一种治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物及其制备方法与流程

1.本发明属于兽用中药技术领域，具体涉及一种治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物及其制备方法。


背景技术：

2.结肠小袋纤毛虫(balantidium coli malmsten)属于纤毛虫门动基裂纲毛口目小袋虫科小袋虫属，通常寄生在动物肠壁引发动物腹泻(也称结肠纤毛虫痢疾)。该寄生虫呈全球性分布,多见于常年温暖的热带、亚热带地区。现有研究表明，结肠小袋虫可感染50余种动物，除感染动物外，人的感染率也呈上升趋势。结肠小袋纤毛虫在发育过程中有滋养体和包囊两种形态。新形成的包囊内可见虫体活动，包囊不易受环境压力影响，是病原体的传播阶段。滋养体主要以横二分裂法增殖，侵入肠壁，是寄生在动物肠道的原生动物寄生虫，导致动物机体腹泻、结肠充血、出血、溃疡和穿孔等，给人和动物的健康造成重大威胁。
3.食蟹猴遗传基因与人类的遗传基因有75.0～98.5％相同，具有体型小、性格温顺等优点，常作为国内外重要的实验动物研究模型。目前世界科学研究中对试验结果的准确度要求越来越高，对试验食蟹猴的品质要求也越来越严格。随着实验猴集约化养殖程度的提高，开放环境下饲养的食蟹猴寄生虫感染时有发生，特别是由于结肠小袋纤毛虫的感染，食蟹猴时常发生腹泻与患病。食蟹猴感染寄生虫后血液生理、生化以及免疫学指标发生变化会对试验结果的准确性造成一定的干扰，为了提高实验猴质量和养殖场的经济效益，加强对猴群寄生虫的控制与净化至关重要。
4.目前小袋虫病主要依靠硝基咪唑类药物来控制，最常用的是甲硝唑，在甲硝唑治疗猪和灵长类动物的小袋虫病例中，发现存在反复发作和疗效不明显的情况。另外，甲硝唑具有致癌、致畸等毒副作用，相关法规规定禁止或限制使用此类物质作为动物食品的饲料添加剂。
5.因此，为研究出一种好的药物防治食蟹猴小袋纤毛虫病，减少养殖企业食蟹猴患病腹泻及死亡率，提高实验动物品质质量，本发明提供一种应用中药方法有效防治猴小袋纤毛虫病。


技术实现要素：

6.针对以上问题，本发明提供一种治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物，该中药组合物由艾叶、葛根和青蒿三种中药原料组成，对食蟹猴患小袋纤毛虫病的治愈率有明显提高，具有极好的治疗效果。
7.本发明通过以下技术方案实现：
8.一种治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物，包括如下重量份数的原料：艾叶1～10份、葛根1～10份、青蒿1～10份。
9.作为技术方案的优选，所述中药组合物包括以下重量份数的原料：艾叶3～7份、葛根3～7份、青蒿3～7份。
10.作为技术方案的优选，所述中药组合物包括以下重量份数的原料：艾叶5份、葛根5份、青蒿5份。
11.一种如上所述的治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物的制备方法，按如下步骤制备：
12.(1)粗粉碎：按照重量份数称取中药原料艾叶、葛根和青蒿，经粉碎、混合、过筛，得中药原料混合物；
13.(2)板框压滤：向中药原料混合物中加入水进行浸泡，将浸泡后的中药原料混合物进行板框压滤，得第一次滤液和第一次滤渣，将所得第一次滤液经静置后，收集上清液；
14.(3)超声提取：以乙醇水溶液为提取溶剂，将所得第一次滤渣进行超声提取，得到提取混合物；
15.(4)煎煮：将所得提取混合物经大火煮沸后，慢火煎煮，过滤，得第二次滤液和第二次滤渣；向第二次滤渣中加入水，经大火煮沸后，慢火煎煮，过滤，收集第三次滤液；
16.(5)减压浓缩：合并上清液、第二次滤液和第三次滤液，经减压浓缩，即得到治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物。
17.作为技术方案的优选，步骤(3)中，所述超声提取为于超声频率45～70khz、温度50～70℃的条件下超声提取40～50min。
18.作为技术方案的优选，步骤(4)中，所述慢火煎煮提取混合物的时间为30～50min；所述慢火煎煮第二次滤渣的时间为20～30min。
