基于将MOMPVS4抗原靶向至抗原呈递细胞的衣原体疫苗

基于将momp vs4抗原靶向至抗原呈递细胞的衣原体疫苗
技术领域
1.本发明属于医学领域，特别是疫苗学领域。


背景技术：

2.衣原体是细胞内细菌病原体，是造成各种感染的原因。例如，沙眼衣原体(chlamydia trachomatis)是人的性传播疾病和眼部感染(沙眼)的病原体。据估计，全世界有9200万人性感染沙眼衣原体。因为沙眼衣原体泌尿生殖系统感染的患病率高，并且是异位妊娠和不孕不育的危险因素，所以引起公共卫生关注。除此之外，已显示沙眼衣原体感染会促进hiv的传播，并作为hpv诱导的宫颈癌的协同因素。未经治疗的沙眼衣原体生殖系统感染的持续时间可以延长，并且在最初12个月内通常无法完全清除。从人体研究中可以知道，产生了一定程度的针对生殖器再感染的保护性免疫，尽管它表现为充其量是部分的。抗生素疗法有效地控制感染；然而，无症状病例的高患病率表明，只有开发出有效的衣原体疫苗，才能设想可持续地控制疾病。
3.momp是中和抗体的经典靶抗原，也是最早描述的抗原分子之一。它是一种表面暴露的跨膜蛋白，具有结构(孔蛋白)特性。momp是一种40kda的蛋白，大约占沙眼衣原体膜中蛋白质的60％，是中和抗体的靶标，在体外和体内均已证明有效。momp由被五个恒定片段隔开的四个可变表面暴露结构域(vs1至vs4)组成，是衣原体血清型(～15)分组的分子基础。已经描述了世界各地区沙眼衣原体泌尿生殖系统血清型的分布概况，为基于momp的疫苗所需的血清型覆盖率提供了流行病学数据。
4.momp在人和动物中具有高免疫原性，因此已作为疫苗候选物进行了非常详细的研究，既作为天然纯化的蛋白质进行重组研究，也作为dna疫苗。主要是vs4作为免疫原引起了兴趣，因为显示该区域含有嵌入可变区中的高度保守的物种特异性表位。重要地，vs4区中的该保守表位可以引发广泛的交叉反应性免疫反应，其能够中和多种血清型，其中包括最流行的d、e和f。使用vs4区时缺乏保护的原因可以有很多；包括靶向抗原呈递细胞的效率低。


技术实现要素：

5.本发明由权利要求书定义。特别是，本发明涉及针对抗原呈递细胞的表面抗原的抗体，其中重链和/或轻链与沙眼衣原体的momp vs4结构域缀合或融合。
具体实施方式
6.定义
7.如本文所用，术语“受试者”或“有需要的受试者”旨在指人或非人哺乳动物。通常患者感染了或可能感染沙眼衣原体。
8.如本文所用，术语“沙眼衣原体”具有其在本领域中的一般含义，是指作为人的性传播疾病和眼部感染(沙眼)的病原体的细菌，其可以以各种方式表现，包括：沙眼、性病淋
巴肉芽肿、非淋菌性尿道炎、宫颈炎、输卵管炎、盆腔炎性疾病。沙眼衣原体是失明的最常见感染性原因，也是最常见的性传播细菌。
9.如本文所用，术语“无症状的”是指没有经历衣原体感染的可检测症状的受试者。如本文所用，术语“有症状的”是指经历了衣原体感染的可检测症状的受试者。衣原体感染的症状包括但不限于：排尿时疼痛、阴道分泌物异常、腹部或骨盆疼痛、性交时疼痛、性交后出血、女性月经间出血以及排尿时疼痛、阴茎尖端的白色、混浊或水样分泌物、尿道(将尿液排出体外的管道)灼热或瘙痒、或男性睾丸疼痛。
10.如本文所用，术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用，以指任何长度的氨基酸的聚合物。这些术语还涵盖已被修饰(例如二硫键形成、糖基化、脂化、磷酸化或与标记成分缀合)的氨基酸聚合物。在基因疗法的上下文中讨论时，多肽是指各自完整的多肽，或其任何片段或基因工程衍生物(其保留了完整蛋白质的所需生化功能)。
11.如本文所用，术语“多核苷酸”是指任何长度的核苷酸(包括脱氧核糖核苷酸或核糖核苷酸、或其类似物)的聚合形式。多核苷酸可以包含修饰的核苷酸(如甲基化的核苷酸和核苷酸类似物)，并且可以被非核苷酸成分中断。如果存在修饰，可以在聚合物组装之前或之后赋予对核苷酸结构的修饰。如本文所用，术语多核苷酸可互换地指双链和单链分子。除非另有说明或要求，否则本文描述的本发明的多核苷酸的任何实施方案既涵盖双链形式，也涵盖已知或预测构成双链形式的两种互补单链形式中的每一种。
12.如本文所用，表述“源自”是指其中第一成分(例如第一多肽)或来自该第一成分的信息用于分离、获得或制造不同的第二成分(例如不同于第一多肽的第二多肽)的过程。
13.如本文所用，术语“编码”是指多核苷酸中核苷酸的特定序列(例如基因、cdna或mrna)的固有特性，在生物过程中作为用于合成其它聚合物和大分子的模板，具有确定的核苷酸序列(例如rrna、trna和mrna)或确定的氨基酸序列和由其产生的生物学特性。因此，如果在细胞或其他生物系统中，与基因对应的mrna的转录和翻译产生蛋白质，则该基因、cdna或rna编码该蛋白质。编码链(其核苷酸序列与mrna序列相同，通常在序列表中提供)和非编码链(用作基因或cdna转录的模板)两者都可以称为编码该蛋白质或该基因或cdna的其它产物。除非另有说明，否则“编码氨基酸序列的核苷酸序列”包括所有互为简并版本且编码相同氨基酸序列的核苷酸序列。短语“编码蛋白质或rna的核苷酸序列”也可以包括内含子，以至于编码该蛋白质的核苷酸序列在某些版本中可以含有内含子。
14.如本文所用，术语“载体”、“克隆载体”和“表达载体”是指可以将dna或rna序列(例如外源基因)引入宿主细胞从而转化宿主并促进所引入序列的表达(例如转录和翻译)的载体。
15.如本文所用，术语“启动子/调节序列”是指由细胞的合成机制或引入的合成机制识别的核酸序列(例如dna序列)，该识别是启动多核苷酸序列的特异性转录所需的，从而允许表达与启动子/调节序列可操作连接的基因产物。在一些例子中，该序列可以是核心启动子序列，在其它例子中，该序列还可以包括增强子序列和表达基因产物所需的其它调节元件。例如，启动子/调节序列可以是以组织特异性方式表达基因产物的序列。
16.如本文所用，术语“可操作连接”或“转录控制”是指调节序列与异源核酸序列之间的功能连接，其导致异源核酸的表达。例如，当第一核酸序列与第二核酸序列处于功能关系时，第一核酸序列与第二核酸序列可操作连接。例如，如果启动子影响编码序列的转录或表
达，则启动子与编码序列可操作连接。可操作连接的dna序列可以彼此连续，例如，在需要连接两个蛋白质编码区域时位于同一阅读框中。
