一种藜麦麸皮皂苷的提取方法及其应用

1.本发明属于药物提取领域，具体涉及一种藜麦麸皮皂苷的提取方法及其应用，尤其涉及一种总皂苷得率高的藜麦麸皮皂苷的提取方法及其应用。


背景技术：

2.藜麦(chenopodium quinoa willd)，又称藜谷、南美藜、昆诺阿藜等，是苋科藜属的一种双子叶植物。与其他谷物相比，藜麦具有十分均衡的营养成分，蛋白质含量高(12～23％)，人体必需氨基酸种类齐全，尤其是富含其他谷物含量较少的赖氨酸。脂肪(5.0～7.2％)、膳食纤维、维生素、矿物质(特别是钙、磷、铁、锌等)等营养元素的含量也远高于大多数谷类作物；藜麦不含麸质，适于对麸质过敏的人群食用。藜麦中含有的黄酮、多酚、不饱和脂肪酸等营养功能因子具有抗氧化、降血脂、增强免疫等生理功效，能够降低一些慢性疾病的发生风险。
3.藜麦麸皮中皂苷含量丰富，食用带有麸皮的藜麦会有一种苦涩味，因此在藜麦的加工过程中一般都会脱皮以除去皂苷。研究发现，皂苷具有抗肿瘤、抗炎、免疫调节、保肝、降胆固醇、降血糖和抗微生物等生物活性。此外，它们还可以充当免疫和吸收佐剂，增强抗原特异性抗体和粘膜反应等。因此，实现对藜麦麸皮中皂苷的提取分离，并对其生物活性展开研究，对拓展藜麦的开发利用具有重要意义。
4.cn112023439a公开了一种藜麦皂苷提取装置及其使用方法，包括提取罐体、皂皮进料管、浸泡润湿腔、固液分离支撑板、揉搓分离机构和风干传送机构，提取罐体底壁上设有集液罐和藜麦收集箱，藜麦收集箱包括揉搓腔和藜麦暂存腔，揉搓腔设于藜麦暂存腔上方，揉搓分离机构设于提取罐体下部侧壁上，揉搓分离机构滑动设于揉搓腔内，风干传送机构设于提取罐体中部，风干传送机构位于揉搓分离机构上方，提取罐体内侧壁圆周中上部设有支撑台，浸泡润湿腔设于支撑台上，浸泡润湿腔内设有搅拌装置。该发明提供的装置预先对藜麦进行润湿浸泡，使其表面软化，提高了打磨去除皂苷皮的效率。
5.cn109125416a公开了一种藜麦麸皮总皂苷提取及纯化方法，步骤为：1)将干燥的藜麦麸皮中加入乙醇溶液，超声提取1～3次，每次15～60min，提取液抽滤后，浓缩至无醇味，得到水相；2)将水相加入水饱和正丁醇萃取1～3次，浓缩干燥得到萃取物；3)将萃取物加甲醇溶解，再加入丙酮，离心得到沉淀物；4)将沉淀物干燥后，即得藜麦麸皮总皂苷。该发明首先采用乙醇超声提取，然后用水饱和正丁醇萃取，加入甲醇和丙酮溶解分离纯化，操作步骤简单，成品中总皂苷纯度在30％以上，可广泛应用于医药或化妆品领域。
6.由于藜麦麸皮皂苷具有抗肿瘤、抗炎、免疫调节、保肝、降胆固醇、降血糖和抗微生物等有益效果。因此，如何提供一种藜麦麸皮中皂苷的提取分离方法，成为了亟待解决的问题。


