R的制作方法

r
é
otier水用于维持皮肤微生物群平衡的美容用途
技术领域
1.本发明涉及r
é
otier水用于维持皮肤微生物群平衡的美容用途。


背景技术：

2.人体皮肤是一个平衡的系统。数以千计的细菌、病毒、真菌和螨虫在其中定殖，它们构成了所谓的皮肤微生物群或皮肤菌群。菌群平衡的任何改变，换句话说细菌稳态的任何破坏，都会导致皮肤障碍。
3.宏基因组学使鉴定皮肤微生物群的组成成为可能。凭借这种测序方法，可以对各种不同的细菌物种系统分类。因此，除了已知的细菌(表皮葡萄球菌(staphylococcus epidermidis)、人葡萄球菌(staphylococcus hominis)、链球菌、丙酸杆菌和棒状杆菌)之外，宏基因组学和其他分子技术还揭示出皮肤含有超过300种共生细菌亚种。
4.皮肤菌群的分布和组成因皮肤区域而异，这主要是由存在的水分含量和皮脂含量造成的。此外，皮肤微生物群的微生物组成在数量和种类方面存在个体间差异。
5.皮肤微生物群的组成是局部条件与微生物代谢特性之间的平衡的结果。此外，除了内在因素例如年龄、性别、遗传背景和免疫反应性之外，外在因素例如气候(温度、环境湿度、紫外线)、药物治疗(抗生素、皮质激素)、住院、穿着衣服的类型、洗剂、霜剂、清洁剂、除臭剂或止汗剂的使用、清洗频率、外伤的存在和许多其他因素，都会对皮肤微生物群落的组成产生相当大的影响，并且会影响皮肤微生物群的微妙平衡。
6.因此，对能够维持皮肤微生物群平衡的美容产品存在着需求。
7.已知r
é
otier水的美容应用通过增强皮肤屏障来改善皮肤保湿。


技术实现要素：

8.发明人现在已经鉴定了r
é
otier水的新特性，他们提出在美容应用中利用这些特性来维持皮肤微生物群的平衡。
9.根据本发明，r
é
otier水的局部施用使得可以维持皮肤微生物群的平衡，特别是避免由环境引起的变化。因此，本发明涉及r
é
otier水作为旨在使皮肤微生物群稳定，从而维持皮肤质量和/或防止或减少皮肤瑕疵的药剂的美容用途。
10.r
é
otier水的局部施用尤其可以防止由使用侵蚀性皮肤去污剂或清洁剂、由暴露于紫外线或蓝光或由体育锻炼造成的体温和/或出汗增加而引起的皮肤微生物群失衡。
11.r
é
otier水还可以限制或减少鳞屑的积累，从而尤其可以维持光滑的皮肤表面和/或有助于均匀光滑的外观。
12.r
é
otier水可以以喷雾形式或以适合于局部施用的任何形式直接使用，优选在皮肤上，特别是以乳剂、霜剂、洗剂、凝胶、面膜、洗发水、护发产品、发膜、发乳或发蜡的形式。r
é
otier水尤其可以包含在免洗组合物中，特别是护理组合物、化妆组合物如粉底或防晒组合物中。
附图说明
13.图1：在d0和d56时未处理的香农多样性指数。在d0和d56时，来自于未经历处理的皮肤样品的分类多样性研究的统计检验的结果。所述香农多样性指数不仅考虑了分类多样性(otu)，而且考虑了其在样品中的相对丰度。
14.图2：在d0和d56时未处理的多样性指数(运算分类单位，otu)。在d0和d56时，来自于未经历处理的皮肤样品的分类多样性研究的统计检验的结果。
15.图3：在d0和d56时使用r
é
otier水处理的香农多样性指数。在d0和d56时，来自于已用r
é
otier水处理的皮肤样品的分类多样性研究的统计检验的结果。
16.图4：在d0和d56时使用r
é
otier水处理的多样性指数(otu)。在d0和d56时，来自于已用r
é
otier水处理的皮肤样品的分类多样性研究的统计检验的结果。
