一种具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状能力的发酵乳杆菌HF19及其应用

本发明属于微生物，涉及一种发酵乳杆菌，具体涉及一种具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状的发酵乳杆菌（

lactobacillus fermentum）hf19及其应用。

背景技术：

1、近年来，随着饮食结构西方化、生活方式改变及环境因素变化，溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，uc）的发病率呈逐年上升趋势。溃疡性结肠炎是一类慢性、复发性肠道炎症性疾病，主要临床表现为腹痛、腹泻、黏液脓血便及体重下降等，病程迁延且易反复发作，严重影响患者生活质量。目前，溃疡性结肠炎的临床干预手段主要包括氨基水杨酸类药物、糖皮质激素、免疫抑制剂及生物制剂等，部分重症或药物控制不佳患者需接受外科手术治疗。然而，现有药物长期使用可能伴随感染风险增加、肝肾功能损伤、免疫抑制及继发性失应答等问题；外科手术亦可能带来疾病复发、吻合口漏、肠粘连、肠梗阻及短肠综合征等风险。因此，开发安全性高、成本较低、适用于长期摄入并可辅助缓解溃疡性结肠炎症状的新型微生态制剂具有重要应用价值。

2、乳酸菌是一类广泛存在于传统发酵食品和人体肠道中的有益微生物，具有调节肠道菌群、降低炎症反应、增强肠道屏障功能及维持肠道微生态稳态等作用。已有研究表明，部分乳酸菌可通过降低促炎因子释放、提高紧密连接蛋白表达、促进杯状细胞和肠黏液屏障恢复等方式，缓解溃疡性结肠炎相关肠道损伤。因此，筛选具有良好胃肠道耐受性、安全性及抗炎活性的乳酸菌菌株，是开发用于改善溃疡性结肠炎症状的益生菌产品的重要方向。

3、青藏高原传统发酵乳制品长期处于特殊地理环境、低温、低氧及高脂乳基质等条件下自然发酵，蕴含丰富且具有地域特色的乳酸菌资源。来源于青藏高原传统发酵乳制品的乳酸菌在胃肠道耐受、肠道黏附、免疫调节及屏障保护等方面具有潜在应用优势。基于此，从青藏高原传统发酵牦牛乳制品中筛选具有抗炎活性、肠道屏障保护能力及良好安全性的乳酸菌菌株，对于开发可辅助缓解溃疡性结肠炎症状的益生菌制剂、功能食品或药物组合物具有重要意义。

技术实现思路

1、针对背景技术中存在的上述问题，本发明提供了一种具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状能力的发酵乳杆菌hf19及其应用。本发明从青藏高原传统发酵乳制品中分离纯化出的乳酸菌中，筛选出具有降低uc症状的菌株，在测定菌株体外抑制raw264.7炎症细胞产生no能力、保护caco-2细胞单层膜能力的基础上，基于耐酸耐胆盐、抗生素耐药性实验等益生特性，筛选出一株综合特性好、具有缓解uc症状能力的乳酸菌，并进一步用动物实验验证其功能。

2、本发明的目的是通过以下技术方案实现的：

3、一种具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状能力的发酵乳杆菌hf19，为发酵乳杆菌（

lactobacillus fermentum），于2025年10月21日保藏于中国典型培养物保藏中心；地址为中国湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山，武汉大学，简称cctcc；保藏号为cctcc no.m20252279；16s rdna序列如seqid:1所示。

4、一种上述发酵乳杆菌hf19的制备方法，包括如下步骤：

5、步骤(1)采用稀释涂布、平板划线法分离纯化出单一乳酸菌；

6、步骤(2)通过体外实验比较不同分离菌株具有缓解uc症状能力，筛选出具有抑制uc症状功能的乳酸菌；

7、步骤(3)通过对分离菌株的耐酸耐胆盐、黏附特性和抗生素耐药性实验，获得具有良好益生特性的菌株。

8、一种上述发酵乳杆菌hf19在缓解慢性溃疡性结肠炎中的应用。

9、一种上述发酵乳杆菌hf19在制备具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状功能的组合物中的应用。

