一种纳豆激酶肠溶胶囊及制备方法

1.本发明属于药物制剂技术领域，具体涉及一种纳豆激酶肠溶胶囊及制备方法。


背景技术：

2.血栓性疾病是目前死亡率占首位的病症，对中老年人的生命和健康有严重危害，且血栓病人呈年轻化趋势，其发病率和死亡率逐年上升。
3.纳豆激酶是纳豆芽孢杆菌分泌的一种碱性丝氨酸蛋白酶，有较强的溶血栓作用，能够改善血液粘度，可增加血管弹性，是一种安全有效的绿色溶血栓药物。
4.与目前临床上使用的治疗心脑血管栓塞的药物如尿激酶、链激酶及组织型纤溶酶原激活物等比较，纳豆激酶具有以下优点：纳豆激酶的分子量比较小，更容易被人体吸收；可以直接被消化道吸收，因此可以做成口服性溶血栓药物；纳豆激酶直接作用于纤维蛋白，迅速高效；用细菌发酵，成本低廉；无抗原性；安全无毒等。
5.人体胃液ph值为0.9-1.8，人体肠液ph值为8.4左右。而纳豆激酶是碱性蛋白酶，在ph7-9的弱碱性环境下酶活长期稳定，在胃液酸性环境会迅速失活。若直接服用，纳豆激酶经过通过胃，酶活会大大降低甚至完全失活，没办法被人体吸收利用。
6.海藻酸钠是无毒食品，早在1938年就已被收入美国药典。海藻酸钠含有大量的-coo-，在水溶液中可表现出聚阴离子行为，具有一定的黏附性。在酸性条件下，-coo-转变成-cooh，电离度降低，海藻酸钠的亲水性降低，分子链收缩，ph值增加时，-cooh基团不断地解离，海藻酸钠的亲水性增加，分子链伸展。因此，海藻酸钠具有明显的ph敏感性。海藻酸钠可以在极其温和的条件下快速形成凝胶，当有ca
2
、sr
2
等阳离子存在时，g单元上的na

与二价阳离子发生离子交换反应，g单元堆积形成交联网络结构，从而形成水凝胶。海藻酸钠形成凝胶的条件温和，这可以避免制作过程中酶失活。
7.申请文件201910169887.x公开了一种纳豆激酶肠溶片及其制备方法。该豆激酶肠溶片剂型为片剂。


