剂中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯的方法。本发明专属性良好，灵敏度符合限度要求；本发明方法的检测结果准确、可靠，可用于异丙托溴铵吸入剂的质量控制。
[0010]
技术方案：
[0011]
基于lc
‑
ms测定异丙托溴铵吸入剂中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯的方法，包括如下步骤：确定样品的配制，利用液相
‑
质谱联用仪，采用标准曲线法，实现异丙托溴铵吸入剂中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯含量的准确测定。
[0012]
具体包括以下步骤：
[0013]
(1)迁移样品的配制：精密移取吸入用异丙托溴铵吸入剂1.0ml至10ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，再精密移取1.0ml该溶液至5ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，作为样品。
[0014]
(2)采用lc
‑
ms对迁移样品进行测定：
[0015]
色谱柱：agilent ec
‑
c18(4.6mm*50mm，2.7μm)；柱温：30℃；
[0016]
有机相：0.1％甲酸水溶液
‑
甲醇(25:75，v/v)；流速：0.8ml/min；
[0017]
离子模式：esi正离子模式；扫描方式：sim q3；
[0018]
进样体积：5μl；质谱采集时间：2.5min～5.5min；采集离子(m/z)：579；
[0019]
离子化电压：3500v；鞘气：60arb；辅助气：15arb；尾吹气：2arb；
[0020]
传输管温度：350℃；蒸发器温度：350℃。
[0021]
(3)精密量取一定量的邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯溶液配制成对照品溶液；量取一定量的供试品样品，配制成样品溶液，进样，记录色谱图，按照标准曲线法，通过测量对照品溶液中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯的峰面积和浓度，计算样品溶液中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯的含量。
[0022]
有益效果：本发明提供了一种检测异丙托溴铵吸入剂中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯的含量的方法，采用该方法可以准确的检测低浓度杂质的含量，检测方法便捷、快速，可用于于异丙托溴铵吸入剂的质量控制；本发明对检测过程中的lc
‑
ms操作参数进行了优化选择，使检测时间短；通过方法学验证，说明本发明专属性、准确性良好，灵敏度也符合限度要求。
附图说明
[0023]
图1实施例1中本发明方法对样品的检测结果。
[0024]
图2实施例2中本发明方法的邻苯二甲酸二异丁酯线性结果。
[0025]
图3实施例2中本发明方法的邻苯二甲酸二丁酯线性结果。
具体实施方式
[0026]
为了加深对本发明的理解，下面将结合实施例和附图对本发明作进一步详述，该实施例仅用于解释本发明，并不构成对本发明保护范围的限定。
[0027]
下述实施例中使用的主要仪器有：液相质谱联用仪(型号：thermo vanquish uhplc
‑
thermo tsq quantis，生产厂家：赛默飞世尔科技(中国)有限公司)
[0028]
下述实施例中使用的对照品溶液有：邻苯二甲酸二丁酯(来源：北京坛墨质检科技有限公司；含量：1000μg/ml)；邻苯二甲酸二异丁酯(来源：北京坛墨质检科技有限公司；含量：1000μg/ml)
[0029]
下述实施例中使用的溶剂有：乙醇(来源：tedia；纯度：色谱级)、甲醇(来源：merck；纯度：色谱级)、超纯水(milli
‑
q)
[0030]
实施例1异丙托溴铵吸入剂的测试
[0031]
(1)样品溶液的制备：
[0032]
精密移取吸入用异丙托溴铵吸入剂1.0ml至10ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，再精密移取1.0ml该溶液至5ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为样品溶液。
[0033]
(2)对照品溶液的制备：
[0034]
对照品储备液
‑
1：精密移取1.5ml的邻苯二甲酸二丁酯对照品溶液和0.35ml邻苯二甲酸二异丁酯对照品溶液于50ml容量瓶中，用乙醇定容至刻度，摇匀，作为对照品储备液
‑
1。
[0035]
标准限度对照品溶液：精密移取2.0ml对照品储备液
‑
1于10ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为标准限度对照品溶液。
[0036]
定量限溶液：精密移取0.4ml对照品储备液
‑
1至10ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为定量限溶液。
[0037]
检测限溶液：精密移取2.5ml定量限溶液至5ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为检测限溶液。
[0038]
线性溶液：精密移取一定量体积(见表1)对照品储备液
‑
1分别至不同容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为线性溶液。
[0039]
表1线性溶液配制
[0040][0041]
(3)仪器方法：
[0042][0043]
(4)分析结果：
[0044]
在lc
‑
