一种人参皂苷长春新碱脂质体、其制备方法和应用与流程

技术特征：
1.一种人参皂苷长春新碱脂质体，其特征在于，其包括如下质量份数的组分：5-20份磷脂、0.05-2份peg-dspe、0.1-4份人参皂苷、1份长春新碱盐。2.如权利要求1所述的人参皂苷长春新碱脂质体，其特征在于，所述的人参皂苷长春新碱脂质体中，所述的人参皂苷与所述的磷脂形成磷脂膜；和/或，所述的长春新碱盐为硫酸长春新碱通过ph梯度法与盐溶液进行离子交换得到的长春新碱盐；和/或，所述的长春新碱盐为硫酸长春新碱、蔗糖八硫酸酯长春新碱、甲基磺酸长春新碱、甲基磺酸长春新碱、乙二磺酸长春新碱、丙二磺酸长春新碱、乙二磺酸长春新碱或丙二磺酸长春新碱；更佳地，所述的长春新碱盐为蔗糖八硫酸酯长春新碱、甲基磺酸长春新碱或乙二磺酸长春新碱；例如蔗糖八硫酸酯长春新碱；和/或，所述的磷脂选自氢化磷脂、蛋黄卵磷脂、大豆磷脂和脑磷脂中的一种或多种；较佳地，所述的磷脂为氢化磷脂或蛋黄卵磷脂；和/或，所述的人参皂苷为选自20(s)-人参皂苷rg3、20(s)-人参皂苷rh2、人参皂苷rg5、人参皂苷伪gq和人参皂苷rk1中的一种或多种，较佳地，所述的人参皂苷为20(s)-人参皂苷rg3、20(s)-人参皂苷rh2、人参皂苷rg5、人参皂苷rk1或人参皂苷rp1；和/或，所述人参皂苷的hplc纯度≥99％；和/或，所述的人参皂苷长春新碱脂质体的粒径d90≤150nm；和/或，所述的人参皂苷长春新碱脂质体还包括水；和/或，所述的人参皂苷长春新碱脂质体不包括胆固醇。3.如权利要求2所述的人参皂苷长春新碱脂质体，其特征在于，所述的磷脂膜还包括peg-dspe；和/或，所述的磷脂膜的内侧为内水相，所述的磷脂膜的外侧为外水相；所述的长春新碱盐被包封于所述的内水相中；所述的长春新碱为不溶于水的所述的长春新碱盐；较佳地，所述的内水相为盐溶液；所述的外水相优选为生理等渗溶液；例如生理等渗溶液为5％葡萄糖水溶液或10％蔗糖水溶液；和/或，所述的长春新碱盐为硫酸长春新碱通过ph梯度法与盐溶液进行离子交换得到的长春新碱盐；所述的盐溶液为磺酸盐水溶液或蔗糖八硫酸酯盐水溶液；较佳地，所述的盐溶液为蔗糖八硫酸酯三乙胺水溶液、甲基磺酸铵水溶液、甲基磺酸三乙胺水溶液、乙二磺酸铵水溶液、丙二磺酸铵水溶液、乙二磺酸三乙胺水溶液或丙二磺酸三乙胺水溶液；更佳地，所述的盐溶液为蔗糖八硫酸酯三乙胺水溶液、甲基磺酸铵水溶液或乙二磺酸三乙胺水溶液；例如蔗糖八硫酸酯三乙胺水溶液；和/或，所述的硫酸长春新碱与所述的人参皂苷的质量比为1:(0.1～1)；例如所述的硫酸长春新碱与所述的人参皂苷rg3的质量比为1:0.1、1:0.5、1:0.8、1:1、1:1.5、1：2、1:3或1:4；和/或，所述的硫酸长春新碱与所述的peg-dspe的质量比为1:(0.1～5)；例如，所述的硫酸长春新碱与所述的peg-dspe的质量比为1:0.0.5、1:0.1、1:0.25、1:0.5、1:1或1：2；和/或，所述的硫酸长春新碱与所述的磷脂的质量比为1:(10～20)；例如，所述的硫酸长春新碱与磷脂的质量比为1:10、1:12、15:1或1:20；和/或，所述的盐溶液与所述的硫酸长春新碱的体积质量比为66.7～200ml/g，例如
100ml/g；和/或，所述的硫酸长春新碱溶液的浓度为5～20mg/ml，例如1mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、15mg/ml或20mg/ml；优选地为10～15mg/ml；和/或，所述的盐溶液的浓度为0.05m-0.975m；例如0.05m、0.1m、0.2m、0.3m、0.325m、0.65m、0.975m或0.16m；更佳地，当所述的盐溶液为蔗糖八硫酸酯三乙胺水溶液时，所述的盐溶液的浓度为0.05m-0.1m；例如0.05m或0.1m；和/或，当所述的盐溶液为乙二磺酸三乙胺水溶液时，所述的盐溶液的浓度为0.16m-0.65m；例如0.2m、0.3m、0.325m、0.65m或0.16m；和/或，当所述的盐溶液为甲基磺酸铵水溶液时，所述的盐溶液的浓度为0.325m-0.975m；例如0.325m、0.65m或0.975m；所述的磷脂的质量分数为10份；和/或，所述的peg-dspe的质量分数为0.5份；和/或，所述的人参皂苷的质量分数为1份；和/或，所述peg-dspe为peg2000-dspe。