17.图5：在d0和d56时，比较了同一个体的两个手臂之间的香农多样性指数。
18.a.在d0时，尚未处理的区域(“活化前”)与对照区域之间的相关性。将线性相关应用于保持不处理的区域(对照区域)与随后被处理的区域(“活化前”)之间d0时的采样。
19.b.在d56时处理过的手臂与未处理的手臂之间的相关性。将线性相关应用于处理与未处理的区域之间d56时的采样。
20.图6：通过加权unifrac分析得出的距离指数。该图示出了样品之间计算的距离或差异评分。
21.图7：r
é
otier水处理后鳞屑积累的限制。该图示出了鳞屑量随时间的变化。统计：配对student’s检验，*与d0相比p《0.05。
22.图8：对经皮失水(tewl)没有影响。该图示出了tewl随时间的变化。统计：配对student’s检验，***与d0相比p《0.01。
23.图9：该图示出了用r
é
otier水处理的受试者和未处理的对照受试者相比角质湿度测量分析随时间的变化。
24.发明详述
25.皮肤微生物群
26.所述美容组合物尤其可以使微生物群稳定，和/或维持和/或避免破坏皮肤菌群、特别是共生菌群的平衡。
27.人类微生物群被定义为与其人类宿主共生生活的微生物群。“共生”微生物在与它们的宿主共生时不引起疾病。
28.术语“皮肤微生物群”、“皮肤微生物组”或“皮肤菌群”旨在意味着存在于皮肤表面、次级皮脂腺和汗腺上、深层真皮和皮下组织中的细菌、分支杆菌、真菌、寄生和病毒微生物的集合。该术语具体来说包括常驻菌群和临时菌群。皮肤微生物群尤其包括属于放线菌门(例如丙酸杆菌和棒状杆菌)、厚壁菌门(例如梭菌)、变形菌门(例如假单胞菌)和拟杆菌门的细菌，以及真菌、螨类(蠕形螨)和病毒，这个名单不是限制性的。细菌属的相对丰度随着皮肤区域(皮脂腺部位、潮湿部位或干燥部位，后者通常表现出更多的变形菌)而变。
29.出于本发明的目的，表述“维持或避免破坏皮肤菌群的平衡”旨在意味着维持或保护在施用所述美容组合物之前存在的皮肤菌群，或在施用所述美容组合物后不存在对所述共生菌群的微生物菌株的致死活性。它还旨在意味着针对例如由环境、特别是高湿度水平、高温或暴露于紫外线或蓝光以及体育锻炼后通常伴随着出汗的体温升高所引起的微生物
群失衡的预防性效果。r
é
otier水的局部施用尤其可以防止因使用侵蚀性皮肤去污剂或清洁剂而导致的皮肤微生物群失衡。表述“使用侵蚀性皮肤去污剂或清洁剂”尤其旨在意味着个体的卫生习惯涉及过度使用皮肤去污剂或清洁剂的情况。
30.术语“使微生物群稳定”包括防止微生物群失衡以便维持皮肤菌群的正常平衡。
31.r
é
otier水
32.r
é
otier水是一种深层来源的天然水，具有恒定的物理化学组成。r
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otier喷泉位于法国的hautes-alpes，r
é
otier市，海拔大约910m。从附近温泉流出的水渗入土壤，然后再次上升，富含矿物质。r
é
otier水的恒定组成描述在下表中。
33.表1
34.组成mg/l180℃下的干燥残渣4121硫酸根1503氯离子943硝酸根0.1正磷酸根0.08钙599镁73钠683钾18铁0.011锰0.014锶11.2铝《0.005硅11.2锂0.8硒《0.005铜《0.005锌《0.005硼1.5
35.因此，r
é
otier水的特征在于高矿物质含量，特别是钙、钠、镁和锶含量。
36.盖仑制剂
37.r
é
