1.本发明涉及通过施用pd-1轴结合拮抗剂(如抗pd1或抗pd-l1抗体)和免疫反应细胞(如t细胞)的组合来治疗癌症或肿瘤，该t细胞呈递异源t细胞受体(tcellreceptor，tcr)或嵌合抗原受体(chimericantigenreceptor，car)。
背景技术：
：：2.肿瘤微环境中的免疫耐受、t细胞耗竭和功能抑制是对癌症免疫治疗的挑战，成功治疗癌症的一个目标是寻求旨在打破肿瘤微环境内的耐受并增强和维持t细胞活化的疗法。3.抗肿瘤免疫反应始于树突状细胞(dendriticcell，dc)引起的释放和摄取肿瘤抗原，该树突状细胞处理抗原并通过mhc将其呈递给呈递抗原特异性t细胞受体的t细胞，这种对t细胞的刺激导致它们的活化和增殖。有效的抗肿瘤免疫反应需要维持活化的t细胞反应才能有效消除肿瘤。问题仍然在于，肿瘤微环境被肿瘤细胞本身和髓源性抑制细胞(myeloid-derivedsuppressorcells，mdscs)和调节性t细胞(regulatorytcell，tregs)的抑制性免疫群体赋予免疫抑制；此外，免疫耐受可以源自于抗肿瘤免疫反应的任何关键阶段的抑制，即树突状细胞；抗原呈递，主要的组织相容性复合物；t细胞的启动、信号传导、激活或运输或t细胞渗透到肿瘤中，t细胞受体；mdsc、tregs和癌症相关的纤维细胞，其促进更高水平的抑制性配体和细胞因子。这个问题可能导致患者通过对过继转移免疫效应物(如抗肿瘤单克隆抗体、嵌合抗原受体(chimericantigenreceptor，car)t细胞、tcr工程t细胞)而对癌症疗法缺乏反应，或患者在治疗后仍复发，尽管循环中存在可测量的抗体或转导的t细胞。一些癌症，如食道癌、胃癌、肝癌、胆管癌、胰腺癌、头颈癌、肺癌、卵巢癌、乳腺癌，似乎在这方面存在特殊的问题。4.原发性和获得性耐药性对使用检查点抑制剂进行有效的癌症和肿瘤治疗也是一个越来越大的挑战，例如使用抗pd1或抗pd-l1抗体的pd-1轴结合拮抗剂治疗。人们认为这种抗性的基础是多种机制的，例如，肿瘤微环境抑制因子、低肿瘤免疫原性、肿瘤的pd1抗性、t细胞浸润或排斥机制、肿瘤对干扰素的抗性以及t细胞引起的对额外的检查点抑制剂受体的上调。一些癌症出现高度耐药的检查点抑制剂治疗、部分患者反应、无反应和患者对检查点抑制剂治疗产生获得性耐药是癌症疗法中的一个重要问题。5.因此，需要开发解决对癌症和肿瘤的检查点抑制剂疗法的原发性和获得性耐药性并改善t细胞功能、增强t细胞存活持久性和功效、激活免疫系统和/或克服局部免疫抑制性肿瘤微环境的疗法。6.本发明涉及癌症和/或肿瘤的联合治疗，其包括pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群，该联合治疗导致增强对癌症或肿瘤的免疫反应。技术实现要素：7.本发明涉及癌症和/或肿瘤的联合治疗，其包括pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。优选地，联合治疗导致增强对癌症或肿瘤的免疫反应。8.本发明提供了一种治疗、预防或延缓受试者癌症和/或肿瘤的进展的方法，包括向受试者施用有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。还提供了一种增强受试者对癌症和/或肿瘤的免疫反应的方法，包括向受试者施用有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。9.本发明还提供pd-1轴结合拮抗剂与表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群的组合，用于治疗、预防或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展或用于增强对癌症和/或肿瘤的免疫反应。10.本发明还提供了pd-1轴结合拮抗剂与表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群的组合在制造用于治疗、预防或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展或者用于增强对癌症和/或肿瘤的免疫反应的药剂中的用途。11.本发明还提供了一种用于治疗、预防或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展或用于增强对癌症或肿瘤的免疫反应的一种或多种药物的制造方法，包括使用pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。12.还提供了一种治疗、预防或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展的方法，包括向受试者施用治疗方案，该治疗方案包括有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。13.本发明还提供了一种pd-1轴结合拮抗剂，其用于治疗、预防或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展的方法中，该方法包括向受试者施用一种治疗方案，该治疗方案包括有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。14.还提供了一种用于增强受试者对癌症和/或肿瘤的免疫反应的方法，包括向受试者施用一种治疗方案，该治疗方案包括有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。15.本发明还提供了一种pd-1轴结合拮抗剂，用于增强受试者对癌症和/或肿瘤的免疫反应的方法中，该方法包括向受试者施用一种治疗方案，该治疗方案包括有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。16.根据本发明，治疗导致在受试者的完全反应、部分反应或疾病稳定；和/或治疗期间或治疗停止后受试者的持续反应；任选地，相对于施用治疗之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞治疗，治疗得到改善。17.pd-1轴结合拮抗剂18.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂是一种分子，其抑制pd-1轴结合伴侣(bindingpartner)与其同类的(cognate)结合伴侣的相互作用或减少、阻止或抑制源自于pd-1与一个或多个pd-1的结合伴侣(例如pd-l1和pd-l2)的相互作用的信号转导。pd-1轴结合拮抗剂可以减少、抑制或阻止pd1轴对t细胞介导的抑制作用或克服t细胞功能障碍或耗竭，例如产生恢复或增强t细胞功能的结果，例如通过t细胞增殖、细胞因子产生、靶细胞杀伤、活化、cd28信号传导、浸润肿瘤、识别和结合树突状细胞呈递的抗原和/或产生干扰素的能力来指示。19.根据本发明，在其拮抗、阻断、抑制或降低其结合的抗原(例如pd-1相关靶标)的生物学活性的意义上，pd-1轴结合拮抗剂可以是拮抗剂。因此，pd-1轴结合拮抗剂可以拮抗、阻断、抑制或减少通过pd-1的信号传导，从而恢复t细胞的功能性反应，例如t细胞增殖、细胞因子产生、靶细胞杀伤，从而将t细胞从功能障碍状态拯救到抗原刺激状态，并增强t细胞功能，例如通过克服t细胞耗竭、无反应性(anergy)、功能障碍、肿瘤免疫、增强肿瘤免疫原性或改善持续反应。20.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以是(a)pd-1拮抗剂和/或结合拮抗剂，(b)pd-l1拮抗剂和/或结合拮抗剂，(c)pd-l2拮抗剂和/或结合拮抗剂。pd-1轴结合拮抗剂可以结合pd-1和/或结合到seqidno:1，或(b)结合pd-l1和/或结合到seqidno:2。21.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以(a)抑制pd-1与其配体结合伴侣的结合，(b)抑制pd-l1与其配体结合伴侣的结合。22.因此，当pd-1轴结合拮抗剂是pd-1结合拮抗剂时，它可以抑制pd-1与以下中的一者或多者的结合：(a)pd-l1，(b)pd-l2，或(c)pd-l1和pd-l2。pd-1结合拮抗剂可以包括抗pd-1抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白和寡肽，其由于pd-1与pd-l1和/或pd-l2的相互作用而抑制、减少、阻止或干扰信号转导。pd-1结合拮抗剂可以减少负共刺激信号，该负共刺激信号由t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导或通过t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导，和/或通过pd-1的信号传导来介导，从而使功能障碍的t细胞功能障碍降低，从而增强响应抗原的t细胞效应器功能，和/或增强t细胞功能，例如通过克服t细胞耗竭、无反应性、功能障碍、肿瘤免疫、增强肿瘤免疫原性和/或改善持续反应。23.因此，当pd-1轴结合拮抗剂是pd-l1结合拮抗剂时，它可以抑制pd-l1与其一种或多种结合伴侣(例如(a)pd1、(b)cd80、(c)b7-1)的结合，和/或减少、抑制、阻止或干扰由pd-l1与其一种或多种结合伴侣相互作用产生的信号转导。pd-l1结合拮抗剂可以包括抗pd-l1抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白或寡肽，和/或可以减少负共刺激信号，该负共刺激信号由在t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导或通过在t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导，和/或通过pd-l1的信号传导介导，从而使功能障碍的t细胞功能障碍降低，从而增强对抗原的t细胞效应器响应，和/或增强t细胞功能，例如通过克服t细胞耗竭、无反应性、功能障碍、肿瘤免疫、增强肿瘤免疫原性或改善持续反应。24.因此，当pd-1轴结合拮抗剂可以是pd-l2结合拮抗剂时，它可以结合pd-l2和/或结合seqidno:3，和/或它可以抑制pd-l2结合一个或多个其结合伴侣，例如pd-1，和/或减少、抑制、阻止或干扰由pd-l2与一个或多个其结合伴侣的相互作用产生的信号转导。pd-l2结合拮抗剂可以包括抗pd-l2抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白或寡肽，和/或可以减少负共刺激信号，该负共刺激信号由在t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导或通过在t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导，通过pd-l2的信号传导介导，从而使功能障碍的t细胞功能障碍减少，从而增强对抗原的t细胞效应器响应。25.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂、pd-1结合拮抗剂或pd-l1结合拮抗剂可以是抗体；任选其中26.(a)抗pd-l1抗体抑制pd-l1和pd-1之间的结合和/或pd-l1和b7-1之间的结合，27.(b)抗pd-l1抗体抑制癌细胞表面上的pd-l1将信号转导至细胞内通路，28.(c)抗pd-1抗体抑制pd-l1和pd-1之间的结合和/或pd-l2和pd-1之间的结合，29.(d)抗pd-1抗体抑制t细胞表面上的pd-1将信号转导至细胞内通路。在前述中，细胞内通路可以是t细胞细胞内通路，对其的刺激可以使t细胞功能障碍，从而降低t细胞效应器对抗原的反应功能。30.根据本发明，pd-l1结合拮抗剂可以选自：(a)德瓦鲁单抗(durvalumab)、imfinzi或medi4736，(b)阿替利珠单抗(atezolizumab)、tecentriq或mpdl3280a，(c)阿维鲁单抗(avelumab)、bavencio或msb0010718c，(d)mdx-1105、bms-936559。