技术实现要素：

8.为解决现有技术的不足，本发明提供了一种纳豆激酶肠溶胶囊及制备方法。
9.本发明所提供的技术方案如下：
10.一种纳豆激酶肠溶胶囊的制备方法，包括以下步骤：
11.1)配制浓度为1wt％-5wt％的海藻酸钠与浓度为0.1wt％-0.5wt％的羧甲基纤维素钠的混合溶液，加热搅拌均匀；
12.2)待步骤1)得到的所述混合溶液冷却至室温后加入酶活为83-133fu/ml的纳豆激酶溶液，搅拌均匀，静置消泡，所述混合溶液与所述纳豆激酶溶液的体积用量比为(1.8-2.2):1；
13.3)将消泡后的溶液逐滴地滴入到浓度为0.2wt％-1.5wt％的cacl2溶液中，形成小球，静置固化0.5-2小时，用筛网滤出小球，再用超纯水冲洗，即得纳豆激酶肠溶胶囊。
14.上述技术方案以海藻酸钠为主要壁材，纳豆激酶为内容物，利用海藻酸钠的性质来保护纳豆激酶，将纳豆激酶制成具有肠溶性的胶囊，使其能顺利通过胃酸环境并保留一定的酶活，最终在肠道中释放，被人体吸收，发挥作用。
15.通过上述方案制得的纳豆激酶肠溶胶囊粒径均一且包埋率高。制得的纳豆激酶肠溶胶囊能有效抵御胃酸环境并在肠液环境中得以释放。
16.具体的，步骤3)中，筛网的孔径为1.5mm-2.0mm。
17.具体的，可用蠕动泵配合孔径合适的针头，来滴加消泡后的溶液。
18.本发明还提供了上述制备方法制备得到的纳豆激酶肠溶胶囊。
19.具体的，纳豆激酶肠溶胶囊的粒径为2.5mm-4mm。
20.上述的技术方案中，过大的粒径会导致胶囊机械强度低，易破碎；过小的粒径会导致纳豆激酶胶囊机械强度高，不利于纳豆激酶在肠液中的释放。
21.上述的制备方法中，海藻酸钠浓度过高会导致海藻酸钠混合溶液过于粘稠，难以通过针头挤出胶囊；海藻酸钠浓度过低会导致海藻酸钠混合溶液滴入cacl2溶液时，胶囊不成型，破碎在溶液中。
22.具体的，纳豆激酶肠溶胶囊的包埋率大于或等于77.7％。
23.本发明所制得的纳豆激酶肠溶胶囊为淡黄色规则球体，直径为2.5mm-4mm，包埋率高，能有效保护纳豆激酶不在胃酸环境中失活，并在肠液中释放。
附图说明
24.图1是本发明所提供的纳豆激酶肠溶胶囊的光学照片。
具体实施方式
25.以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
26.下述实例中，制作纳豆激酶肠溶胶囊所用的纳豆激酶溶液为实验室发酵生产所得，每批次酶活会有差异，以胶囊包埋率以及胶囊与裸酶的对比为衡量标准。
27.实例1
28.一种纳豆激酶肠溶胶囊的制作方法，步骤如下：
29.1、称取海藻酸钠1.0g，羧甲基纤维素钠0.06g，倒入50ml锥形瓶中，加入20ml纯水，放于磁力搅拌器上加热搅拌至完全溶解。
30.2、待步骤1的溶液冷却至室温后，向其中加入10ml纳豆激酶溶液，放于磁力搅拌器上搅拌均匀，然后静置30分钟消除溶液中的气泡。
31.3、配制20ml浓度为0.5％的cacl2溶液于50ml锥形瓶中，放置于磁力搅拌器上，加入转子缓慢搅拌。
32.4、将10ml步骤2所得溶液逐滴滴入步骤3所配溶液中，边滴边搅拌。滴完后静置1小时。
33.5、用滤网滤出步骤4所得胶囊，并用超纯水冲洗3遍，即得纳豆激酶肠溶胶囊。
34.6、同时测量纳豆激酶原液和cacl2溶液中残留的纳豆激酶酶活，计算包埋率。
35.7、将步骤5制得的胶囊放于人工胃液中37℃、180r/min处理2小时，将胶囊滤出用
超纯水冲洗3遍，再放入人工肠液中37℃、180r/min处理3小时，测量人工肠液中的酶活。同时将纳豆激酶原液放于人工胃液中37℃、180r/min处理2小时，测量人工胃液中的酶活。
36.本实例制得的纳豆激酶肠溶胶囊为淡黄色规则的球体。纳豆激酶原液酶活为92.30fu/ml，cacl2溶液中残留的纳豆激酶酶活为20.58fu/ml，胶囊的包埋率为77.7％。经过胃酸处理后，纳豆激酶裸酶活性仅剩1.36fu/ml；而纳豆激酶肠溶胶囊经过胃液的两小时肠液三小时后酶活为17.25fu/ml。
37.实例2
38.1、称取海藻酸钠0.6g，羧甲基纤维素钠0.06g，倒入50ml锥形瓶中，加入20ml纯水，放于磁力搅拌器上加热搅拌至完全溶解。
