杀真菌组合物的制作方法

杀真菌组合物
1.本发明涉及用于治疗有用植物的植物病原性病害、尤其是植物病原性真菌的新型杀真菌组合物，并且涉及控制有用植物上的此类病害和/或真菌的方法。
2.尽管属于多种不同化学类别的许多杀真菌化合物已被开发或正在被开发用于在有用植物作物中作为杀真菌剂使用，但在很多方面，针对具体植物病原性真菌的作物耐受性和活性并不总能满足农业实践的需要。wo 2018/102345披露了金担子素a作为农用杀真菌剂来治疗、预防或控制植物和种子中的真菌感染的用途。金担子素a是由出芽短梗霉菌(aureobasidium pullulans)产生的抗真菌环酯肽类抗生素。参见例如，takesako等人,the journal of antibiotics[抗生素杂志],1991,44,919-924。
[0003]
然而，存在如下持续需求：发现具有优异生物学特性的新组合物以用于控制或预防植物被植物病原性真菌侵染。例如，具有更宽的活性谱、改善的作物耐受性、改善的协同相互作用或增强特性的组合物，或显示更快速起效或具有更长持续残留活性或能够减少用于有效控制植物病原体所需的化合物和组合物的施用次数和/或降低其施用率，从而能够实现有益的抗性管理实践、降低环境影响并且减少操作人员暴露的组合物。
[0004]
使用包含具有不同作用模式的不同杀真菌化合物的混合物的组合物可以解决这些需要中的一些(例如，通过将具有不同活性谱的杀真菌剂进行组合)。
[0005]
根据本发明，提供了一种杀真菌组合物，该杀真菌组合物包含作为活性成分的组分(a)和(b)的混合物，其中组分(a)是具有式(i)的环酯肽或其立体异构体：
[0006][0007]
其中
[0008]
r1是甲基、乙基、1-羟基乙基或2-羟基乙基；
[0009]
a1是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)和l-缬氨酸(l-val)残基；
[0010]
a2是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：l-苯丙氨酸(l-phe)、邻-氟-l-苯丙氨酸(l-o-fphe)、间-氟-l-苯丙氨酸(l-m-fphe)、l-酪氨酸(l-tyr)、l-环己基丙氨酸(l-cha)、o-乙酰基-l-酪氨酸[l-tyr(ac)]、o-正己酰基-l-酪氨酸[l-tyr(正己酰基)]、o-苯甲酰基-l-酪氨酸[l-tyr(bzl)]和佩斯法尼酸(persephanine)残基；
[0011]
a3是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：n-甲基-l-苯丙氨酸(l-mephe)、l-苯丙氨酸(l-phe)、β-羟基-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-β-oh-mephe)、邻-氟-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-o-f-mephe)、间-氟-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-m-f-mephe)、对-氟-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-p-f-mephe)、间-溴-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-m-br-mephe)、对-溴-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-p-br-mephe)、间-碘-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-m-i-mephe)、对-碘-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-p-i-mephe)、3-苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-(4-氟苯基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-(4-氟苯基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-(4-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-(4-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-(1-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-(1-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-(2-氯-4-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-(2-氯-5-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-(2-氯-5-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-[4-(哌嗪-1-基)苯基]苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-[4-(哌嗪-1-基)苯-1-基]苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯-1-基]苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、β-氧代-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-β-氧代-mephe)、β-乙酰氧基-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-β-aco-mephe)、n-甲基-l-酪氨酸(l-metyr)、o-甲基-n-甲基-l-酪氨酸[l-metyr(me)]、n-甲基-l-丙氨酸(l-meala)、n-甲基-l-丝氨酸(l-meser)、n-甲基-d-苯丙氨酸(d-mephe)、n-甲基-d-丙氨酸(d-meala)、n-甲基-d-缬氨酸(d-meval)、n-甲基-d-丝氨酸(d-meser)、n-甲基-肌氨酸(mesar)和n-甲基-l-丝氨酸(l-meser)残基；
[0012]
a4是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：l-脯氨酸(l-pro)、l-硫代脯氨酸(l-spro)和4-羟基-l-脯氨酸(l-4hyp)残基；
[0013]
a5是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：l-别异亮氨酸(l-aile)、l-亮氨酸(l-leu)、l-正亮氨酸(l-nle)、l-正缬氨酸(l-nva)和l-缬氨酸(l-val)残基；
[0014]
a6是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、n-甲基-l-亮氨酸(l-meleu)、n-甲基-l-别异亮氨酸(l-meaile)和l-缬氨酸(l-val)残基；
[0015]
a7是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：l-亮氨酸(l-leu)、l-别异亮氨酸(l-aile)和l-正缬氨酸(l-nva)残基；并且
[0016]
a8是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：β-羟基-n-甲基-l-缬氨酸(l-β-oh-meval)、γ-羟基-n-甲基-l-缬氨酸(l-γ-oh-meval)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-缬氨酸(l-val)、n-甲基-2,3-双脱氢-l-缬氨酸(l-medh
2,3
val)、n-甲基-3,4-双脱氢-l-缬氨酸(l-medh
3,4
val)、n-甲基-l-苯丙氨酸(l-mephe)、β-羟基-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-β-oh-mephe)、n-甲基-l-苏氨酸(l-methr)、肌氨酸(sar)和n,β-二甲基-l-天冬氨酸(l-n,β-measp)残基；并且
[0017]
组分(b)选自由以下具有多位点作用的抑制剂组成的组：
[0018]
(b.1)选自下组的无机活性物质，该组由以下各项组成：波尔多混合剂、铜、乙酸铜、氢氧化铜、王铜、碱式硫酸铜和硫；
[0019]
(b.2)选自下组的硫代和二硫代氨基甲酸盐，该组由以下各项组成：福美铁、代森锰锌、代森锰、威百亩、磺菌威、代森联、甲基代森锌、塞仑、代森锌和福美锌；
[0020]
(b.3)选自下组的有机氯化合物，该组由以下各项组成：敌菌灵、百菌清、敌菌丹、克菌丹、灭菌丹、抑菌灵、双氯酚、六氯苯、五氯苯酚(pentachlorphenole)及其盐、苯酞和对
甲抑菌灵；以及
[0021]
(b.4)选自下组的胍类化合物以及其他，该组由以下各项组成：胍、多果定、双胍辛盐、双胍辛乙酸盐、双胍辛胺、双胍辛胺三乙酸盐、双胍三辛烷基苯磺酸盐(iminoctadine tris(albesilate))、敌菌灵和二噻农。
[0022]
通常，组分(a)与组分(b)的重量比可以是从100:1至1:1000、优选从100:1至1:800、更优选从50:1至1:800、甚至更优选从20:1至1:600。
[0023]
在本发明的一些优选实施例中，组分(a)与组分(b)的重量比可以是1:1、或1:1.2、或2:1、或4:1、或8:1、或16:1、或1:200、或1:100、或1:50、或1:25、或1:20、或1:12.5、或1:10、或1:6.2、或1:5、或1:2.5。
[0024]
根据本发明的第二方面，提供了一种控制或预防有用植物上或其繁殖材料上的植物病原性病害、尤其是植物病原性真菌的方法，该方法包括将如根据本发明所定义的组合物施用至这些有用植物、其场所或其繁殖材料。优选的是这样的方法，该方法包括将根据本发明的组合物施用至这些有用植物或施用至其场所，更优选地施用至这些有用植物。进一步优选的是这样的方法，该方法包括将根据本发明的组合物施用至这些有用植物的繁殖材料。
[0025]
根据本发明的第三方面，提供了如根据本发明所定义的包含组分(a)和组分(b)的组合物作为杀真菌剂的用途。
[0026]
已经发现，将组分(b)的化合物和任选地组分(c)的化合物与具有式(i)的化合物组合使用可以出人意料地并且大量地增强后者对抗真菌的效果，反之亦然。此外，使用本发明的组合物可以有效地对抗比单独使用个别活性成分时所能对抗的更广谱的此类真菌。
[0027]
由根据本发明的某些杀真菌组合物提供的益处还可以尤其包括针对保护植物免受由真菌引起的病害的有利水平的生物活性或对于用作农用化学活性成分的优越特性(例如，更大的生物活性、有利的活性谱、增加的安全性、改善的物理-化学特性或增加的生物可降解性)。
[0028]
如本文所用，术语“环酯肽”是指由衍生自2-羟基-3-甲基链烷酸的单元以及衍生自α-氨基酸a1、a2、a3、a4、a5、a6、a7和a8的单元按顺序组成的环肽，其中α-氨基酸残基a8通过酯基与2-羟基-3-甲基链烷酸的-och(ch(ch3)r1)部分键合以形成-c(＝o)och(ch(ch3)r1)部分，并且其中α-氨基酸残基a1、a2、a3、a4、a5、a6、a7和a8通过肽键相互连接。2-羟基-3-甲基链烷酸可以是2(r)-羟基-3(r)-甲基戊酸或2(r)-羟基-3-甲基丁酸。
[0029]
在本发明的第一实施例中，组分(a)包含一种或多种具有式(i-a)的环酯肽：
[0030][0031]
其中
[0032]
r1是甲基或乙基；
[0033]
x1、x2和x3中的每一个是氢，或者x1、x2和x3是氢、氟或羟基，条件是x1、x2和x3中只有一个是氟或羟基；
