一种多机制协同促进淋巴吸收的纳米脂质体递送组合物及其制备方法与流程

本发明涉及药物制剂，特别涉及一种多机制协同促进淋巴吸收的纳米脂质体递送组合物及其制备方法。

背景技术：

0、技术背景

1、脂溶性活性成分普遍存在水分散性较差、胃肠环境中稳定性不足以及口服后肠壁和肝脏首过代谢明显等问题，导致原型成分进入体循环的比例较低，且吸收过程容易受到制剂状态、脂质消化和个体差异影响。现有口服脂质载体虽可改善部分成分的分散与吸收，但仍可能存在载药或包封稳定性不足、粒径分布较宽、储存及复溶后易聚集、释放过程单一等缺陷，难以兼顾快速起效与持续作用。对于多种脂溶性活性成分共同递送的情形，不同成分的理化性质差异还可能影响制剂稳定性和释放一致性。上述问题相互关联，共同限制了脂溶性活性成分的口服吸收效率、制剂质量可控性以及终端产品适配范围。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明实施例提供一种多机制协同促进淋巴吸收的纳米脂质体递送组合物及其制备方法，以解决或缓解现有技术中存在的技术问题。

2、本发明实施例的技术方案是这样实现的：一种多机制协同促进淋巴吸收的纳米脂质体递送组合物，包括：

3、递送载体，用于负载所述脂溶性活性成分，所述递送载体为脉冲式双层纳米脂质体、外泌体或脂质体-外泌体杂合囊泡；

4、当所述递送载体为脉冲式双层纳米脂质体时，所述脂溶性活性成分包括第一部分脂溶性活性成分和第二部分脂溶性活性成分，所述脉冲式双层纳米脂质体包括缓释内层和设置于所述缓释内层外部的速释外层；

5、缓释内层载药脂质体，包括内层磷脂和胆固醇，所述胆固醇的质量为所述内层磷脂质量的20%～30%，所述第二部分脂溶性活性成分采用硫酸铵梯度法主动载入所述缓释内层载药脂质体中；

6、速释外层，由包含外层磷脂和胆固醇的速释外层脂质体形成，所述胆固醇的质量为所述外层磷脂质量的5%～10%，所述第一部分脂溶性活性成分包载或吸附于所述速释外层脂质体中；

7、其中，所述速释外层脂质体的脂质膜结合于所述缓释内层载药脂质体的外部，使所述速释外层和所述缓释内层载药脂质体形成复合纳米脂质体颗粒，所述第一部分脂溶性活性成分先于所述第二部分脂溶性活性成分释放，以形成前期释放和后续持续释放相衔接的双阶段释放过程；

8、当所述递送载体为外泌体时，所述外泌体来源于植物、乳源或间充质干细胞，所述脂溶性活性成分通过电穿孔、超声或共孵育方式负载于所述外泌体中；

9、当所述递送载体为脂质体-外泌体杂合囊泡时，所述脂质体-外泌体杂合囊泡由脂质体与外泌体经冻融循环和膜挤出融合而成。

10、在上述实施例中：所述脉冲式双层纳米脂质体含有带负电荷磷脂，所述带负电荷磷脂占总磷脂质量的2%～8%，使所述脉冲式双层纳米脂质体的zeta电位为－35～－50mv。

11、在上述实施例中：所述脂溶性活性成分选自姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素、四氢姜黄素、木犀草素、槲皮素、水飞蓟宾、白藜芦醇、橙皮苷、染料木黄酮、辅酶q10、维生素d3、维生素e、番茄红素和叶黄素中的一种或多种组合。

12、在上述实施例中：所述第一部分脂溶性活性成分和所述第二部分脂溶性活性成分为同一种脂溶性活性成分的不同部分；

13、所述速释外层所含总脂质与所述缓释内层载药脂质体所含总脂质的质量比为1∶1～1∶3；

14、在37℃、ph值为6.8且含有0.5%吐温-80的模拟肠液中，以100rpm进行恒温振荡释放时，所述第一部分脂溶性活性成分在30～60分钟内优先释放，所述第二部分脂溶性活性成分在其后的2～4小时内持续释放。

15、在上述实施例中：还包括安全冗余组分，所述安全冗余组分包括：

16、西兰花种子水提物，所述西兰花种子水提物中萝卜硫苷的含量不低于10%，每剂用量为10～20mg；

17、水飞蓟宾磷脂复合物，每剂用量为50～80mg；

18、槲皮素，每剂用量为10～20mg；

19、脂溶性抗氧化剂，所述脂溶性抗氧化剂选自维生素e和抗坏血酸棕榈酸酯中的至少一种，其总添加量为磷脂质量的0.5%～2.0%。

20、在上述实施例中：所述纳米脂质体递送组合物同时负载两种或两种以上所述脂溶性活性成分，各所述脂溶性活性成分分别主动载药后混合，或者在同一主动载药过程中共同负载；

21、所述两种或两种以上脂溶性活性成分为以下组合中的至少一种：姜黄素与木犀草素组合、姜黄素与槲皮素组合、姜黄素与辅酶q10组合、四氢姜黄素与水飞蓟宾组合、姜黄素与白藜芦醇组合、木犀草素与槲皮素组合。