otier水可以以雾的形式(其通常可以利用雾化器或汽化器喷洒)，也可以任何适合于局部或皮肤施用的盖仑制剂的形式施用，任选地作为与美容可接受的赋形剂和/或活性剂的混合物。
38.由此配制的美容组合物通常可以包含以重量计1％至100％的r
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otier水。例如，它可以是包含100％的r
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otier水的雾，或者是包含以重量计1％至95％、优选地1％至90％、优选地1％至80％、更优选地1％至70％、1％至60％、1％至50％、1％至40％、1％至30％、1％至20％、1％至10％或1％至5％的r
é
otier水的组合物。在一个优选实施方式中，所述盖伦组合物包含以重量计100％的r
é
otier水。
39.因此可以使用固体、液体或半固体制剂，例如霜剂、乳剂、香膏、泡沫剂、洗剂、精华素、凝胶或霜剂凝胶、洗发剂、护理产品、面膜或养发剂。因此，r
é
otier水可以配制成水包油或油包水乳液、多重乳液、水性、水-醇性或水-乙醇酸溶液或水分散系的形式。可以将r
é
otier水掺入到用于护肤和/或皮肤化妆的各种不同产品例如保湿护理产品或粉底中，或用于清洁皮肤的各种不同产品例如用于卸妆的洗剂、凝胶或乳剂、面膜或其他护发和/或洗发产品例如尤其是洗发水和护发素中。
40.在一个特定实施方式中，所述美容组合物采取水性凝胶或水包油乳液的形式。
41.因此，水性相含有r
é
otier水和任选的去离子水和/或选自多元醇和水性胶凝剂的至少一种组成成分。水总共有利地占所述组合物总重量的30％至95％，优选为30％至90％。所述多元醇具体来说可以选自甘油、丙二醇、丁二醇、戊二醇及其混合物，并且它可以占所述组合物总重量的5％至30％。
42.在一个特定实施方式中，所述美容组合物是包含以重量计30％至95％的r
é
otier水的凝胶。
43.术语“水性胶凝剂”表示能够通过水合来固定水分子并因此提高水性相黏度的聚合化合物。这种胶凝剂可以选自：多糖，例如纤维素及其衍生物、改性淀粉、卡拉胶、琼脂、黄原胶和植物胶例如瓜尔胶或刺槐豆胶；合成聚合物，特别是2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸(amps)与乙烯吡咯烷酮的共聚物，任选交联的丙烯酸钠均聚物，以及丙烯酸类共聚物，特别是丙烯酸钠及其衍生物和/或(甲基)丙烯酸烷基酯和/或(甲基)丙烯酸羟基烷基酯和/或(甲基)丙烯酸(聚乙氧基)烷基酯与任选的至少一种其他单体、有利地是2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸(amps)的共聚物，这些共聚物任选地交联；及其混合物。
44.当存在时，脂肪相可以包含一种或多种挥发性和/或非挥发性油。挥发油的实例是支链烷烃例如异十二烷，以及c
10-c
13
的直链烷烃。作为非挥发油，可以具体提到的是：
[0045]-酸和一元醇的酯，选自：饱和直链c
2-c
10
(优选为c
6-c
10
)酸和饱和直链c
10-c
18
(优选为c
10-c
14
)一元醇的单酯和聚酯，饱和直链c
10-c
20
酸和支链或不饱和c
3-c
20
(优选为c
3-c
10
)一元醇的单酯和聚酯；支链或不饱和c
5-c
20
酸和支链或不饱和c
5-c
20
一元醇的单酯和聚酯；支链或不饱和c
5-c
20
酸和直链c
2-c4一元醇的单酯和聚酯；
[0046]-c