31.因此，pd-l1结合拮抗剂可以是抗体，包括：32.(a)包括seqidno:4的重链和包括seqidno:5的轻链，或其可变区或其cdr，33.(b)包括seqidno:6的重链和包括seqidno:7的轻链，或其可变区或其cdr，34.(c)包括seqidno:8的重链和包括seqidno:9的轻链，或其可变区或其cdr，或35.(d)包括seqidno:10的重链和包括seqidno:11的轻链，或其可变区或其cdr；或者36.(e)(a)至(d)中任一项的抗原结合区。37.根据本发明，pd-1结合拮抗剂可以选自：(a)派姆单抗(pembrolizumab)、keytruda、兰博利珠单抗(lambrolizumab)或mk-3475，(b)西米普利单抗(cemiplimab)、libtayo或regn-2810，(c)bms/ono、纳武利尤单抗(nivolumab)、欧狄沃(opdivo)、ono-4538、bms-936558或mdx1106。38.因此，pd-1结合拮抗剂可以是抗体，包括：39.(a)包括seqidno:12的重链和包括seqidno:13的轻链，或其可变区或其cdr，40.(b)包括seqidno:14的重链和包括seqidno:15的轻链，或其可变区或其cdr，或41.(c)包括seqidno:16的重链和包括seqidno:17的轻链，或其可变区或其cdr；或者42.(d)(a)至(c)中任一项的抗原结合区。43.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂，pd-1或pd-l1或pd-l2结合拮抗剂可以是抗体；例如抗体可以是单克隆的、人的或人源化的，全长的或其抗原结合片段，例如fv、fab、fab'、fab'-sh、f(ab')2；双链抗体(diabody)；线性抗体；单链抗体分子，或scfv。抗体同种型(isotype)可选自五类免疫球蛋白中的任何一种：iga、igd、ige、igg和igm，其重链分别称为α、δ、ε、γ和μ(m)。γ和α类抗体可以是任何亚类：igg1、igg2a、igg2b、igg3、igg4、iga1和iga2。44.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂，其可以是pd-1结合拮抗剂、pd-l1结合拮抗剂或p2-l2结合拮抗剂，可以是免疫粘附素。免疫粘附素可以包括粘附素域，其包含结合特异性，例如受体或配体的结合位点，与免疫球蛋白恒定域，例如来自任何同种型，例如igg-1、igg-2、igg2a、igg2b、igg-3或igg-4亚型、iga、iga-1、iga-2、ige、igd或igm，和/或可包括免疫球蛋白分子的铰链区、ch2区和ch3区，或铰链区、ch1区、ch2区和ch3区。因此，免疫粘附素可以是包含pd-l1或pd-l2的细胞外或pd-1结合部分或pd-1的细胞外或pd-l1或pd-l2结合部分的多肽，其与免疫球蛋白序列的恒定结构域(例如pd-l1ecd-fc、pd-l2ecd-fc和pd-1ecd-fc)融合。45.免疫反应细胞46.根据本发明，修饰的免疫反应细胞可以是淋系的细胞，包括b、t或自然杀伤(naturalkiller，nk)细胞。修饰的免疫反应细胞可以是淋巴谱系系(lymphoidlineage)的细胞，包括b细胞、t细胞、自然杀伤(nk)细胞，及其前体，该前体包括胚胎干细胞和多能干细胞(例如，可以从中分化淋巴样细胞的那些细胞)。t细胞可以是在胸腺中成熟的淋巴细胞，且主要负责细胞介导的免疫，也参与适应性免疫系统。根据本发明，t细胞可以包括但不限于辅助t细胞、细胞毒性t细胞、记忆t细胞(包括中枢记忆t细胞、干细胞样记忆t细胞(或干样记忆t细胞)和两种类型的效应器记忆t细胞：例如tem细胞和temra细胞、调节性t细胞(也称为抑制性t细胞)、自然杀伤t细胞、粘膜相关的不变t细胞和γ-δt细胞。细胞毒性t细胞(ctl或杀伤t细胞)是t淋巴细胞的一个子集，其能够诱导受感染的体细胞或肿瘤细胞的死亡。可以通过引入tcr对受试者自身的t细胞进行基因修饰以靶向特定抗原。优选地，修饰的免疫反应细胞是t细胞，任选地是cd4 t细胞或cd8 t细胞。因此，修饰的免疫反应细胞可以是t细胞，任选地cd4 t细胞或cd8 t细胞，或者修饰的免疫反应细胞可以是修饰的t细胞群，任选地cd4 t细胞群；或cd8 t细胞群，或cd4 t细胞和cd8 t细胞的混合群体。47.异源tcr/car48.根据本发明，修饰的免疫反应细胞可以表达异源t细胞受体(tcr)或异源嵌合抗原受体(car)。在与抗原结合后，修饰的免疫反应细胞可对带有抗原的细胞表现出t细胞效应器功能和/或细胞溶解效应，和/或经历增殖和/或细胞分裂。在某些实施方式中，与包括靶向相同癌症和/或肿瘤抗原和/或肽(抗原肽)的嵌合抗原受体(car)的细胞相比，包括tcr的修饰的免疫反应细胞表现出相当的或更好的治疗效果。包括tcr或car的活化的修饰的免疫反应细胞可以分泌抗肿瘤细胞因子，其包括但不限于tnfα、ifnγ和il2。49.根据本发明，修饰的免疫反应细胞可以包括编码异源t细胞受体(tcr)或异源嵌合抗原受体(car)的核酸、构筑体或载体，或异源核酸、构筑体或载体。任选地，tcr可以是亲和性增强的tcr，例如特异性肽增强的亲和性受体(specificpeptideenhancedaffinityreceptor，spear)tcr。50.术语“异源的”或“外源的”是指这样的多肽或核酸，其对于特定的生物系统(如细胞或宿主细胞)而言是外来的，且不是天然存在于该系统中，且可以通过人工或重组手段引入系统。因此，异源的tcr或car的表达可由此改变t细胞的免疫原性特异性，使得它们对于存在于患有癌症的个体的癌症细胞表面上的一种或多种肿瘤或癌症抗原和/或肽识别或显示出改进的识别。t细胞的修饰及其随后的扩增可以在体外和/或离体进行。51.癌症抗原52.根据本发明，癌症抗原和/或肿瘤抗原或其肽抗原可以是癌症-睾丸抗原、ny-eso-1、mart-1(t细胞识别的黑色素瘤抗原)、wt1(wilms肿瘤1)、gp100(糖蛋白100)、酪氨酸酶、prame(黑色素瘤中优先表达的抗原)、p53、hpv-e6/hpv-e7(人乳头瘤病毒)、hbv、trail、dr4、甲状腺球蛋白(thyroglobin)、tgfbii移码抗原、lage-1a、kras、cmv(巨细胞病毒)、cea(癌胚抗原)、afp(甲胎蛋白)、mage-a1、mage-a2、mage-a3、mage-a4、mage-a6、mage-a8和mage-a9、mage-a10，或mage-a12，或其肽抗原。根据本发明，优选的肿瘤抗原是mage-a4，例如seqidno：36或其肽抗原。优选地，癌症和/或肿瘤抗原肽具有氨基酸序列gvydgrehtv，seqidno:18。53.共刺激配体54.根据本发明，修饰的免疫反应细胞还可以包括外源或重组(例如，细胞被转导)的至少一种共刺激配体，任选一种、两种、三种或四种。修饰的免疫反应细胞可以共表达tcr或car和至少一种外源共刺激配体。tcr或car与至少一种外源共刺激配体之间的相互作用可以提供非抗原特异性信号和细胞活化。共刺激配体包括但不限于肿瘤坏死因子(tnf)超家族成员和免疫球蛋白(ig)超家族配体。tnf是一种参与全身炎症的细胞因子，且刺激急性期反应。tnf超家族成员包括但不限于神经生长因子(ngf)、cd40l(cd40l)/cd154、cd137l/4-1bbl、tnf-α、cd134l/ox40l/cd252、cd27l/cd70、fas配体(fasl)、cd30l/cd153、肿瘤坏死因子β(tnfp)/淋巴毒素-α(lta)、淋巴毒素-β(ttb)、cd257/b细胞激活因子(baff)/blys/thank/tall-l、糖皮质激素诱导的tnf受体配体(gitrl)和tnf相关的凋亡诱导配体(trail)、light(tnfsf14)。免疫球蛋白(ig)超家族是一大类细胞表面和可溶性蛋白质，其参与细胞的识别、结合或粘附过程。这些蛋白质与免疫球蛋白具有相同的结构特征——它们具有免疫球蛋白结构域(折叠)。免疫球蛋白超家族配体包括但不限于cd80和cd86，两者都是cd28的配体。在某些实施方式中，至少一种共刺激配体选自由以下组成的组：4-1bbl、cd275、cd80、cd86、cd70、ox40l、cd48、tnfrsf14及其组合的组合。至少一种外源的或重组的共刺激配体可以是4-1bbl或cd80，优选地，至少一种外源的或重组的共刺激配体是4-1bbl。修饰的免疫反应细胞可包括两种外源或重组的共刺激配体，优选的两种外源或重组的共刺激配体是4-1bbl和cd80。55.修饰的免疫反应细胞可包括外源或重组(例如，细胞被转导)的至少一种克服免疫抑制性肿瘤微环境的构筑体。此类构筑体可以是但不限于环状amp磷酸二酯酶和显性负相(dominant-negative)转化生长因子β(tgfbeta)受体ii。修饰的免疫反应细胞、修饰t细胞或修饰t细胞群可以被工程化以释放对所述细胞的细胞溶解活性具有积极作用的细胞因子。这样的细胞因子包括但不限于白细胞介素7、白细胞介素15和白细胞介素21。56.特异性结合tcr/car57.根据本发明，修饰的免疫反应细胞，例如修饰的t细胞，可以被修饰以表达异源tcr或car，其结合或特异性结合到患有疾病症状或癌症症状的受试者、患者或癌症患者的肿瘤细胞和/或组织、和/或癌细胞和/或组织。随后可以用根据本发明的修饰的免疫反应细胞或修饰的t细胞或其种群来治疗受试者、患者或癌症患者。根据本发明的用修饰的免疫反应细胞或修饰的t细胞治疗的合适的癌症患者可以通过包括以下的方法来鉴定：从患有肿瘤和/或癌症的个体或受试者获得肿瘤和/或癌细胞的样本；将肿瘤和/或癌细胞鉴定为与由修饰的免疫反应细胞表达的tcr或car结合。58.根据本发明，异源tcr或car结合到或特异性结合到癌症抗原和/或肿瘤抗原或其肽抗原。根据本发明，异源tcr或car结合到或特异性结合到与癌性病症相关的和/或由肿瘤或癌细胞或组织呈递的癌症抗原和/或肿瘤抗原或其肽抗原。59.特异性描述了异源tcr或car与特定靶标癌症抗原和/或肿瘤抗原或其肽抗原之间的结合强度，并且可以通过解离常数kd、受体-配体系统的结合和未结合状态之间的比率来描述。此外，异源tcr或car可以结合的不同癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原越少，其结合特异性就越大。60.根据本发明，异源tcr或car可以结合少于10、9、8、7、6、5、4、3、2种不同的癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原，例如仅结合一种癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原。61.根据本发明，异源tcr或car可以以下面区间的解离常数结合：0.01μm和100μm之间、0.01μm和50μm之间、0.01μm和20μm之间、0.05μm和20μm之间，或0.01μm、0.02μm、0.03μm、0.04μm、0.05μm、0.06μm、0.07μm、0.08μm、0.09μm、0.19μm、0.15μm、0.25μm、0.25μm、0.35μm、0.35μm、0.45μm、0.45μm、0.55μm、0.55μm、0.65μm、0.65μm、0.75μm、0.75μm、0.85μm、0.85μm、0.95μm、0.95μm、1.05μm、1.55μm、2.05μm、2.55μm、3.05μm、3.55μm、4.05μm、4.55μm、5.05μm、5.55μm、6.05μm、6.55μm、7.05μm、7.55μm、8.05μm、8.55μm、9.05μm、9.55μm、10.0μm；或10.0μm和1000μm之间、10μm和50μm之间、50μm和5000μm之间，或10μm、20μm、30μm、40μm、50μm、60μm、70μm、80μm、90μm、100μm、150μm、200μm、250μm、300μm、350μm、400μm、450μm、500μm；任选地用表面等离子共振测量，任选地在25℃，任选地在ph为6.5和6.9之间或7.0和7.5之间。