丝瓜络乙醇提取物、丝瓜皂苷N在制备具有延缓衰老的药物中的用途以及一种丝瓜络乙醇提取物水相馏分

本发明涉及丝瓜络乙醇提取物、丝瓜皂苷n在制备具有延缓衰老的药物中的用途以及一种丝瓜络乙醇提取物水相馏分。

背景技术：

1、老年引发的系统性结构与功能衰退，其深层驱动机制在于机体稳态维持能力的进行性丧失，最终表现为多系统功能失调。这一过程既严重损害老年群体的生活品质，也对公共卫生资源形成持续性压力。在诸多受累系统中，骨骼肌的衰老性改变尤为关键——肌肉量流失、力量减退、运动耐力下降及慢性炎症持续存在，共同构成其核心病理表现；当上述改变累积至一定程度时，即发展为老年性肌少症，进而成为多种衰老相关疾病的重要促进因素。当前研究普遍认为，细胞衰老是骨骼肌衰老的重要病理基础。衰老骨骼肌组织中，衰老细胞进行性累积，呈现典型的多维度衰老表型：形态学上表现为胞体与胞核体积增大；分子层面表现为sa-β-gal、p16、p21等衰老标志物表达显著上调，以及dna损伤标志物γ-h2ax表达增多；功能层面则表现为细胞增殖能力的进行性衰退。上述衰老细胞同时大量分泌促炎因子及多种生物活性分子，构成衰老相关分泌表型（sasp），通过旁分泌途径诱导局部微环境慢性炎症，进而加速肌肉组织结构损伤与功能退行性改变。基于此，以缓解细胞衰老相关表型或抑制sasp释放为靶点的干预策略，已成为延缓骨骼肌衰老的重要研究方向。

2、目前针对骨骼肌衰老的干预方式：

3、1、运动训练：结合抗阻训练（如举重、弹力带）、有氧训练（如快走、慢跑）和平衡训练；

4、2、营养支持：核心是保证足量优质蛋白质等营养物质的摄入；

5、3、抗细胞衰老：选择性清除衰老细胞，或抑制其分泌的衰老相关分泌表型（sasp）炎症因子；

6、4、调节特定信号通路：激活自噬、靶向肌抑素(myostatin)、选择性雄激素受体调节剂（enobosarm）、靶向改善线粒体生物合成与稳定性；

7、5、基因疗法：通过载体（如慢病毒）将“长寿蛋白”sirt5的编码基因导入肌肉，过表达sirt5。

8、尽管前景广阔，但前沿抗骨骼肌衰老策略的临床转化仍面临现实瓶颈。部分干预手段虽能增加肌肉质量，却未能显著改善患者实际的肌肉力量或活动能力（如步行速度）。此外，多数新药（尤其是基因疗法与靶向药物）的长期安全性数据尚不充分。

9、雷帕霉素（rapamycin, rap）作为抗衰老研究的经典药，其临床转化面临严峻挑战。其副作用谱与衰老的核心病理特征高度重叠：一方面，雷帕霉素可诱发胰岛素抵抗、糖耐量异常及血脂升高，加剧老年群体固有的代谢紊乱；另一方面，其天然免疫抑制特性会增加感染易感性，与衰老伴随的免疫衰退形成叠加风险。此外，该药还可能负向调控肌肉蛋白合成（ https://doi.org/10.18632/aging.206300）及干扰红细胞稳态。鉴于衰老本身即为代谢失调与免疫功能下降的温床，上述缺陷严重制约了雷帕霉素在延缓衰老领域的实际应用潜力。

10、在此背景下，从天然资源中发掘安全性更优的抗衰老活性成分成为重要方向。丝瓜络作为传统药材，已展现出抗氧化、抗炎等初步活性，但其组分复杂、关键活性单体不明、系统安全性数据欠缺，严重阻碍了其临床转化。相较于作用靶点宽泛、副作用显著的雷帕霉素，从中药中获取的成分明确、机制清晰的高活性单体，有望在安全性和可接受性上实现显著提升。因此，对丝瓜络进行系统分离与筛选，明确其药效物质基础，成为突破这一瓶颈的关键路径。