[0034]
x4是ch、s或羟基亚甲基；
[0035]
a3是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：n-甲基-l-苯丙氨酸(l-mephe)、l-苯丙氨酸(l-phe)、β-羟基-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-β-oh-mephe)、邻-氟-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-o-f-mephe)、间-氟-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-m-f-mephe)、对-氟-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-p-f-mephe)、间-溴-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-m-br-mephe)、对-溴-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-p-br-mephe)、间-碘-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-m-i-mephe)、对-碘-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-p-i-mephe)、3-苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-(4-氟苯基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-(4-氟苯基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-(4-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-(4-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-(1-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-(1-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-(2-氯-4-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-(2-氯-5-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-(2-氯-5-吡啶基)-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-[4-(哌嗪-1-基)苯基]苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-[4-(哌嗪-1-基)苯-1-基]苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、3-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基]苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、4-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯-1-基]苯基-n-甲基-l-苯丙氨酸、β-氧代-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-β-氧代-mephe)、β-乙酰氧基-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-β-aco-mephe)、n-甲基-l-酪氨酸(l-metyr)、o-甲基-n-甲基-l-酪氨酸[l-metyr(me)]、n-甲基-l-丙氨酸(l-meala)、n-甲基-l-丝氨酸(l-meser)、n-甲基-d-苯丙氨酸(d-mephe)、n-甲基-d-丙氨酸(d-meala)、n-甲基-d-缬氨酸(d-meval)、n-甲基-d-丝氨酸(d-meser)和n-甲基-l-丝氨酸(l-meser)残基；
[0036]
a5是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：l-别异亮氨酸(l-aile)、l-亮氨酸(l-leu)、l-正亮氨酸(l-nle)、l-正缬氨酸(l-nva)和l-缬氨酸(l-val)残基；
[0037]
a6是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、n-甲基-l-亮氨酸(l-meleu)、n-甲基-l-别异亮氨酸(l-meaile)和l-缬氨酸(l-val)残基；
[0038]
a7是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：l-亮氨酸(l-leu)、l-别异亮氨酸(l-aile)和l-正缬氨酸(l-nva)残基；并且
[0039]
a8是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：β-羟基-n-甲基-l-缬氨酸(l-β-oh-meval)、γ-羟基-n-甲基-l-缬氨酸(l-γ-oh-meval)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-缬氨酸(l-val)、n-甲基-2,3-双脱氢-l-缬氨酸(l-medh
2,3
val)、n-甲基-3,4-双脱氢-l-缬氨酸(l-medh
3,4
val)、n-甲基-l-苯丙氨酸(l-mephe)、β-羟基-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-β-oh-mephe)、n-甲基-l-苏氨酸(l-methr)、肌氨酸(sar)和n,β-二甲基-l-天冬氨酸(l-n,β-measp)残基。
[0040]
优选地，根据本发明的具有式(i)的化合物选自表a(下文)中列出的化合物1.001至1.035或表b(下文)中列出的化合物2.001至2.045。
[0041]
以下清单提供了关于本发明的具有式(i)的化合物的取代基r1、a1、a2、a3、a4、a5、a6、a7和a8的定义，包括优选定义。对于这些取代基中的任何一个，下文给出的任何定义都可以结合下文或在本文件中的其他地方给出的任何其他取代基的任何定义。
[0042]
表a：此表披露了35种具有式(i)的化合物，其中r1、a1、a2、a3、a4、a5、a6、a7和a8如下表a中所阐述：
[0043]
表a
[0044]
[0045]
[0046]
[0047][0048]
表b：此表披露了45种具有式(i)的化合物，其中r1是乙基，a1是l-meval，a4是l-pro，a6是l-meval并且a7是l-leu并且a2、a3、a5和a8如下表b中所阐述：
[0049]
表b
[0050]
[0051]
[0052][0053]
在本发明的此第一实施例的第一变体中，组分(a)优选地是具有式(i-a1)的环酯肽或其立体异构体，后文称为金担子素a：
[0054][0055]
如本文所用，术语“金担子素a”表示由衍生自2(r)-羟基-3(r)-甲基戊酸((2r,3r)-hmp)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-苯丙氨酸(l-phe)、n-甲基-l-苯丙氨酸(l-mephe)、l-脯氨酸(l-pro)、l-别异亮氨酸(l-aile)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-亮氨酸(l-leu)和β-羟基-n-甲基-l-缬氨酸(l-β-oh-meval)的单元按顺序组成的具有式(i-a1)的环酯肽或其立体异构体。
[0056]
在本发明的此第一实施例的第二变体中，组分(a)优选地是具有式(i-a2)的环酯肽或其立体异构体，后文称为金担子素e：
[0057][0058]
如本文所用，术语“金担子素e”表示由衍生自2(r)-羟基-3(r)-甲基戊酸((2r,3r)-hmp)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-苯丙氨酸(l-phe)、β-羟基-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-β-oh-mephe)、l-脯氨酸(l-pro)、l-别异亮氨酸(l-aile)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-亮氨酸(l-leu)和β-羟基-n-甲基-l-缬氨酸(l-β-oh-meval)的单元按顺序组成的具有式(i-a2)的环酯肽或其立体异构体。
[0059]
在本发明的此第一实施例的第三变体中，组分(a)优选地是具有式(i-a3)的环酯肽或其立体异构体，后文称为金担子素g：
[0060][0061]
如本文所用，术语“金担子素g”表示由衍生自2(r)-羟基-3(r)-甲基戊酸((2r,3r)-hmp)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-苯丙氨酸(l-phe)、n-甲基-l-苯丙氨酸(l-mephe)、l-脯氨酸(l-pro)、l-别异亮氨酸(l-aile)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-亮氨酸(l-leu)和n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)的单元按顺序组成的具有式(i-a3)的环酯肽或其立体异构体。
[0062]
在根据本发明的一个实施例中，组分(a)包含两种或更多种如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体。
[0063]
在本发明的此实施例的第一变体中，组分(a)包含金担子素a以及一种或多种其他如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体。
[0064]
在本发明的此实施例的第二变体中，组分(a)包含金担子素e以及一种或多种其他如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体。
[0065]
在根据本发明的一个优选实施例中，组分(a)包含金担子素a以及一种或多种选自由如表a中所阐述的化合物1.001至1.004和1.006至1.035组成的组的具有式(i)的环酯肽或其立体异构体。优选地，组分(a)包含金担子素a以及至少一种其他选自由金担子素e和金担子素g组成的组的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体。
[0066]
在根据本发明的另一个优选实施例中，组分(a)包含金担子素a以及一种或多种选自由如表b中所阐述的化合物2.001至2.045组成的组的具有式(i)的环酯肽或其立体异构体。
[0067]
在组分(a)包含金担子素a以及一种或多种其他具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体的实施例中，所述组分(a)典型地包含：
[0068]
按重量计从10％至99.9％、优选按重量计从20％至99.9％、更优选按重量计从40％至99.9％的金担子素a，以及
[0069]
按重量计从0.1％至90％、优选按重量计从0.1％至80％、更优选按重量计从0.1％至60％的一种或多种其他具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体。
[0070]