通过实验测量解离速率常数koff和结合速率常数kon来确定解离常数kd或koff/kon。tcr解离常数可以使用可溶形式的tcr来测量，其中tcr包括tcrα链可变域和tcrβ链可变域。因此，根据本发明使用的异源tcr或car能够有效和/或以高亲和性结合至hla展示gvydgrehtv，任选地与肽呈递分子，例如hla复合，例如与hla-a*02或hla-a*0201复合，或者不与肽呈递分子复合呈递，例如解离常数在0.01μm和100μm之间，例如50μm、100μm、200μm、500μm，优选0.05μm至20.0μm之间。62.根据本发明，修饰的免疫反应细胞，例如修饰的t细胞，可以包括异源tcr或car，其可以结合、特异性结合和/或以高亲和性结合癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原，任选地与癌性病症相关和/或由癌细胞或组织的肿瘤呈递；任选地，其中癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原被异源tcr或car识别，任选地与肽呈递分子例如hla复合，例如与hla-a*02或hla-a*0201复合，或者不与肽呈递分子例如或hla复合呈递。63.根据本发明，异源t细胞受体(tcr)或car，以及包括异源t细胞受体(tcr)或car的修饰的免疫反应细胞可以具有结合到内源性表达的肿瘤细胞表面、癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原的特性，任选地其中该结合不依赖于细胞表面抗原作为与肽呈递分子或抗原呈递分子的复合物的呈递，例如主要组织相容性复合物(majorhistocompatibilitycomplex，mhc)或人白细胞抗原(hla)或主要组织相容性复合物类相关蛋白(mr)1。64.根据本发明，任选地与密切相关的癌症和/或肿瘤抗原或肽抗原序列相比，tcr或car结合可以特异性针对一种癌症和/或肿瘤抗原，例如mage蛋白(诸如magea4)，或其肽抗原。密切相关的癌症和/或肿瘤抗原或肽抗原序列可以具有相似或相同的长度，和/或可以具有相似数量或相同数量的氨基酸残基。密切相关的肽抗原序列可具有50％至90％、或60％至90％、或70％至90％、或80％至90％的同一性，优选80至90％的同一性，和/或可相差1、2、3或4个氨基酸残基。密切相关的肽序列可以来源于序列gvydgrehtv，seqidno:18的多肽序列。65.结合亲和性可以通过平衡方法(例如酶联免疫吸附测定(elisa)或放射免疫测定(ria))，或动力学(例如biacoretm分析)来确定。亲合力(avidity)是两个分子在多个位点相互结合强度的总和，例如考虑到相互作用的化合价。根据本发明，与缺乏异源tcr或car或具有替代的异源tcr或car的免疫反应细胞相比，免疫反应细胞可以表现出对癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原、或由肿瘤或癌细胞或组织呈递并被异源tcr或car识别的癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原的改善的亲和性和/或亲合力。66.选择性结合tcr/car67.根据本发明，异源tcr或car可以选择性地结合癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原，任选地与癌症病症相关和/或由肿瘤或癌细胞或组织呈递；任选地，其中癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原被异源tcr或car识别，任选地与肽呈递分子(例如hla)复合，例如与hla-a*02或hla-a*0201复合，或者不与肽呈递分子或hla复合呈递，肽呈递分子或hla，优选由肿瘤细胞或癌细胞或组织表达。68.选择性结合表示异源tcr或car以比另一种更高的亲和性结合癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原。选择性结合由与异源tcr或car的复合物中一种配体抗原置换另一种配体抗原的平衡常数表示。69.特异性/选择性结合tcr/car70.根据本发明，异源tcr或car结合对于癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原具有选择性和/或特异性，所述癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原可以是癌症-睾丸抗原、ny-eso-1、mart-1(t细胞识别的黑色素瘤抗原)、wt1(wilms肿瘤1)、gp100(糖蛋白100)、酪氨酸酶、prame(黑色素瘤中优先表达的抗原)、p53、hpv-e6/hpv-e7(人乳头瘤病毒)、hbv、trail、dr4、甲状腺球蛋白、tgfbii移码抗原、lage-1a、kras、cmv(巨细胞病毒)、cea(癌胚抗原)、afp(甲胎蛋白)、mage-a1、mage-a2、mage-a3、mage-a4、mage-a6、mage-a8和mage-a9、mage-a10，或mage-a12，或其肽抗原。优选地，肿瘤抗原是mage-a4或其肽抗原。71.根据本发明，异源tcr或car可以结合、和/或特异性结合、和/或选择性结合肽呈递分子，例如呈递或展示癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原的hla，即癌症和/或肿瘤抗原的肽片段(phla)，其中hla对应于mhci类(a、b和c)，它们都是hla1类或其特定等位基因，或者hla对应于mhcii类(dp、dm、do、dq和dr)或其特定等位基因，优选hla是1类，优选等位基因是hla-a2、或hla-a*02、或hla-a2 、或hla-a*02阳性hla，优选hla-*0201。可替选地，异源tcr或car可以结合、和/或特异性结合、和/或选择性结合不由hla呈递或展示的癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原。72.优选地，异源tcr或car不是由免疫反应细胞天然表达的(即tcr或car是外源的或异源的)。异源tcr可以包括αβtcr异二聚体。异源tcr或car可以是重组的、或合成的、或人工的tcr或car，即自然界中不存在的tcr。例如，异源tcr可以被工程化以增加其对特定癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原的亲和性或亲合力(即亲和性增强的tcr或特定的肽增强的亲和性受体(spear)tcr)。亲和性增强的tcr或(spear)tcr可相对于天然存在的tcr包括一个或多个突变，例如在tcr的α和β链的可变区的高变互补决定区(cdr)中的一个或多个突变。这些突变可增加tcr对展示肿瘤抗原的肽片段的mhc的亲和性，任选地在由肿瘤和/或癌细胞表达这些mhc时。产生亲和性增强或成熟的tcr的合适方法包括使用噬菌体或酵母展示筛选tcr突变体，且是本领域众所周知的(参见例如robbins等人jimmunol(2008)180(9)：6116；sanmiguel等人(2015)cancercell28(3)281-283；schmitt等人(2013)blood122348-256；jiang等人(2015)cancerdiscovery5901)。优选的亲和性增强的tcr可以结合表达mage家族的肿瘤抗原的肿瘤或癌细胞，例如magea4或其肽抗原，例如序列gvydgrehtv，seqidno:18。73.根据本发明，异源tcr可以是magea4tcr，其可以包括seqidno：21的α链参考氨基酸序列或其变体，和seqidno：23的β链参考氨基酸序列或其变体。变体的氨基酸序列可与参考氨基酸序列具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。tcr可由seqidno：22的α链参考核苷酸序列或其变体和seqidno：24的β链参考核苷酸序列或其变体编码。变体的核苷酸序列可以与参考核苷酸序列具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。74.根据本发明，tcr可以包括tcrα链可变域和tcrβ链可变域，其中：75.(i)α链可变域包括具有以下序列的cdr：76.vspfsn(αcdr1)，seqidno:27，或seqidno:21的氨基酸48-53，77.ltfsen(αcdr2)，seqidno:28，或seqidno:21的氨基酸71-76，和78.cvvsggtdswgklqf(αcdr3)，seqidno:29，或seqidno:21的氨基酸111-125，和79.(ii)β链可变域包括具有以下序列的cdr80.kghdr(βcdr1)，seqidno:30，或seqidno:23的氨基酸46-50，81.sfdvkd(βcdr2)，seqidno:31，或seqidno:23的氨基酸68-73，和82.catsgqgayeeqff(βcdr3)，seqidno:32，或seqidno:23的氨基酸110-123或与其具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％，至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性的序列，任选地具有100％的序列同一性的序列。83.因此，tcr可以包括一种tcr，其中，α链可变域包括与seqidno:25具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性的氨基酸序列或者seqidno:22的氨基酸残基1-136的序列；和/或β链可变域包括与seqidno:26具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性的氨基酸序列或者seqidno:23的氨基酸残基1-133的序列。84.术语“祖细胞tcr”在本文中用于指包括分别具有seqidno：21和23的magea4tcrα链和magea4tcrβ链的tcr。期望提供相对于祖细胞tcr突变或修饰的tcr，与祖细胞tcr相比，其对肽-hla复合物具有相等的、等效的或更高的亲和性和/或相等的、等效的或较慢的解离速率。根据本发明，相对于祖细胞tcr，异源tcr可以在α链可变域和/或β链可变域中具有一个以上的突变，并且可以表示为“工程化tcr化或“突变tcr变。这些突变可以提高对magea4或其肽抗原的结合亲和性、和/或特异性、和/或选择性、和/或亲合力。在某些实施方式中，在α链可变域中存在1、2、3、4、5、6、7或8个突变，例如4或8个突变，和/或在β链可变域中存在1、2、3、4或5个突变，例如5个突变。在一些实施方式中，本发明的tcr的α链可变域可以包括氨基酸序列，其与seqidno:25的氨基酸残基的序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性。在一些实施方式中，本发明的tcr的β链可变域可以包括氨基酸序列，其与seqidno:26的氨基酸残基的序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性。85.根据本发明，tcr可包括一种tcr，其中α链可变域包括seqidno：25或seqidno：21的氨基酸残基1-136的氨基酸序列；或一种氨基酸序列，其中其氨基酸残基1-47、54-70、77-110和126-136分别与seqidno：25的氨基酸残基1-47、54-70、77-110和126-136的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性，和/或其中，氨基酸残基48-53、71-76和111-125，cdr1、cdr2、cdr3分别与seqidno:25的氨基酸残基48-53、71-76和111-125，cdr1、cdr2、cdr3的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性。