39.2、待步骤1的溶液冷却至室温后，向其中加入10ml纳豆激酶溶液，放于磁力搅拌器上搅拌均匀，然后静置30分钟消除溶液中的气泡。
40.3、配制20ml浓度为0.5％的cacl2溶液于50ml锥形瓶中，放置于磁力搅拌器上，加入转子缓慢搅拌。
41.4、将10ml步骤2所得溶液逐滴滴入步骤3所配溶液中，边滴边搅拌。滴完后静置1小时。
42.5、用滤网滤出步骤4所得胶囊，并用超纯水冲洗3遍，即得纳豆激酶肠溶胶囊。
43.6、同时测量纳豆激酶原液和cacl2溶液中残留的纳豆激酶酶活，计算包埋率。
44.7、将步骤5制得的胶囊放于人工胃液中37℃、180r/min处理2小时，将胶囊滤出用超纯水冲洗3遍，再放入人工肠液中37℃、180r/min处理3小时，测量人工肠液中的酶活。同时将纳豆激酶原液放于人工胃液中37℃、180r/min处理2小时，测量人工胃液中的酶活。
45.本实例制得的纳豆激酶肠溶胶囊为淡黄色规则的球体。纳豆激酶原液酶活为85.40fu/ml，cacl2溶液中残留的纳豆激酶酶活为15.29fu/ml，胶囊的包埋率为82.1％。经过胃酸处理后，纳豆激酶裸酶已完全失活；而纳豆激酶肠溶胶囊经过胃液的两小时肠液三小时后酶活为17.50fu/ml。
46.实例3
47.1、称取海藻酸钠0.6g，羧甲基纤维素钠0.1g，倒入50ml锥形瓶中，加入20ml纯水，放于磁力搅拌器上加热搅拌至完全溶解。
48.2、待步骤1的溶液冷却至室温后，向其中加入10ml纳豆激酶溶液，放于磁力搅拌器上搅拌均匀，然后静置30分钟消除溶液中的气泡。
49.3、配制20ml浓度为1.5％的cacl2溶液于50ml锥形瓶中，放置于磁力搅拌器上，加入转子缓慢搅拌。
50.4、将10ml步骤2所得溶液逐滴滴入步骤3所配溶液中，边滴边搅拌。滴完后静置1小时。
51.5、用滤网滤出步骤4所得胶囊，并用超纯水冲洗3遍，即得纳豆激酶肠溶胶囊。
52.6、同时测量纳豆激酶原液和cacl2溶液中残留的纳豆激酶酶活，计算包埋率。
53.7、将步骤5制得的胶囊放于人工胃液中37℃、180r/min处理2小时，将胶囊滤出用超纯水冲洗3遍，再放入人工肠液中37℃、180r/min处理3小时，测量人工肠液中的酶活。同时将纳豆激酶原液放于人工胃液中37℃、180r/min处理2小时，测量人工胃液中的酶活。
54.本实例制得的纳豆激酶肠溶胶囊为淡黄色规则的球体。纳豆激酶原液酶活为
133.00fu/ml，cacl2溶液中残留的纳豆激酶酶活为28.46fu/ml，胶囊的包埋率为78.6％。经过胃酸处理后，纳豆激酶裸酶活性仅剩2.10fu/ml；而纳豆激酶肠溶胶囊经过胃液的两小时肠液三小时后酶活为20.35fu/ml。
55.实例4
56.1、称取海藻酸钠0.6g，羧甲基纤维素钠0.06g，倒入50ml锥形瓶中，加入20ml纯水，放于磁力搅拌器上加热搅拌至完全溶解。
57.2、待步骤1的溶液冷却至室温后，向其中加入10ml纳豆激酶溶液，放于磁力搅拌器上搅拌均匀，然后静置30分钟消除溶液中的气泡。
58.3、配制20ml浓度为0.8％的cacl2溶液于50ml锥形瓶中，放置于磁力搅拌器上，加入转子缓慢搅拌。
59.4、将10ml步骤2所得溶液逐滴滴入步骤3所配溶液中，边滴边搅拌。滴完后静置1小时。
60.5、用滤网滤出步骤4所得胶囊，并用超纯水冲洗3遍，即得纳豆激酶肠溶胶囊。
61.6、同时测量纳豆激酶原液和cacl2溶液中残留的纳豆激酶酶活，计算包埋率。
62.7、将步骤5制得的胶囊放于人工胃液中37℃、180r/min处理2小时，将胶囊滤出用超纯水冲洗3遍，再放入人工肠液中37℃、180r/min处理3小时，测量人工肠液中的酶活。同时将纳豆激酶原液放于人工胃液中37℃、180r/min处理2小时，测量人工胃液中的酶活。
63.本实例制得的纳豆激酶肠溶胶囊为淡黄色规则的球体。纳豆激酶原液酶活为83.30fu/ml，cacl2溶液中残留的纳豆激酶酶活为18.24fu/ml，胶囊的包埋率为78.1％。经过胃酸处理后，纳豆激酶裸酶活性仅剩0.67fu/ml；而纳豆激酶肠溶胶囊经过胃液的两小时肠液三小时后酶活为18.00fu/ml。
64.以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。