一种具有抗皱淡纹和抗光老化功效的复合活性胶原三肽饮品及其制备方法与流程

本发明涉及肽类物质制备及应用，特别涉及一种具有抗皱淡纹和抗光老化功效的复合活性胶原三肽饮品及其制备方法。

背景技术：

1、复合活性胶原三肽（collagen tripeptide，ctp），是以动物源胶原蛋白为底物，经特异性蛋白酶定向酶解制得的小分子寡肽混合物，核心特征为遵循胶原蛋白固有gly-x-y重复三肽序列，代表性活性单元包含了gph（甘氨酰脯氨酰羟脯氨酸）、gpa（甘氨酰脯氨酰丙氨酸）、gpp（甘氨酰脯氨酰脯氨酸）等三肽片段，分子量普遍低于500da，可不经肠道完全分解直接被机体吸收，是口服美容抗衰领域热门功效原料。相较于大分子胶原蛋白、普通随机水解胶原多肽，ctp吸收利用率更高，能够靶向作用于皮肤真皮层，促进自身胶原合成、改善皮肤光老化、淡化细纹皱纹，常被用于口服液、固体饮料等口服美容制剂。

2、现有胶原肽相关产品与制备工艺存在诸多缺陷：传统水解工艺多采用单一广谱蛋白酶随机水解胶原蛋白，酶解切割无定向性，切割位点无选择性，产物中大分子多肽、二肽、游离氨基酸占比高，具备皮肤修护活性的gly-x-y型胶原三肽富集量较低，大量无效组分稀释活性，口服后体内gph、gpa、gpp等特征活性三肽血药浓度偏低，生物利用度差，美容功效有限，而市售普通大分子胶原蛋白原料分子量更大，口服后在肠道内几乎完全分解为游离氨基酸，无法以完整活性肽形式入血，难以发挥靶向护肤作用；常规胶原三肽口服饮品仅简单将胶原肽粉末与甜味剂、维生素辅料复配调配，未针对小分子三肽酸碱、温度敏感的特性优化体系，高温灭菌、长期储存过程中三肽易发生降解、聚合，同时缺乏专属质控手段，无法精准定量成品中活性胶原三肽真实占比，产品批次间功效差异大；即便现有商业化胶原三肽产品可实现小分子吸收，但其工艺对gph、gpa、gpp等特征活性三肽的富集能力有限，同等口服剂量下，大鼠体内血浆活性三肽峰值浓度偏低，肠道吸收速度慢，到达皮肤组织的有效活性肽总量不足，抗皱、修护光老化的作用周期短、效果弱。

技术实现思路

1、鉴于此，本发明提出一种具有抗皱淡纹和抗光老化功效的复合活性胶原三肽饮品及其制备方法，解决上述问题。

2、本发明的技术方案是这样实现的：一种具有抗皱淡纹和抗光老化功效的复合活性胶原三肽，所述复合活性胶原三肽由牛皮胶原蛋白肽、鱼皮胶原蛋白肽、牦牛骨胶原蛋白肽、ⅱ型胶原蛋白肽按质量比350:85:42:42混合后经定向酶解制得，所述复合活性胶原三肽含有以甘氨酸-x-y为通式的三肽，其中甘氨酸为所述三肽n端第一位的甘氨酸残基，所述复合活性胶原三肽含有甘氨酰-脯氨酰-羟脯氨酸三肽；且所述复合活性胶原三肽的分子量小于500da。

3、上述复合活性胶原三肽的制备方法，包括以下步骤：

4、1a.缓冲液配制：向纯化水中加入碳酸钠和柠檬酸钠，加入量分别为2.0±0.2g/l，搅拌至完全溶解，形成缓冲体系；

5、1b.原料溶解：将动物皮来源胶原蛋白肽、水产源胶原蛋白肽、动物骨来源胶原蛋白肽按350:85:42:42的质量比加入上述缓冲液中，搅拌至完全溶解，料液终浓度控制在300~350g/l，调节ph至7.0±0.5；

