一种治疗腰背痛的组合物及其制备方法和应用与流程

1.本发明属于医药技术领域，具体涉及一种治疗腰背痛的组合物及其制备方法和应用。


背景技术：

2.公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
3.腰背痛是一类严重影响患者生活质量的常见病症，可导致患者运动功能障碍，甚至丧失生活自理能力。分为特异性(由非脊柱或脊柱来源的特定病理生理机制)和非特异性(无明确特异性病因)。其中非特异性腰背痛占所有病例的80％-90％。首要发病因素是软组织损伤引起的肌筋膜痛，其他常见原因还包括退行性病变及精神因素。多数患者常于急性期缓解后反复进行性进展，严重影响日常生活及工作，治疗目标主要为缓解疼痛、恢复功能及预防复发。
4.黄帝内经对腰背痛有明确记载，《素问》第四十一篇《刺腰痛篇》：记载了引起腰痛的各种原因、症状和治疗，如“足太阳脉令人腰痛，引项脊背如重状，挟脊而痛至头，刺其”。结合中医理论及现代研究，可应用补益结合镇痛两方面进行治疗。如何实现补益与镇痛的结合，提高药剂有效镇痛成分的提取率，成为了亟需解决的问题。


技术实现要素：

5.为了解决现有技术的不足，本发明的目的是提供一种治疗腰背痛的组合物及其制备方法和应用。本发明中威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪，采用传统水煎煮，起到滋补肝肾作用；制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花，采用乙醇提取，提高镇痛成分提取率。
6.为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：
7.第一方面，本发明提供了一种治疗腰背痛的组合物，所述组合物包括威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物和制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄、红花的醇提取组合物。
8.第二方面，本发明提供了一种治疗腰背痛的组合物的制备方法，包括以下步骤：
9.取威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪，加水煎煮，合并滤液，减压浓缩至药材重，得到威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物；
10.取制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花，乙醇提取，合并滤液，减压回收乙醇，至无醇味，得到制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物；
11.将威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物和制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物混合得到所述治疗腰背痛的组合物。
12.第三方面，本发明提供了上述治疗腰背痛的组合物在制备治疗腰背痛药物中的应用，所述治疗腰背痛药物包括上述治疗腰背痛的组合物和辅料。
13.上述本发明的一种或多种技术方案取得的有益效果如下：
14.(1)本发明的治疗腰背痛的组合物中威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物起到滋补肝肾作用，制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物提高镇痛成分提取率，实现了补益结合镇痛进行腰背痛治疗；
15.(2)本发明的水提取工艺和醇提取工艺实现了主要活性成分齐墩果酸、杯苋甾酮、阿魏酸、黄芪甲苷、川芎嗪、藁本内酯、羟基红花黄色素a、丹酚酸b、隐丹参酮、丹参酮ⅱa的高提取率和组合物的高出膏率；
16.(3)本发明的治疗腰背痛的组合物所制备的药物能够有效治疗腰背疼痛，显著改善腰背疼痛患者的疼痛严重程度、发作频率，提升患者的生活质量，具有较好的治疗效果。
具体实施方式
17.本发明的第一种典型实施方式，一种治疗腰背痛的组合物，其特征在于，所述组合物由威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物和制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物组成。
18.该实施方式的一种或多种实施例中，所述威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物的制备方法为：
19.取威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪，加水煎煮，合并滤液，减压浓缩至药材重，得到威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物。
