一种脐带间充质干细胞冻存保护剂及冻存方法与流程

技术特征：
1.一种脐带间充质干细胞冻存保护剂，其特征在于，由基础培养基和添加在培养基中的以下成分组成：芝麻素8.5-12μg/ml、甲基丙烯酸羟乙酯4.5-6.5ng/ml、纳米碳化铌5.3-8.9ng/ml、谷氨酰胺10-15μg/ml、脯氨酸1-4mg/ml。2.根据权利要求1所述脐带间充质干细胞冻存保护剂，其特征在于，由基础培养基和添加在培养基中的以下成分组成：芝麻素10.5μg/ml、甲基丙烯酸羟乙酯5.5ng/ml、纳米碳化铌7.2ng/ml、谷氨酰胺13μg/ml、脯氨酸2mg/ml。3.根据权利要求1或2所述脐带间充质干细胞冻存保护剂，其特征在于，所述基础培养基为dmem/f12培养基。4.根据权利要求1或2所述脐带间充质干细胞冻存保护剂，其特征在于，所述纳米碳化铌平均粒径为100nm。5.一种脐带间充质干细胞的冻存方法，其特征在于，包括以下过程：(1)取基础培养基加入芝麻素、谷氨酰胺和脯氨酸，混合均匀，加入处于对数生长期的脐带间充质干细胞，在2-6℃预冷一段时间；(2)向步骤(1)中加入甲基丙烯酸羟乙酯和纳米碳化铌，以3-5℃/min降温至-80℃，在-80℃下保存24h后转移至液氮中。6.根据权利要求5所述脐带间充质干细胞的冻存方法，其特征在于，步骤(1)中脐带间充质干细胞的密度为6-9
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106个/ml。7.根据权利要求1所述脐带间充质干细胞的冻存方法，其特征在于，步骤(1)中预冷处理10-15min。

技术总结
本发明公开了一种脐带间充质干细胞冻存保护剂，由基础培养基和添加在培养基中的以下成分组成：芝麻素8.5-12μg/mL、甲基丙烯酸羟乙酯4.5-6.5ng/mL、纳米碳化铌5.3-8.9ng/mL、谷氨酰胺10-15μg/mL、脯氨酸1-4mg/mL。本发明提供的冻存保护剂中的芝麻素、谷氨酰胺和脯氨酸为冻存的脐带间充质干细胞复苏提供能量，有助于脐带间充质干细胞快速恢复活性。甲基丙烯酸羟乙酯和纳米碳化铌对脐带间充质干细胞进一步起到保护作用，减少冻存过程中对细胞造成的不可逆的损伤，复苏后的细胞存活率高。本发明还提供了一种脐带间充质干细胞的冻存方法，以处于对数生长期的脐带间充质干细胞为保存对象，采用本发明提供的冻存保护剂，通过控制保护剂中各组分的添加时机，进一步提高细胞冻存的效率。存的效率。存的效率。


技术研发人员：赵佳佳 李成白 黄文旺
受保护的技术使用者：成都旨蓄科技有限公司
技术研发日：2022.10.24
技术公布日：2023/1/13