6、1c.灭菌：将料液升温至95±5℃，保温20min，同时实现微生物灭活和胶原肽链的解聚与酶切位点暴露；

7、1d.定向酶解：将料液降温至20~40℃，加入特异性水解蛋白酶进行定向酶解，酶解时间为15~20h，搅拌转速150±50rpm，控温20~40℃

8、1e.除杂脱色脱腥：酶解完成后将料液升温至60~90℃，加入活性炭与硅藻土，搅拌吸附20min，过滤，经板框过滤去除吸附剂及不溶性杂质；

9、1f.低温浓缩：滤液在75~85℃条件下浓缩，浓缩时间≤30min，浓缩至料液固形物含量为45~50%；

10、1g.巴氏灭菌与干燥：浓缩液经巴氏灭菌后，送入真空带式干燥机干燥至水分＜7g/100g，过80~100目筛，即得复合活性胶原三肽粉末。

11、进一步地，步骤1d中，所述特异性水解蛋白酶与胶原蛋白原料总量的质量比为1:(2380~2800)。

12、进一步地，步骤1e中，所述活性炭与硅藻土的质量比为1:1，总添加量为料液质量的1~2%；搅拌吸附温度为65±5℃，搅拌吸附时间为18~22min，搅拌速率为80~100rpm，过滤后收集澄清滤液。

13、进一步地，具有抗皱淡纹和抗光老化功效的胶原三肽饮品，含有上述的复合活性胶原三肽，每1000ml饮品包括以下组分：复合活性胶原三肽20~50g、小分子透明质酸钠0.5~1.0g、谷胱甘肽0.3~0.6g、番茄红素0.05~0.1g、维生素c 0.5~1.0g，余量为水。

14、优选地，每1000ml成品包括以下组分：上述复合活性胶原三肽40g、小分子透明质酸钠0.8g、谷胱甘肽0.5g、番茄红素0.08g、维生素c0.8g，余量为纯化水；所述复合活性胶原三肽由牛皮胶原蛋白肽、鱼皮胶原蛋白肽、牦牛骨胶原蛋白肽、ⅱ型胶原蛋白肽按质量比350:85:42:42混合后经定向酶解制得。

15、进一步地，所述小分子透明质酸钠的分子量小于10000da，所述水为纯化水，所述饮品的ph值为6.5~7.5。

16、上述复合活性胶原三肽饮品的制备方法，包括以下步骤：

17、2a.调配：将制得的复合活性胶原三肽粉末与配方量的小分子透明质酸钠、谷胱甘肽、天然抗光老化成分、维生素c依次加入纯化水中搅拌溶解，调节ph至6.5~7.5；

18、2b.高压均质：在20~30mpa下均质处理1~2次；

19、2c.真空脱气：在真空度≤-0.09mpa条件下脱气10~15min；

20、2d.无菌灌装：灌入已灭菌包装容器中，密封；

21、2e.低温灭菌：在65~70℃条件下灭菌20~30min，即得成品。

22、本发明的复合活性胶原三肽在制备具有抗皱淡纹、抗光老化功效的口服饮品中的应用。

23、与现有技术相比，本发明的有益效果是：

24、1.原料定向酶解富集高活性三肽，采用特异性水解蛋白酶定向酶解，利用多种蛋白酶的酶切偏好协同作用，优先在甘氨酸位点附近进行切割，高效富集以gly-x-y为通式的活性三肽，产物中gph、gpa、gpp等gly-x-y特征活性三肽占比达40.78%，远高于传统随机水解产物，无效大分子多肽杂质少；大鼠体内吸收试验证实，同等给药剂量下，本产品口服后血浆活性三肽峰值浓度优于普通胶原蛋白及市售商业化胶原三肽，小分子三肽可完整经肠道吸收入血，生物利用度大幅提升，能高效输送至皮肤发挥抗皱、修护光老化功效。饮品体系稳定性优异，针对小分子三肽温敏、酸碱敏感特性优化配方，规避灭菌与长期储存中肽段降解、聚合问题，产品批次间活性三肽含量稳定可控。

25、2.建立完整多维度质控表征体系，通过sec尺寸排阻色谱定量活性三肽含量，搭配氨基酸组成、n端序列、高分辨质谱、体内吸收动力学联合验证，可直观佐证产物具备胶原专属gly-x-y三肽结构，产品品质有据可依，有效区分普通水解多肽产品，解决现有产品活性低、吸收差、质控缺失、功效不稳定的行业痛点。