17.如本文所用，术语“转化”是指将“外来的”(即外在的或细胞外的)基因、dna或rna序列引入宿主细胞，以便宿主细胞将表达引入的基因或序列以产生所需的物质(通常是由引入的基因或序列编码的蛋白质或酶)。接收并表达引入的dna或rna的宿主细胞被“转化”。
18.如本文所用，术语“表达系统”是指宿主细胞和相容载体在适当条件下，例如用于表达由载体携带并引入宿主细胞的外来dna编码的蛋白质。
19.如本文所用，两个序列之间的“百分比同一性”是序列共有的相同位置数的函数(即，％同一性＝相同位置数/位置总数
×
100)，同时考虑了空位的数量和每个空位的长度，需要引入这些空位以实现两个序列的最佳比对。可以使用数学算法完成序列的比对和两个序列之间百分比同一性的确定，如下所述。可以使用needleman和wunsch算法确定两个氨基酸序列之间的百分比同一性(needleman,saul b.&wunsch,christian d.(1970)."a general method applicable to the search for similarities in the amino acid sequence of two proteins".journal of molecular biology.48(3):443-53.)。也可以使用例如emboss needle(成对比对；可在www.ebi.ac.uk获得)等算法来确定两个核苷酸或氨基酸序列之间的百分比同一性。例如，emboss needle可以与blosum62矩阵一起使用，“空位开放罚分(gap open penalty)”为10，“空位扩展罚分(gap extend penalty)”为0.5，“末端空位罚分(end gap penalty)”为假，“末端空位开放罚分(end gap open penalty)”为10，并且“末端空位扩展罚分(end gap extend penalty)”为0.5。通常，“百分比同一性”是匹配位置数除以比对位置数并乘以100的函数。例如，如果在比对后，两个比对序列之间10个序列位置中有6个相同，则同一性为60％。通常在进行分析的查询序列的全长上确定％同一性。具有相同初级氨基酸序列或核酸序列的两个分子是相同的，无论任何化学和/或生物修饰如何。根据本发明，第一氨基酸序列与第二氨基酸序列具有至少80％同一性是指第一序列与第二氨基酸序列具有80；81；82；83；84；85；86；87；88；89；90；91；92；93；94；95；96；97；98；99或100％的同一性。
20.如本文所用，术语“momp”是指沙眼衣原体的主要外膜蛋白。momp是一种表面暴露的跨膜蛋白，具有结构(孔蛋白)特性。momp是一种40kda的蛋白，大约占沙眼衣原体膜中蛋白质的60％，是中和抗体的靶标，在体外和体内均已证明有效。momp由被五个恒定片段隔开的四个可变表面暴露结构域(vs1至vs4)组成，是衣原体血清型(～15)分组的分子基础。momp的示例性氨基酸序列显示为seq id no：1，其中vs4结构域的范围从seq id no：1中第282位的氨基酸残基至第358位的氨基酸残基。
21.seq id no:1》sp|q46409|mompd_chltr主要外膜孔蛋白，血清型d os＝沙眼衣原体(d/uw-3/cx株)ox＝272561gn＝ompa pe＝2sv＝1。vs4结构域在序列中带有下划线。
[0022][0023]
如本文所用，术语“缀合”或可互换的“缀合多肽”旨在表示由一种或多种多肽共价连接而形成的复合或嵌合分子。术语“共价连接”或“缀合”是指多肽和非肽部分彼此直接共
价连接，或通过中间部分(如桥、间隔子或连接部分)彼此间接共价连接。一种特别的缀合物是融合蛋白。
[0024]
如本文所用，术语“融合蛋白”表示通过连接源自不同蛋白质的两种或更多种多肽而产生的蛋白质。特别是，可以通过重组dna技术产生融合蛋白，其通常用于生物学研究或疗法。也可以通过化学共价缀合产生融合蛋白，在融合蛋白的多肽部分之间有或没有接头。在融合蛋白中，两种或更多种多肽直接融合或通过接头融合。
[0025]
如本文所用，术语“直接”是指第一多肽n-末端的第一氨基酸与第二多肽c-末端的最后一个氨基酸融合。这种直接融合可以自然发生，如以下所述：(vigneron等人，science 2004，pmid 15001714)，(warren等人，science 2006，pmid 16960008)，(berkers等人，j.immunol.2015a，pmid 26401000)，(berkers等人，j.immunol.2015b，pmid 26401003)，(delong等人，science 2016，pmid 26912858)，(liepe等人，science 2016，pmid 27846572)，(babon等人，nat.med.2016，pmid 27798614)。
[0026]
如本文所用，术语“接头”具有其在本领域中的一般含义，是指长度足以确保蛋白质形成适当的二级和三级结构的氨基酸序列。在一些实施方案中，所述接头是肽接头，其包含至少一个但少于30个氨基酸，例如2-30个氨基酸，优选10-30个氨基酸，更优选15-30个氨基酸，仍更优选19-27个氨基酸，最优选20-26个氨基酸的肽接头。在一些实施方案中，接头具有2；3；4；5；6；7；8；9；10；11；12；13；14；15；16；17；18；19；20；21；22；23；24；25；26；27；28；29；30个氨基酸残基。通常，接头是那些允许化合物采用适当构象的接头。最合适的接头序列(1)将采用灵活的伸展构象，(2)将不会表现出发展可以与融合蛋白的功能结构域相互作用的有序二级结构的倾向，并且(3)将具有最小的可以促进与功能蛋白结构域相互作用的疏水或带电特性。
[0027]
