一种构树根诱导不定芽的组培方法与流程

本发明涉及植物无性繁殖，具体涉及一种构树根诱导不定芽的组培方法。

背景技术：

1、构树（

broussonetia papyrifera）是桑科构属的落叶乔木，构树耐贫瘠、耐干旱、耐盐碱，是生态修复的先锋树种，并且其树皮、木材、叶、花、果实、根等皆可综合利用，经济效益潜力很大。目前，关于构树的繁殖方式主要有播种繁殖、扦插繁殖和组织培养。其中，组织培养技术因其繁殖速度快、不受季节限制、可保持优良性状等优势，被认为是构树高效无性繁殖的有效途径。

2、目前，当前构树规模化繁育主要依靠茎段组培，也有少量叶片再生技术，但均存在明显缺陷。采用叶片作为外植体时，需先诱导形成愈伤组织，再由愈伤分化不定芽，繁育周期长，体细胞变异、材料褐化和污染风险高；常规茎段组培虽无需愈伤、可直接萌发腋芽，但单根茎段仅能分化1~3个不定芽，种苗呈线性缓慢增殖，扩繁效率偏低，且母株可采集茎段数量有限，持续取材易损伤母本。现有少量利用构树根系再生芽的组培方案，也并未对不定芽数量进行改善，不定芽繁殖系数较低，几乎不具备产业化繁育价值。难以满足大批量、低成本供苗的生产需求和优良抗逆性状构树大量快繁。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种构树根诱导不定芽的组培方法，可显著提升构树不定芽发生率，诱导率可达70%，单根出芽指数可达5以上，增殖效率远高于传统茎段繁育。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了一种构树根诱导不定芽的组培方法，其特征在于，包括以下步骤：将构树组培苗根段接种于诱导培养基上进行诱导培养，得到丛生不定芽；所述诱导培养基为包含0.1~0.3 mg·l-16-ba和0.01~0.03 mg·l-1naa的ms培养基。

4、优选的，所述构树组培苗根段的直径为1.5~2 mm，长度为3~5 cm。

5、优选的，所述组培苗根段的取材方法包括从构树组培苗根茎处分离。

6、优选的，所述接种的方式为将组培苗根段按照水平方向放置于所述诱导培养基的表面。

7、优选的，所述组培苗根段的接种密度为2~4条根段/个组培瓶；所述组培瓶的容积为250~350 ml；所述诱导培养基的灌装量为30~50 ml/瓶。

8、优选的，所述诱导培养的温度为25~30 ℃；

9、优选的，所述诱导培养的光照强度为10~15 µmol·m-2·s-1，光照周期为13~15 h光照/天。

10、优选的，所述诱导培养过程中，每培养18~22天继代培养1次。

11、本发明提供了一种构树的无性繁殖方法，包括以下步骤：（1）将所述组培方法培育获得的丛生不定芽分为独立单芽，诱导不定根的生长，获得构树生根组培苗；（2）将所述构树生根组培苗经继代培养，重复所述的组培方法。

12、本发明提供了一种所述组培方法或所述无性繁殖方法在构树规模化无性繁殖或种苗工厂化生产中的应用。

13、本发明提供了一种构树根诱导不定芽的组培方法，采用诱导培养基对构树组培苗的根进行诱导培养，所述诱导培养基为含0.1~0.3 mg·l-16-ba和0.01~0.03 mg·l-1naa的ms培养基。采用本发明所述的组培方法对构树组培苗的根段进行诱导培养，可使每条组培苗根产生6个以上不定芽，且不定芽发生率均在70%以上，通过此方法可得到大量不定芽用于后续无性繁殖，增殖效率远高于传统茎段繁育。本发明操作简便、繁殖效率高，可用于构树的规模化无性繁殖、种苗工厂化生产及生态修复用苗的快速繁育。

1.一种构树根诱导不定芽的组培方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的组培方法，其特征在于，所述构树组培苗根段的直径为1.5~2mm，长度为3~5 cm。

3.根据权利要求1或2所述的组培方法，其特征在于，所述组培苗根段的取材方法包括从构树组培苗根茎处分离。

4.根据权利要求1所述的组培方法，其特征在于，所述接种的方式为将组培苗根段按照水平方向放置于所述诱导培养基的表面。

5.根据权利要求1所述的组培方法，其特征在于，所述组培苗根段的接种密度为2~4条根段/个组培瓶；所述组培瓶的容积为250~350 ml；所述诱导培养基的灌装量为30~50 ml/瓶。

6.根据权利要求1所述的组培方法，其特征在于，所述诱导培养的温度为25~30℃。

7.根据权利要求1所述的组培方法，其特征在于，所述诱导培养的光照强度为10~15 µmol·m-2·s-1，光照周期为13~15 h光照/天。

8.根据权利要求1所述的组培方法，其特征在于，所述诱导培养过程中，每培养18~22天继代培养1次。

9.一种构树的无性繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：

10.权利要求1~8任一项所述组培方法或权利要求9所述无性繁殖方法在构树规模化无性繁殖或种苗工厂化生产中的应用。