10、一种上述发酵乳杆菌hf19在制备具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状功能的食品中的应用，所述食品为发酵乳制品。

11、一种上述发酵乳杆菌hf19在制备具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状功能的活菌制剂中的应用。

12、一种组合物，包含上述发酵乳杆菌hf19。

13、一种食品，包含上述发酵乳杆菌hf19。

14、一种乳产品，包含上述发酵乳杆菌hf19。

15、一种活菌制剂，包含上述发酵乳杆菌hf19。

16、相比于现有技术，本发明具有如下优点：

17、本发明提供了一株具有缓解肠道炎症作用的发酵乳杆菌hf19，通过体外抗炎及肠道屏障保护实验筛选发现，hf19具有抑制炎症反应和保护肠上皮屏障的潜力；进一步经耐酸耐胆盐、体外黏附性及常用抗生素敏感性实验评价表明，hf19在ph 3.0酸性条件和0.1%胆盐环境下仍具有一定生长能力，具备胃肠道环境耐受潜力；该菌株具有可检测的肠上皮细胞黏附能力，且未表现出对多数常用抗生素的广泛耐药现象，具有进一步开发应用的安全基础。采用dss诱导的小鼠慢性溃疡性结肠炎模型进行体内验证，结果表明，hf19干预能够显著降低疾病活动指数（dai）（p<0.05），改善模型诱导的结肠缩短，使结肠长度恢复至接近正常水平，并可调节脾脏指数和肝脏指数，缓解炎症状态下的免疫器官异常反应及肝脏代谢负担，同时对肾脏指数无显著不良影响。elisa检测结果显示，hf19可显著降低结肠组织中促炎因子il-1β水平，其中hf19 d组还可显著降低il-6水平并提高抗炎因子il-10水平，提示其能够通过调节促炎/抗炎因子平衡减轻肠道炎症反应。结合结肠组织h&e染色和ab-pas染色结果，hf19能够改善结肠黏膜结构破坏，减轻炎性细胞浸润，促进隐窝结构和杯状细胞黏液分泌功能恢复，从而维持肠黏膜屏障完整性。综上，发酵乳杆菌（

lactobacillus

fermentum）hf19具有耐酸耐胆盐、抗炎调节及肠道屏障保护作用，可作为益生菌发酵剂或功能性食品原料，用于制备缓解炎症性肠病相关症状的产品。

1.一种具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状能力的发酵乳杆菌hf19，其特征在于所述hf19为发酵乳杆菌（lactobacillus fermentum），保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏号为cctcc no.m20252279。

2.根据权利要求1所述的具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状能力的发酵乳杆菌hf19，其特征在于所述hf19的16s rdna序列如seqid:1所示。

3.一种权利要求1-2任一项所述发酵乳杆菌hf19在缓解慢性溃疡性结肠炎中的应用。

4.一种权利要求1-2任一项所述发酵乳杆菌hf19在制备具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状功能的组合物中的应用。

5.一种权利要求1-2任一项所述发酵乳杆菌hf19在制备具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状功能的食品中的应用。

6.一种权利要求1-2任一项所述发酵乳杆菌hf19在制备具有缓解慢性溃疡性结肠炎症状功能的活菌制剂中的应用。

7.一种组合物，其特征在于所述组合物包含权利要求1-2任一项所述发酵乳杆菌hf19。

8.一种食品，其特征在于所述食品包含权利要求1-2任一项所述发酵乳杆菌hf19。

9.一种乳产品，其特征在于所述乳产品包含权利要求1-2任一项所述发酵乳杆菌hf19。

10.一种活菌制剂，其特征在于所述活菌制剂包含上权利要求1-2任一项所述发酵乳杆菌hf19。