如本文所用，术语“抗体”是指免疫球蛋白分子和免疫球蛋白分子的免疫活性部分，即含有与抗原免疫特异性结合的抗原结合位点的分子。在啮齿动物和灵长类动物的天然抗体中，两条重链通过二硫键相互连接，每条重链通过二硫键与轻链连接。有两种轻链λ(1)和κ(k)。有五种主要的重链类别(或同种型)，其决定抗体分子的功能活性：igm、igd、igg、iga和ige。每条链含有不同的序列结构域。在典型的igg抗体中，轻链包括两个结构域，一个可变结构域(vl)和一个恒定结构域(cl)。重链包括四个结构域，一个可变结构域(vh)和三个恒定结构域(ch1、ch2和ch3，统称为ch)。轻链(vl)和重链(vh)两者的可变区决定与抗原的结合识别和特异性。轻链(cl)和(ch)重链的恒定区结构域赋予重要的生物学特性，如抗体链结合、分泌、经胎盘迁移、补体结合以及与fc受体(fcr)的结合。fv片段是免疫球蛋白fab片段的n-末端部分，由一条轻链和一条重链的可变部分组成。抗体的特异性在于抗体结合位点和抗原决定簇之间的结构互补性。抗体结合位点由主要来自高变区或互补决定区(cdr)的残基组成。有时，来自非高变区或框架区(fr)的残基也可以参与抗体结合位点，或影响整体结构域结构从而影响结合位点。互补决定区或cdr是指共同定义天然免疫球蛋白结合位点的天然fv区的结合亲和力和特异性的氨基酸序列。免疫球蛋白的轻链和重链各有三个cdr，分别命名为l-cdr1、l-cdr2、l-cdr3和h-cdr1、h-cdr2、h-cdr3。因此，抗原结合位点通常包括六个cdr，其包括来自重链和轻链v区中每个区域的cdr。框架区(fr)是指在cdr之间插入的氨基酸序列。据此，轻链和重链的可变区通常包括以下顺序的4个框架区和3个cdr：fr1-cdr1-fr2-cdr2-fr3-cdr3-fr4。根据kabat等人设计的系统对抗体可变结构域中
的残基进行常规编号。在kabat等人，1987，sequences of proteins of immunological interest，美国nih美国卫生与公众服务部(kabat等人，1992年，以下简称“kabat等人”)中提出了该系统。kabat残基名称并不总是与seq id序列中氨基酸残基的线性编号直接对应。实际的线性氨基酸序列可以比严格的kabat编号中含有更少或额外的氨基酸，对应于基本可变结构域结构的结构成分(无论是框架区还是互补决定区(cdr))的缩短或插入。对于给定抗体，可以通过比对抗体序列中的同源残基与“标准”kabat编号序列来确定正确的kabat残基编号。根据kabat编号系统，重链可变结构域的cdr位于残基31-35(h-cdr1)、残基50-65(h-cdr2)和残基95-102(h-cdr3)。根据kabat编号系统，轻链可变结构域的cdr位于残基24-34(l-cdr1)、残基50-56(l-cdr2)和残基89-97(l-cdr3)。对于下文描述的激动剂抗体，已使用来自www.bioinf.org.uk的cdr查找算法确定了cdr，见antibodies页中标题为“how to identify the cdrs by looking at a sequence”的小节。
[0028]
如本文所用，术语“免疫球蛋白结构域”是指抗体链的球状区(例如重链抗体链或轻链)，或基本上由这种球状区组成的多肽。
[0029]
如本文所用，术语“fc区”用于定义免疫球蛋白重链的c-末端区，包括天然序列fc区和变异fc区。人igg重链fc区通常定义为包含从igg抗体的c226位或p230位至羧基末端的氨基酸残基。fc区的残基编号是kabat的eu索引的编号。可以例如在抗体的生产或纯化过程中去除fc区的c-末端赖氨酸(残基k447)。因此，本发明的抗体组合物可以包含去除所有k447残基的抗体群体、没有去除k447残基的抗体群体、以及具有和不具有k447残基的抗体混合物的抗体群体。
[0030]
如本文所用，术语“嵌合抗体”是指包含非人抗体的vh结构域和vl结构域以及人抗体的ch结构域和cl结构域的抗体。在一个实施方案中，“嵌合抗体”是一种抗体分子，其中(a)恒定区(即重链和/或轻链)或其一部分被改变、替换或交换，使得抗原结合位点(可变区)与不同或改变的类别、效应子功能和/或物种的恒定区连接，或与向嵌合抗体赋予新特性的完全不同的分子(例如酶、毒素、激动剂分子(例如cd40配体)、激素、生长因子、药物等)连接；或(b)可变区或其一部分被改变、替换或交换为具有不同或改变的抗原特异性的可变区。嵌合抗体还包括灵长类动物化抗体，特别是人源化抗体。此外，嵌合抗体可以包含在受体抗体或供体抗体中不存在的残基。进行这些修改是为了进一步完善抗体性能。进一步的详细信息见jones等人，nature 321:522-525(1986)；riechmann等人，nature 332:323-329(1988)；和presta，curr.op.struct.biol.2:593-596(1992)。(见美国专利号4,816,567；和morrison等人,proc.natl.acad.sci.usa,81:6851-6855(1984))。
[0031]
如本文所用，术语“人源化抗体”包括具有鼠抗体的6个cdr但具有人源化框架区和恒定区的抗体。更具体地，如本文所用，术语“人源化抗体”可以包括其中源自另一种哺乳动物物种(如小鼠)种系的cdr序列已被移植至人框架序列上的抗体。
[0032]
如本文所用，术语“人单克隆抗体”旨在包括具有源自人免疫球蛋白序列的可变区和恒定区的抗体。本发明的人抗体可以包括未由人免疫球蛋白序列编码的氨基酸残基(例如通过体外随机或位点特异性诱变或通过体内体细胞突变而引入的突变)。然而，在一个实施方案中，如本文所用，术语“人单克隆抗体”不旨在包括其中源自另一种哺乳动物物种(如小鼠)种系的cdr序列已被移植至人框架序列上的抗体。
[0033]
如本文所用，术语“免疫反应”是指免疫系统对宿主体内抗原的反应，其包括产生
抗原特异性抗体和/或细胞毒性反应。对初始抗原暴露的免疫反应(初次免疫反应)通常在数天至两周的滞后期后可检测到；对同一抗原的后续刺激的免疫反应(二次免疫反应)比初次免疫反应的情况下更快。对转基因产物的免疫反应可以包括体液免疫反应(例如抗体反应)和细胞免疫反应(例如溶细胞性t细胞反应)，其可以被由转基因编码的免疫原性产物引发。可以通过本领域已知的方法(例如通过测量抗体滴度)来测量免疫反应的水平。
[0034]
如本文所用，术语“apc”或“抗原呈递细胞”表示能够激活t细胞的细胞，包括但不限于某些巨噬细胞、b细胞和树突状细胞。
[0035]
如本文所用，术语“树突状细胞”或“dc”是指淋巴或非淋巴组织中存在的形态相似细胞类型的多样化群体的任何成员。这些细胞的特征在于其独特的形态、高水平的表面mhc-ii类表达(steinman等人，ann.rev.immunol.9:271(1991)；其对此类细胞的描述通过引用并入本文)。
[0036]
如本文所用，术语“cd40”具有其在本领域中的一般含义，是指人cd40多肽受体。在一些实施方案中，cd40是如uniprotkb-p25942(也称为人tnr5)所报道的人典型序列的亚型。