86.根据本发明，tcr可以包括一种tcr，其中，在α链可变域中，序列：87.(i)其氨基酸残基1-47可以(a)与seqidno:25的氨基酸残基1-47的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:25的残基1-47，可具有插入或缺失的一个、两个或三个氨基酸残基，88.(ii)氨基酸残基48-53是vspfsn、cdr1、seqidno:27或seqidno:25的氨基酸48-53，89.(iii)其氨基酸残基54-70可以具有(a)与seqidno:25的氨基酸残基54-70的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:25的氨基酸残基54-70的序列，可具有一个、两个或三个插入或缺失的氨基酸残基，90.(iv)氨基酸残基71-76可以是ltfsen、cdr2、seqidno:28或seqidno:25的氨基酸71-76，91.(v)其氨基酸残基77-110可以与seqidno:25的氨基酸残基77-70的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:25的氨基酸残基77-110的序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失、或取代，92.(vi)氨基酸111-125可以是cvvsggtdswgklqf、cdr3、seqidno:29或seqidno:25的氨基酸111-125，93.(vii)其氨基酸残基126-136可以与seqidno:25的氨基酸残基126-136的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:25的氨基酸残基126-136的序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失、或取代。94.根据本发明，tcr可包括一种tcr，其中β链可变域包括：seqidno：26的氨基酸序列或一种氨基酸序列，其中，其氨基酸残基1-45、51-67、74-109和124-133分别与seqidno：26的氨基酸残基1-45、51-67、74-109和124-133的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，且其中，氨基酸残基46-50、68-73和110-123分别与seqidno:26的氨基酸残基46-50、68-73和110-123、cdr1、cdr2、cdr3具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性。95.根据本发明，tcr可以包括一种tcr，其中在α链可变域中，序列：96.(i)其氨基酸残基1-45可以(a)与seqidno:26的氨基酸残基1-45的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:26的残基1-45，可具有插入或缺失的一个、两个或三个氨基酸残基，97.(ii)氨基酸残基46-50是kghdr、cdr1、seqidno:30或seqidno:26的氨基酸46-50，98.(iii)其氨基酸残基51-67可以(a)具有与seqidno:26的氨基酸残基51-67的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:26的氨基酸残基51-67序列，可具有插入或缺失的一个、两个或三个氨基酸残基，99.(iv)氨基酸残基68-73可以是sfdvkd、cdr2、seqidno:31或seqidno:26的氨基酸68-73，100.(v)其氨基酸残基74-109可以具有与seqidno:26的氨基酸残基74-109的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:26的氨基酸残基74-109的序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失、或取代；101.(vi)氨基酸110-123可以是catsgqgayeeqff、cdr3、seqidno:32或seqidno:26的氨基酸110-123，102.(vii)其氨基酸残基124-133可以具有与seqidno:26的氨基酸残基124-133的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:26的氨基酸残基124-133的序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失、或取代。103.氨基酸和核苷酸序列的同一性通常参考算法gap(gcgwisconsinpackagetm,accelrys,sandiegoca)定义。gap使用needleman&wunsch算法(j.mol.biol.(48):444-453(1970))比对两个完整的序列，使匹配的数量最大化并使空位的数量最小化。通常，使用默认参数，空位创建罚分(gapcreationpenalty)＝12，空位扩展罚分(gapextensionpenalty)＝4。使用gap可能是优选的，但也可以使用其他算法，例如blast、psiblast或tblastn(使用altschul等人(1990)j.mol.biol.215:405-410的方法)、fasta(使用pearson和lipman(1988)pnasusa85:2444-2448的方法)或smith-waterman算法(smith和waterman(1981)j.molbiol.147:195-197)，通常采用默认参数。104.特定氨基酸序列变体可通过插入、添加、取代或缺失1个氨基酸、2、3、4、5-10、10-20或20-30个氨基酸而不同于参考序列。在一些实施方式中，变体序列可包括具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多个插入、缺失或取代的残基的参考序列。例如，可以插入、删除或取代多达15个、多达20个、多达30个或多达40个残基。105.在一些优选的实施方式中，变体可以与参考序列相差1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多个保守取代。保守取代涉及用具有相似性质的不同氨基酸取代氨基酸。例如，脂肪族残基可以被另一个脂肪族残基取代，非极性残基可以被另一个非极性残基取代，酸性残基可以被另一个酸性残基取代，碱性残基可以被另一个碱性残基取代，极性残基可以被另一个极性残基取代，或者芳族残基可以被另一个芳族残基取代。例如，保守取代可以在以下组内的氨基酸之间发生：106.(i)丙氨酸和甘氨酸；107.(ii)谷氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺和天冬酰胺；108.(iii)精氨酸和赖氨酸；109.(iv)天冬酰胺、谷氨酰胺、谷氨酸和天冬氨酸；110.(v)异亮氨酸、亮氨酸和缬氨酸；111.(vi)苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；112.(vii)丝氨酸、苏氨酸和半胱氨酸。113.cd8α辅助受体114.根据本发明，表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群可进一步表达或呈递异源辅助受体。异源辅助受体可以是cd8辅助受体。cd8辅助受体可以包括二聚体或cd8链对，cd8链对包括cd8-α和cd8-β链或cd8-α和cd8-α链。优选地，cd8辅助受体是包括cd8-α和cd8-α链的cd8αα辅助受体。cd8α辅助受体可包括与seqidno：19至少80％同一性的氨基酸序列、seqidno：19或其变体。cd8α辅助受体可以是同型二聚体(homodimer)。115.cd8辅助受体与1类mhc结合并增强tcr信号传导。根据本发明，cd8辅助受体可以包括seqidno：19的参考氨基酸序列或者可以是其变体。变体的氨基酸序列可与参考氨基酸序列seqidno:19具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。cd8辅助受体可以由seqidno：20的参考核苷酸序列编码或者可以是其变体。变体的核苷酸序列可以与参考核苷酸序列seqidno:20具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。116.根据本发明，异源cd8辅助受体可以包括cd8辅助受体，其中在ig样的v型结构域中包括具有以下序列的cdr：117.(i)vllsnptsg、cdr1、seqidno:33，或seqidno:19的氨基酸45-53，118.(ii)ylsqnkpk、cdr2、seqidno:34，或seqidno:19的氨基酸72-79，119.(iii)lsnsim、cdr3、seqidno:35，或seqidno:19的氨基酸80-117，120.或与其具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的序列。121.根据本发明，异源cd8辅助受体可包括cd8辅助受体，其包括或其中在ig样的v型结构域中包括：seqidno:19的氨基酸序列的残基22-135；或一种氨基酸序列，其中其氨基酸残基22-44、54-71、80-117、124-135分别与seqidno:19的氨基酸残基22-44、54-71、80-117、124-135、cdr1、cdr2、cdr3的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，且其中其氨基酸残基45-53、72-79和118-123分别与seqidno:19的氨基酸残基45-53、72-79和118-123的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性。122.根据本发明，cd8辅助受体可包括cd8辅助受体，其中，或在ig样v型结构域中，序列为：123.(i)其氨基酸残基22-44可以(a)具有与seqidno:19的氨基酸残基22-44的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:19的残基22-44，可具有一个、两个或三个插入或缺失的氨基酸残基，124.(ii)氨基酸残基45-53是vllsnptsg、seqidno:33、cdr1或seqidno:19的氨基酸45-53，125.(iii)其氨基酸残基54-71可以(a)具有与seqidno:19的氨基酸残基54-71的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:19的氨基酸残基54-71的序列，可具有一个、两个或三个插入或缺失的氨基酸残基，126.(iv)氨基酸残基72-79可以是ylsqnkpk、cdr2、seqidno:34或seqidno:19的氨基酸72-79，127.(v)其氨基酸残基80-117可以与seqidno:19的氨基酸残基80-117的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:19的氨基酸残基80-117序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失或取代；128.(vi)氨基酸118-123可以是lsnsim、cdr3、seqidno:35或seqidno:19的氨基酸80-117，129.