4.一种人参皂苷长春新碱脂质体的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤：步骤1、将磷脂溶解于溶剂中，加入盐溶液进行水化，得到溶液a1；步骤2、其为方案1、方案2或方案3；方案1包括如下步骤：将步骤1得到的所述的溶液a1进行高压均质，控制粒径d90在100nm以下，得到溶液a2a；方案2包括如下步骤：将步骤1得到的所述的溶液a1，分别依次通过各孔径挤出板挤出，控制粒径d90在100nm以下，得到溶液a2b；方案3包括如下步骤：将步骤1得到的所述的溶液a1进行超声处理，得到溶液a2c；步骤3、将所述的步骤2中得到的溶液a2a、a2b或a2c在含有所述的生理等渗溶液的透析袋中进行透析，得到溶液a3；步骤4、将步骤3得到的所述的溶液a3与硫酸长春新碱的水溶液混合，得到a4脂质体；步骤5、将步骤4得到的所述的a4脂质体与所述的人参皂苷在乙醇中混合，得到a5脂质体。5.权利要求4述的人参皂苷长春新碱脂质体的制备方法，其特征在于，所述的人参皂苷长春新碱脂质体的制备方法还包括步骤6：将步骤5得到的所述的a5脂质体和peg-dspe分散在生理等渗溶液中，得到所述的人参皂苷长春新碱脂质体；和/或，所述的磷脂和人参皂苷的种类和用量如权利要求1-3任一项所述；和/或，所述的步骤1中，所述的溶剂为乙醇；例如无水乙醇；和/或，所述的步骤1中，所述的磷脂与所述的溶剂的质量体积比为1g/1～10ml，例如1g/2ml；和/或，所述的步骤1中，所述的水化的温度为55-65℃；和/或，所述的水化的时间与反应规模相关，所述的水化以溶液均一即可，例如10-4小
时，例如10分钟；和/或，所述的步骤1中，所述的水化为在旋蒸瓶中进行，转速为40～60rp/min，例如50rp/min；和/或，所述的步骤2的方案1中，所述的高压均质为在均质机中使用-5～10℃冷冻水冷切循环；较佳地，所述的高压均质为在均质机中使用5～10℃冷冻水冷切循环；和/或，所述的步骤2的方案1中，所述的高压均质的压力在800-1500bar之间，例如1200bar；和/或，所述的步骤2的方案1中，所述的高压均质的次数为3-4次，例如4次；和/或，所述的步骤2的方案2中，所述挤出的温度为35-45℃，例如40℃；和/或，所述的步骤2的方案2中，所述挤出板的孔径为800nm，400nm，200nm，100nm；和/或，所述的步骤2的方案2中，所述挤出的压力为600～800psi；例如800psi；和/或，所述的步骤2的方案2中，所述挤出的次数为4-10次，例如4次；和/或，所述的步骤2的方案2中，所述的溶液a1，分别依次通过孔径分别为800nm、400nm、200nm、100nm的聚碳酯膜过滤板；和/或，所述的步骤2的方案3中，所述的超声在600w下超声；和/或，所述的超声为25次；较佳地，所述的超声为开5秒，停5秒；和/或，所述的步骤3中，所述的透析袋的截留分子量为8000～15000；例如，10000；和/或，所述的步骤3中，所述的等渗溶液为5％葡萄糖或10％蔗糖水溶液；和/或，步骤3中，所述的溶液a2a、a2b或a2c与所述的等渗溶液的体积比为1:1000；和/或，步骤3中，所述的透析的温度为0-10℃，例如4℃；和/或，步骤3中，所述的透析的时间以完全去除所述的溶液a2a、a2b或a2c脂质体中外水相中的所述的盐溶液，较佳地，所述的透析的时间为10-18小时，例如12小时；和/或，所述的步骤4中，所述的硫酸长春新碱溶液的浓度为5～20mg/ml，例如1mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、15mg/ml或20mg/ml，优选地为10～15mg/ml；和/或，所述的步骤5中，所述的人参皂苷乙醇溶液的浓度为5～20mg/ml，例如10mg/ml；和/或，所述的步骤5中，所述的搅拌时间为30-60分钟，例如45分钟；和/或，所述的步骤5中，所述的透析袋的截留分子量为8000～15000