[0037]
如本文所用，术语“cd40l”具有其在本领域中的一般含义，是指人cd40l多肽，例如，如uniprotkb-p25942所报道的，包括其cd40结合结构域seq id no：2。cd40l可以表达为可溶性多肽，是cd40受体的天然配体。
[0038]
seq id no:2》cd40l结合结构域
[0039][0040]
如本文所用，术语“cd40激动剂抗体”旨在指在基于细胞的测定(如b细胞增殖测定)中，在没有cd40l的情况下增加cd40介导的信号传导活性的抗体。特别是，cd40激动剂抗体(i)它诱导b细胞增殖，如通过流式细胞术分析、或通过分析cfse标记的细胞的复制稀释度所体外测量的；和/或(ii)诱导细胞因子(如il-6、il-12或il-15)分泌，如通过树突状细胞激活测定所体外测量的。
[0041]
如本文所用，术语“langerin”具有其在本领域中的一般含义，是指人c型凝集素域家族4成员k多肽。在一些实施方案中，langerin是如uniprotkb-q9uj71(也称为人cd207)所报道的人典型序列的亚型。
[0042]
如本文所用，术语“治疗”既指预防性或预防治疗，也指治愈性或疾病修饰性治疗，包括治疗有感染疾病风险或疑似已感染疾病的患者以及生病或已被诊断为患有疾病或医疗状况的患者，并且包括抑制临床复发。可以将治疗施用于患有医疗疾患或最终可能获得该疾患的患者，以预防、治愈疾患或复发性疾患、延迟其发生、减轻其严重程度、或改善其一种或多种症状，或为了延长患者的生存期，使其超过在没有这种治疗的情况下的预期。“治疗方案”是指疾病的治疗模式，例如在疗法期间使用的给药模式。治疗方案可以包括诱导方案和维持方案。短语“诱导方案”或“诱导期”是指用于疾病初始治疗的治疗方案(或治疗方案的一部分)。诱导方案的一般目标是在治疗方案的初始阶段向患者提供高水平的药物。诱导方案可以(部分或全部)采用“负荷方案”，其可以包括施用比医生在维持方案期间会使用的剂量更大的药物，比医生在维持方案期间会施用药物更频繁地施用药物，或两者。短语“维持方案”或“维持期”是指用于在疾病治疗期间维持患者的治疗方案(或治疗方案的一部
分)，例如使患者长时间(数月或数年)保持缓解。维持方案可以采用连续疗法(例如定期施用药物，例如每周、每月、每年等)或间歇疗法(例如间断治疗、间歇治疗、在复发时治疗、或在达到特定预定标准[例如疼痛、疾病表现等]后治疗)。
[0043]
如本文所用，术语“药物组合物”是指本文所述的组合物或其药学上可接受的盐，与其它试剂(如载体和/或赋形剂)。如本文所提供的药物组合物通常包含药学上可接受的载体。
[0044]
如本文所用，术语“药学上可接受的载体”包括任何和所有溶剂、稀释剂或其它液体载体、分散剂或悬浮助剂、表面活性剂、等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等，以适合所需的特定剂型。remington's pharmaceutical-sciences，第十六版，e.w.martin(mack publishing co.,easton,pa.,1980)公开了用于配制药物组合物的各种载体和制备其的已知技术。
[0045]
如本文所用，术语“接种疫苗”是指但不限于，在受试者中引发针对特定抗原的免疫反应的过程。
[0046]
如本文所用，术语“疫苗组合物”旨在指可以施用于人或动物以诱导免疫系统反应的组合物；该免疫系统反应可以导致激活某些细胞，特别是apc、t淋巴细胞和b淋巴细胞。
[0047]
如本文所用，术语“抗原”是指如果经处理并由mhc分子呈递，则能够被抗体或t细胞受体(tcr)特异性结合的分子。抗原另外能够被免疫系统识别和/或能够诱导体液免疫反应和/或细胞免疫反应，导致激活b淋巴细胞和/或t淋巴细胞。抗原可以具有一个或多个表位或抗原位点(b表位和t表位)。
[0048]
如本文所用，术语“佐剂”是指在施用于受试者或动物时可以诱导和/或增强针对抗原的免疫反应的化合物。它也旨在指通常起到加速、延长对特定抗原的特异性免疫反应或增强其质量的作用的物质。在本发明的上下文中，术语“佐剂”是指一种化合物，其既通过影响先天免疫反应的瞬时反应来增强先天免疫反应，也通过抗原呈递细胞(apc)尤其是树突状细胞(dc)的激活和成熟来增强适应性免疫反应的更长期的作用。
[0049]
如本文所用，表述“治疗有效量”是指本发明活性成分的足够的量，其以适用于医学治疗的合理的益处/风险比诱导免疫反应。
[0050]
本发明的抗体：
[0051]
本发明的第一目的涉及一种针对抗原呈递细胞的表面抗原的抗体，其中重链和/或轻链与多肽缀合或融合，所述多肽与seq id no：1中范围从第282位的氨基酸残基至第358位的氨基酸残基的氨基酸序列(即vs4多肽)具有至少80％的同一性。
[0052]
在一些实施方案中，抗体的重链缀合或融合至与seq id no：1中范围从第282位的氨基酸残基至第358位的氨基酸残基的氨基酸序列(即vs4多肽)具有至少80％的同一性的多肽。
[0053]
在一些实施方案中，抗体的轻链缀合或融合至与seq id no：1中范围从第282位的氨基酸残基至第358位的氨基酸残基的氨基酸序列(即vs4多肽)具有至少80％的同一性的多肽。
[0054]
在一些实施方案中，抗体的重链和轻链两者缀合或融合至与seq id no：1中范围从第282位的氨基酸残基至第358位的氨基酸残基的氨基酸序列(即vs4多肽)具有至少80％的同一性的多肽。
[0055]
在一些实施方案中，所述抗体是igg抗体，优选igg1或igg4抗体，或甚至更优选igg4抗体。
[0056]
在一些实施方案中，所述抗体是嵌合抗体，特别是嵌合小鼠/人抗体。
[0057]
在一些实施方案中，所述抗体是人源化抗体。
[0058]
可以基于如上所述制备的鼠单克隆抗体的序列来制备嵌合抗体或人源化抗体。可以使用标准分子生物学技术从感兴趣的鼠杂交瘤获得编码重链和轻链免疫球蛋白的dna并进行工程化以容纳非鼠(例如人)免疫球蛋白序列。例如，为了产生嵌合抗体，可以使用本领域已知的方法将鼠可变区与人恒定区连接(参见例如cabilly等人的美国专利号4,816,567)。为了产生人源化抗体，可以使用本领域已知的方法将鼠cdr区域插入人框架中。参见例如winter的美国专利号5,225,539和queen等人的美国专利号5,530,101；5,585,089；5,693,762和6,180,370。
