肌肉靶向复合物及其用于治疗面肩肱型肌营养不良的用途的制作方法

技术特征：
1.复合物，其包含与分子载荷共价连接的抗转铁蛋白受体抗体，所述分子载荷被配置成用于抑制双同源框4(dux4)的表达或活性，其中：(i)所述抗体包含含有seq id no：15的氨基酸序列的重链可变区(vh)的重链互补决定区1(cdr-h1)、重链互补决定区2(cdr-h2)、重链互补决定区3(cdr-h3)，以及含有seq id no：16的氨基酸序列的轻链可变区(vl)的轻链互补决定区1(cdr-l1)、轻链互补决定区2(cdr-l2)、轻链互补决定区3(cdr-l3)；(ii)所述抗体包含含有seq id no：204的氨基酸序列的vh的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3，以及含有seq id no：205的氨基酸序列的vl的cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3；(iii)所述抗体包含含有seq id no：7的氨基酸序列的vh的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3，以及含有seq id no：8的氨基酸序列的vl的cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3；或者(iv)所述抗体包含含有seq id no：23的氨基酸序列的vh的cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3，以及含有seq id no：24的氨基酸序列的vl的cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3。2.权利要求1所述的复合物，其中所述抗体包含：(i)seq id no：155的cdr-h1，seq id no：156的cdr-h2，seq id no：157的cdr-h3，seq id no：158的cdr-l1，seq id no：159的cdr-l2和seq id no：14的cdr-l3；(ii)seq id no：194的cdr-h1，seq id no：195的cdr-h2，seq id no：196的cdr-h3，seq id no：197的cdr-l1，seq id no：198的cdr-l2和seq id no：193的cdr-l3；(iii)seq id no：145的cdr-h1，seq id no：146、seq id no：267或seq id no：269的cdr-h2，seq id no：147的cdr-h3，seq id no：148的cdr-l1，seq id no：149的cdr-l2和seq id no：6的cdr-l3；或者(iv)seq id no：165、seq id no：271或seq id no：273的cdr-h1，seq id no：166的cdr-h2，seq id no：167的cdr-h3，seq id no：168的cdr-l1，seq id no：169的cdr-l2和seq id no：22的cdr-l3。3.权利要求1或权利要求2所述的复合物，其中所述抗体包含具有以下的人框架区或人源化框架区：(i)seq id no：15中所示的vh的cdr-h1、cdr-h2、cdr-h3，以及seq id no：16中所示的vl的cdr-l1、cdr-l2、cdr-l3；(ii)seq id no：204中所示的vh的cdr-h1、cdr-h2、cdr-h3，以及seq id no：205中所示的vl的cdr-l1、cdr-l2、cdr-l3；(iii)seq id no：7中所示的vh的cdr-h1、cdr-h2、cdr-h3，以及seq id no：8中所示的vl的cdr-l1、cdr-l2、cdr-l3；或者(iv)seq id no：23中所示的vh的cdr-h1、cdr-h2、cdr-h3，以及seq id no：24中所示的vl的cdr-l1、cdr-l2、cdr-l3。4.权利要求1至3中任一项所述的复合物，其中所述抗体选自：(i)包含含有与seq id no：15具有至少80％同一性的氨基酸序列的vh和含有与seq id no：16具有至少80％同一性的氨基酸序列的vl的抗体；(ii)包含含有与seq id no：204具有至少80％同一性的氨基酸序列的vh和含有与seq id no：205具有至少80％同一性的氨基酸序列的vl的抗体，任选地其中所述抗体包含含有seq id no：204的氨基酸序列的vh和含有seq id no：205的氨基酸序列的vl；