技术实现要素：

7.针对现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种藜麦麸皮皂苷的提取方法及其
应用，尤其提供一种总皂苷得率高的藜麦麸皮皂苷的提取方法及其应用。本发明提供的提取方法操作步骤简单，提取效率高，总皂苷得率高。
8.为达到此发明目的，本发明采用以下技术方案：
9.一方面，本发明提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，所述提取方法包括以下步骤：
10.(1)将藜麦麸皮烘干、脱脂，之后用醇溶液提取，得到粗提物；
11.(2)将步骤(1)得到的粗提物用大孔树脂洗脱，得到所述藜麦麸皮皂苷。
12.上述提取方法操作简单，通过特定提取步骤及参数使所述提取方法提取效率高，总皂苷得率得到提高。
13.优选地，步骤(1)所述醇溶液包括乙醇溶液。
14.优选地，所述醇溶液的体积分数为50～70％。
15.优选地，步骤(1)所述提取的方法包括加热提取或超声提取.
16.优选地，所述加热提取的温度为65～70℃。
17.优选地，所述超声提取的功率为50～500w/l，温度为-20～0℃。
18.优选地，所述提取的时间为1.5～3h。
19.优选地，步骤(1)所述提取的料液比为1:20～1:24。
20.其中，醇溶液的体积分数可以是50％、55％、60％、65％或70％等，加热提取的温度可以是65℃、66℃、67℃、68℃、69℃或70℃等，超声提取的功率可以是50w/l、100w/l、150w/l、200w/l、250w/l、300w/l、350w/l、400w/l、450w/l或500w/l等，温度可以是-20℃、-18℃、-16℃、-14℃、-12℃、-10℃、-8℃、-6℃、-4℃、-2℃或0℃等，提取的时间可以是1.5h、1.6h、1.7h、1.8h、1.9h、2h、2.1h、2.2h、2.3h、2.4h、2.5h、2.6h、2.7h、2.8h、2.9h或3h等，料液比可以是1:20、1:21、1:22、1:23或1:24等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
21.上述特定提取参数能够提高提取效果，进而提高总皂苷得率。
22.优选地，步骤(2)所述大孔树脂包括d101、hpd722、hpd600、ads-7、ads-17或nka-9中任意一种，优选hpd600。
23.上述特定大孔树脂能够在有效去除杂质的前提下减少对藜麦麸皮皂苷的吸附，并通过特定洗脱程序将藜麦麸皮皂苷洗脱，提高总皂苷得率。
24.优选地，步骤(2)所述洗脱的洗脱液包括乙醇溶液，所述乙醇溶液的体积分数为55～65％。
25.优选地，步骤(2)所述洗脱的洗脱液体积为3.5～5.5bv。
26.优选地，步骤(2)所述洗脱的流速为0.8～1.2bv/h。
27.其中，乙醇溶液的体积分数可以是55％、56％、57％、58％、59％、60％、61％、62％、63％、64％或65％等，洗脱液的体积可以是3.5bv、3.7bv、3.9bv、4.1bv、4.3bv、4.5bv、4.7bv、4.9bv、5.1bv、5.3bv或5.5bv等，流速可以是0.8bv/h、0.9bv/h、1bv/h、1.1bv/h或1.2bv/h等，但不限于以上所列举的数值，上述数值范围内其他未列举的数值同样适用。
28.上述特定洗脱参数能够将杂质与所述藜麦麸皮皂苷分离，并将藜麦麸皮皂苷洗脱，提高总皂苷得率。
29.作为本发明优选的技术方案，所述提取方法包括以下步骤：
30.(1)将藜麦麸皮烘干、脱脂，之后用体积分数50～70％的乙醇溶液在65～70℃下提取1.5～3h，得到粗提物；
31.(2)将步骤(1)得到的粗提物用大孔树脂、乙醇溶液以0.8～1.2bv/h的流速洗脱3.5～5.5bv，得到所述藜麦麸皮皂苷。
32.另一方面，本发明还提供了如上所述的藜麦麸皮皂苷的提取方法在制备抗氧化药物、抗肿瘤药物或抑菌药物中的应用。
33.与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
34.本发明提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，通过特定提取步骤及参数使所述提取方法提取效率高，总皂苷得率得到提高；采用特定大孔树脂能够在有效去除杂质的前提下减少对藜麦麸皮皂苷的吸附，并通过特定洗脱程序将藜麦麸皮皂苷洗脱，使杂质与所述藜麦麸皮皂苷分离，提高总皂苷得率。
具体实施方式
35.为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下结合本发明的优选实施例来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。
36.实施例1
37.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤如下：
38.(1)将3g藜麦麸皮50℃下烘干、粉碎，经石油醚脱脂，烘干，之后浸泡在体积分数60％的乙醇溶液中(料液比1:22)，在67℃下提取2.3h，料液比，得到粗提物；
39.(2)将步骤(1)得到的粗提物用大孔树脂hpd600、体积分数60％乙醇溶液洗脱，流速1bv/h，洗脱液体积4.5bv，脱溶得到所述藜麦麸皮皂苷。
40.实施例2
41.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤如下：
42.(1)将3g藜麦麸皮50℃下烘干、粉碎，经石油醚脱脂，烘干，之后浸泡在体积分数50％的乙醇溶液中(料液比1:24)，在65℃下提取3h，料液比，得到粗提物；
43.(2)将步骤(1)得到的粗提物用大孔树脂hpd722、体积分数55％乙醇溶液洗脱，流速1.2bv/h，洗脱液体积5.5bv，脱溶得到所述藜麦麸皮皂苷。
44.实施例3
45.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤如下：
46.(1)将3g藜麦麸皮50℃下烘干、粉碎，经石油醚脱脂，烘干，之后浸泡在体积分数70％的乙醇溶液中(料液比1:20)，在70℃下提取1.5h，料液比，得到粗提物；