[0059]
在一些实施方案中，所述抗体是人抗体。在一些实施方案中，可以使用携带人免疫系统而不是小鼠系统的一部分的转基因或转染色体小鼠来鉴定人抗体。这些转基因和转染色体小鼠分别包括本文称为humab小鼠和km小鼠的小鼠，并且在本文中统称为“人ig小鼠”。humab(medarex,inc.)含有编码未重排的人重链(μ链和γ链)和k轻链免疫球蛋白序列的人免疫球蛋白基因微座位(miniloci)，以及使内源性μ链和k链基因座失活的靶向突变(参见例如lonberg等人，1994nature 368(6474):856-859)。在另一个实施方案中，可以使用在转基因和转染色体上携带人免疫球蛋白序列的小鼠(如携带人重链转基因和人轻链转染色体的小鼠)来产生人抗体。此类小鼠在本文中称为“km小鼠”，详细描述于ishida等人的pct公布wo 02/43478中。
[0060]
在一些实施方案中，所述抗体对专职apc的细胞表面标志物具有特异性。所述抗体可以对另一种专职apc(如b细胞或巨噬细胞)的细胞表面标志物具有特异性。
[0061]
在一些实施方案中，所述抗体选自特异性结合以下各项的抗体：dc免疫受体(dcir)、mhc i类、mhc ii类、cd1、cd2、cd3、cd4、cd8、cdllb、cd14、cd15、cd16、cd19、cd20、cd29、cd31、cd40、cd43、cd44、cd45、cd54、cd56、cd57、cd58、cd83、cd86、cmrf-44、cmrf-56、dcir、dc-aspgr、clec-6、cd40、bdca-2、marco、dec-205、甘露糖受体、langerin、dectin-1、b7-1、b7-2、ifn-γ受体和il-2受体、icam-1、fey受体、lox-1和aspgr。
[0062]
在一些实施方案中，所述抗体对cd40具有特异性。
[0063]
在一些实施方案中，抗cd40抗体源自12e12抗体，并且包含：
[0064]-包含互补决定区cdr1h、cdr2h和cdr3h的重链，所述cdr1h具有氨基酸序列gftfsdyymy(seq id no：3)，所述cdr2h具有氨基酸序列yinsgggstyypdtvkg(seq id no：4)，所述cdr3h具有氨基酸序列rglpfhamdy(seq id no：5)，
[0065]-和包含互补决定区cdr1l、cdr2l和cdr3l的轻链，所述cdr1l具有氨基酸序列sasqgisnyln(seq id no：6)，所述cdr2l具有氨基酸序列ytsilhs(seq id no：7)，所述cdr3l具有氨基酸序列qqfnklppt(seq id no：8)。
[0066]
在一些实施方案中，抗cd40抗体源自11b6抗体，并且包含：
[0067]-包含互补决定区cdr1h、cdr2h和cdr3h的重链，所述cdr1h具有氨基酸序列gysftgyymh(seq id no：9)，所述cdr2h具有氨基酸序列rinpyngatsynqnfkd(seq id no：10)，所述cdr3h具有氨基酸序列edyvy(seq id no：11)，和
[0068]-包含互补决定区cdr1l、cdr2l和cdr3l的轻链，所述cdr1l具有氨基酸序列rssqslvhsngntylh(seq id no：12)，所述cdr2l具有氨基酸序列kvsnrfs(seq id no：13)，所述cdr3l具有氨基酸序列sqsthvpwt(seq id no：14)。
[0069]
在一些实施方案中，抗cd40抗体源自12b4抗体，并且包含：
[0070]-包含互补决定区cdr1h、cdr2h和cdr3h的重链，所述cdr1h具有氨基酸序列gytftdyvlh(seq id no：15)，所述cdr2h具有氨基酸序列yinpyndgtkynekfkg(seq id no：16)，所述cdr3h具有氨基酸序列gypaysgyamdy(seq id no：17)，和
[0071]-包含互补决定区cdr1l、cdr2l和cdr3l的轻链，所述cdr1l具有氨基酸序列rasqdisnyln(seq id no：18)，所述cdr2l具有氨基酸序列ytsrlhs(seq id no：19)，所述cdr3l具有氨基酸序列hhgntlpwt(seq id no：20)。
[0072]
在一些实施方案中，抗cd40抗体选自如表a中所述的选定的mab1、mab2、mab3、mab4、mab5和mab6。
[0073]
表a：cd40抗体
[0074]
mab1[11b6 vh/vkv2]seq id no：21seq id no：22mab2[11b6 vhv3/vkv2]seq id no：23seq id no：22mab3[12b4]seq id no：24seq id no：25mab4[24a3]seq id no：26seq id no：27mab5[cp870,893]seq id no：28seq id no：29mab 6[12e12]seq id no：30seq id no：31
[0075]
seq id no：21(人源化11b6的可变重链区(vh)(v2)的氨基酸序列)
[0076][0077]
seq id no：22(人源化11b6 vl的可变轻链(vl)vk(v2)的氨基酸序列)
[0078][0079]
seq id no：23(人源化11b6的可变重链区(vh)(v3)的氨基酸序列)
[0080][0081]
seq id no：24(mab3(12b4)的vh氨基酸序列)
[0082][0083]
seq id no：25(mab3(12b4)的vl氨基酸序列)
[0084][0085]
seq id no：26(mab4(24a3 hc)的vh氨基酸序列)
[0086][0087]
seq id no：27(mab4(24a3 kc)的vl氨基酸序列)
[0088][0089]
seq id no：28(mab5的vh氨基酸序列)
[0090][0091]
seq id no：29(mab5的vl氨基酸序列)
[0092][0093]
seq id no：30(mab6(12e12 h3人源化hc)的vh氨基酸序列)
[0094][0095]
seq id no：31(mab6(人源化k2 12e12)的vl氨基酸序列)
[0096][0097]