在组分(a)包含金担子素e以及一种或多种其他具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体的实施例中，所述组分(a)典型地包含：
[0071]
按重量计从10％至99.9％、优选按重量计从20％至99.9％、更优选按重量计从40％至99.9％的金担子素e，以及
[0072]
按重量计从0.1％至90％、优选按重量计从0.1％至80％、更优选按重量计从0.1％至60％的一种或多种其他具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体。
[0073]
在根据本发明的一个实施例中，组分(a)典型地包含：
[0074]
按重量计从60％至99.5％的金担子素a，
[0075]
按重量计从0.05％至5％的金担子素e，
[0076]
任选地，按重量计从0.1％至30％的金担子素g，以及
[0077]
任选地，按重量计从0.1％至10％的一种或多种其他具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体。
[0078]
在本发明的第二实施例中，组分(a)包含一种或多种具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体：
[0079][0080]
其中
[0081]
r1是甲基或乙基；
[0082]
x4是ch、s或羟基亚甲基；
[0083]
a5是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：l-别异亮氨酸(l-aile)、l-亮氨酸(l-leu)、l-正亮氨酸(l-nle)和l-缬氨酸(l-val)残基；
[0084]
a6是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、n-甲基-l-亮氨酸(l-meleu)、l-别异亮氨酸(l-aile)和n-甲基-l-别异亮氨酸(l-meaile)残基；
[0085]
a7是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：l-亮氨酸(l-leu)、l-别异亮氨酸(l-aile)和l-正缬氨酸(l-nva)残基；并且
[0086]
a8是选自下组的α-氨基酸残基，该组由以下各项组成：β-羟基-n-甲基-l-缬氨酸(l-β-oh-meval)、γ-羟基-n-甲基-l-缬氨酸(l-γ-oh-meval)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、n-甲基-2,3-双脱氢-l-缬氨酸(l-medh
2,3
val)、n-甲基-3,4-双脱氢-l-缬氨酸(l-medh
3,4
val)、n-甲基-l-苯丙氨酸(l-mephe)、β-羟基-n-甲基-l-苯丙氨酸(l-β-oh-mephe)、n-甲基-l-苏氨酸(l-methr)、肌氨酸(sar)和n,β-二甲基-l-天冬氨酸(l-n,β-measp)残基。
[0087]
如本文所用，术语“佩斯法尼酸残基”表示具有下式的α-氨基酸残基：
[0088][0089]
在本发明的此第二实施例的第一变体中，组分(a)优选地是具有式(i-b1)的环酯肽或其立体异构体，后文称为佩斯法素(persephacin)a：
[0090][0091]
如本文所用，术语“佩斯法素a”表示由衍生自2(r)-羟基-3(r)-甲基戊酸((2r,3r)-hmp)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-佩斯法尼酸、肌氨酸(sar)、l-脯氨酸(l-pro)、l-别异亮氨酸(l-aile)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-亮氨酸(l-leu)和β-羟基-n-甲基-l-缬氨酸(l-β-oh-meval)的单元按顺序组成的具有式(i-b1)的环酯肽或其立体异构体。
[0092]
在本发明的此第二实施例的第二变体中，组分(a)优选地是具有式(i-b2)的环酯肽或其立体异构体，后文称为佩斯法素b：
[0093][0094]
如本文所用，术语“佩斯法素b”表示由衍生自2(r)-羟基-3(r)-甲基戊酸((2r,3r)-hmp)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-佩斯法尼酸、肌氨酸(sar)、l-脯氨酸(l-pro)、l-别异亮氨酸(l-aile)、l-别异亮氨酸(l-aile)、l-亮氨酸(l-leu)和β-羟基-n-甲基-l-缬氨酸(l-β-oh-meval)的单元按顺序组成的具有式(i-b2)的环酯肽或其立体异构体。
[0095]
在本发明的此第二实施例的第三变体中，组分(a)优选地是具有式(i-b3)的环酯肽或其立体异构体，后文称为佩斯法素c：
[0096][0097]
如本文所用，术语“佩斯法素c”表示由衍生自2(r)-羟基-3(r)-甲基戊酸((2r,3r)-hmp)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-佩斯法尼酸、肌氨酸(sar)、l-脯氨酸(l-pro)、l-别异亮氨酸(l-aile)、n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)、l-亮氨酸(l-leu)和n-甲基-l-缬氨酸(l-meval)的单元按顺序组成的具有式(i-b3)的环酯肽或其立体异构体。
[0098]
在根据本发明的一个实施例中，组分(a)包含两种或更多种如上文所定义的具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体。
[0099]
在本发明的此实施例的一个变体中，组分(a)包含佩斯法素a以及一种或多种其他如上文所定义的具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体。
[0100]
在组分(a)包含佩斯法素a以及一种或多种其他具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体的实施例中，所述组分(a)典型地包含：
[0101]
按重量计从10％至99.9％、优选按重量计从20％至99.9％、更优选按重量计从40％至99.9％的佩斯法素a，以及
[0102]
按重量计从0.1％至90％、优选按重量计从0.1％至80％、更优选按重量计从0.1％至60％的一种或多种其他具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体。
[0103]
在根据本发明的另一个实施例中，组分(a)包含一种或多种如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体以及一种或多种如上文所定义的具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体。
[0104]
在本发明的此实施例的一个变体中，组分(a)包含金担子素a以及一种或多种如上文所定义的具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体。
[0105]
在本发明的此实施例的另一个变体中，组分(a)包含金担子素a、一种或多种其他如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体以及一种或多种如上文所定义的具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体。
[0106]
在本发明的此实施例的另一个变体中，组分(a)包含金担子素a、至少一种其他选自由金担子素e和金担子素g组成的组的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体以及一种或多种如上文所定义的具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体。
[0107]
在根据本发明的另一个实施例中，组分(a)是出芽短梗霉菌的菌株，通常是出芽短梗霉菌r106的菌株。
[0108]
应理解在这不限制本发明的范围的情况下，一种或多种如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体可以从出芽短梗霉菌的菌株(通常是出芽短梗霉菌r106的菌株)的发酵液中获得。
[0109]
在根据本发明的另一个实施例中，组分(a)是榛痂圆孢(sphaceloma coryli)的菌株或基因修饰菌株。
[0110]
应理解在这不限制本发明的范围的情况下，一种或多种如上文所定义的具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体可以从榛痂圆孢的菌株或基因修饰菌株的发酵液中获得。
[0111]
如本文所用，术语“发酵液”是指从菌株的发酵过程中获得的组合物。
[0112]
在根据本发明的另一个实施例中，组分(a)是包含两种或更多种如上文所定义的具有式(i)的环酯肽或其立体异构体的发酵液。
[0113]
在本发明的此实施例的第一变体中，组分(a)是包含两种或更多种如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体的发酵液。
[0114]
在根据本发明的一个实施例中，组分(a)是包含金担子素a以及一种多种其他如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体的发酵液。
[0115]
在根据本发明的另一个实施例中，组分(a)是包含金担子素e以及一种或多种其他如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体的发酵液。
[0116]
在本发明的此实施例的第二变体中，组分(a)是包含两种或更多种如上文所定义的具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体的发酵液，优选地组分(a)是包含佩斯法素a以及
一种或多种其他如上文所定义的具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体的发酵液。
[0117]
组分(b)化合物在本文和上文中是通过在个别情况下使用的所谓的“iso通用名”或另一种“通用名”或商标名来提及的。组分(b)化合物是已知的，并且是可商购的和/或可以使用本领域已知的程序和/或在文献中报道的程序来制备。
[0118]
在根据本发明的一个优选实施例中，组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹。
[0119]
在根据本发明的优选组合物中，组分(a)包含一种或多种如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是100:1至1:1000、优选从100:1至1:800、更优选从50:1至1:800、甚至更优选从20:1至1:600。
[0120]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)是金担子素a，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从100:1至1:1000。
[0121]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)是金担子素a，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从100:1至1:800。
[0122]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)是金担子素a，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从50:1至1:800。
[0123]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)是金担子素a，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从20:1至1:600。