，例如，截留分子量为10000；和/或，步骤5中，所述的透析的温度为0-10℃，例如4℃；和/或，步骤5中，所述的透析的时间以完全去除乙醇盐溶液、未包裹的硫酸长春新碱和人参皂苷为准，较佳地，所述的透析的时间为10-18小时，例如12小时；和/或，所述的人参皂苷长春新碱脂质体的制备方法还进一步包括除菌过滤和灌装步骤；例如，除菌过滤步骤中，采用0.22μm滤膜过滤所述的脂质体；灌装步骤中，灌装于10ml或20ml西林瓶中、压盖和包装；和/或，所述的人参皂苷长春新碱脂质体的制备方法中，所述的人参皂苷长春新碱脂质体的粒径d90≤150nm，包封率≥80％；较佳地，所述的步骤6中，将peg-dspe，溶于步骤3相同的生理等渗溶液中，然后加入到步骤5得到的所述的a5脂质；和/或，所述的步骤4中，将步骤3得到的所述的溶液a3与所述的硫酸长春新碱水溶液，
按照体积比为1：1混合，并于50-60℃水浴中孵育40分钟，即得长春新碱脂质体；和/或，所述的步骤5中，将所述的人参皂苷得乙醇溶液缓慢加入到步骤4中的长春新碱脂质体溶液，搅拌，挥发除去大部分乙醇，然后再置于透析袋中透析，以上述步骤3相同的等渗溶液作为透析介质；和/或，所述的步骤6中，所述的硫酸长春新碱与所述的peg-dspe的质量比为1:(0.1～5)；例如，所述的硫酸长春新碱与所述的peg-dspe的质量比为1:0.0.5、1:0.1、1:0.25、1:0.5、1:1或1：2；和/或，所述的步骤6中，所述的peg-dspe浓度为1-20mg/ml，例如10mg/ml。6.一种人参皂苷长春新碱脂质体，其特征在于，其由如权利要求4或5所述的人参皂苷长春新碱脂质体的制备方法制备得到。7.一种人参皂苷长春新碱脂质体，所述的人参皂苷长春新碱脂质体的原料包括如下质量分数的组成：5-20份磷脂、0.05-2份peg-dspe、0.1-4份人参皂苷、1份硫酸长春新碱；较佳地，所述的磷脂、所述的peg-dspe和所述的人参皂苷的定义和质量分数如权利要求2或3所述；和/或，所述的人参皂苷长春新碱脂质体由如权利要求4或5所述的人参皂苷长春新碱脂质体的制备方法制备得到。8.权利要求7所述的人参皂苷长春新碱脂质体，其特征在于，所述的人参皂苷长春新碱脂质体的原料还包括生理等渗溶液和/或盐溶液；和/或，所述的人参皂苷长春新碱脂质体中，所述的人参皂苷长春新碱脂质体的粒径d90≤150nm，包封率≥80％；和/或，所述的生理等渗溶液为5％葡萄糖水溶液或10％蔗糖水溶液；较佳地，所述的盐溶液为磺酸盐水溶液或蔗糖八硫酸酯盐水溶液；更佳地，所述的盐溶液为蔗糖八硫酸酯三乙胺水溶液、甲基磺酸铵水溶液、甲基磺酸三乙胺水溶液、乙二磺酸铵水溶液、丙二磺酸铵水溶液、乙二磺酸三乙胺水溶液或丙二磺酸三乙胺水溶液；还佳地，所述的盐溶液为蔗糖八硫酸酯三乙胺水溶液、甲基磺酸铵水溶液或乙二磺酸三乙胺水溶液；例如蔗糖八硫酸酯三乙胺水溶液。9.一种脂质体组合物，其特征在于，其包含葡萄糖水溶液和如权利要求1-3或6-8中任一项所述的人参皂苷长春新碱脂质体；较佳地，所述的葡萄糖水溶液为5％葡萄糖水溶液；和/或，所述的人参皂苷长春新碱脂质体溶液中，所述的人参皂苷长春新碱脂质体的包封率≥80％。10.一种物质a在制备治疗和/或预防癌症药物中的应用；所述的物质a为如权利要求1-3或6-8所述的人参皂苷长春新碱脂质体或如权利要求9所述的脂质体组合物；较佳地，所述的癌症为急性白血病、恶性淋巴瘤、乳腺癌中的一种或多种；和/或，所述的人参皂苷长春新碱脂质体的粒径d90≤150nm，包封率≥80％；和/或，所述的应用中，所述人参皂苷的纯度≥99％。

技术总结
本发明公开了一种人参皂苷长春新碱脂质体、其制备方法和应用。本发明提供了一种人参皂苷长春新碱脂质体(简称“Ginposome-VCR”)，其包括如下质量份数的组分：5-20份磷脂、0.05-2份PEG-DSPE、0.1-4份人参皂苷、1份长春新碱盐。本发明的人参皂苷长春新碱脂质体对肿瘤细胞的具有靶向作用和增效减毒。胞的具有靶向作用和增效减毒。


技术研发人员：李翀 王建新 王丹 陈颖江 詹华杏
受保护的技术使用者：厦门本素药业有限公司
技术研发日：2021.06.09
技术公布日：2022/12/8