(vii)其氨基酸残基124-135可以具有与seqidno:19的氨基酸残基124-135的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:19的氨基酸残基124-135的序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失或取代。130.表达异源cd8辅助受体的修饰的免疫反应细胞可以显示出对抗原肽、肿瘤或癌抗原的刺激或在抗原肽、肿瘤或癌抗原刺激时的亲和性和/或亲合力的提高和/或t细胞活化的提高，如通过本文公开的测定法确定的，任选地当相对于不表达异源cd8辅助受体的修饰的免疫反应细胞，在hla上呈递。修饰的免疫反应细胞的异源cd8可以与mhc相互作用或特异性结合，mhc可以是i类或ii类，优选i类主要组织相容性复合物(mhc)、hla-i分子或mhci类hla-a/b2m二聚体，优选cd8-a与i类mhc的α3部分(残基223和229之间)相互作用，优选通过cd8的igv样结构域。因此，与缺乏异源cd8的免疫反应细胞相比，异源cd8提高了免疫反应细胞与由hlapmhci或phla结合或呈递的hla和/或抗原肽的tcr结合，任选地位于抗原呈递细胞、树突细胞和/或肿瘤或癌细胞、肿瘤或癌症组织的表面上。因此，与缺乏异源cd8的细胞相比，异源cd8可以改善或增加免疫反应细胞的细胞(tcr)/肽-主要组织相容性复合物i类(pmhci)相互作用的解离率(koff)且因此其半衰期，任选地位于抗原呈递细胞、树突细胞和/或肿瘤或癌细胞，或肿瘤或癌组织的表面上，因此也可以提供改善的连接亲和性和/或亲合力。异源cd8可以改善tcr在免疫反应细胞表面上的组织，以实现phla结合的协同性，并且可以改善的治疗亲合力。因此，异源cd8辅助受体修饰的免疫反应细胞可能以锌依赖性方式与lck(淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶)结合或相互作用，导致转录因子，如nfat、nf-κb和ap-1的激活。131.根据本发明，任选地响应癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原，任选地由癌细胞或组织的肿瘤呈递时，与缺乏异源cd8辅助受体的免疫反应细胞相比，修饰的免疫反应细胞可具有改善或增加的cd40l表达、细胞因子产生、细胞毒活性、诱导树突细胞成熟或诱导树突细胞细胞因子产生。132.治疗效果133.根据本发明和本发明的方法和用途，相对于治疗或干预之前，或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞的治疗，t细胞功能增强了至少10％，或者20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、120％、150％、200％或更多。例如，通过cd8 t细胞分泌γ-干扰素增加、t细胞增殖增加、内部信号传导增加、抗原反应性增加、细胞因子和/或干扰素分泌增加、靶细胞杀伤增加、t细胞活性增加，cd28信号传导增加、t细胞浸润肿瘤的能力增加、识别和结合呈递抗原的树突状细胞能力增加来判断。134.根据本发明以及本发明的方法和用途，可以减弱肿瘤免疫或肿瘤规避免疫识别，从而提高免疫系统对肿瘤的识别和攻击，从而治疗例如由肿瘤结合、肿瘤缩小和肿瘤清除来测量的肿瘤免疫。因此，相对于治疗或干预之前或相对于单独使用pd1轴结合拮抗剂或单独使用表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞的治疗的水平，本发明提供的肿瘤免疫的治疗和/或提供的肿瘤免疫的治疗增强了至少10％，或者20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、120％、150％、200％或更多，例如，通过肿瘤结合、肿瘤缩小和肿瘤清除中的任何一个或多个来测量的。135.根据本发明和本发明的方法和用途，相对于治疗或干预之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞的治疗的水平，提供了改善或增强的肿瘤免疫原性，例如通过对肿瘤或肿瘤抗原引起免疫反应的能力来测量的，例如肿瘤免疫原性增强了至少10％、或者20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、120％、150％、200％或更多，例如，根据细胞因子和/或干扰素分泌增加、t细胞增殖增加、抗原反应性增加、靶细胞杀伤、t细胞激活、cd28信号传导、t细胞浸润肿瘤的能力、识别和结合呈递抗原的树突状细胞的能力中的任何一个或多个来判断。136.根据本发明以及本发明的方法和用途，提供了在停止治疗后降低肿瘤生长或肿瘤生长速率或维持肿瘤大小的改善的持续反应，例如，如通过肿瘤大小或肿瘤数量的测量中的任一项或多项来确定，相对于治疗或干预之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞的治疗的水平，优选持续反应增强了至少10％，或者20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、120％、150％、200％或更多。例如，持续反应可以具有至少与治疗持续时间相同的持续时间，是治疗持续时间长度的至少1.5、2.0、2.5或3.0或更多倍。137.在t细胞活性的上下文中，术语“功能障碍”是指对抗原刺激的免疫反应性降低的状态，包括t细胞耗竭和/或无反应性，由此t细胞可以识别和结合抗原，但在进行的免疫反应或对抗肿瘤生长过程中表现出有效性的降低。功能障碍的t细胞表现出将抗原识别转化为下游t细胞效应器功能的能力受损，例如增殖、细胞因子和干扰素的产生或靶细胞杀伤，和/或对抗原识别表现出难以驾驭或无反应，这是t细胞功能障碍的特征。“t细胞功能障碍”可能与通过pd-1不当增加的t细胞信号传导；t细胞增殖和/或产生细胞因子和/或细胞溶解活性的能力降低；t细胞无反应性；肿瘤免疫有关。[0138]“t细胞耗竭(exhaustion)”包括由于持续的作为对癌症反应的一部分的tcr信号传导而导致的t细胞功能障碍状态，并阻止对肿瘤的最佳反应。耗竭可以通过细胞内在负调节(共刺激)途径(例如pd-1、pd-1轴、b7-h3、b7-h4)或通过细胞外在负调节途径(免疫调节细胞因子)发挥作用。t细胞耗竭的特征是效应器功能差、抑制性受体持续表达和不同于功能性效应器或记忆t细胞的变化的转录活性。t细胞无反应性是通过t细胞受体的信号传导缺陷以及由此产生的对抗原刺激无反应的状态来发生的，甚至在共刺激的情况下，因此此类t细胞不会经历克隆扩增和/或获得效应器功能。[0139]施用[0140]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂和修饰的免疫反应细胞可以单独地、依次地或同时地施用。[0141]因此，[0142](a)pd-1轴结合拮抗剂可以在修饰的免疫反应细胞之前、与修饰的免疫反应细胞同时、或在修饰的免疫反应细胞之后施用，或[0143](b)pd-1轴结合拮抗剂可以在修饰的免疫反应细胞之前和与修饰的免疫反应细胞同时施用，或[0144](c)pd-1轴结合拮抗剂可以在修饰的免疫反应细胞之前和在修饰的免疫反应细胞之后施用，或[0145](d)pd-1轴结合拮抗剂可以与修饰的免疫反应细胞同时和在修饰的免疫反应细胞之后施用，或[0146](e)pd-1轴结合拮抗剂可在修饰的免疫反应细胞后施用，或[0147](f)pd-1轴结合拮抗剂可以在修饰的免疫反应细胞之前、与修饰的免疫反应细胞同时和在修饰的免疫反应细胞之后施用。[0148]例如，pd-1轴结合拮抗剂在施用修饰的免疫反应细胞后的第一次施用可以在施用修饰的免疫反应细胞后第14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35天中的任何一天，优选第14至16天、或17至21天、或22至26天，优选第17至22天，优选第17天、第21天或第22天。[0149]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂和/或修饰的免疫反应细胞可以连续施用，任选地作为单剂量，或间歇地施用，任选地作为多于一剂的剂量。[0150]根据本发明，修饰的免疫反应细胞可以作为单剂量施用。修饰的免疫反应细胞可以约5亿至以下任一个之间的剂量施用：约10亿细胞、约20亿细胞、约30亿细胞、约40亿细胞、约50亿细胞、约60亿细胞、约70亿细胞、约80亿细胞、约90亿细胞、约100亿细胞、约110亿细胞、约120亿细胞、约130亿细胞、约140亿细胞、约150亿细胞、约160亿细胞、约170亿细胞、约180亿细胞、约190亿细胞、约200亿细胞、或约210亿细胞。修饰的免疫反应细胞可以下列剂量施用：约1亿至约2亿细胞、约3亿至约4亿细胞、约5亿至约6亿细胞、约7亿至约8亿细胞、或约9亿至约10亿细胞，任选地约5亿至约10亿细胞，约20亿至约50亿细胞、或约60亿至约100亿细胞。[0151]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂和/或修饰的免疫反应细胞可以通过静脉内、肌内、皮下、局部、口服、经皮、腹膜内、眶内(intraorbitally)、植入、吸入、鞘内、心室内、或鼻内、或通过静脉输注施用。优选地，pd-1轴结合拮抗剂和/或修饰的免疫反应细胞可以静脉内或通过静脉内输注施用。[0152]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以以约0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、或60mg/kg中的任一剂量施用。pd-1轴结合拮抗剂可以以约0.5mg/kg至约1.5mg/kg、约1mg/kg至约2mg/kg、约3mg/kg至约5mg/kg、约6mg/kg至约9mg/kg、约10mg/kg至约15mg/kg、约16mg/kg至约20mg/kg、约20mg/kg至约25mg/kg、约1mg/kg至约9mg/kg、约10mg/kg至约20mg/kg的任一剂量施用。根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以以约10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、380、390、400、410、420、430、440、450、460、470、480、490、500、510、520、530、540、550、560、570、580、590、600、650、700、750、800、850、900、950、1000mg中的任一剂量施用，优选200mg、250mg或300mg。根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以以固定剂量施用，或者可以改变剂量，例如在多于一个剂量的情况下或在一施用周期(dosingcycle)中。[0153]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以以下列形式施用：[0154](a)在一个或多个施用周期中的每一个施用周期中单剂量，[0155](b)在一个或多个施用周期中的每一个施用周期中一个或多个剂量，[0156](c)在一个或多个施用周期的每一个施用周期中第一天单剂量，[0157](d)在一个或多个施用周期的每一个施用周期中一个或多个剂量，包括在一个或多个施用周期的每一个施用周期中的第一天单剂量，[0158](e)在一个或多个施用周期中的每一个施用周期中一个或多个剂量，在每个周期的第一天至少一个剂量。[0159]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以在施用周期中施用，其中施用周期可以是5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、15天、16天、17天、18天、19天、20天、21天、22天、23天、24天、25天、26天、27天、28天、29天、30天、31天、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月或12个月中任何一个。