20.该实施方式的一种或多种实施例中，所述威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的质量比为1-2:1-2:1-2。
21.该实施方式的一种或多种实施例中，所述加水煎煮分为两次，第一次加水煎煮加6-10倍水，煎煮时间1.5-2.5h；第二次加水煎煮加6-8倍水，煎煮时间0.5-1.5h。
22.该实施方式的一种或多种实施例中，所述制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物的制备方法为：
23.取制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花，乙醇提取，合并滤液，减压回收乙醇，至无醇味，得到制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物。
24.该实施方式的一种或多种实施例中，所述制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的质量比为5-7:5-7:10-15:12-18:18-20:9-12:9-12。
25.该实施方式的一种或多种实施例中，所述乙醇提取分为两次，乙醇浓度为60％-80％；
26.第一次乙醇提取使用5-9倍乙醇，第一次乙醇提取时间为1-2h；
27.第二次乙醇提取使用5-9倍乙醇，第二次乙醇提取时间为1-2h。
28.本发明的第二种典型实施方式，一种治疗腰背痛的组合物的制备方法，包括以下步骤：
29.取威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪，加水煎煮，合并滤液，减压浓缩至药材重，得到威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物；
30.取制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花，乙醇提取，合并滤液，减压回收乙醇，至无醇味，得到制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物；
31.将威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物和制乳香、制没药、制香附、川芎、丹
参、姜黄和红花的醇提取组合物混合得到所述治疗腰背痛的组合物。
32.本发明的第三种典型实施方式，上述治疗腰背痛的组合物在制备治疗腰背痛药物中的应用，所述治疗腰背痛药物包括上述治疗腰背痛的组合物和辅料。
33.该实施方式的一种或多种实施例中，所述治疗腰背痛药物包括但不限于膏滋、颗粒剂、片剂、胶囊。
34.为了使得本领域技术人员能够更加清楚地了解本发明的技术方案，以下将结合具体的实施例详细说明本发明的技术方案。
35.实施例1
36.取威灵仙150g、川牛膝150g、当归150g、炙黄芪150g，加水煎煮两次，第一次加8倍水煎煮2h，第二次加6倍水煎煮1h，合并滤液，减压浓缩至药材重，得到威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物。
37.取制乳香60g、制没药60g、制香附120g、川芎150g、丹参200g、姜黄100g、红花100g，加70％乙醇提取2次，第一次加7倍量乙醇提取1.5h，第二次加6倍量乙醇提取1h，合并滤液，减压回收乙醇，至无醇味，得到制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取物。
38.将威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物和制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物混合得到所述治疗腰背痛的组合物。
39.实施例2
40.与实施例1不同的是，第一次加6倍水煎煮2h。
41.实施例3
42.与实施例1不同的是，第一次加10倍水煎煮2h，第二次加8倍水煎煮1h。
43.实施例4
44.与实施例1不同的是，第一次加8倍水煎煮1.5h，第二次加6倍水煎煮0.5h。
45.实施例5
46.与实施例1不同的是，第一次加8倍水煎煮2.5h，第二次加6倍水煎煮1.5h。
47.实施例6
48.与实施例1不同的是，加80％乙醇提取2次，第一次加7倍量乙醇提取1.5h，第二次加6倍量乙醇提取1h。
49.实施例7
50.与实施例1不同的是，加60％乙醇提取2次，第一次加7倍量乙醇提取1.5h，第二次加6倍量乙醇提取1h。
51.实施例8
52.与实施例1不同的是，第一次加9倍量乙醇提取1.5h，第二次加7倍量乙醇提取1h。
53.实施例9
54.与实施例1不同的是，第一次加5倍量乙醇提取1.5h，第二次加4倍量乙醇提取1h。
55.实施例10
56.与实施例1不同的是，第一次加7倍量乙醇提取1h，第二次加6倍量乙醇提取0.5h。
57.实施例11
58.与实施例1不同的是，第一次加7倍量乙醇提取2h，第二次加6倍量乙醇提取1.5h。
59.实施例12