19.作为技术方案的优选，步骤(4)中，所述煎煮第二次滤渣时的加水量为第二次滤渣重量的3～5倍。
20.作为技术方案的优选，步骤(2)中，所述板框压滤的进料压力为0.6～0.8mpa；所述静置时间为2～3h。
21.作为技术方案的优选，步骤(2)中，所述浸泡为于温度20～35℃下浸泡3～5h。
22.作为技术方案的优选，步骤(2)中，所述浸泡时的加水量为中药原料混合物重量的4～8倍。
23.作为技术方案的优选，步骤(3)中，所述乙醇水溶液的体积分数为40～50％。
24.作为技术方案的优选，步骤(1)中，所述过筛为过40～60目筛。
25.艾叶，性温、味苦、无毒、属纯阳之性、通十二经，具有杀虫消炎、消肿散结、止血止痛、护肝利胆、回阳救逆、抗过敏、理气血、增强免疫力等功效。《本草》载：“艾叶能灸百病”，艾叶在我国民间使用的非常广泛，既能够食用，又能够药用，常用于治疗腹痛血痢、各种出血病、粘膜溃疡、咽喉肿痛、恶寒发热等。
26.青蒿，性寒，味苦、辛，归肝、胆经，具有清热燥湿、抗疟杀虫、抗炎镇痛、凉血止血、调节免疫，抗肿瘤等功效。
27.葛根，性味甘辛而凉，入脾、胃经，具有清热解毒、解痉镇痛，清火泻痢、排脓破血、升阳透疹、解热生津、抗炎抗敏、止血痢的功效，常用于治疗腹痛腹泻、泄泻、痢疾等。
28.与现有技术相比，本发明的优点及有益效果为：
29.1、本发明采用中药药物艾叶、葛根和青蒿并以特定的用量配伍，最终形成能有效治疗食蟹猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物，副作用小，治疗效果显著，艾叶具有杀虫消炎、增强免疫力等作用，青蒿具有清热燥湿、抗疟杀虫、抗炎镇痛等作用，葛根具有清热解
毒、清火泻痢、抗炎抗敏等作用，各成分相互配伍、协调作用，能够有效治疗食蟹猴腹痛腹泻，具有杀虫消炎、抗过敏、理气血、强体质等作用。本发明的中药组合物能显著提高食蟹猴的机体免疫力，增强抗病能力，对小袋纤毛虫病具有很好的抑制作用，显著提高了小袋纤毛虫病的治愈率，降低了食蟹猴的患病腹泻及死亡率，有效地提高实验猴的质量和养殖场的经济效益。
30.2、本发明通过将中药组合物与其他药物甲硝唑、百毒杀等进行治疗效果的实验对比，实验结果表明，甲硝唑、百毒杀对食蟹猴患小袋纤毛虫病的治愈率仅为40％，中药组分为艾叶和葛根的治愈率为60％，而本发明的中药组合物对食蟹猴患小袋纤毛虫病的治愈率有明显提高，达到100％，同时发现治疗过程中猴毛色改善明显，毛色油光靓丽。说明本发明由艾叶、葛根和青蒿三种中药原料组成的中药组合物对猴小袋纤毛虫病具有很好的抑制作用，起到极好的治疗效果，对食蟹猴养殖场防控小袋纤毛虫病有重要指导意义。
31.3、本发明的制备方法煎煮过程中可以对中药成分进行提取，通过加热让水分充分浸润原料，促进原料中有效成分的溶出；辅以超声提取，是以利用超声波产生的强烈空化效应，以及机械效应、热效应促进提取的过程，促进原料中有效成分的溶出；两种提取方法的共同使用可以增加药效成分的提取效果，在满足药效的同时提高提取效率，提高中药原料的利用率。设备简单、操作方便、提取时间短、提取效率高、成本低廉。
32.4、本发明的制备方法对中药原料混合物先进行浸泡再进行板框压滤，能够将原料中的淀粉等成分溶出，从而与原料中的有效成分进行分离，减轻淀粉等成分对后期有效成分的提取过程造成影响，主要避免中药原料混合物中的葛根因含有大量的淀粉，若直接进行高温提取，淀粉糊化容易导致提取物变得粘稠，使得有效成分难以溶出，导致提取效率低的问题。
附图说明
33.图1为经显微镜检查患病食蟹猴粪便发现的小袋纤毛虫图。
具体实施方式
34.下面通过实施例对本发明做进一步地详细说明，这些实施例仅用来说明本发明，并不限制本发明的保护范围。
35.实施例1
36.一种治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物的制备方法，按如下步骤制备：
37.(1)粗粉碎：按照重量份数称取中药原料艾叶5份、葛根5份、青蒿5份，经粉碎、混合、过60目筛，得中药原料混合物；
