苯基香豆满KGM组合物在抑制胃肠道戊糖素形成的应用

苯基香豆满kgm组合物在抑制胃肠道戊糖素形成的应用
技术领域
1.本技术属于保健食品或药品领域，具体涉及苯基香豆满kgm组合物在抑制胃肠道戊糖素形成的应用。


背景技术：

2.美拉德反应是食品在加工过程中产生独特风味和色泽的主要原因之一。其通过羰基化合物(如还原糖类)和氨基化合物(如氨基酸、蛋白质等)间的反应，产生多种美拉德反应产物，如戊糖素。随着加工食品的摄入，造成人体内戊糖素的积聚，引起慢性代谢性疾病，如高血脂、糖尿病等，严重危害人体健康。因此，可以通过抑制戊糖素的形成来减少人体内戊糖素的积聚，从而降低各种慢性疾病风险。
3.苯基香豆满为具有独特结构的木质素，含β-5化学连接键，赋予了其较强的生物活性，在抗氧化、降血脂、降血糖、抗病毒等方面具有重要作用，在食品、生物及医药等方面具有重要的应用价值。同时，愈创木基的甲氧基，为苯环结构提供了强电子云场，活化了苯环上的酚羟基，且β-5和α-o-4成环结构，使得两个苯环上的电子云场呈现协同作用，使之具有非常强的抗氧化活性，可有效抑制自由基的形成。已知戊糖素的生成与自由基的形成密切相关，两个苯环上的电子云场通过β-5和α-o-4成环连接，使得酚型苯基香豆满能显著抑制自由基的形成，势必将减少戊糖素的生成，有望在制备治疗、延缓或改善戊糖素相关疾病的保健食品或药品中有广泛的应用。
4.葡甘聚糖(konjac glucomannan，kgm)，属于可溶性半纤维素，为人体第七营养素纤维素中的优品，由葡萄糖和甘露糖以β-1,4糖苷键结合形成的高分子化合物，是一种优质的可溶性膳食纤维。kgm具有清理肠道、提高耐糖能力、防止肥胖、改善胆固醇代谢等功能，能阻止人体对糖、脂、胆固醇的过量吸收。对kgm的进一步研究和深度开发利用已引起人们的广泛关注，故kgm现已被应用于食品、医药等领域。


技术实现要素：

5.本技术的目的是提供苯基香豆满kgm组合物在抑制胃肠道戊糖素形成的应用。
6.本技术发现苯基香豆满和kgm(葡甘聚糖)对胃肠道中戊糖素的形成具有协同抑制增效效果，苯基香豆满和kgm组合使用后，能显著提升胃肠道中抑制戊糖素形成的效果。基于该发现，苯基香豆满和kgm的组合物具有抑制胃肠道戊糖素形成的应用。
7.进一步的，苯基香豆满kgm组合物具有制备抑制胃肠道戊糖素形成的保健食品或药品中的应用。
8.进一步的，苯基香豆满kgm组合物具有制备治疗、延缓或改善戊糖素相关疾病的保健食品或药品中的应用；所述的戊糖素相关疾病包括糖尿病、阿尔茨海默病、动脉粥样硬化等疾病。
9.作为优选，苯基香豆满为酚型结构苯基香豆满且至少含一个愈创木基结构单元，愈创木基结构单元通过β-5键和α-o-4键成环连接。
10.在一些具体实施方式中，苯基香豆满为双愈创木基型苯基香豆满或单愈创木基型苯基香豆满。
11.在一些具体实施方式中，葡甘聚糖分子量为70万～200万。
12.在一些具体实施方式中，苯基香豆满kgm组合物中，苯基香豆满和kgm的质量比为(1～4):1，优选为(2～3):1。
13.一种抑制胃肠道戊糖素形成的保健食品或药品，含苯基香豆满kgm组合物。
14.一种治疗、延缓或改善戊糖素相关疾病的保健食品或药品，含苯基香豆满kgm组合物。
15.在一些具体实施方式中，苯基香豆满kgm组合物中，苯基香豆满和kgm的质量比为(1～4):1，优选为(2～3):1。
16.本技术的有益效果如下：
