一种提高茄子基因编辑效率的CRISPR/Cas9载体

技术特征：
1.一种提高茄子基因编辑效率的crispr/cas9载体，其特征在于，茄子内源u6-1启动子驱动sgrna的表达。2.根据权利要求1所述，载体构建步骤如下：以pp1c.4载体为骨架，将smu6-1启动子替换pp1c.4中的拟南芥u6启动子，得到适用于茄子的基因编辑载体，命名为psmp1c，茄子u6-1启动子的序列如seq id no:1所示，所述的茄子u6-1启动子是与拟南芥u6基因同源的茄子u6-1基因启动子序列进行再克隆得到的序列，所述克隆过程中引物序列为：f1:5’_gacaacatctgccattgga_3’r1:5’_gaactcattacttcgctagg_3 。3.根据权利要求2所述的方法，茄子u6-1启动子替换pp1c.4中的拟南芥u6启动子，具体步骤是扩增茄子u6-1启动子后对扩增产物和pp1c.4载体分别进行ecori和xbai酶切，酶切产物连接，得到编辑载体psmp1c；茄子u6-1启动子扩增引物：f2:5’_cggaattcgacaacatctgccattgga_3’r2:5’_gctctagagaactcattacttcgctagg_3’。4.权利要求1所述的提高茄子基因编辑效率的crispr/cas9载体在茄子中进行基因编辑的应用。

技术总结
本发明涉及一种提高茄子基因编辑效率的CRISPR/Cas9载体，属于生物技术领域。本发明构建了能高效表达sgRNA的CRISPR/Cas9载体，建立了一套提高茄子基因编辑效率的CRISPR/Cas9体系。相对于现有的茄子编辑载体，本发明所构建的基因编辑载体能够更高效地对茄子基因进行定向编辑，能在茄子育种改良和基因功能研究中得以运用。得以运用。


技术研发人员：杨艳 周晓慧 王丹 庄勇 刘军 刘松瑜
受保护的技术使用者：江苏省农业科学院
技术研发日：2021.04.24
技术公布日：2022/11/10