[0124]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)是金担子素e，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从100:1至1:1000。
[0125]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)是金担子素e，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从100:1至1:800。
[0126]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)是金担子素e，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从50:1至1:800。
[0127]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)是金担子素e，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从20:1至1:600。
[0128]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)包含金担子素a以及一种或多种选自由如表a中所阐述的化合物1.001至1.004和1.006至1.035组成的组的具有式(i)的环酯肽或其立体异构体，优选地组分(a)包含金担子素a以及至少一种其他选自由金担子素e和金担子素g组成的组的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)
的重量比是从100:1至1:1000。
[0129]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)包含金担子素a以及一种或多种选自由如表a中所阐述的化合物1.001至1.004和1.006至1.035组成的组的具有式(i)的环酯肽或其立体异构体，优选地组分(a)包含金担子素a以及至少一种其他选自由金担子素e和金担子素g组成的组的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从100:1至1:800。
[0130]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)包含金担子素a以及一种或多种选自由如表a中所阐述的化合物1.001至1.004和1.006至1.035组成的组的具有式(i)的环酯肽或其立体异构体，优选地组分(a)包含金担子素a以及至少一种其他选自由金担子素e和金担子素g组成的组的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从50:1至1:800。
[0131]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)包含金担子素a以及一种或多种选自由如表a中所阐述的化合物1.001至1.004和1.006至1.035组成的组的具有式(i)的环酯肽或其立体异构体，优选地组分(a)包含金担子素a以及至少一种其他选自由金担子素e和金担子素g组成的组的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从20:1至1:600。
[0132]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)是出芽短梗霉菌的菌株(通常是出芽短梗霉菌r106的菌株)，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从100:1至1:1000、优选从100:1至1:800、更优选从50:1至1:800、甚至更优选从20:1至1:600。
[0133]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)是包含一种或多种如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体的发酵液，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从100:1至1:1000、优选从100:1至1:800、更优选从50:1至1:800、甚至更优选从20:1至1:600。
[0134]
在根据本发明的另一种优选组合物中，组分(a)是包含金担子素a以及一种或多种其他如上文所定义的具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体的发酵液，并且组分(b)是选自下组的化合物，该组由以下各项组成：代森锰锌、百菌清、克菌丹和灭菌丹，其中组分(a)与组分(b)的重量比是从100:1至1:1000、优选从100:1至1:800、更优选从50:1至1:800、甚至更优选从20:1至1:600。
[0135]
在某些情况下，本发明的组合物可以包含另外的不同于组分(b)的活性成分组分(c)，其中组分(c)选自由如根据本发明所定义的具有多位点作用的抑制剂(b.1)、(b.2)、(b.3)和(b.4)组成的组。
[0136]
在这些组合物包含组分(a)、组分(b)和组分(c)的本发明的实施例中，组分(a)与组分(b)和组分(c)的总和的重量比可以是从100:1至1:1000、更优选从100:1至1:800、甚至更优选从50:1至1:800、还更优选从20:1至1:600。
[0137]
在本发明的一些优选实施例中，组分(a)与组分(b)和组分(c)的总和的重量比可以是1:1、或1:1.2、或2:1、或4:1、或8:1、或16:1、或1:200、或1:100、或1:50、或1:25、或1:20、或1:12.5、或1:10、或1:6.2、或1:5、或1:2.5。
[0138]
根据本发明的具有式(i)的化合物或其立体异构体可以通过本领域技术人员已知的方法来制备。可以购买或者使用合成或半合成化学或发酵方法来制备具有式(i)的化合物。例如，具有式(i-a)的化合物或其立体异构体可以通过在takesako等人,the journal of antibiotics[抗生素杂志],1991,44,919-924、takesako等人,tetrahedron[四面体],1996,52,4327-4346和maharani等人tetrahedron[四面体],2014,70,2351-2358中已知的方法来制备。包含一种或多种具有式(i-a)的化合物或其立体异构体的发酵液可以从出芽短梗霉菌的菌株(通常是出芽短梗霉菌r106的菌株)的发酵过程中获得。包含一种或多种具有式(i-b)的化合物或其立体异构体的发酵液可以从榛痂圆孢的菌株的发酵过程中获得。发酵液可以不需要纯化。替代性地，一种或多种具有式(i)的化合物可以从发酵液中分离并且纯化，例如通过色谱法使用吸附剂(例如，硅胶和反相硅胶、光学活性吸附剂、树脂)或者一种或多种溶剂(例如，分隔、逆流分离、多相溶剂混合物)或者其他化学手段(例如，结晶、重结晶、盐形成和沉淀)来达到最终的纯度。具有式(i)的化合物或其立体异构体的纯度可以包括但不限于从10％至20％、或从20％至30％、或从30％至40％、或从40％至50％、或从50％至60％、或从60％至70％、或从70％至80％、或从80％至90％、或从90％至100％的范围。具有式(i)的化合物或其立体异构体的纯度可以通过本领域技术人员已知的任何技术(包括nmr、质谱法、液相色谱-质谱法(lcms)、高效液相色谱法(hplc)和其他分析手段)来测量。
[0139]
如本文所用的术语“杀真菌剂”意指控制、改变或预防真菌生长的化合物。术语“杀真菌有效量”意指能够对真菌生长产生影响的这样一种化合物或此类化合物的组合的量。控制或改变的影响包括所有从自然发育的偏离，如杀死、阻滞等，并且预防包括在植物内或植物上形成屏障或其他防御以预防真菌侵染。
[0140]
术语“植物”是指植物的所有有形部分，包括种子、幼苗、幼树、根、块茎、茎、秆、叶子和果实。
[0141]
术语“植物繁殖材料”表示植物的所有生殖部分，例如植物的种子或营养性部分如插条和块茎。它包括严格意义上的种子、以及根、果实、块茎、球茎、根茎和植物各部分。
[0142]
如本文所用的术语“场所”意指植物在其中或其上生长的地方，或栽培植物的种子被播种的地方，或者种子将要被置于土壤中的地方。它包括土壤、种子和幼苗，以及建立的植被。
[0143]
贯穿本文件，表述“组合物”代表组分(a)和(b)的不同混合物或组合(包括上文定义的实施例)，例如呈单一的“掺水即用”形式，呈组合的喷雾混合物(由单一活性成分的单独配制品构成)(如“桶混制剂(tank-mix)”)，并且当以顺序方式(即，一种在另一种的合理短的时间段之后，如几小时或几天)施用时，以单一活性成分的组合使用。对于实现本发明，施用组分(a)和(b)的顺序并不是至关重要的。
[0144]
根据本发明的组合物能有效地对抗引起植物病原性病害的有害微生物(如微生物)，特别是对抗植物病原性真菌和细菌。
[0145]
本发明的组合物可以用于控制由担子菌纲(basidiomycete)、子囊菌纲
septosporum)、葡萄褐斑病菌(isariopsis clavispora)、香蕉黑条叶斑病菌(mycosphaerella fijiensis)、禾生球腔菌(mycosphaerella graminicola)、散梗菌绒孢菌(mycovellosiella koepkeii)、phaeoisariopsis bataticola、葡萄假尾孢菌(pseudocercospora vitis)、小麦基腐病菌(pseudocercosporella herpotrichoides)、甜菜叶斑病菌(ramularia beticola)、柱隔孢叶斑病菌(ramularia collo-cygni)，巨座壳目(magnaporthales)如燕麦全蚀病菌(gaeumannomyces graminis)、稻瘟病菌(magnaporthe grisea)、稻瘟病菌(magnaporthe oryzae)，间座壳目(diaporthales)如榛子东部枯萎病菌(anisogramma anomala)、apiognomonia errabunda、普拉塔尼壳囊孢(cytospora platani)、大豆北方茎溃疡病菌(diaporthe phaseolorum)、毁灭性座盘孢(discula destructiva)、草莓日规壳菌(gnomonia fructicola)、葡萄苦腐病菌(greeneria uvicola)、核桃黑盘孢菌(melanconium juglandinum)、葡萄生拟茎点菌(phomopsis viticola)、核桃溃疡病菌(sirococcus clavigignenti-juglandacearum)、干孢盾壳椿启介菌(tubakia dryina)、dicarpella属物种、苹果树腐烂病菌(valsa ceratosperma)，以及其他如actinothyrium graminis、豌豆壳二孢(ascochyta pisi)、黄曲霉(aspergillus flavus)、烟曲霉(aspergillus fumigatus)、构巢曲霉(aspergillus nidulans)、番木瓜座糙孢菌(asperisporium caricae)、樱桃叶斑病菌(blumeriella jaapii)、假丝酵母属物种(candida spp.)、煤炱病菌(capnodium ramosum)、cephaloascus属物种、麦类条斑病菌(cephalosporium gramineum)、奇异长喙壳(ceratocystis paradoxa)、毛壳菌属物种(chaetomium spp.)、拟白膜盘菌(hymenoscyphus pseudoalbidus)、球孢子菌属物种(coccidioides spp.)