17.苯基香豆满和kgm对胃肠道中戊糖素的形成具有协同抑制增效效果，相比单独的苯基香豆满或kgm，苯基香豆满kgm组合物对抑制胃肠道戊糖素形成的效果更显著，在抗氧化、抗衰老、抗糖尿病、抗阿尔茨海默病、抗动脉粥样硬化等疾病领域具有潜在的应用前景。
附图说明
18.图1为本技术实施例1中双愈创木基型苯基香豆满、kgm以及两者的组合物在胃肠消化阶段对戊糖素的抑制率；
19.图2为本技术实施例2中双愈创木基型苯基香豆满、kgm以及两者的组合物在胃肠消化阶段对戊糖素的抑制率；
20.图3为本技术实施例3中双愈创木基型苯基香豆满、kgm以及两者的组合物在胃肠消化阶段对戊糖素的抑制率；
21.图4为本技术实施例4中单愈创木基型苯基香豆满、kgm以及两者的组合物在胃肠消化阶段对戊糖素的抑制率；
22.图1-4中，a-c及a-c不同字母表示差异有统计学意义，a、b和c分别表示同一样品在口腔、胃和肠间存在显著性差异，p《0.01；a、b和c分别表示同一消化阶段不同样品间存在显著性差异，p《0.05。
具体实施方式
23.以下实施例用于进一步说明本技术，但不应理解为对本技术的限制。若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。
24.下述实施例中所配制的相关溶液，如未说明均为用水作为溶剂进行配制。下述实施例中所使用的苯基香豆满购于默克sigma-aldrich公司。下述实施例中所使用的葡甘聚糖购于上海麦克林生化科技有限公司的魔芋甘露聚糖，产品型号k861211。
25.实施例1
26.本实施例的具体步骤如下：
27.(1)30mg双愈创木基型苯基香豆满溶于98ml水中，再加入2ml甲醇，配制浓度0.3g/l的苯基香豆满溶液。双愈创木基型苯基香豆满的化学式如下：
[0028][0029]
(2)30mg葡甘聚糖溶于100ml水中，配制浓度0.3g/l的葡甘聚糖溶液。
[0030]
(3)苯基香豆满溶液和葡甘聚糖溶液按2:1的体积比混合，再采用0.22μm微孔膜进行灭菌处理获得混合溶液。
[0031]
(4)按表1配制人工唾液(ssf)储备液，在80ml人工唾液ssf中分别加入苯基香豆满溶液、葡甘聚糖溶液、混合溶液各10ml；再向每份人工唾液中加入2ml cacl2和2ml超纯水，加入3ml牛血清白蛋白(bovine serum albumin，bsa)和3ml乙二醛(glyoxal，go)，建立牛血清白蛋白-乙二醛模型(记为bsa-go模型)，混匀作为口腔组。以仅加入超纯水的人工唾液为对照组。
[0032]
表1模拟消化液原液的配方
[0033][0034][0035]
(5)按表1配制人工胃液(sgf)储备液，向步骤(4)的口腔组溶液中分别加入20ml所配制的人工胃液(sgf)储备液，用hcl溶液调ph值至4，然后加入2ml胃蛋白酶及2ml cacl2，最后加2ml超纯水，在37℃恒温振荡箱内进行消化，作为胃消化组。
[0036]
(6)按表1配制人工肠液(sif)储备液，向步骤(5)的胃消化组中加入20ml人工肠液储备液，然后加入1ml胰酶、2ml新鲜猪胆盐、2ml cacl2，用naoh调ph值至中性灭酶。补加2ml超纯水，置于37℃恒温振荡箱内进行消化2h，消化结束后煮沸灭酶，作为肠消化组。
[0037]
(7)经体外消化模拟，测定样品在口腔、胃、肠不同阶段的戊糖素抑制率，结果见图1，从图中可以看出双愈创木基型苯基香豆满和葡甘聚糖的组合物对抑制戊糖素产生了协同增效的效果。
[0038]
实施例中戊糖素抑制率的测定方法为：
