防治帕金森氏病的中药组合物及其汤剂的制备方法

1.本发明涉及中药技术领域，具体是一种用于防治帕金森氏病的中药和汤剂制备。


背景技术：

2.帕金森氏病(pd)是一种慢性退行性神经系统疾病，又名震颤麻痹，病因迄今未明，仅知该病可能与遗传、环境因素、感染、衰老、氧化应激、过多的自由基形成及神经营养因子缺乏等有关。伴随社会老龄化，帕金森氏病的发病率每年递增，正日益成为一个严重的医学与社会问题。研究报告显示，65岁以上帕金森氏病患病率，位居老年神经系统退行性疾病第二位。帕金森氏病患者晚期可发展至全身僵直，健康状况与日俱下。
3.临床上以药物治疗帕金森氏病为主，药物主要的作用为抗胆碱能药物或增强多巴胺能递质，但因帕金森氏病病因病机的多样性和不确定性，决定了单一化学药品多无确切疗效，而且价格高昂、用药不便，且有较多的副作用，不利于患者长期应用，只能改善症状，长期使用可出现异动症、剂末现象等严重副反应，并增加脑内自由基生成，损伤多巴胺神经元。因此，临床尚缺乏理想的帕金森氏病药物，仍缺乏针对其发病机制的有效治疗的方法。
4.中药强调整体和标本兼治，拥有悠久的历史和广泛的实践基础。现有的一些关于帕金森氏病的治疗中药和许多治疗方法，其目的都是缓解症状和延缓病程。但由于个体的差异，并不能起到阻断或逆转病程的作用。因此针对帕金森氏病，研发一种价格合理，用药方便，且不会产生药物依赖的效果明显的中药，这对于祖国医学的发展和人民健康事业的保障具有重要而又现实意义。