因此，施用周期可以是10至12天、11至13天、14至17天、14至17天、18至21天、22至24天、24至27天、28至30天或31天、一周、两周、三周、四周或1个月、2个月、6个月中的任一个，优选3周或21天。[0160]根据本发明，在施用修饰的免疫反应细胞之前，pd-1轴结合拮抗剂可以在一个或多个施用周期中的每一个施用周期中以一个或多个剂量施用，且在施用修饰的免疫反应细胞后，在一个或多个施用周期中的每个施用周期中以一个或多个剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量。可替选地，pd-1轴结合拮抗剂可以在施用修饰的免疫反应细胞之前在一个或多个施用周期的每一个施用周期内以一个或多个剂量施用，与施用修饰的免疫反应细胞同时施用(任选地以单剂量施用)，和在施用修饰的免疫反应细胞后在一个或多个施用周期的每一个施用周期内以一个或多个剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量。可替选地，在施用修饰的免疫反应细胞后，pd-1轴结合拮抗剂可以在一个或多个施用周期的每一个施用周期内以一个或多个剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量。[0161]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以在施用修饰的免疫反应细胞之前在一个或多个施用周期中的每个施用周期中以单剂量施用，且在施用修饰的免疫反应细胞之后，在一个或多个施用周期中的每个施用周期中以单剂量施用，任选其中可以在每个周期的第一天施加单剂量。可替选地，pd-1轴结合拮抗剂可以在施用修饰的免疫反应细胞之前在一个或多个施用周期的每一个施用周期中以单剂量施用，与施用修饰的免疫反应细胞同时施用(任选地，其中修饰的免疫反应细胞以单剂量施用)，和在施用修饰的免疫反应细胞后，在一个或多个施用周期的每一个施用周期内以单剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天以单剂量施用。可替选地，在施用修饰的免疫反应细胞之后(任选地其中修饰的免疫反应细胞以单剂量施用)，pd-1轴结合拮抗剂可以在一个或多个施用周期的每个施用周期中以单剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天以单剂量施用。根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以在一个或多个施用周期的每个施用周期的第一天以约200mgs的单一固定剂量施用，其中施用周期为21天和/或其中修饰的免疫反应细胞以约50亿至约100亿细胞的单剂量施用，任选地其中施用修饰的免疫反应细胞后的第一剂pd-1轴结合拮抗剂是在施用免疫反应细胞后的第17天、第21天或第22天施用。[0162]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以在特定时期施用，也意味着pd-1轴结合拮抗剂施用周期可以在特定时期施用，例如在施用修饰的免疫反应细胞后的特定时期。特定时期可以是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31个月中的任何一个，优选24个月。[0163]根据本发明的方法可以包括以下步骤，其中[0164](a)在施用修饰的免疫反应细胞之前，pd-1轴结合拮抗剂在一个或多个施用周期的每一个施用周期以一个或多个剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量，[0165](b)在施用修饰的免疫反应细胞之前，在施用pd-1轴结合拮抗剂之后的时间点确定疾病状态，并与施用pd-1轴结合拮抗剂之前的状态进行比较，其中如果确定了稳定的疾病或进行性疾病，则[0166](c)施用修饰的免疫反应细胞，并且在施用修饰的免疫反应细胞之后或与施用修饰的免疫反应细胞同时和施用修饰的免疫反应细胞之后，在一个或多个施用周期的每一个施用周期以一个或多个剂量施用pd-1轴结合拮抗剂；任选地，其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量，进一步任选地，pd-1轴结合拮抗剂可以在特定时期施用。进一步任选地，在施用修饰的免疫反应细胞后的第一剂pd-1轴结合拮抗剂是在施用免疫反应细胞后的第17天、第21天或第22天施用。[0167]根据本发明的方法可以包括以下步骤，其中[0168](a)在施用修饰的免疫反应细胞之前，pd-1轴结合拮抗剂在一个或多个施用周期的每一个施用周期以一个或多个剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量，[0169](b)在施用修饰的免疫反应细胞之前，在施用pd-1轴结合拮抗剂之后的时间点确定疾病状态，并且与pd-1轴结合拮抗剂施用之前的状态进行比较，其中如果确定完全反应或部分反应，则。[0170](c)在一个或多个施用周期中的每一个施用周期以一个或多个剂量施用pd-1轴结合拮抗剂，而不施用修饰的免疫反应细胞；任选地，其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量，进一步任选地，其中pd-1轴结合拮抗剂在特定时期或确定疾病进展中的较短者施用。进一步任选地，当在步骤(c)中确定稳定性疾病或进行性疾病时，则(d)施用修饰的免疫反应细胞，且施用修饰的免疫反应细胞后或者与修饰的免疫反应细胞施用修饰的免疫反应细胞同时且在施用修饰的免疫反应细胞后，在一个或多个施用周期的每个施用周期以一个或多个剂量施用pd-1轴结合拮抗剂；任选地，其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量，进一步任选地，pd-1轴结合拮抗剂可以在特定时期施用。进一步任选地，在施用修饰的免疫反应细胞后的第一剂pd-1轴结合拮抗剂是在施用免疫反应细胞后的第17天、第21天或第22天施用。[0171]根据本发明，当所有目标病变或肿瘤已被评估或测量为已消失时，确定“完全反应”(completeresponse，cr)。当测量到目标病变或肿瘤的最长直径总和(sld)至少减少30％时确定“部分反应”(partialresponse，pr)，例如参考对照或治疗前比较。当测量到目标病变或肿瘤的最长直径总和(sld)至少增加20％时确定“进行性疾病”(progressivedisease，pd)，例如自治疗开始或存在一个或多个新病变以来，参照对照或治疗前比较。采取治疗开始以来最小的sld作为参考，在确定目标病变或肿瘤的最长直径总和(sld)既没有足够的减少或降低以符合pr标准，也没有足够的增加以符合pd标准时，确定“稳定性疾病”(stabledisease，sd)。[0172]根据本发明，癌症可以是复发性癌症(relapsedcancer)、或难治性癌症、或复发癌(recurrentcancer)、或局部复发癌、或转移性癌症、不可切除的癌症、或局部局限的癌症、没有手术或放射疗法选择的癌症、或不可手术的癌症、或其任何组合。受试者可能患有复发性癌症、或难治性癌症、或复发癌、或局部复发癌、或转移性癌症、或局部受限或不能手术的癌症，或其任何组合。[0173]根据本发明，癌症和/或肿瘤可以表达mage蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]，任选地mage-a4蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]。[0174]根据本发明，癌症可以选自：肺癌，非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer，nsclc)、转移性或晚期nsclc、鳞状nsclc、腺癌nsclc、腺鳞状nsclc、大细胞nsclc、卵巢癌、胃癌、尿路上皮癌、食管癌、食管胃结合部癌(esophagogastricjunctioncancer，egj)、黑色素瘤、膀胱癌、头颈癌、头颈鳞状细胞癌(headandnecksquamouscellcarcinoma，hnscc)、口腔癌、口咽癌、下咽癌、咽喉癌(cancerofthethroat)、喉癌(cancerofthelarynx)、扁桃体癌症、舌癌、软腭癌、咽癌、滑膜肉瘤、粘液样圆形细胞脂肪肉瘤(myxoidroundcellliposarcoma，mrcls)，任选地其中癌症或肿瘤表达mage蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]，任选地mage-a4蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]，cps指组合的阳性得分。[0175]根据本发明，癌症可以选自以下任一种：乳腺癌、转移性乳腺癌、肝癌、肾细胞癌、滑膜肉瘤、尿路上皮癌或肿瘤、胰腺癌、结肠直肠癌、转移性胃部癌(metastaticstomachcancer)、转移性胃癌(metastaticgastriccancer)、转移性肝癌、转移性卵巢癌、转移性胰腺癌、转移性结直肠癌、转移性肺癌、结直肠癌或腺癌、肺癌或腺癌、胰腺癌或腺癌、粘液性腺瘤、胰腺导管癌、血液恶性肿瘤，任选地其中癌症或肿瘤表达mage蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]，任选地mage-a4蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]。根据本发明，癌症可以是在含铂化疗后疾病仍具有疾病进展的复发或转移性hnscc。[0176]进一步提供了根据本发明的方法或用途，其中受试者之前未接受过癌症治疗，或者其中受试者已经接受过先前的癌症治疗和/或对先前的癌症治疗没有反应，或者其中疾病在先前的治疗期间或在先前的治疗之后已经进展。[0177]根据本发明，先前的治疗可以包括全身和/或局部疗法，例如以下的任何一种或多种：手术、放射疗法、冷冻疗法、激光疗法、局部疗法、化学疗法、激素疗法、靶向药物或免疫疗法。因此，在先的治疗可以包括局部疗法，例如手术、放射疗法、冷冻疗法、激光疗法、局部疗法和/或全身疗法中的任何一种或多种，例如化学疗法、激素疗法、靶向药物或免疫疗法中的任何一种或多种。[0178]根据本发明，先前的治疗可以包括pd-1轴结合拮抗剂、pd-l1结合拮抗剂或pd-1结合拮抗剂。因此，先前的治疗可以包括以下任何一种：[0179](a)抗pd-l1抗体，其抑制pd-l1和pd-1之间和/或pd-l1和b7-1之间的结合，[0180](b)抗pd-l1抗体，其抑制癌细胞表面上的pd-l1将信号转导至细胞内途径，[0181](c)抗pd-1抗体，其抑制pd-l1和pd-1之间和/或pd-l2和pd-1之间的结合，[0182](d)抗pd-1抗体，其抑制t细胞表面上的pd-1将信号转导至细胞内途径，[0183](e)pd-l1结合拮抗剂，其选自：[0184](i)德瓦鲁单抗、imfinzi或medi4736，[0185](ii)阿替利珠单抗、tecentriq或mpdl3280a，[0186](iii)阿维鲁单抗、bavencio或msb0010718c，[0187](iv)mdx-1105、bms-936559，[0188](f)pd-1结合拮抗剂选自：[0189](i)派姆单抗、keytruda、兰博利珠单抗或mk-3475，[0190](ii)西米普利单抗、libtayo或regn-2810，[0191](iii)bms/ono、纳武利尤单抗、opdivo、ono-4538、bms-936558或mdx1106。[0192]根据本发明，先前的治疗可以包括表皮生长因子受体拮抗剂，任选地西妥昔单抗(cetuximab)。