、稠李柱盘孢(cylindrosporium padi)、苹果双壳菌(diplocarpon malae)、野生偏盘菌(drepanopeziza campestris)、葡萄痂囊腔菌(elsinoe ampelina)、黑附球菌(epicoccum nigrum)、表皮癣菌属物种(epidermophyton spp.)、葡萄藤猝倒病菌(eutypa lata)、白地霉(geotrichum candidum)、禾谷绒座壳(gibellina cerealis)、高粱胶尾孢(gloeocercospora sorghi)、仁果黏壳孢(gloeodes pomigena)、gloeosporium perennans；毒麦种子内生真菌(gloeotinia temulenta)、griphospaeria corticola、利尼球梗孢(kabatiella lini)、小孢粘束孢(leptographium microsporum)、leptosphaerulinia crassiasca、扰乱散斑壳(lophodermium seditiosum)、禾谷盘二孢菌(marssonina graminicola)、雪霉叶枯菌(microdochium nivale)、美澳型核果褐腐病菌(monilinia fructicola)、核果链核盘菌(monilinia laxa)、果生链核盘菌(monilinia fructigena)、白明梭孢(monographella albescens)、甜瓜黑点根腐病菌(monosporascus cannonballus)、丝环盘菌属物种(naemacyclus spp.)、新榆枯萎病菌(ophiostoma novo-ulmi)、巴西副球孢子菌(paracoccidioides brasiliensis)、扩展青霉(penicillium expansum)、杜鹃盘多毛孢霉(pestalotia rhododendri)、皮特里霉属物种(petriellidium spp.)、无柄盘菌属物种(pezicula spp.)、大豆茎褐腐病菌(phialophora gregata)、四孢瓶霉菌(phialophora tetraspora)、果生黑痣菌(phyllachora pomigena)、杂食动物瘤梗孢(phymatotrichum omnivora)、隐秘囊孢菌(physalospora abdita)、烟草织孢霉菌(plectosporium tabacinum)、马铃薯皮斑病菌(polyscytalum pustulans)、苜蓿假盘菌(pseudopeziza medicaginis)、芸薹埋核盘菌(pyrenopeziza brassicae)、高粱座枝孢(ramulispora sorghi)、花旗松落叶病菌(rhabdocline pseudotsugae)、大麦云纹病菌
vastatrix)、落花生柄锈菌(puccinia arachidis)、棉花柄锈菌(puccinia cacabata)、禾柄锈菌(puccinia graminis)、隐匿柄锈菌(puccinia recondita)、高粱柄锈菌(puccinia sorghi)、大麦柄锈菌(puccinia hordei)、条形柄锈菌大麦专化型(puccinia striiformis f.sp.hordei)、条形柄锈菌黑麦专化型(puccinia striiformis f.sp.secalis)、榛膨痂锈菌(pucciniastrum coryli)，或者锈菌目(uredinales)如松疱锈病菌(cronartium ribicola)、美洲苹果锈病菌(gymnosporangium juniperi-viginianae)、杨树叶锈病菌(melampsora medusae)、豆薯层锈菌(phakopsora pachyrhizi)、山马蝗层锈菌(phakopsora meibomiae)、短尖多胞锈菌(phragmidiummucronatum)、physopella ampelosidis、异色疣双胞锈菌(tranzschelia discolor)和蚕豆单胞锈菌(uromyces viciae-fabae)；以及其他腐病和病害，如由隐球菌属物种(cryptococcus spp.)、茶饼病菌(exobasidium vexans)、因诺德玛微伞皮(marasmiellus inoderma)、小菇属物种(mycena spp.)、玉米丝黑穗病菌(sphacelotheca reiliana)、雪腐病核瑚菌(typhula ishikariensis)、冰草条黑粉菌(urocystis agropyri)、花枯锁霉(itersonilia haperplexans)、因微瑟姆伏革菌(corticium invisum)、地衣状伏革菌(laetisaria fuciformis)、玉蜀黍丝核菌(waitea circinata)、立枯丝核菌(rhizoctonia solani)、瓜亡革菌(thanetephorus cucurmeris)、大丽花叶黑粉菌(entyloma dahliae)、小孢叶黑粉菌(entylomella microspora)、沼湿草尾孢黑粉菌(neovossia moliniae)和小麦网腥黑粉菌(tilletia caries)引起的那些；
[0149]
芽枝霉纲(blastocladiomycetes)，如玉蜀黍节壶菌(physoderma maydis)；以及
[0150]
毛霉菌纲，如瓜笄霉(choanephora cucurbitarum)；毛霉属物种(mucor spp.)；少根根霉(rhizopus arrhizus)、米根霉(rhizopus oryzae)、匍枝根霉(rhizopus stolonifera)、黑根霉(rhizopus nigricans)，以及由与上文列出的那些紧密相关的其他物种和属引起的病害。
[0151]
除了它们的杀真菌活性之外，这些组合物还可以具有对抗细菌如梨火疫病菌(erwinia amylovora)、胡萝卜软腐欧文氏菌(erwinia caratovora)、野油菜黄单胞菌(xanthomonas campestris)、丁香假单胞菌(pseudomonas syringae)、疮痂病链霉菌(streptomyces scabies)和其他相关物种以及某些原生动物的活性。
[0152]
根据本发明的组合物能特别有效地对抗属于以下纲的植物病原性真菌：子囊菌纲(例如黑星菌属(venturia)、链格孢属(alternaria)、叉丝单囊壳属(podosphaera)、白粉菌属(erysiphe)、大角间座壳属(magnaporthe)、链核盘菌属(monilinia)、球腔菌属(mycosphaerella)、钩丝壳属(uncinula))；担子菌纲(例如驼孢锈菌属(hemileia)、丝核菌属(rhizoctonia)、层锈菌属(phakopsora)、柄锈菌属(puccinia)、黑粉菌属(ustilago)、腥黑粉菌属(tilletia))；不完全菌纲(fungi imperfecti)(也称为半知菌纲(deuteromycetes)；例如葡萄孢属(botrytis)、炭疽菌属(colletotrichum)、长蠕孢属(helminthosporium)、喙孢属(rhynchosporium)、镰刀菌属(fusarium)、壳针孢属(septoria)、尾孢属(cercospora)、链格孢属、青霉属(penicillium)、梨孢属(pyricularia)和假小尾孢属(pseudocercosporella))；卵菌纲(例如疫霉属(phytophthora)、霜霉属(peronospora)、假霜霉属(pseudoperonospora)、白锈属(albugo)、盘梗霉属(bremia)、腐霉属(pythium)、假指梗霉属(pseudosclerospora)、单轴
霉属(plasmopara))。
[0153]
优选地，根据本发明的组合物可以有效地对抗选自下组的植物病原性真菌，该组由以下各项组成：链格孢属、壳二孢属(ascochyta)、葡萄孢属、尾孢属、禾旋孢腔菌、炭疽菌属、瓜类炭疽菌、棒孢菌属(corynespora)、白粉菌属、二孢白粉菌(erysiphe cichoracearum)、黄瓜白粉病菌(sphaerotheca fuliginea)、镰刀菌属、尖孢镰刀菌、graminis、球座菌属(guignardia)、长蠕孢属、咖啡驼孢锈菌、大角间座壳属、稻瘟病菌(magnaporthe oryzae)、链核盘菌属、球腔菌属、落花生球腔菌(mycosphaerella arachidis)、层锈菌属、茎点霉属(phoma)、拟茎点霉属(phomopsis)、柄锈菌属、假小尾孢属、pseudopezicula、短尖多胞锈菌、叉丝单囊壳属、核腔菌属(pyrenophora)、圆核腔菌、梨孢属、稻梨孢(pyricularia oryzae)、柱隔孢属(ramularia)、柱隔孢叶斑病菌、丝核菌属、立枯丝核菌、大麦云纹病菌、核盘菌属(sclerotinia)、壳针孢属、小麦壳针孢、丝轴黑粉菌(sphacelotheca reilliana)、腥黑粉菌、隐条黑粉菌(urocystis occulta)、钩丝壳属、黑粉菌属、黑星菌属、丛梗孢属(monilia)和青霉属。
[0154]
本发明的组合物可以特别有效地对抗选自下组的植物病原性真菌，该组由以下各项组成：链格孢属、葡萄孢属、尾孢属、炭疽菌属、棒孢菌属、球座菌属、球腔菌属、链核盘菌属、青霉属、层锈菌属、拟茎点霉属、叉丝单囊壳属、pseudopezicula、壳针孢属、钩丝壳属和黑星菌属。
[0155]
本发明的组合物可以尤其有效地对抗选自下组的植物病原性真菌，该组由以下各项组成：茄链格孢菌、互隔链格孢菌、葱链格孢菌(alternaria porri)、灰葡萄孢菌、葱腐葡萄孢菌(botrytis allii)、葱鳞葡萄孢菌(botrytis squamosa)、辣椒尾孢(cercospora capsici)、瓜类炭疽菌、多主棒孢菌、葡萄球座菌、美澳型核果褐腐病菌、果生链核盘菌、核果链核盘菌、指状青霉(penicillium digitatum)、意大利青霉(penicillium italicum)、扩展青霉、葡萄生拟茎点菌、白叉丝单囊壳、单囊壳白粉病菌(podosphaera xanthii)、葡萄角斑叶焦病菌(pseudopezicula tracheiphila)、小麦壳针孢、葡萄钩丝壳和苹果黑星病菌。
[0156]
根据本发明，“有用植物”典型地包括以下多年生或一年生植物：
[0157]
谷物，如谷类(例如大麦、玉蜀黍(玉米)、粟、燕麦、水稻、黑麦、高粱、小黑麦、tritordeum和小麦)、苋菜、荞麦、奇亚(chia)、藜麦和灿尼花(canihua)；
[0158]
水果和树坚果，如葡萄藤(鲜食葡萄和酿酒葡萄)、扁桃、苹果、杏、鳄梨、香蕉、黑莓、蓝莓、面包果、可可、腰果、番荔枝、樱桃、栗子(对于坚果)、花楸果、柑橘(包括葡萄柚、酸橙、柠檬、橙、柑桔柠檬)、椰子、咖啡豆、蔓越莓、穗醋栗、枣、斐济果(feijoa fruit)、无花果、榛子(filbert/hazelnut)、醋栗、番石榴、猕猴桃、荔枝、澳洲胡桃、芒果、油桃、橄榄、番木瓜、百香果、桃、梨、山核桃、柿子、菠萝、开心果、李子(包括西梅)、石榴、榅桲、树莓、草莓、苏利南樱桃和胡桃；
[0159]
蔬菜，如洋蓟、芦笋、豆(食荚菜豆、嫩菜豆、干菜豆、可食用豆)、甜菜(食用甜菜)、青花菜/束球花甘蓝(broccoli raab)、抱子甘蓝、卷心菜(包括大白菜)、胡萝卜、花椰菜、根芹菜、芹菜、鹰嘴豆、细香葱、羽衣甘蓝(collard)(包括无头甘蓝(kale))、黄瓜、毛豆、茄子、苦苣、豌豆(菜豌豆、干豌豆、可食用豌豆)、大蒜、辣根、苤蓝、韭葱、扁豆、莴苣、甜瓜、蘑菇(栽培蕈)、芥菜和其他绿叶蔬菜、秋葵、洋葱、欧芹、欧洲萝卜、胡椒、马铃薯、仙人掌果、南
瓜、萝卜、大黄、芜菁甘蓝、婆罗门参、菠菜、倭瓜(西葫芦和笋瓜)、甜玉米、甘薯、叶甜菜、芋头、番茄/绿番茄、芜菁和西瓜；
[0160]
大田作物，如糖用甜菜、甘蔗、烟草、花生、大豆；
[0161]
油料作物，如油菜(卡诺拉)、芥菜、荠蓝、海甘蓝、向日葵、罂粟、芝麻和红花；
[0162]
饲料作物，例如苜蓿、三叶草、豇豆、巢菜、红豆草、羽扇豆、饲用甜菜、黑麦草、草地早熟禾、牛毛草、果园草；纤维作物，如棉花、亚麻、大麻、黄麻和剑麻；
[0163]