11、申请号 202310677560.x，发明名称：丝瓜络提取物在制备诱导细胞自噬及治疗阿尔茨海默病药物中的用途，公开了一种丝瓜络提取物在制备诱导细胞自噬及治疗阿尔茨海默病药物中的用途， 属于生物医疗技术领域。本发明中的丝瓜络提取物为风干后的丝瓜果实的维管束的乙醇提取物。 本发明获得了丝瓜络提取物，其能够抑制aβ沉积，减轻秀丽隐杆线虫的aβ和tau病理，还可诱导细胞自噬来抑制其诱导的氧化应激和毒性，从而达到治疗、缓解阿尔茨海默病的目的。

12、目前尚无丝瓜络提取物用于抗衰老的相关文献报道。

技术实现思路

1、本发明提供了丝瓜络乙醇提取物、丝瓜皂苷n在制备具有延缓衰老的药物中的用途以及一种丝瓜络乙醇提取物水相馏分。

2、本发明提供了丝瓜络乙醇提取物在制备具有延缓衰老的药物中的用途；所述的丝瓜络乙醇提取物来源于葫芦科丝瓜属植物丝瓜（luffa cylindrica (l.) roem.，或 luffaaegyptiaca mill.）的干燥成熟果实的维管束的75～90％乙醇提取物。

3、本发明提供了一种丝瓜络乙醇提取物水相馏分，它是将丝瓜络75～90％乙醇提取物，依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取后，得到的水相馏分wf。

4、其中，将所述水相馏分wf经大孔吸附树脂柱层析分离，依次以60%、70%、80%甲醇溶液梯度洗脱，分别收集各浓度洗脱液，减压浓缩至干，对应得到水相馏分wf-6、wf-7、wf-8。其中，大孔树脂预处理步骤为：采用95%乙醇浸泡大孔树脂过夜使其充分溶胀，湿法装柱，去除破碎细小颗粒后均匀填充，继而以ddh2o充分冲洗至流出液无醇味；将水相馏分wf以适量ddh2o溶解并搅拌均匀后上样于预处理后的大孔吸附树脂柱中。

5、本发明还提供了所述的丝瓜络乙醇提取物水相馏分在制备具有延缓衰老的药物中的用途。

6、本发明还提供了丝瓜皂苷n在制备具有延缓衰老的药物中的用途。

7、其中，所述的药物是保护肌肉功能退化的作用。

8、其中，所述的药物是改善骨骼肌功能减退、骨骼肌衰老或肌少症表型的药物。

9、本发明还提供了一种延缓衰老的药物组合物，它是含有所述的丝瓜络乙醇提取物、或，权利要求2或3所述的丝瓜络乙醇提取物水相馏分，或，丝瓜皂苷n。

10、所述的药物组合物的制剂形式包括但不限于以下几类：片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、口服液、混悬液、滴丸、微丸、缓释制剂或微粒给药制剂中的一种或多种。

11、本发明旨在提供丝瓜皂苷n在制备预防和/或延缓骨骼肌衰老药物中的应用，以解决现有技术存在的以下问题：

12、（1）中药活性成分复杂、主要活性物质不确定；

13、（2）难以兼顾衰老表型逆转与sasp抑制；

14、（3）缺乏安全有效的天然抗骨骼肌衰老药物。

15、本发明的有益效果是：

16、本发明首次明确丝瓜皂苷n为丝瓜络抗衰老作用的关键活性物质。在提取分离策略上，采用乙醇提取可有效溶解丝瓜络中皂苷类、甾体类、黄酮及酚类等极性适中的抗衰老活性成分，而水相馏分的优势在于，丝瓜络富含纤维素和半纤维素，整体呈现较强的亲水性和吸水溶胀特性，经水相柱层析可进一步富集具强亲水性的活性成分（如多糖及部分皂苷），从而实现对不同极性活性组分的系统分离。经细胞、线虫及小鼠三层次药效验证，丝瓜皂苷n可在细胞水平逆转衰老相关表型，在线虫水平增强运动能力，在哺乳动物水平降低骨骼肌p16、p21及sasp炎症因子表达，并改善肌纤维结构及运动功能，系统证明了其抗衰老药效。