在一些实施方案中，抗cd40抗体是cd40激动剂抗体。cd40激动剂抗体描述于wo2010/009346、wo2010/104747和wo2010/104749中。其它正在开发的抗cd40激动剂抗体包括：pfizer开发的全人igg2 cd40激动剂抗体cp-870,893。它以3.48
×
10-10
m的kd与cd40结合，但不阻断cd40l的结合(参见例如美国专利号7,338,660)；和seattle genetics从小鼠抗体克隆s2c6开发的人源化igg1抗体sgn-40，s2c6是使用人膀胱癌细胞系作为免疫原产生的。sgn-40以1.0
×
10-9
m的kd与cd40结合，并通过增强cd40和cd40l之间的相互作用而起作用，从而表现出部分激动剂作用(francisco j a等人,cancer res,60:3225-31,2000)。甚至更特别地，所述cd40激动剂抗体选自如表a中所述的选定的mab1、mab2、mab3、mab4、mab5和mab6。
[0098]
在一些实施方案中，所述cd40激动剂抗体的重链或轻链(即未与vs4多肽缀合或融合的链)与cd40l的cd40结合结构域缀合或融合。
[0099]
在一些实施方案中，cd40l的cd40结合结构域与所述cd40激动剂抗体的轻链或重链的c-末端融合，任选地通过接头融合，所述接头优选如下文所述的flexv1接头。
[0100]
在一些实施方案中，本发明的抗体由cd40激动剂抗体组成，其中所述抗体的重链与vs4多肽融合或缀合，轻链与cd40l的cd40结合结构域(seq id no：2)缀合或融合。
[0101]
在一些实施方案中，所述抗体对langerin具有特异性。在一些实施方案中，所述抗体源自具有atcc登录号pta-9852的抗体15b10。在一些实施方案中，所述抗体源自具有atcc登录号pta-9853的抗体2g3。在一些实施方案中，所述抗体源自如wo2011032161中所述的抗体91e7、37c1或4c7。
[0102]
在一些实施方案中，抗langerin抗体包含重链和轻链，所述重链包含15b10抗体的互补决定区cdr1h、cdr2h和cdr3h，所述轻链包含15b10抗体的互补决定区cdr1l、cdr2l和cdr3l。
[0103]
在一些实施方案中，抗langerin抗体包含重链和轻链，所述重链包含2g3抗体的互补决定区cdr1h、cdr2h和cdr3h，所述轻链包含2g3抗体的互补决定区cdr1l、cdr2l和cdr3l。
[0104]
在一些实施方案中，抗langerin抗体包含重链和轻链，所述重链包含4c7抗体的互补决定区cdr1h、cdr2h和cdr3h，所述轻链包含4c7抗体的互补决定区cdr1l、cdr2l和cdr3l。
[0105]
在一些实施方案中，所述抗体选自如表b中所述的选定的mab7、mab8、mab9、mab10、mab11和mab12。
[0106]
mab7[15b10]seq id no：32seq id no：33mab8[2g3]seq id no：34seq id no：35mab9[4c7]seq id no：36seq id no：37
[0107]
seq id no：32(15b10的可变重链区(vh)的氨基酸序列)
[0108][0109]
seq id no：33(15b10的可变轻链区(vl)的氨基酸序列)
[0110][0111]
seq id no：34(2g3的可变重链区(vh)的氨基酸序列)
[0112][0113]
seq id no：35(2g3的可变轻链区(vl)的氨基酸序列)
[0114][0115]
seq id no：36(4c7的重链的氨基酸序列)
[0116][0117]
seq id no：37(4c7的轻链的氨基酸序列)
[0118][0119]
可以通过本领域本身已知的任何技术生产本发明的抗体，所述技术例如但不限于单独的或组合的任何化学、生物、遗传或酶技术。知道所需序列的氨基酸序列后，本领域技术人员可以容易地通过用于生产多肽的标准技术来生产所述多肽。例如，可以通过如本领域现在公知的重组dna技术来合成本发明的抗体。例如，在将编码所需(多)肽的dna序列掺入表达载体并将此类载体引入将表达所需多肽的合适的真核或原核宿主中后，可以获得作为dna表达产物的这些片段，之后可以使用公知的技术从所述宿主中分离它们。
[0120]
抗体的重链和/或轻链通过其c-末端与vs4多肽缀合或融合。在一些实施方案中，抗体的重链和/或轻链与vs4多肽的n-末端融合。
[0121]
在一些实施方案中，通过使用化学偶联将抗体的重链和/或轻链与vs4多肽缀合。本领域已知数种方法用于使抗体与其缀合物部分附着或缀合。已用于将部分与抗体缀合的接头类型的例子包括但不限于腙类、硫醚类、酯类、二硫化物类和含肽的接头(如缬氨酸-瓜氨酸接头)。可以选择的接头例如对溶酶体隔室内的低ph值切割敏感，或对蛋白酶切割敏感，所述蛋白酶如在肿瘤组织中优选表达的蛋白酶，如组织蛋白酶(例如组织蛋白酶b、c、d)。特别是用于缀合多肽的技术是本领域公知的(参见例如arnon等人，“monoclonal antibodies for immunotargeting of drugs in cancer therapy”,monoclonal antibodies and cancer therapy(reisfeld等人编辑，alan r.liss,inc.,1985)；hellstrom等人，“antibodies for drug delivery”,controlled drug delivery(robinson等人编辑，marcel deiker,inc.,第二版,1987)；thorpe,“antibody carriers of cytotoxic agents in cancer therapy:a review”,monoclonal antibodies'84:biological and clinical applications(pinchera等人编辑，1985)；“analysis,results,and future prospective of the therapeutic use of radiolabeled antibody in cancer therapy”,monoclonal antibodies for cancer detection and therapy(baldwin等人编辑，academic press,1985)；和thorpe等人，1982,immunol.rev.62:119-58；还参见例如pct公布wo 89/12624。)