60.将实施例1的治疗腰背痛的组合物与5％pvp-k30、10％麦芽糊精混合，得到治疗腰背痛的组合物颗粒剂。
61.实验例1
62.测定威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物中的主要活性成分齐墩果酸、杯苋甾酮、阿魏酸、黄芪甲苷的含量。
63.出膏率＝干膏量/生药量*100。
64.转移率＝干膏量*干膏含量/含指标成分药材量*药材含量*100。
65.齐墩果酸、杯苋甾酮、阿魏酸含量测定
66.色谱柱为phenomenext luna c18柱(250mm
×
4.6mm，5μm)；流动相为乙腈(a)-0.085％磷酸溶液(b)，梯度洗脱：0～20min，10％～30％乙腈；20～45min，30％～57％乙腈；45～60min，57％～85％乙腈，检测波长为240nm；流速为1.0ml
·
min-1；柱温为30℃；进样量为10μl。
67.取齐墩果酸、杯苋甾酮、阿魏酸3种对照品精密称定，用80％甲醇制成每1ml含齐墩果酸、杯苋甾酮、阿魏酸分别为30、15、20μg的混合对照品溶液。
68.分别取实施例1-5中的威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物约1.0g，精密称定，精密加入80％甲醇溶液30ml，称定重量，回流1h，取出放冷，再称定重量，用80％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
69.分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
70.黄芪甲苷含量测定
71.以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-水(32：68)为流动相；蒸发光散射检测器检测。理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000。
72.取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加80％甲醇制成每1ml含50μg的溶液，即得对照品溶液。
73.分别取实施例1-5中的威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入含4％浓氨试液的80％甲醇溶液(取浓氨试液4ml，加80％甲醇至100ml，摇匀)25ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用含4％浓氨试液的80％甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液15ml，蒸干，残渣用80％甲醇溶解，转移至5ml量瓶中，加80％甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
74.分别精密吸取对照品溶液2μl、10μl，供试品溶液10～20μl，注入液相色谱仪，测定，以外标两点法对数方程计算，即得。
75.实施例1-5中威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物的出膏率及主要活性成分转移率如表1所示。
76.表1实施例1-5的威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物的出膏率及主要活性成分转移率
[0077][0078]
由表1可知，本发明可实现威灵仙、川牛膝、当归和炙黄芪的水提取物的高出膏率和高主要活性成分转移率，进而实现滋补肝肾作用。
[0079]
实验例2
[0080]
测定制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物中主要活性成分川芎嗪、藁本内酯、羟基红花黄色素a、丹酚酸b、隐丹参酮、丹参酮ⅱa的含量。
[0081]
出膏率＝干膏量/生药量*100。
[0082]
转移率＝干膏量*干膏含量/含指标成分药材量*药材含量*100。
[0083]
色谱柱为phenomenext luna c18柱(250mm
×
4.6mm，5μm)；流动相为乙腈(a)-0.1％磷酸溶液(b)，梯度洗脱：0～10min，10％～10％乙腈；10～40min，10％～22％乙腈；40～50min，22％～22％乙腈；50～80min，22％～50％乙腈；80～115min，50％～85％乙腈；检测波长为205nm；流速为1.0ml
·
min-1；柱温为30℃；进样量为10μl。
[0084]
取川芎嗪、藁本内酯、羟基红花黄色素a、丹酚酸b、隐丹参酮、丹参酮ⅱa5种对照品精密称定，用80％甲醇制成每1ml含红花红色素a、丹酚酸b、隐丹参酮、丹参酮ⅱa分别为50、15、10、20、10μg的混合对照品溶液。
[0085]
分别取实施例1、6-11中制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物约1.0g，精密称定，精密加入80％甲醇溶液30ml，称定重量，回流1h，取出放冷，再称定重量，用80％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。