47.(2)将步骤(1)得到的粗提物用大孔树脂d101、体积分数65％乙醇溶液洗脱，流速0.8bv/h，洗脱液体积3.5bv，脱溶得到所述藜麦麸皮皂苷。
48.实施例4
49.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除将大孔树脂hpd600替换成等量的d101外，其余与实施例1一致。
50.实施例5
51.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除将大孔树脂hpd600替换成等量的hpd722外，其余与实施例1一致。
52.实施例6
53.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除将大孔树脂hpd600替换成等量的ads-7外，其余与实施例1一致。
54.实施例7
55.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除将大孔树脂hpd600替换成等量的ads-17外，其余与实施例1一致。
56.实施例8
57.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除将大孔树脂hpd600替换成等量的nka-9外，其余与实施例1一致。
58.实施例9
59.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除步骤(2)中乙醇溶液的体积分数为55％外，其余与实施例1一致。
60.实施例10
61.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除步骤(2)中乙醇溶液的体积分数为65％外，其余与实施例1一致。
62.实施例11
63.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除步骤(1)的提取方法为在-10℃下以250w/l超声2.3h外，其余与实施例1一致。
64.实施例12
65.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除步骤(1)的提取方法为在-20℃下以500w/l超声2.3h外，其余与实施例1一致。
66.实施例13
67.本实施例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除步骤(1)的提取方法为在0℃下以50w/l超声2.3h外，其余与实施例1一致。
68.对比例1
69.本对比例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除步骤(2)中乙醇溶液的体积分数为50％外，其余与实施例1一致。
70.对比例2
71.本对比例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除步骤(2)中乙醇溶液的体积分数为70％外，其余与实施例1一致。
72.对比例3
73.本对比例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除步骤(1)的提取方法为在-30℃下以600w/l超声2.3h外，其余与实施例1一致。
74.对比例4
75.本对比例提供了一种藜麦麸皮皂苷的提取方法，具体步骤中除步骤(1)的提取方法为在10℃下以30w/l超声2.3h外，其余与实施例1一致。
76.效果测试：
77.齐墩果酸标准曲线：分别取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml齐墩果酸标准溶液(80μg/ml，甲醇为溶剂)置于10ml试管中作为待测液，每组3个平行。将待测液于70℃水浴中挥
干，依次加入5％的香草醛～冰醋酸溶液0.2ml和高氯酸0.8ml，试管加塞摇匀后70℃水浴加热15min，显色后冰水冷却5min，加5ml冰乙酸稀释摇匀、静置30min，546nm处测吸光值，以等量甲醇替代待测液作试剂空白。以齐墩果酸浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
78.之后分别将实施例1～13和对比例1～4得到的藜麦麸皮皂苷分别用甲醇配成1mg/ml浓度的溶液，取0.05ml样品溶液作为待测液，按齐墩果酸标准曲线的方法测定其中的总皂苷含量，计算总皂苷得率：
79.总皂苷得率(％)＝c
×
v/(m
×
106)
×
100％；
80.公式中的c表示样品液中皂苷的浓度(μg/ml)，v为样品液总体积(ml)，m为藜麦麸皮的质量。
81.结果如下：
82.组别总皂苷得率(％)组别总皂苷得率(％)组别总皂苷得率(％)实施例115.23实施例78.83实施例1311.25实施例27.39实施例89.43对比例16.82实施例37.92实施例98.19对比例27.13实施例49.96实施例108.73对比例310.65实施例58.92实施例1114.75对比例410.14实施例69.52实施例1212.53
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83.以上数据显示，本发明提供的藜麦麸皮皂苷的提取方法提取效率高，总皂苷得率高；比较实施例1和实施例4～8可以发现，本发明通过选择特定大孔树脂在有效去除杂质的前提下减少对藜麦麸皮皂苷的吸附，进一步提高了总皂苷得率；比较实施例1、9、10和对比例1～2可以发现，本发明通过控制步骤(2)中洗脱液的体积分数显著提高了总皂苷得率；比较实施例11-13，对比例3-4可以发现，本发明通过选择特定超声提取参数显著提高了总皂苷得率。
84.申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的藜麦麸皮皂苷的提取方法及其应用，但本发明并不局限于上述实施例，即不意味着本发明必须依赖上述实施例才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。
85.以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。
86.另外需要说明的是，在上述具体实施方式中所描述的各个具体技术特征，在不矛盾的情况下，可以通过任何合适的方式进行组合，为了避免不必要的重复，本发明对各种可能的组合方式不再另行说明。