[0039]
通过日立f-4700荧光分光光度计在激发波长λ
ex
＝379nm和发射波长λ
em
＝463nm处的荧光强度，测定样品和对照组样品在不同阶段的戊糖素含量，并通过公式计算戊糖素抑制率：戊糖素抑制率(％)＝(1-a
样
/a
对照
)
×
100％；其中，a
样
表示样品的戊糖素含量，a
对照
表示
对照组样品的戊糖素含量。
[0040]
实施例2
[0041]
本实施例的具体步骤如下：
[0042]
(1)30mg双愈创木基型苯基香豆满溶于98ml水中，加入2ml甲醇，配制成浓度0.3g/l的苯基香豆满溶液。
[0043]
(2)30mg葡甘聚糖溶于100ml水中，配制成浓度0.3g/l的葡甘聚糖溶液。
[0044]
(3)苯基香豆满溶液和葡甘聚糖溶液按2.5:1的体积比混合，再采用0.22μm微孔膜进行灭菌处理获得混合溶液。
[0045]
(4)按表1配制人工唾液(ssf)储备液，在80ml人工唾液ssf中分别加入苯基香豆满溶液、葡甘聚糖溶液、混合溶液各10ml，再向每份人工唾液中加入2ml cacl2和2ml超纯水。加入3ml牛血清白蛋白(bovine serum albumin，bsa)和3ml乙二醛(glyoxal，go)，建立牛血清白蛋白-乙二醛模型(记为bsa-go模型)，混匀作为口腔组。以仅加入超纯水的人工唾液为对照组。
[0046]
(5)按表1配制人工胃液(sgf)储备液，向步骤(4)的口腔组溶液中分别加入20ml所配制的人工胃液(sgf)储备液，用hcl溶液调ph值至4，然后加入2ml胃蛋白酶及2ml cacl2，最后加2ml超纯水，在37℃恒温振荡箱内进行消化，作为胃消化组。
[0047]
(6)按表1配制人工肠液(sif)储备液，向步骤(5)的胃消化组中加入20ml人工肠液储备液，然后加入1ml胰酶、2ml新鲜猪胆盐、2ml cacl2，用naoh调ph值至中性灭酶。补加2ml超纯水，置于37℃恒温振荡箱内进行消化2h，消化结束后煮沸灭酶，作为肠消化组。
[0048]
(7)经体外消化模拟，测定样品在口腔、胃、肠不同阶段的戊糖素抑制率，结果见图2，从图中可以看出双愈创木基型苯基香豆满和葡甘聚糖组合物对抑制戊糖素产生了协同增效的效果。戊糖素抑制率具体的测定方法参见实施例1。
[0049]
实施例3
[0050]
本实施例的具体步骤如下：
[0051]
(1)30mg双愈创木基型苯基香豆满溶于98ml水中，加入2ml甲醇，配制成浓度0.3g/l的苯基香豆满溶液。
[0052]
(2)30mg葡甘聚糖溶于100ml水中，配制成浓度0.3g/l的葡甘聚糖溶液。
[0053]
(3)苯基香豆满溶液和葡甘聚糖溶液按3:1的体积比混合，再采用0.22μm微孔膜进行灭菌处理获得混合溶液。
[0054]
(4)按表1配制人工唾液(ssf)储备液，在80ml人工唾液ssf中分别加入苯基香豆满溶液、葡甘聚糖溶液、混合溶液各10ml，再向每份人工唾液中加入2ml cacl2和2ml超纯水。加入3ml牛血清白蛋白(bovine serum albumin，bsa)和3ml乙二醛(glyoxal，go)，建立牛血清白蛋白-乙二醛模型(记为bsa-go模型)，混匀作为口腔组。以仅加入超纯水的人工唾液为对照组。
[0055]
(5)按表1配制人工胃液(sgf)储备液，向步骤(4)的口腔组溶液中分别加入20ml所配制的人工胃液(sgf)储备液，用hcl溶液调ph值至4，然后加入2ml胃蛋白酶及2ml cacl2，最后加2ml超纯水，在37℃恒温振荡箱内进行消化，作为胃消化组。