技术实现要素：

5.本发明的目的是鉴于目前帕金森氏病治疗存在的现实状况，通过试验研究，提供一种有显著疗效的防治帕金森氏病的中药组合物及其汤剂的制备。
6.为实现上述目的，本发明所述的中药组合物的第一个技术方案是：按以下重量份的原料制成：黄芪15克，天麻10克，银杏叶10克，白芍15克，钩藤10克，连翘10克，生甘草5克，野生葛根10克，大叶红景天10克，陈胆星6克，炙远志10克，防风10克。
7.所述的中药组合物的第二个技术方案是：在上述中药组合物的基础上，添加白蚁巢5克。
8.所述的中药组合物汤剂是：采用乙醇提取中药组合物，获得汤剂。
9.所述汤剂的制备方法是：将中药组合物粉碎成粉末，称取中药组合物的粉末，按重量比，加入20倍粉末重量的90％乙醇，加热回流提取2h，抽滤得到汤剂。
10.进一步地，对于抽滤后的滤渣，再加20倍粉末重量的90％乙醇，再加热回流提取2h，抽滤得到滤液，将两次抽滤后的滤液合并在一起，得到提取液汤剂。
11.本发明采用上述技术方案后的有益效果是：
12.1、本发明根据中医辨证论治理论提供了一种全新的防治帕金森病的中药组合物，本发明的中药组合物，所用的药味价格不高，并且数量不多，具有疗效高、无毒副作用、制备
方法简单，无需专用设备和器皿，适于长期服用和推广应用等优点，从病原根本入手，对症下药，达到预防和治疗帕金森氏病的效果。
13.2、本发明在传统水煎方法的基础上，采用了乙醇提取，确保了中药的有效成分，效果优于传统的水煎方法制备得到的汤剂。
14.3、本发明制剂应用于帕金森病果蝇试验，对帕金森病果蝇有明显的改善作用，可见其具有确切疗效，因此，能在中医领域为治疗帕金森氏病提供重要处方。
15.4、将不同浓度的提取液，添食帕金森氏病果蝇，观察并比较帕金森氏病果蝇的攀爬能力、寿命及脑组织病理改变，结果是：该提取液能提高果蝇的攀爬能力，攀爬能力随提取液浓度的升高以及果蝇年龄的增长而增高。该提取液作用后，果蝇脑组织中的细胞数明显增加，空泡减少，与果蝇的行为及寿命变化一致。因此，该提取液能改善帕金森氏病果蝇行为及延长帕金森氏病果蝇寿命。
具体实施方式
16.按以下重量份的原料制成中药组合物：黄芪15克，天麻10克，银杏叶10克，白芍15克，钩藤10克，连翘10克，生甘草5克，野生葛根10克，大叶红景天10克，陈胆星6克，炙远志10克，防风10克。
17.针对肝肾两亏引起的疼痛以及免疫功能和抗氧能力差等很明显的病症，在上述中药组合物的基础上，再增加白蚁巢5克。即按以下重量份的原料制成中药组合物：黄芪15克，天麻10克，银杏叶10克，白芍15克，钩藤10克，连翘10克，生甘草5克，野生葛根10克，大叶红景天10克，陈胆星6克，炙远志10克，防风10克，白蚁巢5克。
18.针对上述的中药组合物，将中药组合物磨成粉状，采用乙醇提取，获得提取液，即中药组合物汤剂。
19.提取液汤剂的具体制备方法是：称取上述中药组合物粉末10g，按重量比，加入20倍量的90％乙醇200ml，加热回流提取2h，抽滤。对于抽滤后的滤渣，再加200ml的90％乙醇，再加热回流提取2h，抽滤。将两次抽滤后的滤液合并在一起，得到提取液，即可直接服用的汤剂。
20.准备帕金森氏病果蝇：取野生果蝇和uas-ddc果蝇杂交得到帕金森氏病果蝇。在帕金森氏病果蝇蛹孵化后，雌雄分开，分为一组雌雄对照组和雌雄各三组实验组，每组各10只。将雌雄果蝇分别培养，培养基中包含琼脂、玉米粉、蔗糖、水及酵母粉等，雌雄果蝇饲养过程中加入丙酸抑制真菌感染，培养时，要在25℃的环境下，白天和黑夜各12小时循环培养。
21.针对一组对照组作帕金森氏病果蝇攀爬能力和寿命试验：在室温25℃和60～70％湿度环境下，雌雄果蝇各取一组10只分别放入测试瓶中，在距瓶底60mm高度划一条线作为标记。将果蝇放到瓶底，果蝇开始沿瓶壁往上爬。攀爬10s后记录爬过标志线的果蝇数目，每组试验10次，以10次爬过标志线的平均果蝇数目作为攀爬能力指标。
22.帕金森氏病果蝇从孵化后6小时后开始做攀爬能力试验并获得相应的攀爬能力指标，然后，第6天、第12天、第24天、第36天和第42天各重复一次。雄性帕金森氏病果蝇和雌性帕金森氏病果蝇的试验记录如表1和表2中的第一行对照组。
23.攀爬能力分析后的帕金森氏病果蝇继续饲养至死亡，分别统计每组雌雄果蝇的寿
命。统计寿命时，第6天、第12天、第24天、第36天、第48天、第60天各统计一次。雄性帕金森氏病果蝇寿和雌性帕金森氏病果蝇寿的试验记录如表3和表4中的第一行对照组。
24.需要说明的是：攀爬能力和寿命试验时的统计，统计方法所得数据用spss统计软件进行检验，用anova方差分析，组间比较作q检验，数据以平均数
±
标准差表示。计数以率表示，通过卡方分析比较。
25.针对雌雄各三组实验组，分别是雌实验组1、雌实验组2、雌实验组3和雄实验组1、实验组2、实验组3，全部转入培养瓶，每个培养瓶一组果蝇。在每个培养瓶中，每100g培养液分别加入1mg、10mg、100mg的提取液，获得不同浓度的提取液培养液。羽化6小时后开始按照和上述对照组一样的方法，做果蝇攀爬能力和寿命试验，得到在不同浓度提取液培养液饲养情况下的雌性和雄性帕金森氏病果蝇攀爬能力和寿命，获得本发明所述的中药组合物提取液汤剂对雌雄性帕金森氏病果蝇的影响，分别如表1、2、3、4中的第二行至第四行所示。
26.表1雄性帕金森氏病果蝇攀爬能力统计
[0027][0028][0029]
表2雌性帕金森氏病果蝇攀爬能力统计
[0030][0031]
表3雄性帕金森氏病果蝇寿命统计
[0032][0033]
表4雌性帕金森氏病果蝇寿命统计
[0034][0035]
结果：由表1和表2可知，对照组果蝇中，雄性帕金森氏病果蝇的攀爬能力在羽化后24后明显下降，攀爬能力随着年龄的增长而逐渐降低。在加入1mg后的提取液培养基中的雄性帕金森氏病果蝇从第24天后发生作用，在加入10mg以及100mg提取液的培养基中的果蝇相对起作用时间较早。因此，三种浓度提取液都能提高帕金森氏病果蝇的攀爬能力，且随着提取液培养基浓度及帕金森氏果蝇龄的增长而增加，呈浓度和时间依赖性。
[0036]
由表3和表4可知提取液培养基作用于果蝇的存活比率：对照组中的雄性帕金森氏病果蝇寿命下降明显，提取液干预培养后，雄性果蝇寿命延长了1.2～3.3％。雌果蝇的寿命延长了1.4～3.3％。在加入1mg、10mg、100mg提取液的培养基浓度下均可延长雄、雌果蝇寿命，并呈现剂量依赖关系。
[0037]
不同浓度提取液作用后，果蝇脑组织病理改变比较：选择果蝇攀爬能力下降较明显的帕金森氏病果蝇，取帕金森氏病果蝇脑组织制作病理切片，刚果红染。帕金森氏病果蝇与对照组相比，其脑组织边缘皮质层得细胞变薄、排列紊乱，空泡增多。取添食提取液的果蝇脑组织病理切片，从病理切片上可见，添食提取液的果蝇脑组织中的细胞有所增加，空泡减少，与果蝇的行为及寿命的改变一致。说明帕金森氏病果蝇的衰老与其脑组织损伤密切相关。因此，提取液具有显著的抗氧化作用，可减缓氧化作用对脑组织的损伤，在临床上可应用于帕金森氏病以及老年性衰老性疾病的治疗。