森林植物，包括针叶树种(例如落叶松、冷杉或松树)、温带和热带硬木树(例如橡树、桦树、山毛榉、柚木或桃花心木)和在干旱带的树种(例如桉树)；
[0164]
园艺作物，如啤酒花、枫树(枫糖浆)、茶、天然橡胶植物和草坪草(例如翦股颖、草地早熟禾、黑麦草、牛毛草、狗牙根、百足草、顶饰发草(crested hairgrass)、克育草、圣奥古斯丁草(st.augustinegrass)、结缕草、马蹄金属(dichondra)、猫尾草、丛生毛草)；
[0165]
花卉园艺、温室和苗圃植物，包括花卉、阔叶树或常青树，例如秋海棠、大丽花、天竺葵、凤仙花属(impatiens)、矮牵牛、锦紫苏、万寿菊、三色堇、金鱼草、非洲堇、杜鹃花、花店菊花、球根花卉、绣球花、百合、兰花、一品红、玫瑰、落新妇、金鸡菊、飞燕草、石竹属(dianthus)、矾根属(heuchera)、玉簪、竹桃、金光菊、鼠尾草、长春花、耧斗菜、黄花菜、花园菊花、常春藤、观赏草、牡丹、飞燕草、唐菖蒲、鸢尾、金鱼草、郁金香、桉树、海桐、蕨、红掌、黛粉叶、龙血树、榕树、蔓绿绒、白鹤芋(spathipyllum)、凤梨、仙人掌、棕榈、香脂冷杉、蓝叶云杉、花旗松、弗雷泽冷杉、红冷杉、苏格兰松树、白松、木兰、白蜡树、榆树、樱花树、榆叶梅、山楂、紫荆和唐棣；
[0166]
繁殖材料，如裸根分株(bare-root division)、插条、衬垫(liner)、穴盘苗、种子、组培苗和预制植物；
[0167]
煮食草药和香辛料，例如多香果、当归属物种(angelica spp.)、八角、胭脂树红、芝麻菜、阿魏胶、罗勒(所有类型)、月桂(栽培种)、墨角藻(海藻)、玻利维亚香菜、琉璃苣、金盏花(草药用途)、石栗、刺山柑、香菜、小豆蔻、桂皮香料、桂皮、香紫苏、丁香、猫薄荷、甘菊、山萝卜、菊苣、没药植物、芫荽叶、聚合草、芫荽、水芹、孜然、咖喱、莳萝、茴香、胡芦巴、fil
é
(栽培种)、凹唇姜(fingerroot)、高良姜、姜、蛇麻子、苦薄荷、牛膝草、薰衣草、香蜂叶、柠檬百里香、拉维纪草、肉豆蔻(mace)、马哈利(mahlab)、三条筋树叶(malabathrum)、马郁兰、薄荷(所有类型)、艾蒿、肉豆蔻(nutmeg)、牛至、鸢尾根、辣椒粉、欧芹、胡椒、迷迭香、芸香、西红花、鼠尾草(所有类型)、香薄荷(所有类型)、掌叶大黄、龙蒿、百里香、姜黄、香草、山葵和豆瓣菜；以及
[0168]
药草，例如海芋植物、蒿属物种(artemisia spp.)、黄芪(astralagus)、波耳多叶、聚合草、金花菊、胡芦巴、野甘菊、毛地黄、银杏、人参、山羊豆、白毛茛、欧地笋、苦薄荷、马尾草、薰衣草、甘草、药用蜀葵、毛蕊花属(mullein)、荨麻、西番莲、广藿香、普列薄荷、美洲商陆、并头草、掌叶大黄、圣约翰草、番泻树、苦菜、甜菊属(stevia)、艾菊、金缕梅、水苏、艾草、蓍草、加州小薄荷(yerba buena)和依兰。
[0169]
此清单不代表任何限制，然而，优选地，有用植物可以选自由小麦、大麦、水稻、大豆、苹果、扁桃、樱桃、树莓、葡萄、黄瓜、花生、番茄、草莓、柑橘和香蕉组成的组。
[0170]
术语“有用植物”应理解为还包括已经由于常规育种或基因工程方法致使对除草剂像溴苯腈或除草剂类(例如像hppd抑制剂、als抑制剂(例如氟嘧磺隆、氟磺隆和三氟啶磺
隆)、epsps(5-烯醇-丙酮酰-莽草酸-3-磷酸-合酶)抑制剂、gs(谷氨酰胺合成酶)抑制剂)耐受的有用植物。已经通过常规育种方法(诱变)致使对咪唑啉酮(例如甲氧咪草烟)耐受的作物的实例是夏季油菜(卡诺拉)。已经通过基因工程方法致使对除草剂或除草剂类耐受的作物的实例包括抗草甘膦和抗草铵膦的玉米品种，这些玉米品种是以商品名herculex和可商购的。
[0171]
术语“有用植物”应理解为还包括已经通过使用重组dna技术而被这样转化使其能够合成一种或多种选择性作用毒素的有用植物，这些毒素如已知例如来自产毒素细菌。可以被表达的毒素的实例包括δ-内毒素，营养期杀昆虫蛋白(vip)，细菌定殖线虫的杀昆虫蛋白，以及由蝎子、蛛形纲动物、黄蜂和真菌产生的毒素。
[0172]
已经被修饰为表达苏云金芽孢杆菌(bacillus thuringiensis)毒素的作物的实例是bt maize(先正达种子公司(syngenta seeds))。包含编码杀昆虫抗性并且由此表达多于一种毒素的多于一种基因的作物的实例是(先正达种子公司)。作物或其种子材料还可以对多种类型的有害生物具有抗性(当通过遗传修饰产生时的所谓的叠加转基因事件)。例如，植物可以具有表达杀昆虫蛋白同时耐受除草剂的能力，例如herculex(陶氏益农公司(dow agrosciences)，先锋良种国际公司(pioneer hi-bred international))。
[0173]
可以由此类转基因植物表达的毒素包括例如杀昆虫蛋白，例如来自蜡样芽饱杆菌(bacillus cereus)或日本金龟子芽孢杆菌(bacillus popliae)的杀昆虫蛋白；或者来自苏云金芽孢杆菌的杀昆虫蛋白，如δ-内毒素，例如cryia(b)、cryia(c)、cryif、cryif(a2)、cryiia(b)、cryiiia、cryiiib(b1)或cry9c，或者营养期杀昆虫蛋白(vip)，例如vip1、vip2、vip3或vip3a；或者细菌定植线虫的杀昆虫蛋白，例如光杆状菌属物种(photorhabdus spp.)或致病杆菌属物种(xenorhabdus spp.)，如发光杆菌(photorhabdus luminescens)、嗜线虫致病杆菌(xenorhabdus nematophilus)；由动物产生的毒素，如蝎毒素、蛛毒素、蜂毒素和其他昆虫特异性神经毒素；由真菌产生的毒素，如链霉菌毒素，植物凝集素类(lectin)如豌豆凝集素、大麦凝集素或雪花莲凝集素；凝集素(agglutinin)；蛋白酶抑制剂，如胰蛋白酶抑制剂、丝蛋白酶抑制剂、马铃薯糖蛋白、胱抑素、木瓜蛋白酶抑制剂；核糖体失活蛋白(rip)，如蓖麻毒素、玉米-rip、相思豆毒素、丝瓜籽蛋白(luffin)、皂草毒蛋白或异株泻根毒蛋白；类固醇代谢酶，如3-羟基类固醇氧化酶、蜕化类固醇-udp-糖基-转移酶、胆固醇氧化酶、蜕化素抑制剂、hmg-coa-还原酶、离子通道阻断剂如钠通道或钙通道阻断剂、保幼激素酯酶、利尿激素受体、芪合酶、联苄合酶、几丁质酶和葡聚糖酶。
[0174]
在本发明的上下文中，δ-内毒素(例如cryia(b)、cryia(c)、cryif、cryif(a2)、cryiia(b)、cryiiia、cryiiib(b1)或cry9c)或营养期杀昆虫蛋白(vip)(例如vip1、vip2、vip3或vip3a)应理解为显然还包括混合型毒素、截短的毒素和经修饰的毒素。混合型毒素是通过那些蛋白质的不同结构域的新组合重组产生的(参见例如，wo02/15701)。截短的毒素的实例是截短的cryia(b)，它在如下所述来自先正达种子公司(syngenta seed sas)的bt11玉米中表达。在经修饰的毒素的情况下，天然存在的毒素的一个或多个氨基酸被替代。在此类氨基酸置换中，优选地将不是天然存在的蛋白酶识别序列插入毒素中，例如像在cryiiia055的情况下，将组织蛋白酶-d-识别序列插入cryiiia毒素中(参见wo 03/
018810)。
[0175]
此类毒素或能够合成此类毒素的转基因植物的实例披露于例如ep-a-0 374 753、wo 93/07278、wo 95/34656、ep-a-0 427 529、ep-a-451 878和wo 03/052073中。
[0176]
用于制备此类转基因植物的方法通常是本领域技术人员已知的并且描述在例如上文提及的公开案中。cryi型脱氧核糖核酸及其制备例如从wo 95/34656、ep-a-0 367 474、ep-a-0 401 979和wo 90/13651中已知。
[0177]
转基因植物中所含的毒素赋予植物对有害昆虫的耐受性。此类昆虫可以存在于任何昆虫分类群，但是尤其常见于甲虫(鞘翅目(coleoptera))、双翅昆虫(双翅目(diptera))和蝶(鳞翅目(lepidoptera))。
[0178]
含有编码杀昆虫剂抗性并且表达一种或多种毒素的一种或多种基因的转基因植物是已知的并且其中一些是可商购的。此类植物的实例是：(玉米品种，表达cryia(b)毒素)；yieldgard(玉米品种，表达cryiiib(b1)毒素)；yieldgard(玉米品种，表达cryia(b)和cryiiib(b1)毒素)；(玉米品种，表达cry9(c)毒素)；herculex(玉米品种，表达cryif(a2)毒素和获得对除草剂草铵膦铵盐耐受性的酶膦丝菌素n-乙酰基转移酶(pat))；nucotn(棉花品种，表达cryia(c)毒素)；bollgard(棉花品种，表达cryia(c)毒素)；bollgard(棉花品种，表达cryia(c)和cryiia(b)毒素)；(棉花品种，表达vip毒素)；(马铃薯品种，表达cryiiia毒素)；和
[0179]
此类转基因作物的另外的实例是：
[0180]
1.bt11玉米，来自先正达种子公司，霍比特路27，f-31 790圣苏维尔，法国，登记号c/fr/96/05/10。经遗传修饰的玉蜀黍(zea mays)，已经通过转基因表达截短的cryia(b)毒素致使能抵抗欧洲玉米螟(玉米螟(ostrinia nubilalis)和粉茎螟(sesamia nonagrioides))的攻击。bt11玉米还转基因表达pat酶以获得对除草剂草铵膦铵盐的耐受性。
[0181]
2.bt176玉米，来自先正达种子公司，霍比特路27，f-31 790圣苏维尔，法国，登记号c/fr/96/05/10。经遗传修饰的玉蜀黍，已经通过转基因表达cryia(b)毒素致使能抵抗欧洲玉米螟(玉米螟和粉茎螟)的攻击。bt176玉米还转基因表达pat酶以获得对除草剂草铵膦铵盐的耐受性。
[0182]
3.mir604玉米，来自先正达种子公司，霍比特路27，f-31 790圣苏维尔，法国，登记号c/fr/96/05/10。已经通过转基因表达经修饰的cryiiia毒素致使抗昆虫的玉米。此毒素是通过插入组织蛋白酶-d-蛋白酶识别序列修饰的cry3a055。此类转基因玉米植物的制备描述于wo 03/018810中。
[0183]
4.mon 863玉米，来自孟山都欧洲公司(monsanto europe s.a.)270-272特弗伦大道(avenue de tervuren)，b-1150布鲁塞尔，比利时，登记号c/de/02/9。mon 863表达cryiiib(b1)毒素，并且对某些鞘翅目昆虫有抗性。
[0184]
5.ipc 531棉花，来自孟山都欧洲公司270-272特弗伦大道，b-1150布鲁塞尔，比利时，登记号c/es/96/02。
[0185]
6.1507玉米，来自先锋海外公司(pioneer overseas corporation)，特德斯科大
道(avenue tedesco)，7b-1160布鲁塞尔，比利时，登记号c/nl/00/10。经遗传修饰的玉米，表达蛋白质cry1f以获得对某些鳞翅目昆虫的抗性，并且表达pat蛋白以获得对除草剂草铵膦铵盐的耐受性。
[0186]
7.nk603
×
mon 810玉米，来自孟山都欧洲公司270-272特弗伦大道，b-1150布鲁塞尔，比利时，登记号c/gb/02/m3/03。通过将经遗传修饰的品种nk603和mon 810杂交，由常规育种的杂交玉米品种构成。nk603
×
mon 810玉米转基因表达从土壤杆菌属物种(agrobacterium sp.)菌株cp4获得的蛋白质cp4 epsps，赋予对除草剂(含有草甘膦)的耐受性；以及还有从苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种(bacillus thuringiensis subsp.kurstaki)获得的cryia(b)毒素，使之对某些鳞翅目(包括欧洲玉米螟)具有耐受性。
[0187]
术语“有用植物”应理解为还包括已经通过使用重组dna技术而被这样转化使其能够合成具有选择性作用的抗病原物质的有用植物，这些抗病原物质例如像所谓的“病程相关蛋白”(prp，参见例如ep-a-0 392 225)。此类抗病原物质和能够合成此类抗病原物质的转基因植物的实例例如从ep-a-0 392 225、wo 95/33818和ep-a-0353 191中已知。产生此类转基因植物的方法通常是本领域技术人员已知的并且描述在例如上文提及的公开案中。