22、本发明提供上述多机制协同促进淋巴吸收的纳米脂质体递送组合物的制备方法，所述脂溶性活性成分包括第一部分脂溶性活性成分和第二部分脂溶性活性成分，所述制备方法包括以下步骤：

23、s1、将包括带负电荷磷脂在内的磷脂与胆固醇溶于无水乙醇并注入硫酸铵溶液，形成胆固醇含量为20%～30%的空白脂质体；透析去除所述空白脂质体外水相中的硫酸铵，建立脂质体内外硫酸铵浓度梯度；

24、s2、将所述第二部分脂溶性活性成分加入所述空白脂质体混悬液中，在50～60℃下孵育30～60分钟，使所述第二部分脂溶性活性成分主动载入脂质体内部，得到缓释内层载药脂质体；依次进行微射流高压均质和膜挤出，使其粒径d50为120～150nm、pdi不大于0.1且zeta电位绝对值为35～50mv；

25、s3、制备胆固醇含量为5%～10%的速释外层脂质体，使其包载或吸附所述第一部分脂溶性活性成分；将所述速释外层脂质体与所述缓释内层载药脂质体按质量比1∶1～1∶3混合，在45℃下孵育30分钟，使二者吸附或融合形成脉冲式双层纳米脂质体；

26、s4、加入冻干保护剂并冷冻干燥，得到冻干粉体；当所述纳米脂质体递送组合物包括安全冗余组分时，在冷冻干燥前加入所述安全冗余组分，或者将所述安全冗余组分与所述冻干粉体复配；

27、其中，同时负载两种或两种以上所述脂溶性活性成分时，各所述脂溶性活性成分分别主动载药后混合，或在同一主动载药过程中共同负载。

28、在上述实施例中：步骤s1中，所述空白脂质体的内水相中硫酸铵的浓度为200～400mm。

29、在上述实施例中：步骤s2中，所述微射流高压均质处理的压力为1500～2000bar，处理次数为3～5次；所述膜挤出处理依次采用孔径为200nm和100nm的聚碳酸酯膜，并分别挤出3～7次。

30、本发明提供上述多机制协同促进淋巴吸收的纳米脂质体递送组合物在制备用于抗炎、化疗增敏、免疫调节、改善氧化应激相关病症、表观遗传调控、神经退行性疾病干预、肿瘤微环境调控、术后伤口愈合促进、肠道屏障修复、皮肤抗衰老或多活性成分协同递送的产品中的应用，其特征在于，所述产品选自药品、保健食品或特殊医学用途配方食品；

31、所述抗炎包括改善慢性低度炎症、代谢综合征相关炎症、神经退行性疾病相关神经炎症和肿瘤微环境免疫调控中的至少一种；

32、所述多活性成分协同递送的产品同时负载两种或两种以上所述脂溶性活性成分。

33、本发明与现有技术相比，具有以下优点：

34、本发明通过采用硫酸铵梯度法将脂溶性活性成分主动载入缓释内层，使缓释内层中脂溶性活性成分的包封率不低于95%，有利于减少游离或浅层吸附的活性成分，提高载药稳定性和制剂质量的一致性。

35、本发明通过微射流高压均质和膜挤出相结合，将脉冲式双层纳米脂质体的粒径d50控制在120～150nm，并将多分散系数pdi控制在不大于0.1，有利于缩小不同颗粒之间的粒径差异，提高纳米脂质体在口服递送过程中的分散一致性。

36、本发明通过带负电荷磷脂调节纳米脂质体的表面电荷，使其zeta电位为－35～－50mv，有利于增强颗粒之间的静电斥力，降低纳米脂质体在制备、储存和复溶过程中发生聚集的可能性。

37、本发明通过胆固醇含量不同的速释外层和缓释内层构成脉冲式双层纳米脂质体，使第一部分脂溶性活性成分在口服后30～60分钟内释放，并使第二部分脂溶性活性成分在随后2～4小时内持续释放，能够兼顾前期释放和后续持续释放。

38、本发明将主动载药、粒径集中控制、表面电荷调节和脉冲式双层释放相结合，各机制分别从载药稳定性、颗粒一致性、分散稳定性和释放动力学方面发挥作用，共同为脂溶性活性成分经肠道淋巴系统吸收提供有利条件。

39、本发明能够同时负载两种或两种以上脂溶性活性成分，各脂溶性活性成分可以分别主动载药后混合，也可以在同一主动载药过程中共同负载，有利于扩大递送组合物对不同活性成分及其组合的适用范围。

40、本发明设置的安全冗余组分可以根据产品需要选择配置，其中，脂溶性抗氧化剂能够降低磷脂膜在制备、冷冻干燥、储存和复溶过程中受到的氧化损伤，有利于提高组合物的稳定性和安全裕度。

41、本发明还可以采用外泌体或者脂质体－外泌体杂合囊泡作为扩展载体，有利于拓展脂溶性活性成分的载体类型和终端产品适用范围。