6-c
12
脂肪酸的甘油三酯，例如辛酸和癸酸的甘油三酯和三庚酸甘油酯；
[0047]-支链和/或不饱和c
10-c
20
脂肪酸(例如亚油酸、月桂酸和肉豆蔻酸)；
[0048]-支链和/或不饱和c
10-c
20
脂肪醇(例如辛基十二烷醇和油醇)；
[0049]-烃类，例如角鲨烷(c30)、特别是从橄榄油提取的植物角鲨烷，和半角鲨烷(c15)；
[0050]-碳酸二烷基酯，例如碳酸二辛酯和碳酸二乙基己基酯；
[0051]-二烷基醚，例如二辛基醚；和
[0052]-它们的混合物。
[0053]
还可以提到的是含有一种或多种上述组成成分的植物油。
[0054]
作为酸和一元醇的酯，可以具体提到的是单酯例如可可癸酸酯和辛酸酯的混合物、夏威夷果酸乙酯、乳木果油乙酯、异硬脂酸异硬脂酯、异壬酸异壬酯、异壬酸乙基己酯、新戊酸己酯、新戊酸乙基己酯、新戊酸异硬脂酯、新戊酸异癸酯、肉豆蔻酸异丙酯、肉豆蔻酸辛基十二烷基酯、棕榈酸异丙酯、棕榈酸乙基己酯、月桂酸己酯、月桂酸异戊酯、壬酸鲸蜡硬脂酯、辛酸丙基庚基酯及其混合物。可以使用的其他酯是酸和一元醇的二酯，例如己二酸二
异丙酯、己二酸二乙基己酯、癸二酸二异丙酯和癸二酸二异戊酯。
[0055]
植物油的实例具体来说是小麦胚芽油、葵花籽油、摩洛哥坚果油、芙蓉油、芫荽油、葡萄籽油、芝麻油、玉米油、杏仁油、蓖麻油、乳木果油、鳄梨油、橄榄油、大豆油、甜杏仁油、棕榈油、菜籽油、棉籽油、榛子油、澳洲坚果油、霍霍巴油、苜蓿油、罂粟籽油、南瓜籽油、葫芦油、黑加仑油、月见草油、薰衣草油、琉璃苣油、小米油、大麦油、藜麦油、黑麦油、红花油、烛果油、西番莲油、玫瑰麝香油、蓝蓟油、亚麻荠籽油或山茶油。
[0056]
脂肪相还可以包含至少一种脂肪相构造剂。术语“脂肪相构造剂”旨在意味着能够使组合物中所包含的油增稠的化合物，特别是选自蜡、脂肪相胶凝剂和糊状脂肪物质以及它们的混合物。
[0057]
所述组合物还可以包含可以分散在乳液的脂肪相和/或水性相中的各种不同组成成分，条件是所述组成成分与局部施用到皮肤或任何其他角蛋白材料相容。
[0058]
因此，它可以包含至少一种水包油或油包水乳化剂，所述乳化剂通常是非离子型的，例如聚氧乙烯酯，任选为聚乙氧基化失水山梨糖醇酯，任选为聚乙氧基化的脂肪酸和甘油的酯、脂肪醇和糖的醚例如烷基葡糖苷及其混合物。所述乳化剂可以占所述组合物总重量的2％至10％，优选地4％至6％。
[0059]
所述组合物还可以包含添加剂，其具体来说选自：在蓝光和/或uva和/或uvb中具有活性的有机和/或无机光保护剂；能够形成抗污染保护膜的基于多糖的成膜聚合物，例如由solabia在商品名和下销售的产品；脱屑剂，例如α-和β-羟基酸；去角质颗粒；芳香剂；抗氧化剂；螯合剂；ph调节剂；防腐剂；颜料；染料；及其混合物。
[0060]
美容应用
[0061]
根据本发明使用的组合物被施用到皮肤(特别是面部，但也可以是身体的任何部位)，包括头皮。
[0062]
这种组合物可以每天一次或多次例如在早晨和/或晚上施用到靶区域。
[0063]
所述靶区域是健康的，受试者至少在所述靶区域中未患有皮肤障碍。
[0064]
实施例和附图说明了本发明而不限制其范围。
具体实施方式
[0065]
实施例1(参比)：细菌多样性(α-多样性)随时间的变化
[0066]
为了验证在皮肤微生物群中确实发生了细菌多样性的变化，对在前臂上采集的122个皮肤样品(来自未表现出皮肤障碍的个体)中存在的细菌群落进行了分析。
[0067]
这项研究是基于靶向宏基因组学中的16s分析，并通过序列或运算分类单位(otu)的组的证实来进行。
