一种槟榔加工副产物的质量检测方法

本发明涉及检测，具体涉及一种槟榔加工副产物的质量检测方法。

背景技术：

1、槟榔为棕榈科植物槟榔

areca catechul.的干燥成熟种子，是传统南药资源之一，具有驱虫、消积、行气、利水等功效，在中药及相关产品开发中具有较高应用价值。我国槟榔资源主要分布于海南、云南、台湾等地区，其中海南是我国槟榔的主要产区之一，具有较好的原料供应基础和产业发展条件。

2、随着槟榔种植和初加工产业的发展，槟榔加工过程中会产生一定量的副产物，包括槟榔加工废水、废弃槟榔籽、槟榔蒂等。这些副产物中仍可能含有生物碱、多酚、黄酮、有机酸、多糖、脂肪酸、萜类及甾体等多类植物源成分，具有进一步开发为药用、饲用、功能性植物资源或其他高值化产品的潜在价值。

3、目前，槟榔加工副产物在实际生产中多被直接丢弃、焚烧、排放或进行简单处理，不仅造成植物资源浪费，也可能增加环境处理压力。随着槟榔产业由传统初加工向精深加工、资源化利用和全产业链开发方向转型，如何对槟榔加工副产物进行有效评价、筛选和质量控制，已成为推动其后续开发利用的重要基础。

4、现有关于槟榔质量控制的研究和标准主要集中于药材槟榔或槟榔制剂本身，检测对象多为完整药材、饮片或成品制剂，常以少数指标性成分的含量测定作为评价依据。然而，槟榔加工副产物与槟榔药材在来源部位、加工过程、含水量、基质组成及成分分布方面存在明显差异，直接套用现有槟榔药材或制剂的检测方法，难以全面、准确地反映槟榔加工副产物的质量特征。

5、此外，不同来源、不同批次、不同加工环节产生的槟榔副产物，其化学成分组成和含量可能存在较大差异。若缺乏统一、稳定和可重复的质量检测方法，将难以实现对槟榔加工副产物的质量分级、原料筛选、批次一致性评价及后续产品开发控制，也不利于其在药用、饲用或功能性产品中的规范化应用。

6、现有技术中，针对槟榔加工副产物的质量检测仍存在以下不足：第一，检测对象多集中于槟榔药材或成品制剂，针对加工副产物的专属性检测方法较少；第二，检测指标相对单一，难以全面反映副产物中多类活性成分的整体质量特征；第三，部分检测方法前处理步骤复杂、重复性不足，难以满足大批量样品的快速检测需求；第四，缺乏能够用于不同批次副产物质量比较、稳定性评价和标准化控制的系统检测方法。

7、因此，有必要建立一种适用于槟榔加工副产物的质量检测方法，通过合理的样品前处理、特征性成分检测、含量测定或指纹图谱分析等手段，对槟榔加工副产物的质量进行稳定、准确和可重复评价，为槟榔副产物的资源化利用、产品开发和质量标准建立提供技术支撑。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种槟榔加工副产物的质量检测方法，本发明检测方法能够对复杂槟榔副产物进行化学成分进行广泛而准确的检测。

2、为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

3、本发明第一方面提供了一种槟榔加工副产物的质量检测方法，所述质量检测方法包括槟榔加工副产物中化学成分的定性分析；

4、所述定性分析包括如下步骤：

5、（a）采用含有内标的甲醇溶液对槟榔加工副产物进行提取、离心，收集上清液；

6、（b）采用uplc-q-exactive orbitrap-ms/ms法对上清液中的化学成分进行定性分析；所述步骤（b）中，uplc-q-exactive orbitrap-ms/ms法中色谱条件如下：acquity uhplchss t3色谱柱；柱温35℃；流动相a为 0.1%甲酸水溶液，流动相b为0.1%甲酸乙腈溶液；梯度洗脱；进样量为10μl；流速为0.3ml/min。

7、优选地，所述步骤（b）中，梯度洗脱程序如下：0~10 min时，流动相b由0%升至30%；10~25 min时，流动相b由30%升至40%；25~30min时，流动相b由40%升至50%；30~40 min时，流动相b由50%升至70%；40~45 min时，流动相b由70%升至100%；45~60 min时，流动相b维持在100%；60~60.5 min时，流动相b由100%降至0%；60.5~70 min时，流动相b维持在0%。