38.(2)板框压滤：向中药原料混合物中加入6倍中药原料混合物重量的水，于温度30℃下浸泡3h，将浸泡后的中药原料混合物于进料压力为0.8mpa下进行板框压滤，得第一次滤液和第一次滤渣，将所得第一次滤液经静置2h后，收集上清液；
39.(3)超声提取：以体积分数为40％的乙醇水溶液为提取溶剂，将所得第一次滤渣于超声频率45khz、温度60℃的条件下超声提取40min，得到提取混合物；
40.(4)煎煮：将所得提取混合物经大火煮沸后，慢火煎煮40min，过滤，得第二次滤液和第二次滤渣；向第二次滤渣中加入4倍第二次滤渣重量的水，经大火煮沸后，慢火煎煮
30min，过滤，收集第三次滤液；
41.(5)减压浓缩：合并上清液、第二次滤液和第三次滤液，经减压浓缩，即得到治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物。
42.实施例2
43.一种治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物的制备方法，按如下步骤制备：
44.(1)粗粉碎：按照重量份数称取中药原料艾叶7份、葛根6份、青蒿3份，经粉碎、混合、过40目筛，得中药原料混合物；
45.(2)板框压滤：向中药原料混合物中加入4倍中药原料混合物重量的水，于温度25℃下浸泡4h，将浸泡后的中药原料混合物于进料压力为0.6mpa下进行板框压滤，得第一次滤液和第一次滤渣，将所得第一次滤液经静置2.5h后，收集上清液；
46.(3)超声提取：以体积分数为45％的乙醇水溶液为提取溶剂，将所得第一次滤渣于超声频率50khz、温度50℃的条件下超声提取50min，得到提取混合物；
47.(4)煎煮：将所得提取混合物经大火煮沸后，慢火煎煮35min，过滤，得第二次滤液和第二次滤渣；向第二次滤渣中加入3倍第二次滤渣重量的水，经大火煮沸后，慢火煎煮25min，过滤，收集第三次滤液；
48.(5)减压浓缩：合并上清液、第二次滤液和第三次滤液，经减压浓缩，即得到治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物。
49.实施例3
50.一种治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物的制备方法，按如下步骤制备：
51.(1)粗粉碎：按照重量份数称取中药原料艾叶5份、葛根3份、青蒿7份，经粉碎、混合、过60目筛，得中药原料混合物；
52.(2)板框压滤：向中药原料混合物中加入5倍中药原料混合物重量的水，于温度20℃下浸泡5h，将浸泡后的中药原料混合物于进料压力为0.6mpa下进行板框压滤，得第一次滤液和第一次滤渣，将所得第一次滤液经静置3h后，收集上清液；
53.(3)超声提取：以体积分数为50％的乙醇水溶液为提取溶剂，将所得第一次滤渣于超声频率60khz、温度70℃的条件下超声提取40min，得到提取混合物；
54.(4)煎煮：将所得提取混合物经大火煮沸后，慢火煎煮30min，过滤，得第二次滤液和第二次滤渣；向第二次滤渣中加入5倍第二次滤渣重量的水，经大火煮沸后，慢火煎煮30min，过滤，收集第三次滤液；
55.(5)减压浓缩：合并上清液、第二次滤液和第三次滤液，经减压浓缩，即得到治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物。
56.实施例4
57.一种治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物的制备方法，按如下步骤制备：
58.(1)粗粉碎：按照重量份数称取中药原料艾叶10份、葛根7份、青蒿8份，经粉碎、混合、过40目筛，得中药原料混合物；
59.(2)板框压滤：向中药原料混合物中加入8倍中药原料混合物重量的水，于温度35℃下浸泡4h，将浸泡后的中药原料混合物于进料压力为0.7mpa下进行板框压滤，得第一次滤液和第一次滤渣，将所得第一次滤液经静置2h后，收集上清液；
60.(3)超声提取：以体积分数为45％的乙醇水溶液为提取溶剂，将所得第一次滤渣于
超声频率70khz、温度70℃的条件下超声提取45min，得到提取混合物；
61.(4)煎煮：将所得提取混合物经大火煮沸后，慢火煎煮30min，过滤，得第二次滤液和第二次滤渣；向第二次滤渣中加入5倍第二次滤渣重量的水，经大火煮沸后，慢火煎煮30min，过滤，收集第三次滤液；
