一种标志物或检测标志物的试剂在制备暴发性1型糖尿病辅助诊断产品和分型识别产品中的应用

本发明属于医学分子诊断领域，具体涉及一种标志物或检测标志物的试剂在制备暴发性1型糖尿病辅助诊断产品和分型识别产品中的应用。

背景技术：

1、暴发性1型糖尿病即ft1d，它是一种特殊类型的1型糖尿病，属于特发性范畴，以急性起病、胰岛功能快速丧失为特征。该病的临床表现为血糖急剧升高（≥16mmol/l）、酮症酸中毒及糖化血红蛋白（hba1c）偏低，常伴随胰酶升高及多脏器损伤。由于病程短、β细胞破坏快，及时识别ft1d对于临床处理和预后管理具有重要意义。

2、ft1d的现有临床诊断主要依赖发病时间、血糖、hba1c、空腹c肽或餐后c肽、尿酮/血酮、动脉血气以及胰岛自身抗体等指标。这些指标在临床诊断中不可替代，但更多反映疾病已经形成后的代谢状态，难以直接反映ft1d相关外周免疫转录异常。

3、免疫学检测方面，gada、ia-2a、znt8a等胰岛自身抗体可辅助判断t1d相关自身免疫状态，但ft1d患者抗体表现存在异质性，部分患者可为阴性，部分患者又可出现自身免疫相关证据，因此单一抗体指标难以覆盖ft1d的全部临床表现。

4、随着转录组学和核酸检测技术发展，rna测序、芯片、rt-qpcr、数字pcr和核酸杂交等技术已被用于疾病分子标志物筛选。

5、本申请的发明人在先研究的发明专利cn202210814048.0涉及hsa_circrna_100632作为暴发性1型糖尿病诊断标志物的应用。ft1d患者外周血单个核细胞中hsa_circrna_100632水平显著增高，与1型糖尿病患者及正常对照具有显著性差异，临床上可以作为诊断性生物标志物用于对ft1d患者诊断及鉴别诊断。并且，上调hsa_circrna_100632水平可以构建ft1d的模型。但该专利区分ft1d与经典1型糖尿病（t1d）的检测敏感度仅43.6%。因此，本领域还需要开发其他的标志物用于暴发性1型糖尿病的诊断或辅助诊断。

6、lncrna被认为可参与免疫细胞分化、炎症信号调控、细胞死亡和代谢稳态等过程，在糖尿病及其并发症中具有潜在标志物和调控靶点价值。但在ft1d领域，现有技术仍缺少以外周血单个核细胞为样本来源、以长链非编码rna即lncrna为核心、并同时覆盖表达谱筛选、临床扩展验证、诊断效能评价和体外功能验证的完整技术方案。

7、总的来说，对于现有技术中的暴发性1型糖尿病的诊断或辅助诊断，主要存在如下不足。1、现有临床指标不能充分提供ft1d的分子分型信息；血糖、hba1c和c肽等指标可提示疾病状态，但难以反映患者外周免疫细胞转录调控网络是否发生重塑。2、现有抗体检测对ft1d与经典t1d的鉴别存在局限。ft1d自身抗体阳性率和抗体谱具有异质性，抗体阴性并不能完全排除免疫参与，抗体阳性也不一定能准确区分ft1d与经典t1d。3、现有技术较少提出可落地的产品形式；即使发现某些rna分子存在差异表达，也常缺少对应引物、样本处理、表达量计算、联合判读模型和试剂盒构成方案。

8、因此，本领域需要开发一种新的标志物或检测标志物的试剂在制备暴发性1型糖尿病辅助诊断产品和分型识别产品中的应用。

技术实现思路

1、因此，本发明首先提供一种标志物在制备暴发性1型糖尿病辅助诊断产品和分型识别产品中的应用，所述标志物为一种长链非编码rna，即lncrna，所述长链非编码rna的名称为enst00000565978，其核酸序列如seq id no.1所示。

2、在一种具体的实施方式中，所述标志物与临床指标空腹c肽、糖化血红蛋白联合使用。

3、在一种具体的实施方式中，以外周血单个核细胞的总rna为样本，以逆转录-实时定量pcr（rt-qpcr）为检测方式检测所述标志物。

4、在一种具体的实施方式中，所述分型识别为暴发性1型糖尿病与经典1型糖尿病的识别。

5、本发明还提供一种检测标志物的试剂在制备暴发性1型糖尿病辅助诊断产品和分型识别产品中的应用，所述标志物为一种长链非编码rna，即lncrna，所述长链非编码rna的名称为enst00000565978，其核酸序列如seq id no.1所示，所述试剂包括如seq id no.2和seq id no.3所示的引物对。

6、在一种具体的实施方式中，所述产品中以β-肌动蛋白基因作为内参，其上下游引物分别为seq id no.4和seq id no.5所示。

7、本发明的有益效果包括：本发明增加了外周血pbmc（外周血单个核细胞）中enst00000565978表达这一分子信息；扩展队列显示该分子在ft1d患者中上调，并高于经典t1d患者；校正年龄后仍与ft1d显著相关，可为ft1d辅助诊断和分型识别提供新的核酸检测对象。

1.一种标志物在制备暴发性1型糖尿病辅助诊断产品和分型识别产品中的应用，其特征在于，所述标志物为一种长链非编码rna，即lncrna，所述长链非编码rna的名称为enst00000565978，其核酸序列如seq id no.1所示。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述标志物与临床指标空腹c肽、糖化血红蛋白联合使用。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，以外周血单个核细胞的总rna为样本，以逆转录实时定量pcr为检测方式检测所述标志物。

4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述分型识别为暴发性1型糖尿病与经典1型糖尿病的识别。

5.一种检测标志物的试剂在制备暴发性1型糖尿病辅助诊断产品和分型识别产品中的应用，其特征在于，所述标志物为一种长链非编码rna，即lncrna，所述长链非编码rna的名称为enst00000565978，其核酸序列如seq id no.1所示，所述试剂包括如seq id no.2和seq id no.3所示的引物对。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述产品中以β-肌动蛋白基因作为内参，其上下游引物分别为seq id no.4和seq id no.5所示。