根据本发明，当先前的治疗包括化学疗法时，其可以包括一种或多种铂化合物，任选地选自利铂(lipoplatin)、顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、奈达铂(nedaplatin)、四硝酸三铂(triplatintetranitrate)、菲铂(phenanthriplatin)、沙铂(satraplatin)、吡铂(picoplatin)。另外或可替选地，当先前的治疗包括化学疗法时，其可以包括一种或多种化学治疗剂，其选自甲氨蝶呤、卡培他滨、紫杉烷、蒽环类、紫杉醇、多西他赛、紫杉醇蛋白结合颗粒、多柔比星、表柔比星、5-氟尿嘧啶、环磷酰胺、阿法替尼、长春新碱、依托泊苷或其组合。另外或可替选地，当先前的治疗包括化学疗法时，其可以包括一种或多种化学治疗剂，其选自：fec：5-氟尿嘧啶、表柔比星、环磷酰胺；fac：5-氟尿嘧啶、多柔比星、环磷酰胺；ac：多柔比星、环磷酰胺；ec：表柔比星、环磷酰胺。[0193]根据本发明，受试者可能在自最后一次治疗后小于或等于12个月复发，或自最后一次治疗后小于或等于6个月复发中，未接受过先前的治疗。[0194]根据本发明，受试者可以是未接受pd-1轴结合拮抗剂，例如派姆单抗、西米普利单抗、纳武利尤单抗或opdivo的或治疗前，可能已接受1、2、3、4、5、6或7次先前剂量的pd-1轴结合拮抗剂。根据本发明，在治疗之前受试者可能已经接受了1、2或3次先前的铂疗法线，或者在治疗之前已经接受了最多1次先前的铂疗法线。[0195]根据本发明，在距最后一次治疗少于或等于12个月时复发，或距最后一次治疗少于或等于6个月时复发的情况下，受试者可能未接受任何先前的辅助疗法(手术后进行放射和/或化疗)。[0196]根据本发明，与单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗相比，治疗延伸或改善或有效延伸或有效改善以下任何一项或多项：[0197](a)无进展生存期(progressionfreesurvival)，[0198](b)进展时间，[0199](c)反应的持续时间，[0200](d)总生存期，[0201](e)客观反应或客观反应率，[0202](f)总体反应或总体反应率，[0203](g)部分反应或部分反应率，[0204](h)完全反应或完全反应率；[0205](i)稳定性疾病率或中值(median)稳定性疾病[0206](j)中值无进展生存期，[0207](k)中值进展时间，[0208](l)中值反应持续时间，或[0209](m)中值总生存期；[0210](n)中值客观反应或中值客观反应率，[0211](o)中值总体反应或中值总体反应率，[0212](p)中值部分反应或中值部分反应率，[0213](q)中值完全反应或中值完全反应，[0214](r)中值稳定性疾病率或中值稳定性疾病。[0215]根据本发明，与单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗相比，治疗延伸、或改善、或有效延伸、或有效改善以下任何一项或多项：[0216](a)最佳总体反应(bestoverallresponse，bor)、(b)确认反应时间(timetoconfirmedresponse，ttr)、(c)反应持续时间(durationofresponse，dor)、(d)稳定性疾病持续时间(durationofstabledisease，dosd)、(e)无进展生存期(progressionfreesurvival，pfs))、或(f)总生存期(overallsurvival，os)。[0217]最佳总体反应(bor)可定义为记录从t细胞输注之日起到疾病进展的最佳反应。确认反应时间(ttr)，可定义为t细胞输注与确认反应的初始日期之间的持续时间。反应持续时间(dor)，可定义为从确认反应的初始日期到pd、进行性疾病(或死亡)的日期的持续时间。疾病稳定持续时间(dosd)，可定义为从t细胞输注日期到pd、进行性疾病(或死亡)日期的持续时间。无进展生存期(pfs)，可定义为t细胞输注日期与基于recistv1.1的疾病进展最早日期或任何原因导致的死亡之间的间隔。总生存期(os)，可以定义为t细胞输注和任何原因导致的死亡之间的持续时间。[0218]“无进展生存期”(pfs)是指从治疗(或随机化)到首次疾病进展或死亡的时间。“进展时间”(ttp)不计算死于被治疗的癌症或肿瘤以外的其他原因的患者，但在其他方面等同于pfs。“反应持续时间”(dor)是癌症、肿瘤或病变在不生长或扩散的情况下继续对治疗产生反应的时间长度。根据本发明，dor、ttp和pfs可以通过实体瘤反应评估标准(responseevaluationcriteriainsolidtumors，recist)来评估，或者可以通过ca-125水平来评估作为进展的决定因素。[0219]根据本发明，例如与单独使用pd-1轴结合拮抗剂(对照)或单独使用修饰的免疫反应细胞(对照)治疗相比，pfs和/或ttp和/或dor或其中值可以是、或者可以被延长或改善至少2周、3周、1个月、2个月、2.3个月、2.5个月、2.9个月、3个月、3.5个月、3.8个月、4个月、4.5个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、16个月、18个月、20个月、22个月、2年、3年、4年、5年、6年、7年、8年、9年、10年。在一个实施方式中，与对照相比，pfs和/或ttp和/或dor或其中值延长了约2.9个月至3.8个月。在一个实施方式中，与对照相比，pfs和/或ttp和/或dor或其中值延长了至少约3.8个月。在另一个实施方式中，与对照相比，pfs和/或ttp和/或dor或其中值延长约2.3个月；在一个实施方式中，与对照相比，pfs和/或ttp和/或dor或其中值延长约6个月。[0220]“总生存期”是指受试者在规定的时间段内保持存活。根据本发明，从根据本发明的方法或治疗开始或从初始诊断开始，总生存期或其中值可以是、或者可以被提高或延长了约6个月、约1年、约1.5年、约2年、约3年、约4年、约5年、约6年、约7年、约8年、约9年、约10年，任选地，用于生存分析的事件可以是任何原因导致的死亡。“生存期”是指受试者保持存活并且包括无进展生存期(pfs)和总生存期(os)。“总生存期”是从疾病、肿瘤和/或癌症的诊断日期或开始治疗之日起，被诊断患有该疾病的受试者仍然活着的时间长度。可以通过kaplan-meier方法估计生存期，并且使用分层对数秩检验(stratifiedlog-ranktest)计算生存期的任何差异；“延长生存期”或“增加生存期的可能性”是指与单独使用pd-1轴结合拮抗剂(对照)或单独使用修饰的免疫反应细胞(对照)的治疗相比，增加治疗受试者的pfs和/或os。根据本发明，例如与单独使用pd-1轴结合拮抗剂(对照)或单独使用修饰的免疫反应细胞(对照)的治疗相比，总生存期或生存期可以延长或提高至少1个月、2个月、2.3个月、2.5个月、2.9个月、3个月、3.5个月、3.8个月、4个月、4.5个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、16个月、18个月、20个月、22个月、2年、3年、4年、5年、6年、7年、8年、9年、10年。[0221]“客观反应率”(objectiveresponserate，obrr)是肿瘤大小减少预定量的受试者比例，任选地由最短时间段内目标病变或肿瘤的最长直径的总和(sld)确定。“总体反应率(overallresponserate，orr)”定义为对治疗有部分或完全反应的受试者比例；它不包括稳定性疾病。orr通常定义为在指定时间段内完全响应(cr)和部分响应(pr)的总和。根据本发明，例如与单独使用pd-1轴结合拮抗剂(对照)或单独使用修饰的免疫反应细胞(对照)的治疗相比，obrr和/或orr和/或pr和/或cr和/或sd可以是或可以延长或提高至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％。[0222]根据本发明，该方法可以进一步包括确定来自受试者的样本中生物标志物的表达水平，其中将生物标志物的水平与参考水平进行比较以确定受试者对治疗作出反应的可能性；或者确定受试者对治疗的反应水平，其中样本在治疗之前、治疗期间或治疗后获得。参考水平可以是受试者治疗前的水平或者可以是与癌症的存在或癌症的不存在相关的水平。生物标志物可以是t-效应器相关基因，例如cd8a、穿孔素(prf1)、粒酶a(gzma)、粒酶b(gzmb)、干扰素-γ(ifn-γ)、cxcl9或cxcl10。生物标志物可以是活化的基质相关基因，例如转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β，tgf-β)、纤维细胞活化蛋白(fibroblast-activatedprotein，fap)、podplanin(pdpn)、胶原基因或双糖链蛋白聚糖(bgn)。生物标志物可以是一种或一种源自髓鞘(myelokj)的抑制细胞相关基因，例如cd68、cd163、foxp3或雄激素调节基因1。或者，生物标志物可以是pd-l1、cd8或雄激素受体(ar)基因。[0223]本发明进一步提供了增强患有癌症和/或肿瘤的受试者的免疫功能的方法，包括向受试者施用治疗方案，该治疗方案包括有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群，例如如上文描述的参考治疗方法以及与其相关的方面、实施方式和特征。[0224]因此，本发明还提供了一种增强免疫功能的方法，其中：[0225](a)相对于治疗施用前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，个体中的cd8t细胞具有增强的启动、活化、增殖和/或细胞溶解活性，[0226](b)相对于治疗施用前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，cd8t细胞的数量增加，[0227](c)相对于施用治疗之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞治疗，受试者中的癌症和/或肿瘤细胞选择性地具有升高的mhci类抗原的表达，任选地其中受试者的pbmc细胞不具有升高的mhci类抗原的表达，[0228](d)相对于治疗施用之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，受试者中的抗原呈递细胞具有增强的成熟和活化，任选地其中抗原呈递细胞是树突细胞，[0229](e)相对于治疗施用前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，个体中的il-10和/或il-8的血清水平降低，[0230](f)相对于施用治疗之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，受试者的癌症和/或肿瘤具有升高的t细胞浸润水平，[0231](g)相对于施用治疗之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，受试者的t细胞具有降低的t细胞pd-1表达水平。[0232]因此，(a)相对于治疗施用前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，cd8t细胞活化的特征可以是γ-ifn cd8t细胞的频率升高和/或细胞溶解活性的增强；(b)抗原呈递细胞的成熟可以cd83 树突细胞频率增加为特征；(c)抗原呈递细胞的活化可以树突细胞上cd80和cd86的表达升高为特征；(d)cd8t细胞可以是抗原特异性cd8t细胞。