62.(5)减压浓缩：合并上清液、第二次滤液和第三次滤液，经减压浓缩，即得到治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物。
63.实施例5
64.一种治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物的制备方法，按如下步骤制备：
65.(1)粗粉碎：按照重量份数称取中药原料艾叶4份、葛根6份、青蒿10份，经粉碎、混合、过40目筛，得中药原料混合物；
66.(2)板框压滤：向中药原料混合物中加入7倍中药原料混合物重量的水，于温度35℃下浸泡3h，将浸泡后的中药原料混合物于进料压力为0.8mpa下进行板框压滤，得第一次滤液和第一次滤渣，将所得第一次滤液经静置3h后，收集上清液；
67.(3)超声提取：以体积分数为50％的乙醇水溶液为提取溶剂，将所得第一次滤渣于超声频率60khz、温度50℃的条件下超声提取50min，得到提取混合物；
68.(4)煎煮：将所得提取混合物经大火煮沸后，慢火煎煮45min，过滤，得第二次滤液和第二次滤渣；向第二次滤渣中加入3倍第二次滤渣重量的水，经大火煮沸后，慢火煎煮25min，过滤，收集第三次滤液；
69.(5)减压浓缩：合并上清液、第二次滤液和第三次滤液，经减压浓缩，即得到治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物。
70.实施例6
71.一种治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物的制备方法，按如下步骤制备：
72.(1)粗粉碎：按照重量份数称取中药原料艾叶1份、葛根3份、青蒿1份，经粉碎、混合、过60目筛，得中药原料混合物；
73.(2)板框压滤：向中药原料混合物中加入4倍中药原料混合物重量的水，于温度25℃下浸泡3h，将浸泡后的中药原料混合物于进料压力为0.6mpa下进行板框压滤，得第一次滤液和第一次滤渣，将所得第一次滤液经静置2h后，收集上清液；
74.(3)超声提取：以体积分数为40％的乙醇水溶液为提取溶剂，将所得第一次滤渣于超声频率50khz、温度55℃的条件下超声提取40min，得到提取混合物；
75.(4)煎煮：将所得提取混合物经大火煮沸后，慢火煎煮30min，过滤，得第二次滤液和第二次滤渣；向第二次滤渣中加入3倍第二次滤渣重量的水，经大火煮沸后，慢火煎煮20min，过滤，收集第三次滤液；
76.(5)减压浓缩：合并上清液、第二次滤液和第三次滤液，经减压浓缩，即得到治疗猴结肠小袋纤毛虫病的中药组合物。
77.实验例1
78.为验证本发明的中药组合物对猴结肠小袋纤毛虫病的治疗效果，进行实验研究。设计实验组：a化药1组(甲硝唑)、b化药2组(百毒杀-含10％癸甲臭铵)、c中药1组(艾叶、葛根)、d中药2组(实施例1的中药组合物)、e阳性对照组、f阴性对照组共6组，每组5只实验猴，共30只实验猴，各药物组及阳性猴为临床出现拉稀并经采样检测出小袋纤毛虫的阳性猴，
如图1所示，图1为经显微镜检查阳性猴粪便发现的小袋纤毛虫图，阴性对照组为临床表现健康并经采样检测无小袋纤毛虫的阴性猴。各实验组按实验设计定期喂药与镜检观察，实验过程中药物用量和治愈情况如表1所示。
79.表1猴结肠小袋纤毛虫病治疗实验效果统计
[0080][0081]
结果经过5天给药后，药物组在治疗后7天和14天达到稳定治疗效果，a、b、c、d组治愈率分别为40％、40％、60％、100％，说明d中药2组(实施例1的中药组合物)对猴结肠小袋纤毛虫病具有很好的抑制作用，起到极好的治疗效果，同时发现该组猴毛色改善明显，毛色油光靓丽。且将该中药组合物在广西桂东灵长类开发实验有限公司食蟹猴养殖场中批量应用，治疗效果很好，对食蟹猴养殖场防控小袋纤毛虫病有重要指导意义。
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以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换等，均应包含在本发明的保护范围之内。