通常，肽分别通过n-羟基琥珀酰亚胺酯或马来酰亚胺官能团与抗体上的赖氨酸或半胱氨酸残基共价连接。已报道了使用工程化半胱氨酸进行缀合或掺入非天然氨基酸的方法会改善缀合物的均一性(axup,j.y.,bajjuri,k.m.,ritland,m.,hutchins,b.m.,kim,c.h.,kazane,s.a.,halder,r.,forsyth,j.s.,santidrian,a.f.,stafin,k.等人.(2012).synthesis of site-specific antibody-drug conjugates using unnatural amino acids.proc.natl.acad.sci.usa 109,16101-16106.；junutula,j.r.,flagella,k.m.,graham,r.a.,parsons,k.l.,ha,e.,raab,h.,bhakta,s.,nguyen,t.,dugger,d.l.,li,g.等人.(2010).engineered thio-trastuzumab-dm1 conjugate with an improved therapeutic index to target human epidermal growth factor receptor 2-positive breast cancer.clin.cancer res.16,4769-4778)。junutula等人(nat biotechnol.2008；26:925-32)开发了基于半胱氨酸的位点特异性缀合，称为“thiomab”(tdc)，据称与常规缀合方法相比，其显示出改进的治疗指数。还正在探索与已掺入抗体中的非天然氨基酸缀合用于adc；然而，该方法的普遍性尚未确定(axup等人，2012)。特别是，本领域技术人员还可以设想用含酰基供体谷氨酰胺的标签(例如含有gin的肽标签或q-标签)或通过多肽工程化(例如通过多肽上的氨基酸缺失、插入、取代或突变)而具有反应性的内源性谷氨酰胺进行工程化的含fc多肽。然后，谷氨酰胺转移酶可以与胺供体剂(例如包含反应性胺或与其连接的小分子)共价交联，以形成稳定且均质的工程化的含fc多肽缀合物群体，所述胺供体剂通过含酰基供体谷氨酰胺的标签或可及的/暴露的/反应性的内源性谷氨酰胺与所述含fc多肽位点特异性缀合(wo 2012059882)。
[0122]
在一些实施方案中，如us20160031988a1和us20120039916a1中所述，抗体的重链和/或轻链通过锚定结构域(dockerin domain)或多个结构域与vs4多肽缀合，以允许与黏
着素(cohesin)融合蛋白非共价缀合。在一些实施方案中，抗体的重链或轻链通过锚定结构域与黏着素融合蛋白缀合，所述黏着素融合蛋白由如seq id no：38中所列出的氨基酸序列组成。
[0123]
seq id no:38optslaml-avitag-thermocohesin-flexv1-momp_chtrd_vs4-epea标签
[0124][0125]
在一些实施方案中，抗体的重链和/或轻链与vs4多肽融合以形成融合蛋白。
[0126]
在一些实施方案中，vs4多肽与重链和/或轻链直接融合或通过接头融合。如本文所用，术语“直接”是指vs4多肽n-末端的第一氨基酸与重链或轻链c-末端的最后一个氨基酸融合。这种直接融合可以自然发生，如以下所描述：(vigneron等人，science 2004，pmid 15001714)，(warren等人，science 2006，pmid 16960008)，(berkers等人，j.immunol.2015a，pmid 26401000)，(berkers等人，j.immunol.2015b，pmid 26401003)，(delong等人，science 2016，pmid 26912858)，(liepe等人，science 2016，pmid 27846572)，(babon等人，nat.med.2016，pmid 27798614)。
[0127]
在一些实施方案中，接头选自flexv1、f1、f2、f3或f4，如下所述。
[0128][0129]
在一些实施方案中，本发明的抗体由抗cd40抗体(命名为cd40.momp-vs4)组成，其中所述抗cd40抗体的重链与vs4多肽融合，所述vs4多肽与seq id no：1中范围从第282位氨基酸残基至第358位氨基酸残基的氨基酸序列具有至少80％的同一性。
[0130]
在一些实施方案中，本发明的抗体由抗cd40抗体(命名为cd40.momp-vs4)组成，其中所述抗cd40抗体的重链与vs4多肽融合，所述vs4多肽具有seq id no：1中范围从第282位氨基酸残基至第358位氨基酸残基的氨基酸序列。
[0131]
在一些实施方案中，所述抗cd40抗体的重链通过接头(特别是通过flexv1)与vs4多肽融合。
[0132]
在一些实施方案中，所述抗cd40抗体源自12e12抗体。
[0133]
在一些实施方案中，本发明的抗体包含如seq id no：44中所列出的重链和具有如seq id no：45中所列出的氨基酸序列的轻链。
[0134]
seq id no:44》[人抗cd40vh3-lv-higg4h-c-flex-v1-hmomp/vs4-epea]
[0135][0136]
seq id no:45》[人抗cd40vk2-lv-higg4h-c]
[0137][0138]
本发明的核酸、载体和宿主细胞：
[0139]
本发明的进一步目的涉及编码抗体的重链和/或轻链的核酸，所述抗体针对抗原呈递细胞的表面抗原并与vs4多肽融合。
[0140]
通常，所述核酸是dna或rna分子，其可以包含于任何合适的载体(如质粒、黏粒、游离体、人造染色体、噬菌体或病毒载体)中。
[0141]
因此，本发明的进一步目的涉及包含本发明的核酸的载体。
[0142]