[0068]
鉴定了来自于17个不同属(放线菌属、芽孢杆菌属、candidatus koribacter属、梭状芽孢杆菌属、埃希氏杆菌属、地杆菌属、富盐菌属、海杆菌属、甲烷短杆菌属、novoshingobium属、土地杆菌属、丙酸杆菌属、假单胞菌属、玫瑰杆菌属、葡萄球菌属、链球菌属、硫化单胞菌属，最具代表性的属是梭状芽孢杆菌属、candidatus koribacter属和海杆菌属)的细菌。
[0069]
运算分类单元(otu)是一个用于将系统发育上接近的个体分组在一起的运算定义。
[0070]
这项研究使得获得在各种不同样品中鉴定到的细菌种群的分类概况成为可能。这些数据用于表示随着组而变的多样性指数。
[0071]
这项分析是基于对两个指数的研究，使得可以评估细菌多样性随时间的变化：
[0072]-香农指数是一种定量度量，它反映了群落中存在的不同类型(otu)的数量，同时考虑了基本实体在这些类型之间的均匀分布。
[0073]
‑“
观察到的otu”指数对应于每个样品检测到的各种不同otu的计数。
[0074]
对所述细菌种群分类情况的研究结果进行的统计分析显示了细菌多样性随时间的变化。
[0075]
另一方面，与香农指数相关的统计结果呈现在图1中。这个指数是基于细菌丰富度(不同细菌物种的数量)和这些物种的相对丰度。图1中呈现的结果显示了在未用r
é
otier水处理的区域中，在d0与d56之间微生物多样性的显著增加(配对wilcoxon检验，*p＝0.0414)。
[0076]
另一方面，也使用“观察到的otu”指数对细菌多样性进行了分析。通过图2的图表可以注意到，在未用r
é
otier水处理的区域上，在d0与d56之间原始固有的微生物多样性(otu的数量)显著增加(配对wilcoxon检验，**p＝0.0017)(图2)。
[0077]
实施例2：r
é
otier水处理后细菌多样性的变化
[0078]
为了测试r
é
otier水对细菌多样性的影响，遵照与实施例1中所述相同的方案，但这次将皮肤样品用r
é
otier水处理。d0与d56之间微生物多样性的比较可以证实r
é
otier水的效果。
[0079]
另一方面，与香农指数相关的统计结果呈现在图3中。这些结果揭示出当所述区域用r
é
otier水处理时，d0和d56时的多样性差异不显著(配对wilcoxon检验，p＝0.4446)。总而言之，这些结果显示在未处理区域上观察到的微生物多样性的增加(图1)在用r
é
otier水处理的区域上受限(图3)。
[0080]
另一方面，与“观察到的otu”多样性指数相关的统计结果呈现在图4中。这些结果证实了r
é
otier水处理导致在d0与d56之间微生物多样性的增加小得多(配对wilcoxon检验，p＝0.0436)。
[0081]
这两个结果可以断言，r
é
otier水通过限制细菌多样性的变化而对皮肤微生物群的稳定化具有影响。
[0082]
实施例3：处理过的手臂与未处理的手臂之间的相关性随时间的变化
[0083]
为了确认r
é
otier水确实对皮肤微生物群的稳定化有影响，在d0和d56时对每位个体的用r
é
otier水处理的手臂和未处理的手臂之间的相关性进行了研究，并将香农多样性指数考虑在内。为此，将线性相关应用于将保持不处理的区域(对照区域)与随后将处理的区域(被表示为“活化前”的区域)之间的d0时的样品样本，以及处理过的区域(处理过的手臂)与未处理的区域(未处理的手臂)之间的d56时的样品样本。
[0084]