(iii)包含含有与seq id no：7具有至少80％同一性的氨基酸序列的vh和含有与seq id no：8具有至少80％同一性的氨基酸序列的vl的抗体；以及(iv)包含含有与seq id no：23具有至少80％同一性的氨基酸序列的vh和含有与seq id no：24具有至少80％同一性的氨基酸序列的vl的抗体。5.权利要求1至4中任一项所述的复合物，其中所述抗体与所述转铁蛋白受体之结合的平衡解离常数(k
d
)为10-11
m至10-6
m。6.权利要求1至5中任一项所述的复合物，其中所述抗体选自全长igg、fab片段、f(ab’)片段、f(ab’)2片段、scfv和fv，任选地其中所述抗体是fab’片段。7.权利要求1至6中任一项所述的复合物，其中所述分子载荷是寡核苷酸。8.权利要求7所述的复合物，其中所述寡核苷酸包含长度为18至30个核苷酸的反义链并且包含与seq id no：258或339的至少15个连续核苷酸互补的区域，任选地其中所述反义链包含与seq id no：261的至少15个连续核苷酸互补的区域。9.权利要求8所述的复合物，其中所述寡核苷酸包含seq id no：248(gggcattttaatatatctctgaact)的至少15个连续核苷酸，其中每个t任选且独立地为u，任选地其中所述寡核苷酸包含seq id no：248(gggcattttaatatatctctgaact)的核苷酸序列，其中每个t任选且独立地为u。10.权利要求6至9中任一项所述的复合物，其中所述寡核苷酸包含一个或更多个磷酸二酰胺吗啉代，任选地其中所述寡核苷酸是磷酸二酰胺吗啉代寡聚物(pmo)。11.权利要求8至10中任一项所述的复合物，其中所述寡核苷酸还包含与所述反义链杂交以形成双链sirna的有义链。12.权利要求11所述的复合物，其中所述寡核苷酸包含至少一个经修饰核苷间键联，任选地其中所述至少一个经修饰核苷间键联是硫代磷酸酯键联。13.权利要求11或权利要求12所述的复合物，其中所述寡核苷酸包含一个或更多个经修饰核苷。14.权利要求13所述的复合物，其中所述一个或更多个经修饰核苷是2’经修饰核苷。15.权利要求14所述的复合物，其中2’经修饰核苷酸选自：2
’‑
o-甲基(2
’‑
o-me)、2
’‑
氟(2
’‑
f)、2
’‑
o-甲氧基乙基(2
’‑
moe)和2’，4
’‑
双环核苷。16.权利要求15所述的复合物，其中所述2’，4
’‑
双环核苷选自：锁核酸(lna)、亚乙基桥联核酸(ena)和(s)-约束性乙基桥联核酸(cet)。17.权利要求1至16中任一项所述的复合物，其中所述肌肉靶向剂通过以下与所述分子载荷共价连接：(i)可切割接头，任选地其中所述可切割接头包含缬氨酸-瓜氨酸二肽序列；或者(ii)不可切割接头，任选地其中所述不可切割接头是烷烃接头。18.权利要求1至17中任一项所述的复合物，其中所述分子载荷通过与所述抗体的赖氨酸残基或半胱氨酸残基的缀合与所述抗体连接。19.抑制细胞中dux4的表达或活性的方法，所述方法包括使所述细胞与有效用于促进分子载荷内化至所述细胞之量的权利要求1至18中任一项所述的复合物接触。20.治疗在4号染色体中具有与面肩肱型肌营养不良(fshd)相关的d4z4重复的一个或更多个缺失的对象的方法，所述方法包括向所述对象施用有效量的权利要求1至18中任一
项所述的复合物。

技术总结
本公开内容的一些方面涉及包含与分子载荷共价连接的肌肉靶向剂的复合物。在一些实施方案中，所述肌肉靶向剂与肌细胞上的内化细胞表面受体特异性结合。在一些实施方案中，所述分子载荷抑制DUX4的表达或活性。在一些实施方案中，所述分子载荷是寡核苷酸，例如反义寡核苷酸或RNAi寡核苷酸。苷酸或RNAi寡核苷酸。苷酸或RNAi寡核苷酸。


技术研发人员：罗梅什
受保护的技术使用者：达因疗法公司
技术研发日：2021.01.08
技术公布日：2022/11/15