此类载体可以包含调节元件(如启动子、增强子、终止子等)，以在施用于受试者时引起或直接表达所述抗体。用于动物细胞表达载体的启动子和增强子的例子包括sv40的早期启动子和增强子、莫洛尼小鼠白血病病毒的ltr启动子和增强子、免疫球蛋白h链的启动子和增强子等。可以使用任何动物细胞表达载体，只要可以插入并表达编码人抗体c区的基因即可。合适的载体的例子包括page107、page103、phsg274、pkcr、psg1βd2-4等。质粒的其它例子包括包含复制起点的复制质粒，或整合质粒(例如puc、pcdna、pbr等)。病毒载体的其它例子包括腺病毒载体、逆转录病毒载体、疱疹病毒载体和aav载体。可以通过本领域已知的技术生产此类重组病毒，如通过转染包装细胞或通过瞬时转染辅助质粒或病毒来进行。病毒包装细胞的典型例子包括pa317细胞、psicrip细胞、gpenv 细胞、293细胞等。可以在例如wo 95/14785、wo 96/22378、us 5,882,877、us 6,013,516、us 4,861,719、us 5,278,056和wo 94/19478中找到用于生产此类复制缺陷重组病毒的详细方案。
[0143]
本发明的进一步目的涉及已用根据本发明所述的核酸和/或载体转染、感染或转化的宿主细胞。
[0144]
本发明的核酸可以用于在合适的表达系统中生产本发明的抗体。常见的表达系统包括大肠杆菌(e.coli)宿主细胞和质粒载体、昆虫宿主细胞和杆状病毒载体、以及哺乳动物宿主细胞和载体。宿主细胞的其它例子包括但不限于原核细胞(如细菌)和真核细胞(如酵母细胞、哺乳动物细胞、昆虫细胞、植物细胞等)。具体的例子包括大肠杆菌、克鲁维酵母属酵母或酵母属酵母。哺乳动物宿主细胞包括中国仓鼠卵巢(cho)细胞，包括dhfr-cho细胞(如urlaub和chasin，1980中所述)与dhfr可选标记物一起使用、chok1 dhfr 细胞系、nso骨髓瘤细胞、cos细胞和sp2细胞，例如gs cho细胞系与gs xceed
tm
基因表达系统(lonza)一起使用，或hek细胞。
[0145]
本发明还涉及一种生产表达根据本发明所述的多肽的重组宿主细胞的方法，所述方法包括以下步骤：(i)将如上所述的重组核酸或载体体外或离体引入感受态宿主细胞中，
(ii)体外或离体培养获得的重组宿主细胞，以及(iii)任选地，选择表达和/或分泌所述抗体的细胞。此类重组宿主细胞可以用于生产本发明的抗体。
[0146]
因此，如本文所公开的宿主细胞特别适合用于生产本发明的抗体。实际上，当将重组表达引入哺乳动物宿主细胞时，通过将宿主细胞培养足以在宿主细胞中表达抗体的一段时间，并且任选地将抗体分泌至宿主细胞生长的培养基中来生产多肽。例如，可以在抗体分泌后使用标准蛋白质纯化方法从培养基中回收并纯化抗体。
[0147]
药物组合物和疫苗组合物：
[0148]
如本文所述的抗体可以作为一种或多种药物组合物的一部分施用。除非任何常规载体介质与本发明的抗体不相容，如通过产生任何不希望的生物效应或另外地以有害的方式与药物组合物的任何其它成分发生相互作用，否则认为其使用是在本发明的保护范围内。可以用作药学上可接受的载体的材料的一些例子包括但不限于：糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉类，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和乙酸纤维素；粉状黄蓍胶；麦芽；明胶；滑石；赋形剂，如可可脂和栓剂蜡；油类，如花生油、棉籽油、红花油、芝麻油、橄榄油、玉米油和大豆油；二醇类，如丙二醇；酯类，如油酸乙酯和月桂酸乙酯；琼脂；缓冲剂，如氢氧化镁和氢氧化铝；海藻酸；无热原水；等渗盐水；林格氏溶液；根据配方师的判断，以下各项也可以存在于组合物中：乙醇和磷酸盐缓冲溶液，以及其它无毒且相容的润滑剂(如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁)，以及着色剂、脱模剂、包衣剂、甜味剂、调味剂和增香剂、防腐剂和抗氧化剂。
[0149]
如本文所述的抗体特别适合用于制备疫苗组合物。因此，本发明的进一步目的涉及包含本发明的抗体的疫苗组合物。
[0150]
在一些实施方案中，本发明的疫苗组合物包含佐剂。在一些实施方案中，所述佐剂是明矾。在一些实施方案中，所述佐剂是不完全弗氏佐剂(ifa)或其它油基佐剂，其在30-70％之间，优选在40-60％之间，更优选在45-55％重量/重量比(w/w)之间存在。在一些实施方案中，本发明的疫苗组合物包含至少一种toll样受体(tlr)激动剂，其选自tlr1、tlr2、tlr3、tlr4、tlr5、tlr6、tlr7和tlr8激动剂。
[0151]
治疗方法：
[0152]
如本文所述的抗体以及药物组合物或疫苗组合物特别适合用于诱导针对沙眼衣原体的免疫反应，因此可以用于疫苗目的。
[0153]
因此，本发明的进一步目的涉及一种用于为有需要的受试者接种针对沙眼衣原体的疫苗的方法，所述方法包括施用治疗有效量的本发明的抗体。
[0154]
在一些实施方案中，如本文所述的抗体以及药物组合物或疫苗组合物特别适合用于治疗沙眼。
[0155]
在一些实施方案中，所述受试者可以是人或任何其他(例如鸟类和哺乳动物)易受衣原体感染的动物(例如家养动物，如猫和狗；牲畜和农场动物，如马、牛、猪、鸡等)。所述受试者通常是哺乳动物，包括非灵长类动物(例如骆驼、驴、斑马、牛、猪、马、山羊、绵羊、猫、狗、大鼠和小鼠)和灵长类动物(例如猴、黑猩猩和人)。在一些实施方案中，所述受试者是非人动物。在一些实施方案中，所述受试者是农场动物或宠物。在一些实施方案中，所述受试者是人。在一些实施方案中，所述受试者是人的婴儿。在一些实施方案中，所述受试者是人的儿童。在一些实施方案中，所述受试者是成年人。在一些实施方案中，所述受试者是老年
mab评估非特异性背景(虚线)。对2名供体进行了初步测试，表明通过cd40受体靶向衣原体抗原改善了抗原特异性t细胞反应。
[0164]
图5：momp/vs4抗原通过flexv1接头与抗cd40 dc靶向抗体缀合的示意图。
[0165]
具体实施方式
[0166]
实施例：
[0167]
生成了抗cd40-momp/vs4疫苗(即抗cd40抗体，其中重链通过锚定结构域与momp/vs4-黏着素缀合)的免疫原性(图1a)。结果描绘于图1-图4中。
[0168]
发明人还生成了一种抗cd40抗体，其中重链通过接头flexv1与momp/vs4缀合(图5)。
[0169]
参考文献：
[0170]
在整个本技术中，各种参考文献描述了本发明所属领域的情况。这些参考文献的公开在此通过引用并入本公开。