从图5a中呈现的结果可以看出，同一志愿者的两条手臂的细菌多样性在d0时确实相关(在将接受处理的区域(“活化前”)与对照区域之间)。计算相关指数对应于值r＝0.72。然而，在将r
é
otier水施用到“活化前”区域上56天后，处理和未处理的两条手臂之间的计算相关指数为r＝0.39，也就是说低于在d0时的计算值。因此，在d0时两条手臂之间存在的相关性在d56时降低(图5b)。
[0085]
治疗过的手臂与未治疗手臂之间的去相关性被认为很可能是由于r
é
otier水对皮肤微生物群的稳定化。事实上，尽管在对照手臂上d56与d0相比α多样性(香农指数)显著增加，但它在用r
é
otier水处理的手臂上保持更稳定。
[0086]
实施例4：微生物群落之间的差异(β-多样性)
[0087]
β-多样性由不同样品的微生物群落之间的距离或差异组成。具体来说，将一种方法用于确定这种差异；它是加权unifrac系统发育方法。这种方法将物种的身份及其丰度考虑在内，并描述了不同样品之间微生物组成的差异。
[0088]
基于unifrac加权系统发育分析的统计研究使得证实个体间和个体内变化性成为可能。
[0089]
图6中呈现的这项分析的结果可以显示，个体间变化性总是保持大于同一个体的两条手臂之间的变化性。
[0090]
因此，微生物群的组成对每位个体特异，并且在同一个体的两个相同区域之间相对相似。
[0091]
在处理56天后，可以注意到同一个体的两条手臂之间的差异(unifrac距离指数)在d56时显著高于d0时(*p＝0.049)，反映出在d56时组成的差异大于d0时。这个结果证实了r
é
otier水对皮肤微生物群的稳定化及其组成的影响，而未处理的手臂的微生物多样性增加并且其组成变化。
[0092]
实施例5：在r
é
otier水处理后鳞屑积累的限制
[0093]
通过在d28和d56时未用r
é
otier水处理的区域与用r
é
otier水处理的区域之间的比较，也研究了r
é
otier水对鳞屑的相对表面积变化的影响。这个分析的结果呈现在图7和表2中。
[0094]
表2
[0095][0096]
这些结果显示，在d28时，与未处理的区域相比，在用r
é
otier水处理的区域上鳞屑积累减少20％。这种减少随着时间更加明显，因为在d56时，与未处理的区域相比，用r
é
otier水处理的区域上鳞屑数量的增加降低51％。
[0097]
鳞屑的减少使得获得更好的表面均匀性以及因此更不粗糙、更光滑的皮肤成为可能。因此，r
é
otier水凭借其减少鳞屑积累的作用，可以恢复或维持皮肤质量。
[0098]
实施例6(参比)：在相同条件下对保湿没有影响
[0099]
与上述实施例中进行的研究平行，评估了r
é
otier水对皮肤保湿的影响。应该指
出，所有这些研究均在夏季条件下，在生活在法国南部的受试者上进行。
[0100]
评估了两种保湿标准：一方面是经皮失水(tewl)，另一方面是角质湿度测量法。
[0101]
tewl可证明皮肤屏障的状况。屏障受损越多，tewl增加得越多。如图8中所示，在整个研究过程中未发现皮肤屏障状况受损，tewl值被认为是正常的。
[0102]
角质湿度测量法测量皮肤表层的保湿程度。如图9中所示，随着时间推移，在所述2个区域上保湿程度仅略有变化，并且不显著。这种变化也与d0时所述两个区域之间的变化保持相同的量级。在d28和d56时所述处理不引起与对照区域的显著差异。
[0103]
这表明，r
é
otier水对维持皮肤微生物群和限制鳞屑的影响与对皮肤保湿的任何影响无关。