[0188]
可以由此类转基因植物表达的抗病原物质包括例如离子通道阻断剂，如钠通道和钙通道阻断剂，例如病毒kp1、kp4或kp6毒素；芪合酶；联苄合酶；几丁质酶；葡聚糖酶；所谓的“病程相关蛋白”(prp；参见例如ep-a-0 392 225)；由微生物产生的抗病原物质，例如肽抗生素或杂环抗生素(参见例如wo 95/33818)或者参与植物病原体防御的蛋白质或多肽因子(所谓的“植物病害抗性基因”，如wo 03/000906中所述)。
[0189]
根据本发明的组合物能特别有效地控制或预防由谷物，水果和树坚果，蔬菜，大田作物，油料作物，饲料作物，森林植物，园艺作物，花卉园艺、温室和苗圃植物，繁殖材料，煮食草药和香辛料以及药草上的某些植物病原性真菌引起的植物病原性病害(尤其是白粉病、锈病、叶斑病、早疫病或霉病)，这些植物病原性真菌如：
[0190]
茄链格孢菌，优选番茄上的茄链格孢菌。
[0191]
互隔链格孢菌，优选茄子上的互隔链格孢菌。
[0192]
葱链格孢菌，优选洋葱上的葱链格孢菌。
[0193]
灰葡萄孢菌，优选番茄、胡椒、洋葱、梨果、核果、猕猴桃、蓝莓、糖用甜菜或葡萄上的灰葡萄孢菌。
[0194]
葱腐葡萄孢菌，优选洋葱上的葱腐葡萄孢菌。
[0195]
葱鳞葡萄孢菌，优选洋葱上的葱鳞葡萄孢菌。
[0196]
辣椒尾孢，优选胡椒上的辣椒尾孢。
[0197]
多主棒孢菌，优选番茄上的多主棒孢菌。
[0198]
葡萄球座菌，优选葡萄上的葡萄球座菌。
[0199]
美澳型核果褐腐病菌，优选樱桃、桃、李子、西梅、油桃或扁桃上的美澳型核果褐腐病菌。
[0200]
果生链核盘菌，优选樱桃、桃、李子、西梅、油桃或扁桃上的果生链核盘菌。
[0201]
核果链核盘菌，优选樱桃、桃、李子、西梅、油桃或扁桃上的核果链核盘菌。
[0202]
葡萄生拟茎点菌，优选葡萄上的葡萄生拟茎点菌。
[0203]
白叉丝单囊壳，优选苹果上的白叉丝单囊壳。
[0204]
单囊壳白粉病菌，优选瓜类蔬菜上的单囊壳白粉病菌。
[0205]
葡萄角斑叶焦病菌，优选葡萄上的葡萄角斑叶焦病菌。
[0206]
葡萄钩丝壳，优选葡萄上的葡萄钩丝壳。
[0207]
苹果黑星病菌，优选苹果上的苹果黑星病菌。
[0208]
此外，根据本发明的组合物能特别有效地对抗种子传播的(seedborne)和土壤传播的病害，如链格孢属物种(alternaria spp.)、壳二孢属物种(ascochyta spp.)、灰葡萄孢菌、尾孢属物种(cercospora spp.)、紫麦角菌、禾旋孢腔菌、炭疽菌属物种(colletotrichum spp.)、附球菌属物种(epicoccum spp.)、禾谷镰刀菌、串珠镰刀菌(fusariummoniliforme)、尖孢镰刀菌、层出镰刀菌(fusarium proliferatum)、茄病镰刀菌(fusarium solani)、胶孢镰刀菌、graminis、长蠕孢属物种(helminthosporium spp.)、雪霉叶枯菌、茎点霉属物种(phoma spp.)、麦类核腔菌(pyrenophora graminea)、稻梨孢、立枯丝核菌、禾谷丝核菌(rhizoctonia cerealis)、核盘菌属物种(sclerotinia spp.)、壳针孢属物种(septoria spp.)、丝轴黑粉菌、腥黑粉菌物种(tilletia spp.)、肉孢核瑚菌(typhula incarnata)、隐条黑粉菌、黑粉菌属物种(ustilago spp.)或轮枝孢属物种(verticillium spp.)；特别是对抗谷类，如小麦、大麦、黑麦或燕麦；玉米；水稻；棉花；大豆；草坪；糖用甜菜；油菜；马铃薯；豆类作物，如豌豆、扁豆或鹰嘴豆；以及向日葵的病原体。
[0209]
此外，根据本发明的组合物能特别有效地对抗如下收获后病害，如灰葡萄孢菌、香蕉炭疽菌(colletotrichum musae)、新月弯孢霉(curvularia lunata)、半裸镰刀菌(fusarium semitecum)、白地霉、美澳型核果褐腐病菌、果生链核盘菌、核果链核盘菌、梨形毛霉(mucor piriformis)、意大利青霉(penicilium italicum)、离生青霉(penicilium solitum)、指状青霉或扩展青霉；特别是对抗水果如梨果(例如苹果和梨)、核果(例如桃和李子)、柑橘、甜瓜、番木瓜、猕猴桃、芒果、浆果(例如草莓)、鳄梨、石榴和香蕉以及坚果的病原体。
[0210]
本发明的组合物还可以用于作物增强。根据本发明，“作物增强”意指植物活力的改善、植物品质的改善、改善的对胁迫因素的耐受性和/或改善的投入利用效率。
[0211]
根据本发明，“植物活力的改善”意指当与已经在相同条件下生长但未使用本发明的方法的对照植物的相同性状相比时，某些性状在质量或数量上被改善。此类性状包括但不限于提早的和/或改善的发芽，改善的出苗，使用更少种子的能力，增加的根的生长，更发达的根系，增加的根的结瘤，增加的芽的生长，增加的分蘖，更强的分蘖，更多产的分蘖，增加的或改善的植物站立，更少的植物伏倒(plant verse)(倒伏)，株高的增加和/或改善，植物重量(鲜重或干重)的增加，更大的叶片，更绿的叶子颜色，增加的色素含量，增加的光合活性，更早的开花，更长的圆锥花序，提早的谷粒成熟，增加的种子、果实或荚果大小，增加的荚果或穗的数量，增加的每荚果或穗的种子数量，增加的种子重量，增强的种子填充，更少的死的基生叶，延缓枯萎，改善的植物生命力，储存组织中提高的氨基酸类化合物水平和/或需要更少的投入(例如需要更少的肥料、水和/或劳作)。活力改善的植物可以具有在任何上述性状或上述性状的任何组合或其中的两个或更多个方面的增加。
[0212]
根据本发明，“植物品质的改善”意指当与已经在相同条件下生长但未使用本发明
的方法的对照植物的相同性状相比时，某些性状在质量或数量上被改善。此类性状包括但不限于改善的植物视觉外观，减少的乙烯(减少产生和/或抑制接收)，所收获材料(例如种子、果实、叶、蔬菜)的改善的品质(这样改善的品质可以表现为所收获材料的改善的视觉外观，改善的碳水化合物含量(例如增加的糖和/或淀粉的量值、改善的糖酸比、还原糖的减少、增加的糖形成速度)，改善的蛋白质含量，改善的油含量和组成，改善的营养价值，抗营养化合物的减少，改善的感官特性(例如改善的味道)和/或改善的消费者健康益处(例如增加的维生素和抗氧化剂水平))，改善的收获后特征(例如增强的贮存期和/或贮存稳定性，更容易的可加工性，更容易的化合物提取)，更均匀的作物发育(例如植物的同时发芽、开花和/或结果)和/或改善的种子品质(例如在随后的季节中使用)。品质改善的植物可以具有在任何上述性状或上述性状的任何组合或其中的两个或更多个方面的增加。
[0213]
根据本发明，“改善的对胁迫因素的耐受性”意指当与已经在相同条件下生长但未使用本发明的方法的对照植物的相同性状相比时，某些性状在质量或数量上被改善。此类性状包括但不限于增加的对非生物胁迫因素的耐受性和/或抗性，这些因素引发次优生长条件，如干旱(例如导致植物水含量缺乏、水吸收潜力缺乏或向植物供水减少的任何胁迫)、冷暴露、热暴露、渗透胁迫、uv胁迫、漫灌、增加的盐度(例如土壤中的盐度)、增加的矿物暴露、臭氧暴露、高度的光暴露和/或养分(例如氮和/或磷养分)利用受限。对胁迫因素的耐受性改善的植物可以具有在任何上述性状或上述性状的任何组合或其中的两个或更多个方面的增加。在干旱和养分胁迫的情况下，此类改善的耐受性可以归因于例如更高效的吸收、利用或保有水分和养分。
[0214]
根据本发明，“改善的投入利用效率”意指当与在相同条件下生长但未使用本发明的方法的对照植物的生长相比时，植物能够更有效地利用给定的投入水平而生长。具体而言，投入包括但不限于肥料(如氮、磷、钾、微量营养素)、光和水。投入利用效率改善的植物可以具有改善的对任何上述投入或者两种或更多种上述投入的任何组合的利用。
[0215]
本发明的其他作物增强包括株高的降低或分蘖的减少，这在希望具有更少的生物质和更少的分蘖的作物中或条件下是有益的特征。
[0216]
任何或全部以上作物增强都可以通过改善例如植物生理、植物生长与发育和/或植物株型而导致产量改善。在本发明的上下文中，“产量”包括但不限于(i)生物质产生、谷物产量、淀粉含量、油含量和/或蛋白质含量的增加，这可以起因于(a)由植物自身产生的量的增加或(b)改善的收获植物物质的能力；(ii)所收获材料的组成上的改善(例如改善的糖酸比、改善的油组成、增加的营养价值、抗营养化合物的减少、增加的消费者健康益处)；和/或(iii)增加的/易化的收获作物的能力、改善的作物可加工性和/或更好的贮存稳定性/贮存期。农业植物的产量增加意指，在可以采取定量测量的情况下，各个植物的某一产物的产量比该植物在相同条件下产生但未应用本发明的相同产物的产量增加了可测量的量。根据本发明，优选的是，产量增加了至少0.5％、更优选至少1％、甚至更优选至少2％、还更优选至少4％、优选5％或甚至更多。
[0217]
任何或全部以上作物增强还都可以导致土地利用改善，即，先前对于栽培不可用或次优的土地可以变得可用。例如，在干旱条件下显示出生存能力增强的植物能够在次优降雨地区(例如可能在沙漠边缘或者甚至沙漠里)栽培。
[0218]
在本发明的一个方面，作物增强是在基本上不存在来自有害生物和/或病害和/或
非生物胁迫的压力的情况下得到的。在本发明的另一个方面，植物活力、胁迫耐受性、品质和/或产量的改善是在基本上不存在来自有害生物和/或病害的压力的情况下得到的。例如，有害生物和/或病害可以通过在本发明的方法之前或者同时施用杀有害生物处理来控制。在本发明的还另一个方面，植物活力、胁迫耐受性、品质和/或产量的改善是在不存在有害生物和/或病害压力的情况下得到的。在另一个实施例中，植物活力、品质和/或产量的改善是在不存在或大体上不存在非生物胁迫的情况下得到的。
[0219]
本发明的组合物还可以在保护储存货物免受真菌攻击的领域中使用。根据本发明，术语“储存货物”应被理解为表示植物和/或动物来源的天然物质及其加工形式，它们取自天然生命周期并且被希望用于长期保护。植物来源的储存货物(如植物或其部分(例如秆、叶、块茎、种子、果实或谷粒))可以以新鲜收割的状态或以加工形式(如预干燥的、润湿的、粉碎的、磨碎的或烘烤的)进行保护。也落在储存货物定义下的是木材，无论呈原木形式，如建筑木材、输电塔和栅栏，还是呈制成品形式，如从木材制造的家具或物体。动物来源的储存货物是兽皮、皮革、毛皮、毛发等。根据本发明的组合物可以预防不利的作用，如腐败、褪色或发霉。优选地，“储存货物”应被理解为表示植物来源的天然物质和/或其加工形式，更优选水果及其加工形式(如梨果、核果、浆果和柑橘类水果及其加工形式)。在本发明的另一个优选实施例中，“储存货物”应被理解为表示木材。
[0220]
因此，本发明的另一个方面是保护储存货物的方法，该方法包括将根据本发明的组合物施用至储存货物。
[0221]
本发明的组合物还可以在保护技术材料免受真菌攻击的领域中使用。根据本发明，术语“技术材料”包括纸；毯；建筑；冷却和加热系统；墙板；通风和空调系统等；优选地，“技术材料”应被理解为表示墙板。根据本发明的组合物可以预防不利的作用，如腐败、褪色或发霉。
[0222]
根据本发明的一些组合物具有内吸作用并且可以被用作叶、土壤和种子处理的杀真菌剂。
[0223]
采用根据本发明的组合物，可以抑制或破坏植物病原性微生物，这些微生物存在于不同的有用植物的植物或植物部分(果实、花、叶、茎、块茎、根)上，同时还保护稍后生长的植物部分免于被植物病原性微生物攻击。
[0224]
可以将根据本发明的组合物施用至植物病原性微生物、受微生物攻击威胁的有用植物、其场所、其繁殖材料、储存货物或技术材料。
[0225]
可以在有用植物、其繁殖材料、储存货物或技术材料被微生物感染之前或之后施用根据本发明的组合物。
[0226]
本发明的组合物还可以在保护工业材料免受真菌攻击的领域中使用。根据本发明，术语“工业材料”表示为了在工业上使用而制备的非生命材料。例如，旨在保护其免受真菌攻击的工业材料可以是胶、浆料(size)、纸、板、纺织品、毯、皮革、木材、建筑、漆料、塑料物品、冷却润滑剂、水性液压液以及其他可以被微生物侵染或分解的材料。可以被微生物的繁殖损害的冷却和加热系统、通风和空调系统以及生产设备的部分(例如冷却水线路)也可以在待保护的材料之中提及。根据本发明的组合物可以预防不利的作用，如腐败、褪色或发霉。