8、优选地，所述步骤（b）中，uplc-q-exactive orbitrap-ms/ms法中质谱条件如下：

9、采用full ms-dd-ms2模式，正离子和负离子同时扫描模式采集；扫描范围为

m/

z100-1200；ms1分辨率为70000，ms2分辨率为17500；喷雾电压为3.2kv；毛细管温度为320℃；辅助气加热温度为350℃；鞘气流速为40l/min，辅助气流速为15l/min；agc target为 1×106；topn 5；ms2采用阶梯碰撞能量30、40、50。

10、优选地，所述步骤（a）中，含有内标的甲醇溶液中内标含量为5μg/ml，甲醇溶液浓度为80%；内标为尼克地平。

11、优选地，所述质量检测方法还包括槟榔加工副产物中槟榔碱、去甲槟榔碱、去甲槟榔次碱和槟榔次碱的定量分析：

12、所述定量分析包括如下步骤：

13、（1）采用甲醇溶液对槟榔加工副产物进行提取、离心，收集上清液；

14、（2）采用液相色谱法对上清液中槟榔碱、去甲槟榔碱、去甲槟榔次碱和槟榔次碱的含量进行测定；所述液相色谱条件如下：

15、以强阳离子交换键合硅胶为填充剂的scx柱；以乙腈-0.01mol/l磷酸二氢铵溶液为流动相，其中乙腈与磷酸二氢铵溶液的体积比为35:65；采用紫外检测器，检测波长为215nm；流速为1.0ml/min；柱温为30℃；进样量为10μl。

16、优选地，所述步骤（1）中，甲醇溶液浓度为70%。

17、优选地，所述步骤（2）中，磷酸二氢铵溶液ph值为2.2。

18、优选地，所述槟榔加工副产物包括槟榔加工废水、槟榔蒂和槟榔籽。

19、与现有技术相比，本发明的有益效果至少包括：

20、本发明检测方法用uplc-q-exactive orbitrap-ms/ms分析方法对槟榔加工副产物槟榔加工废水、槟榔籽、槟榔蒂化学成分进行定性分析；再利用高效液相色谱法测定槟榔加工副产物中槟榔碱、去甲槟榔碱、去甲槟榔次碱、槟榔次碱的含量。uplc-q-exactiveorbitrap-ms/ms分析方法具备分辨率高、质量精度好、定性能力强等优点，可以对复杂的中药复方中的化学成分进行广泛而准确的检测；高效液相色谱发可提供具有高准确性、高灵敏度、良好重复性的检测结果，操作简单易行，并通过了方法学验证，且线性关系良好，精密度、稳定性、重复性及回收率等均符合规定，定性和定量分析结合为槟榔加工副产物的质量标准的建立奠定了基础。

1.一种槟榔加工副产物的质量检测方法，其特征在于，所述质量检测方法包括槟榔加工副产物中化学成分的定性分析；

2.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述步骤（b）中，梯度洗脱程序如下：0~10 min时，流动相b由0%升至30%；10~25 min时，流动相b由30%升至40%；25~30min时，流动相b由40%升至50%；30~40 min时，流动相b由50%升至70%；40~45 min时，流动相b由70%升至100%；45~60 min时，流动相b维持在100%；60~60.5 min时，流动相b由100%降至0%；60.5~70 min时，流动相b维持在0%。

3.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述步骤（b）中，uplc-q-exactive orbitrap-ms/ms法中质谱条件如下：

4.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述步骤（a）中，含有内标的甲醇溶液中内标含量为5μg/ml，甲醇溶液浓度为80%；内标为尼克地平。

5.根据权利要求1所述的质量检测方法，其特征在于，所述质量检测方法还包括槟榔加工副产物中槟榔碱、去甲槟榔碱、去甲槟榔次碱和槟榔次碱的定量分析：

6.根据权利要求5所述的质量检测方法，其特征在于，所述步骤（1）中，甲醇溶液浓度为70%。

7.根据权利要求5所述的质量检测方法，其特征在于，所述步骤（2）中，磷酸二氢铵溶液ph值为2.2。

8.根据权利要求1或5所述的质量检测方法，其特征在于，所述槟榔加工副产物包括槟榔加工废水、槟榔蒂和槟榔籽。