[0056]
(6)按表1配制人工肠液(sif)储备液，向步骤(5)的胃消化组中加入20ml人工肠液储备液，然后加入1ml胰酶、2ml新鲜猪胆盐、2ml cacl2，用naoh调ph值至中性灭酶。补加2ml
超纯水，置于37℃恒温振荡箱内进行消化2h，消化结束后煮沸灭酶，作为肠消化组。
[0057]
(7)经体外消化模拟，测定样品在口腔、胃、肠不同阶段的戊糖素抑制率，结果见图3，从图中可以看出双愈创木基型苯基香豆满和葡甘聚糖组合物对抑制戊糖素产生了协同增效的效果。戊糖素抑制率具体的测定方法参见实施例1。
[0058]
实施例4
[0059]
本实施例的具体步骤如下：
[0060]
(1)30mg单愈创木基型苯基香豆满溶于98ml水中，加入2ml甲醇，配制浓度0.3g/l的苯基香豆满溶液。单愈创木基型苯基香豆满的化学式如下：
[0061][0062]
(2)30mg葡甘聚糖溶于100ml水中，配制浓度0.3g/l的葡甘聚糖溶液。
[0063]
(3)苯基香豆满溶液和葡甘聚糖溶液按3:1的体积比混合，再采用0.22μm微孔膜进行灭菌处理获得混合溶液。
[0064]
(4)按表1配制人工唾液(ssf)储备液，在80ml人工唾液ssf中分别加入苯基香豆满溶液、葡甘聚糖溶液、混合溶液各10ml，再向每份人工唾液中加入2ml cacl2和2ml超纯水。加入3ml牛血清白蛋白(bovine serum albumin，bsa)和3ml乙二醛(glyoxal，go)，建立牛血清白蛋白-乙二醛模型(记为bsa-go模型)，混匀作为口腔组。以仅加入超纯水的人工唾液为对照组。
[0065]
(5)按表1配制人工胃液(sgf)储备液，向步骤(4)的口腔组溶液中分别加入20ml所配制的人工胃液(sgf)储备液，用hcl溶液调ph值至4，然后加入2ml胃蛋白酶及2ml cacl2，最后加2ml超纯水，在37℃恒温振荡箱内进行消化，作为胃消化组。
[0066]
(6)按表1配制人工肠液(sif)储备液，向步骤(5)的胃消化组中加入20ml人工肠液储备液，然后加入1ml胰酶、2ml新鲜猪胆盐、2ml cacl2，用naoh调ph值至中性灭酶。补加2ml超纯水，置于37℃恒温振荡箱内进行消化2h，消化结束后煮沸灭酶，作为肠消化组。
[0067]
(7)经体外消化模拟，测定样品在口腔、胃、肠不同阶段的戊糖素抑制率，结果见图4，从图中可以看出单愈创木基型苯基香豆满和葡甘聚糖组合物对抑制戊糖素产生了协同增效的效果。戊糖素抑制率具体的测定方法参见实施例1。
[0068]
见图1-4，所示为胃肠消化不同阶段各样品的戊糖素抑制率，横坐标代表消化阶段，包括口腔、胃、肠阶段，纵坐标代表戊糖素抑制率。在口腔阶段，样品对戊糖素的抑制率较低；从胃阶段开始，样品对戊糖素抑制效果明显增强。在胃阶段和肠阶段，苯基香豆满和葡甘聚糖对戊糖素均有抑制能力，但组合物的戊糖素抑制率明显优于苯基香豆满和葡甘聚糖的戊糖素抑制率，说明苯基香豆满和葡甘聚糖组合物产生了协同增效的效果，可显著提高抗戊糖素能力。
[0069]
以上所述仅表达了本技术的具体实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本技术技术方案构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本技术的保护范围。