一种基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法

本发明属于食用植物油品质检测，具体涉及一种基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法。

背景技术：

1、油茶籽油是由油茶籽经压榨、浸出或其他工艺制得的食用植物油，因其含有较高比例的不饱和脂肪酸、植物甾醇等营养及功能性成分，具有较高的营养价值和经济价值。随着油茶籽油市场需求的增加，部分产品中存在掺入价格相对较低的其他食用植物油的现象，例如大豆油、玉米油、花生油等。此类掺假行为不仅会影响油茶籽油的品质评价和市场交易公平性，也会损害消费者权益。因此，建立一种准确、稳定且高效的油茶籽油掺假鉴别方法具有重要意义。

2、目前，针对油茶籽油掺假的检测方法已有一定研究，常见方法包括理化指标检测、脂肪酸组成分析、光谱分析、核磁共振分析、色谱分析以及结合化学计量学模型的数据鉴别方法等。上述方法能够在一定程度上实现油茶籽油掺假识别，但仍存在一定不足。例如，理化指标检测专属性较弱，容易受原料来源、加工工艺和储藏条件影响；脂肪酸组成分析虽然应用较广，但不同植物油之间脂肪酸组成存在一定相似性，在低比例掺假情况下鉴别灵敏度有限；光谱分析和核磁共振分析通常依赖复杂模型或专用仪器，样品检测及数据处理过程相对繁琐；部分基于已知掺假模型建立的检测方法，则难以满足未知掺假油种或复杂掺假体系的快速鉴别需求。

3、植物甾醇是食用植物油中重要的微量伴随成分，具有较好的稳定性和来源特异性。不同种类食用植物油中的植物甾醇组成、相对含量及色谱峰分布存在差异，能够反映油料来源特征，并形成具有识别意义的指纹信息。因此，植物甾醇可作为油茶籽油真实性鉴别及掺假识别的重要标志物。

4、然而，现有油茶籽油掺假检测方法中，对油茶籽油与常见掺假食用油之间植物甾醇气相色谱指纹差异的利用仍不充分，尤其缺少基于植物甾醇特征峰位置差异、特征峰错位现象以及特征峰面积随掺假比例变化规律进行掺假鉴别的方法。基于此，有必要建立一种基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法，以实现对油茶籽油掺假的快速、准确和高效识别。

技术实现思路

1、本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。

2、作为本发明其中一个方面，本发明提供一种基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法，其包括，

3、（1）样品前处理：对油茶籽油样品、其他食用植物油样品以及油茶籽油人工掺假样品进行皂化、萃取和衍生化处理，得到适于气相色谱检测的植物甾醇待测样品；

4、（2）气相色谱检测：采用气相色谱仪对所述植物甾醇待测样品进行检测，获得各样品的植物甾醇气相色谱图，并建立油茶籽油、其他食用植物油的植物甾醇指纹图谱；

5、（3）特征峰筛选：将油茶籽油植物甾醇指纹图谱与其他食用植物油植物甾醇指纹图谱进行比对，筛选二者之间存在明显差异的色谱峰作为掺假鉴别的特征峰；所述特征峰包括第一特征峰和第二特征峰，出峰位置均位于胆甾烷醇（内标）与菜油甾醇之间，其中，第一特征峰为在其他食用植物油中稳定出现而在油茶籽油中不存在的色谱峰，相对于内标峰的相对保留时间为 rrt1=1.032±0.001 ；第二特征峰为在油茶籽油中稳定出现而在其他食用植物油中不存在的色谱峰，相对于内标峰的相对保留时间为rrt2=1.037±0.001；

6、（4）掺假鉴别。

7、作为本发明所述的基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法的一种优选方案，步骤（4）所述掺假鉴别包括对未知是否掺假油茶籽油的样品进行样品前处理和气相色谱检测，获得待测样品的植物甾醇气相色谱图，分析所述特征峰的有无以及与内标峰相对保留时间差异，鉴别油茶籽油是否有其他油脂掺假。

8、作为本发明所述的基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法的一种优选方案，所述其他食用植物油包括大豆油、玉米油、葵花籽油、花生油、红花籽油、棕榈油、稻米油中的一种或多种。

9、作为本发明所述的基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法的一种优选方案，所述气相色谱仪为gc-fid气相色谱仪，检测时程序升温初始温度为 200℃，保持3min；随后以2℃/min的升温速率升至220℃；再以10℃/min的升温速率升至300℃，并保持15min；进样口温度为300℃，检测器温度为300℃。

10、作为本发明所述的基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法的一种优选方案，步骤（4）中所述保留时间是以胆甾烷醇内标峰为参照，采用相对于内标峰的相对保留时间。

11、作为本发明所述的基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法的一种优选方案，步骤（2）中所述皂化处理具体为：取0.25g食用油，加入2ml 0.5mol/l naoh溶液以及200μl 1mol/l胆甾烷醇-正己烷溶液，涡旋震荡0.5~1.0 min，并在80℃水浴处理30 min；皂化后加入1.5ml去离子水稀释，再加入1ml正己烷振荡静置分层，吸取有机相，重复3次，合并有机相并用氮气挥干。

12、作为本发明所述的基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法的一种优选方案，步骤（2）中所述衍生化处理具体为：向挥干后的提取物中加入200μl硅烷化试剂n,o-双 (三甲基硅烷基) 三氟乙酰胺、三甲基氯硅烷混合试剂，二者体积比为99:1，105℃反应30min进行衍生化；冷却至室温后用氮气吹干，复溶于200μl色谱级正己烷，过0.22μm有机微孔滤膜。

13、作为本发明所述的基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法的一种优选方案，步骤（3）中所述气相色谱仪使用的色谱柱为hp-5ms毛细管色谱柱，规格为30m×0.25mm×0.25μm，载气为高纯氮气，分流比为10:1，进样量为1μl。

14、作为本发明所述的基于气相色谱植物甾醇指纹图谱的油茶籽油掺假鉴别方法的一种优选方案，步骤（4）中所述分析特征峰的有无是在待测样品的植物甾醇气相色谱图中，观察第一特征峰是否出现；当待测样品色谱图中出现信噪比 s/n≥3 的第一特征峰时，判定该油茶籽油样品掺入其他食用植物油。

15、本发明的有益效果：本发明通过气相色谱检测植物甾醇组分并构建植物甾醇指纹图谱，能够直观获得油茶籽油与其他食用植物油之间的色谱峰分布差异，为油茶籽油真实性鉴别提供稳定、可比较的指纹信息。该方法检测思路清晰，结果直观，有利于实现油茶籽油掺假样品的快速筛查。

16、本发明以内标峰为参照，采用相对于内标峰的相对保留时间对特征峰进行定位，降低了仪器条件、进样状态或保留时间轻微漂移对特征峰识别的影响，提高了特征峰判定的稳定性和可靠性。

17、本发明不依赖复杂的化学计量学建模过程，而是基于植物甾醇指纹图谱、特征峰错位关系进行鉴别，数据处理过程相对简便，鉴别依据明确，适用于油茶籽油掺假鉴别及质量控制。

18、本发明适用于大豆油、玉米油、葵花籽油、花生油、红花籽油、棕榈油、稻米油掺入油茶籽油的鉴别，为油茶籽油产品质量监管、市场掺假筛查和消费者权益保护提供了一种有效的技术手段。