[0227]
待施用的本发明的组合的量将取决于各种因素，如所使用的化合物；处理的对象，
例如像植物、土壤或种子；处理的类型，例如像喷雾、洒粉或拌种；处理的目的，例如像预防或治疗；待控制的真菌类型或施用时间。
[0228]
包含组分(a)与组分(b)的组合的组合物可以例如以单一的“掺水即用”形式施用，以组合的喷雾混合物(由单一活性成分的单独配制品构成)(如“桶混制剂”)施用，并且当以顺序方式(即，一种在另一种的合理短的时间段之后，如几小时或几天)施用时组合使用单一单独活性成分来施用。对于实现本发明，施用组分(a)的化合物和组分(b)的活性成分的顺序并不是至关重要的。
[0229]
根据本发明的组合物是在有害生物防治领域中具有预防和/或治疗价值的活性成分，即使在低施用比率下也是如此。
[0230]
当施用至有用植物时，将组分(a)以从25g a.i./ha至500g a.i./ha的比率与100g a.i./ha至7500g a.i./ha的组分(b)联合施用。
[0231]
在本发明的一个优选实施例中，控制或预防有用植物上或其繁殖材料上的植物病原性病害、尤其是植物病原性真菌的方法包括将如根据本发明所定义的组合物施用至这些有用植物、其场所或其繁殖材料，其中将组分(a)以从25g a.i./ha至500g a.i./ha的比率与100g a.i./ha至7500g a.i./ha的组分(b)联合施用。
[0232]
根据本发明的控制或预防植物病原性病害的方法可以特别有效地对抗选自下组的植物病原性真菌，该组由以下各项组成：链格孢属、葡萄孢属、尾孢属、炭疽菌属、棒孢菌属、球座菌属、球腔菌属、链核盘菌属、青霉属、层锈菌属、拟茎点霉属、叉丝单囊壳属、pseudopezicula、壳针孢属、钩丝壳属和黑星菌属。
[0233]
根据本发明的控制或预防植物病原性病害的方法可以尤其有效地对抗选自下组的植物病原性真菌，该组由以下各项组成：茄链格孢菌、互隔链格孢菌、葱链格孢菌、灰葡萄孢菌、葱腐葡萄孢菌、葱鳞葡萄孢菌、辣椒尾孢、瓜类炭疽菌、多主棒孢菌、葡萄球座菌、美澳型核果褐腐病菌、果生链核盘菌、核果链核盘菌、指状青霉、意大利青霉、扩展青霉、葡萄生拟茎点菌、白叉丝单囊壳、单囊壳白粉病菌、葡萄角斑叶焦病菌、小麦壳针孢、葡萄钩丝壳和苹果黑星病菌。
[0234]
优选的是控制或预防植物病原性病害、尤其是植物病原性真菌的方法，该方法包括将根据本发明的组合物施用至选自下组的有用植物，该组由以下各项组成：谷物，水果和树坚果，蔬菜，大田作物，油料作物，饲料作物，森林植物，园艺作物，花卉园艺、温室和苗圃植物，繁殖材料，煮食草药和香辛料以及药草。
[0235]
更优选的是控制或预防植物病原性病害、尤其是植物病原性真菌的方法，该方法包括将根据本发明的组合物施用至选自下组的有用植物，该组由以下各项组成：小麦、大麦、水稻、大豆、苹果、扁桃、樱桃、树莓、葡萄、黄瓜、花生、番茄、草莓、柑橘和香蕉。
[0236]
在本发明的一个实施例中，根据本发明的控制或预防植物病原性病害的方法可以特别有效地对抗大豆植物上的选自下组的植物病原性真菌，该组由以下各项组成：链格孢属、尾孢属、炭疽菌属、棒孢菌属、球腔菌属、层锈菌属、拟茎点霉属和壳针孢属。
[0237]
在本发明的一个实施例中，根据本发明的控制或预防植物病原性病害的方法可以特别有效地对抗大豆植物上的选自下组的植物病原性真菌，该组由以下各项组成：链格孢属物种、大豆紫斑病菌(cercospora kikuchii)、大豆灰斑病菌、豆薯层锈菌和大豆壳针孢。
[0238]
本发明还提供了杀真菌组合物，这些杀真菌组合物包含协同有效量的如上文提及
的组分(a)与(b)的组合以及农业上可接受的载体和任选地表面活性剂。在所述组合物中，如前文所述，(a)与(b)的重量比优选从100:1至1:1000、更优选从100:1至1:800、甚至更优选从50:1至1:800、还更优选从20:1至1:600。
[0239]
本发明的组合物可以以任何常规形式使用，例如以双包装、干种子处理用的粉剂(ds)、种子处理用的乳液(es)、种子处理用的可流动性浓缩物(fs)、种子处理用的溶液(ls)、种子处理用的水分散性粉剂(ws)、种子处理用的胶囊悬浮液(cf)、种子处理用的凝胶(gf)、乳液浓缩物(ec)、悬浮液浓缩物(sc)、悬浮乳液(se)、胶囊悬浮液(cs)、水分散性颗粒(wg)、可乳化性颗粒(eg)、油包水型乳液(eo)、水包油型乳液(ew)、微乳液(me)、可分散油悬浮剂(od)、油悬剂(of)、油溶性液剂(ol)、可溶性浓缩物(sl)、超低容量悬浮剂(su)、超低容量液剂(ul)、母药(tk)、可分散性浓缩物(dc)、可湿性粉剂(wp)或与农业上可接受的佐剂组合的任何技术上可行的配制品的形式使用。
[0240]
此类组合物可以以常规方式产生，例如通过将活性成分与适当的配制惰性剂(稀释剂、溶剂、填充剂和任选地其他配制成分)混合来产生。还可以使用旨在长期持续效力的常规缓释配制品。特别地，待以喷雾形式施用的配制品如水分散性浓缩物(例如ec、sc、dc、od、se、ew、eo等)、可湿性粉剂和颗粒可以含有提供佐剂作用的化合物。在一些实施例中，本发明的组合物可以通过将包含金担子素a以及一种或多种其他具有式(i-a)的环酯肽或其立体异构体的发酵液与组分(b)混合来产生。在一些其他实施例中，本发明的组合物可以通过将包含佩斯法素a以及一种或多种其他具有式(i-b)的环酯肽或其立体异构体的发酵液与组分(b)混合来产生。
[0241]
使用本发明的组合和稀释剂以合适的拌种配制品形式(例如具有对种子的良好粘着性的水性悬浮液或干粉剂形式)以本身已知的方式将拌种配制品施用至种子。此类拌种配制品是本领域已知的。拌种配制品可以含有呈包囊形式的单一活性成分或活性成分的组合，例如作为缓释胶囊或微胶囊。
[0242]
通常，这些配制品包括按重量计从0.01％至90％的活性剂、从0至20％的农业上可接受的表面活性剂和10％至99.99％的固体或液体配制惰性剂和一种或多种佐剂，该活性剂是由至少具有式(i)的化合物连同组分(b)和任选地组分(c)以及其他活性剂(特别是杀微生物剂或防腐剂等)组成的。组合物的浓缩形式通常含有按重量计在约2％与80％之间、优选在约5％与70％之间的活性剂。配制品的施用形式可以例如含有按重量计从0.01％至20％、优选按重量计从0.01％至5％的活性剂。然而，商用产品将优选地被配制为浓缩物，最终使用者将通常使用稀释的配制品。
[0243]
已经发现，出人意料地，组分(a)与组分(b)的某些重量比能够产生协同活性。因此，本发明的另一个方面是这样的组合物，其中组分(a)和组分(b)以产生协同效应的量存在于组合物中。此协同活性根据如下事实是明显的：包含组分(a)和组分(b)的组合物的杀真菌活性大于组分(a)和组分(b)的杀真菌活性之和。此协同活性以两种方式扩展了组分(a)和组分(b)的作用范围。第一，降低组分(a)和组分(b)的施用比率，然而作用保持同样地好，这意味着即使两种个别组分在如此低的施用比率范围内已经变得完全无效的情况下，活性成分混合物仍实现高度的植物病原体控制。第二，可以被控制的植物病原体谱的大幅增宽。
[0244]
只要活性成分组合的作用大于个别组分的作用之和，就存在协同效应。对于给定
的活性成分组合，预期的作用e服从所谓的科尔比(colby)公式并且可以如下进行计算(colby,s.r."calculating synergistic and antagonistic responses of herbicide combination"[“计算除草剂组合的协同和拮抗反应”],weeds[种子],第15卷,第20-22页；1967)：
[0245]
ppm＝每升喷雾混合物的活性成分(＝a.i.)的毫克数，
[0246]
x＝使用p ppm的活性成分按活性成分(a)计的％作用，
[0247]
y＝使用q ppm的活性成分按活性成分(b)计的％作用。
[0248]
根据科尔比，使用p q ppm的活性成分，预期的(加性的)活性成分(a) (b)的作用是
[0249]
如果实际观察到的作用(o)大于预期的作用(e)，则该组合的作用是超级加性的，即存在协同效应。在数学方面，协同作用对应于(o-e)的差的正值。在活性的纯互补性相加(预期的活性)的情况下，所述差(o-e)为零。所述差(o-e)的负值标志着与预期的活性相比，活性的损失。
[0250]
然而，除了相对于杀真菌活性的实际协同作用外，根据本发明的组合物还可以具有另外的出人意料的有利特性。可以提及的此类有利的特性的实例是：更有利的可降解性；改善的毒理学和/或生态毒理学行为；或者有用植物的改善的特征，包括：出苗、作物产量、更发达的根系、分蘖增加、株高的增加、更大的叶片、更少的死的基生叶、更强的分蘖、更绿的叶子颜色、需要更少的肥料、需要更少的种子、更多产的分蘖、更早的开花、提早的谷粒成熟、更少的植物伏倒(倒伏)、增加的芽的生长、改善的植物活力以及提早的发芽。
[0251]
以下的实例用于说明本发明，并不在以任何方式限制本发明。
[0252]
生物学实例
[0253]
使用其中将组分(a)以从25g a.i./ha至500g a.i./ha的比率与100g a.i./ha至7500g a.i./ha的组分(b)联合施用的施用比率测试根据本发明的组合物的生物(杀真菌)活性。
[0254]
使用一种或多种以下方案(实例1-1和1-2)作为二甲亚砜(dmso)溶液测试根据本发明的组合物的生物(杀真菌)活性。在实例1中提供了液体培养测试的标准说明。
[0255]
金担子素a及其合成从takesako等人,the journal of antibiotics[抗生素杂志],1991,44,919-924中已知。将金担子素a通过用乙酸乙酯提取，然后用meoh:h2o(按体积计80％)与环己烷(按体积计20％)的混合物提取乙酸乙酯浓缩物而从发酵液中分离，并且通过硅胶柱色谱法(硅胶，用己烷:乙酸乙酯洗脱)，然后是反相柱色谱法(rp18，用乙腈:h2o洗脱)进行纯化。正如已经指出的，这些组合物的组分(b)是已知的，并且是可商购的和/或可以使用本领域已知的程序和/或在文献中报道的程序来制备。
[0256]
实例1：在孔板中的液体培养测试
[0257]
将某一真菌的菌丝体片段或分生孢子悬浮液(从该真菌的液体培养物或从低温储存物新鲜制备)直接混入营养肉汤中。将测试化合物的dmso溶液(最大10mg/ml)用0.025％的tween20稀释50倍，并且将10μl的此溶液用移液管移取到微量滴定板(96孔规格)中。然后将含有真菌孢子/菌丝体片段的营养肉汤添加到其中，以得到终浓度的测试化合物。将测试板在黑暗中在24℃和96％相对湿度(rh)下孵育。取决于病害系统，3-7天之后通过光度法和
观察法确定真菌生长的抑制，并且计算相对于未处理的检验物的抗真菌活性百分比。
[0258]
实例1-1：灰葡萄孢菌(灰霉病)
[0259]
将来自低温储存物的真菌分生孢子直接混入营养肉汤(pdb马铃薯右旋糖肉汤)中。在将测试组合物的dmso溶液置于微量滴定板(96孔规格)中之后，添加含有真菌孢子的营养肉汤。将测试板在24℃下孵育，并且在72小时之后通过光度法确定生长的抑制。
[0260]
实例1-2：茄链格孢菌(番茄/马铃薯的早疫病)
[0261]
将来自低温储存物的真菌分生孢子直接混入营养肉汤(pdb马铃薯右旋糖肉汤)中。在将测试组合物的dmso溶液置于微量滴定板(96孔规格)中之后，添加含有真菌孢子的营养肉汤。将测试板在24℃下孵育，并且在48小时之后通过光度法确定生长的抑制。
[0262]
结果
[0263]
在下表1和2中示出了来自上文概述的测试的结果。这些数据表明对于某些重量比的金担子素a和组分(b)的另一种活性成分的组合，观察到对抗灰葡萄孢菌和茄链格孢菌的协同杀真菌活性。
[0264]
根据科尔比，在数学方面，协同作用因子sf对应于o/e。在农业实践中，≥1.1的sf表示相对于活性的纯互补性相加(预期的活性)的显著改善，而在实际施用惯例中≤0.9的sf标志着与预期的活性相比的活性损失。
[0265]
表1：如上文实例1-1中所述的金担子素a和灭菌丹的组合物对抗灰葡萄孢菌的杀真菌活性。
[0266]
[0267][0268]
表2：如上文实例1-2中所述的金担子素a和灭菌丹的组合物对抗茄链格孢菌的杀真菌活性。
[0269]