ms分析中，异丙托溴铵吸入剂中未发现有检出超过限值的邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯，具体结果见图1。
[0045]
实施例2线性
[0046]
(1)溶液的配制：
[0047]
空白溶液：甲醇
[0048]
对照品储备液
‑
1：精密移取1.5ml的邻苯二甲酸二丁酯对照品溶液和0.35ml邻苯二甲酸二异丁酯对照品溶液于50ml容量瓶中，用乙醇定容至刻度，摇匀，作为对照品储备液
‑
1。
[0049]
标准限度对照品溶液：精密移取2.0ml对照品储备液
‑
1于10ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为标准限度对照品溶液。
[0050]
定量限溶液：精密移取0.4ml对照品储备液
‑
1至10ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为定量限溶液。
[0051]
线性溶液：精密移取一定量体积(见表2)对照品储备液
‑
1分别至不同容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为线性溶液。
[0052]
表2线性溶液配制
[0053][0054]
(2)仪器方法：
[0055][0056]
(3)分析结果：
[0057]
待测物线性方程的相关系数均不小于0.990，线性相关方程及系数见图2～图3。
[0058]
实施例3准确度考察
[0059]
(1)溶液的配制：
[0060]
空白溶液：甲醇
[0061]
对照品储备液
‑
1：精密移取1.5ml的邻苯二甲酸二丁酯对照品溶液和0.35ml邻苯二甲酸二异丁酯对照品溶液于50ml容量瓶中，用乙醇定容至刻度，摇匀，作为对照品储备液
‑
1。
[0062]
标准限度对照品溶液：精密移取2.0ml对照品储备液
‑
1于10ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为标准限度对照品溶液。
[0063]
定量限溶液：精密移取0.4ml对照品储备液
‑
1至10ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为定量限溶液。
[0064]
线性溶液：精密移取一定量体积(见表5)对照品储备液
‑
1分别至不同容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为线性溶液。
[0065]
表5线性溶液配制
[0066][0067]
异丙托溴铵溶液
‑
1：精密移取吸入用异丙托溴铵吸入剂1.0ml至10ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为异丙托溴铵溶液
‑
1。
[0068]
供试品溶液：精密移取1.0ml异丙托溴铵溶液
‑
1至5ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为供试品溶液。平行配制两份。
[0069]
50％标准限度添加供试品溶液：精密移取1.0ml异丙托溴铵溶液
‑
1和0.5ml对照品储备溶液
‑
1至5ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为50％标准限度添加供试品溶液。平行配制三份。
[0070]
100％标准限度添加供试品溶液：精密移取1.0ml异丙托溴铵溶液
‑
1和1.0ml对照品储备溶液
‑
1至5ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为100％标准限度添加供试品溶液。平行配制三份。
[0071]
150％标准限度添加供试品溶液：精密移取1.0ml异丙托溴铵溶液
‑
1和1.5ml对照品储备溶液
‑
1至5ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为150％标准限度添加供试品溶液。平行配制三份。
[0072]
(2)仪器方法：
[0073][0074][0075]
(3)分析结果：
[0076]
吸入用异丙托溴铵溶液的准确度考察中各物质的回收率均在80％～120％范围内，且三个水平回收率的rsd不大于8％(n＝9)，结果见表6～表7。
[0077]
表6邻苯二甲酸二丁酯准确度结果
[0078][0079]
表7邻苯二甲酸二异丁酯准确度结果
[0080][0081]
实施例4灵敏度考察
[0082]
(1)溶液的配制：
[0083]
空白溶液：甲醇
[0084]
对照品储备液
‑
1：精密移取1.5ml的邻苯二甲酸二丁酯对照品溶液和0.35ml邻苯二甲酸二异丁酯对照品溶液于50ml容量瓶中，用乙醇定容至刻度，摇匀，作为对照品储备液
‑
1。
[0085]
定量限溶液：精密移取0.4ml对照品储备液
‑
1至10ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为定量限溶液。
[0086]
检测限溶液：精密移取2.5ml定量限溶液至5ml容量瓶中，用甲醇稀释并定容至刻度，摇匀，该溶液为检测限溶液。
[0087]
(2)仪器方法：
[0088][0089][0090]
(3)分析结果：
[0091]
检测限溶液连续进样三针，单位色谱峰的信噪比均不小于3；定量限溶液连续进样六针，待测物色谱峰的信噪比均不小于10；待测物峰面积的rsd％不大于15％(n＝6)；。
[0092]
综上所述，本发明采用lc
‑
ms检测异丙托溴铵吸入剂中邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯的方法，检测方法便捷、快速、检测灵敏度符合要求。
[0093]
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。