[0086]
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
[0087]
实施例1、6-11中制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物的出膏率及主要活性成分转移率如表2所示。表2实施例1、6-11的制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物的出膏率及主要活性成分转移率
[0088]
[0089][0090]
由表2可知，本发明可实现制乳香、制没药、制香附、川芎、丹参、姜黄和红花的醇提取组合物的高出膏率和高主要活性成分转移率，进而提高有效镇痛成分含量。
[0091]
实验例3
[0092]
收集临床病例，通过vas疼痛评分对使用实施例12的治疗腰背痛的组合物颗粒剂治疗腰背疼痛前后进行对比研究。
[0093]
病例来源
[0094]
2020年1月至2021年12月期间，共招募100例腰背疼痛的患者，年龄范围18-55岁，其中男性43人，女性57人。采用治疗腰背痛的组合物颗粒剂干预8周。
[0095]
纳入标准
[0096]
(1)符合因非特异性腰背疼痛导致肢体运动功能障碍，甚至丧失生活自理能力的患者；
[0097]
(2)年龄18-55岁；
[0098]
(3)自愿参加本研究并签署知情同意书。
[0099]
排除标准
[0100]
(1)妊娠或哺乳期妇女；
[0101]
(2)合并除高血压、糖尿病、高脂血症之外的其他严重的脑、心、肺、肾、血液系统疾病和恶性肿瘤，需要药物治疗者；
[0102]
(3)合并有感染性疾病者，如病毒性肝炎、肺结核、艾滋病等；
[0103]
(4)由非脊柱或脊柱来源的特定病理生理机制导致的特异性疼痛。
[0104]
vas疼痛评分
[0105]
根据患者vas疼痛评分量表得分情况，分为四个等级。
[0106]
无痛：0≤患者评分分值≤1，患者无任何疼痛感觉。
[0107]
轻痛：1＜患者评分分值≤4，患者轻微疼痛，一般活动不受影响。
[0108]
中痛：4＜患者评分分值≤7，患者有明显疼痛，活动尚可。
[0109]
重痛：7＜患者评分分值≤10，患者有严重的疼痛，伴有活动受限。
[0110]
疼痛改善率：(治疗前疼痛分数－治疗后疼痛分数)/治疗前疼痛分数
×
100％。
[0111]
镇痛效果标准：镇痛评分≥60％为显效；镇痛评分30％―60％为有效；镇痛评分≤30％为无效。
[0112]
表3治疗腰背痛的组合物颗粒剂治疗腰背疼痛的治疗效果对比表
[0113]
[0114]
[0115]
[0116]
[0117]
[0118][0119]
如表3所示，与治疗前vas评分相比，100例患者中有90例vas评分降低，镇痛改善率在为30％以上患者即镇痛效果为有效和显效患者达67例，即占总患者人数的67％。结果表明治疗腰背痛的组合物颗粒剂能够有效治疗腰背疼痛，显著改善腰背疼痛患者的疼痛严重程度、发作频率，提升患者的生活质量，具有较好的治疗效果。
[0120]
实验例4
[0121]
醋酸小鼠扭体法是筛选镇痛药的常用模型之一，本发明通过应用该模型对实施例12的治疗腰背痛的组合物颗粒剂的镇痛效果进行研究。
[0122]
实验动物
[0123]
spf级昆明种小鼠50只，雌、雄各半，体重18～22g，由辽宁长生生物技术股份有限公司提供，试验前适应性饲养1周后使用。动物饲料:鼠颗粒饲料，于洪区前民饲料厂生产。饲养环境：室内洁净、安静、自然采光，通风良好，湿温度适中。
[0124]
实验药物及试剂
[0125]
治疗腰背痛的组合物颗粒剂(实施例12)；阿斯匹林(湖南中南制药有限公司,批号:h43021055)；醋酸(沈阳市试剂一厂生产)。
[0126]
实验分组
[0127]
将实验小鼠随机分成5组，对照组、模型组、阿司匹林组、高、中、低剂量给药组，每
组12只。高、中、低剂量组(高剂量1.44g/kg，中剂量0.72g/kg，低剂量0.36g/kg)分别给予不同浓度的治疗腰背痛的组合物颗粒剂，阿司匹林组(500mg/kg)、模型组给药同体积的生理盐水，连续灌胃7d。
[0128]
模型建立
[0129]
每次每只给药前称重，实验前12h禁食不禁水。其他各组最后一天给药1h后逐一腹腔注射0.6％醋酸溶液(10ml/kg)致痛。注射后立即记录每只小鼠15min内扭体次数。一次扭体的标准是：小鼠身体拉长腹部肌张力增高前肢伸展并伴有一侧或两侧后肢伸直。抑制率(％)＝(对照组平均扭体次数－给药组平均扭体次数)/对照组平均扭体次数
×
100％。
[0130]
实验结果
[0131]
如表4所示，高中低剂量组均有一定的镇痛作用，中、高剂量组具有显著的镇痛作用，扭体次数与给药浓度成反比，抑制率成正比，可初步断定其镇痛作用与剂量呈一定的量效关系。
[0132]
表4醋酸小鼠扭体法实验结果
[0133][0134]
以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。