[0233]根据本发明，提供了；[0234](a)一种试剂盒，其包括pd-1轴结合拮抗剂和包装说明书，该说明书包括使用pd-1轴结合拮抗剂与表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群的组合以治疗或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展的说明，[0235](b)一种试剂盒，其包括pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群，以及包装说明书，其包括使用pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群以治疗或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展的说明，[0236](c)一种试剂盒，其包括表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群和包装说明书，其包括使用该表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群与pd-1轴结合拮抗剂的组合以治疗或延缓受试者癌症和/或肿瘤的进展的说明；[0237]任选地，其中所述pd-1轴结合拮抗剂是抗pd-l1抗体、抗pd-1抗体、抗pd-1免疫粘附素。[0238]根据本发明，受试者，即受试者癌症和/或肿瘤，可以是pd-l1表达阳性(pd-l1 )和/或hla-a2表达阳性(hla-a2 )，和/或mage-a4表达阳性(mage-a4 )。根据本发明，受试者(a)在任一等位基因中不是hla-a*02:05阳性，(b)不是hla-a*02:07(并且在抗原结合域中具有与a*02:07相同的蛋白质序列的等位基因)或任何a*02无效等位基因(用“n”后缀指定，例如a*02:32n)作为唯一的hla-a*02等位基因(例如具有hla等位基因a*02:04和a*02:07的受试者符合条件)，(c)没有cns转移。[0239]将通过参考以下附图和实施例进一步描述本发明。附图说明[0240]图1.在响应者的输注后肿瘤中检测到cd3和pd-l1的增加；[0241]图2.无响应者中输注后cd3和pd-l1的增加；[0242]图3.与非转导(non-transduced，ntd)t细胞相比，mage-a4speart细胞在刺激后上调pd-1表达；[0243]图4.与非转导(ntd)t细胞相比，mage-a4 cd8speart细胞在刺激后上调pd-1表达；[0244]图5.在a375细胞(a375.gfpmage-a4 黑色素瘤细胞系)中pd-l1被表达且由于ifn-γ而上调；[0245]图6.用于刺激和上调speart细胞(异源mage-a4tcr或异源mage-a4tcr 异源cd8表达t细胞)上pd-1表达的预激活测定方案；[0246]图7.通过预激活在a2m4speart细胞上使pd-1表达上调；[0247]图8.(a)在初始刺激期间和(b)在使用或不使用抗pd-1抗体的再刺激期间a2m4培养物的上清液；此处显示了ifn-γelisa数据(n＝6小规模捐赠者)；[0248]图9.a2m4speart细胞与pd-1轴的拮抗剂(派姆单抗)的组合治疗癌症受试者的方案。[0249]序列[0250]seqidno:1,pd1-人类程序性细胞死亡蛋白(智人(homosapiens)[0251]mqipqapwpvvwavlqlgwrpgwfldspdrpwnpptfspallvvtegdnatftcsfsntsesfvlnwyrmspsnqtdklaafpedrsqpgqdcrfrvtqlpngrdfhmsvvrarrndsgtylcgaislapkaqikeslraelrvterraevptahpspsprpagqfqtlvvgvvggllgslvllvwvlavicsraargtigarrtgqplkedpsavpvfsvdygeldfqwrektpeppvpcvpeqteyativfpsgmgtssparrgsadgprsaqplrpedghcswpl[0252]seqidno:2,pd1l1-人类程序性细胞死亡配体1(智人)[0253]mrifavfifmtywhllnaftvtvpkdlyvveygsnmtieckfpvekqldlaalivywemedkniiqfvhgeedlkvqhssyrqrarllkdqlslgnaalqitdvklqdagvyrcmisygg[0254]adykritvkvnapynkinqrilvvdpvtseheltcqaegypkaeviwtssdhqvlsgkttttnskreeklfnvtstlrintttneifyctfrrldpeenhtaelvipelplahppnerthlvilgaillclgvaltfifrlrkgrmmdvkkcgiqdtnskkqsdthleet[0255]seqidno:3,pd1l2-人类程序性细胞死亡1配体2(智人)[0256]miflllmlslelqlhqiaalftvtvpkelyiiehgsnvtlecnfdtgshvnlgaitaslqkvendtsphreratlleeqlplgkasfhipqvqvrdegqyqciiiygvawdykyltlkvkasyrkinthilkvpetdeveltcqatgyplaevswpnvsvpantshsrtpeglyqvtsvlrlkpppgrnfscvfwnthvreltlasidlqsqmeprthptwllhifipfciiafifiatvialrkqlcqklysskdttkrpvtttkrevnsai[0257]seqidno:4,德瓦鲁单抗重链序列[0258]evqlvesggglvqpggslrlscaasgftfsrywmswvrqapgkglewvanikqdgsekyyvdsvkgrftisrdnaknslylqmnslraedtavyycareggwfgelafdywgqgtlvtvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapefeggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpasiektiskakgqprepqvytlppsreemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk[0259]seqidno:5,德瓦鲁单抗轻链序列[0260]eivltqspgtlslspgeratlscrasqrvsssylawyqqkpgqaprlliydassratgipdrfsgsgsgtdftltisrlepedfavyycqqygslpwtfgqgtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0261]seqidno:6,阿替利珠单抗重链序列[0262]evqlvesggglvqpggslrlscaasgftfsdswihwvrqapgkglewvawispyggstyyadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycarrhwpggfdywgqgtlvtvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqyastyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsreemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk[0263]seqidno:7,阿替利珠单抗轻链序列[0264]diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdvstavawyqqkpgkapklliysasflysgvpsrfsgsgsgtdftltisslqpedfatyycqqylyhpatfgqgtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0265]seqidno:8,阿维鲁单抗重链序列[0266]evqllesggglvqpggslrlscaasgftfssyimmwvrqapgkglewvssiypsggitfyadtvkgrftisrdnskntlylqmnslraedtavyycariklgtvttvdywgqgtlvtvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk[0267]seqidno:9,阿维鲁单抗轻链序列[0268]qsaltqpasvsgspgqsitisctgtssdvggynyvswyqqhpgkapklmiydvsnrpsgvsnrfsgsksgntasltisglqaedeadyycssytssstrvfgtgtkvtvlgqpkanptvtlfppsseelqankatlvclisdfypgavtvawkadgspvkagvettkpskqsnnkyaassylsltpeqwkshrsyscqvthegstvektvaptecs[0269]seqidno:10,mdx1105重链序列[0270]qvqlvqsgaevkkpgssvkvscktsgdtfstyaiswvrqapgqglewmggiipifgkahyaqkfqgrvtitadeststaymelsslrsedtavyfcarkfhfvsgspfgmdvwgqgttvtvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkt[0271]seqidno:11,mdx1105轻链序列[0272]eivltqspatlslspgeratlscrasqsvssylawyqqkpgqaprlliydasnratgiparfsgsgsgtdftltisslepedfavyycqqrsnwptfgqgtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0273]seqidno:12,派姆单抗-db09037》重链序列[0274]qvqlvqsgvevkkpgasvkvsckasgytftnyymywvrqapgqglewmgginpsnggtnfnekfknrvtlttdsstttaymelkslqfddtavyycarrdyrfdmgfdywgqgttvtvssastkgpsvfplapcsrstsestaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtktytcnvdhkpsntkvdkrveskygppcppcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgk[0275]seqidno:13,派姆单抗轻链序列[0276]eivltqspatlslspgeratlscraskgvstsgysylhwyqqkpgqaprlliylasylesgvparfsgsgsgtdftltisslepedfavyycqhsrdlpltfgggtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0277]seqidno:14,纳武利尤单抗重链序列[0278]qvqlvesgggvvqpgrslrldckasgitfsnsgmhwvrqapgkglewvaviwydgskryyadsvkgrftisrdnskntlflqmnslraedtavyycatnddywgqgtlvtvssastkgpsvfplapcsrstsestaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtktytcnvdhkpsntkvdkrveskygppcppcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgk[0279]seqidno:15,纳武利尤单抗轻链序列[0280]eivltqspatlslspgeratlscrasqsvssylawyqqkpgqaprlliydasnratgiparfsgsgsgtdftltisslepedfavyycqqssnwprtfgqgtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0281]seqidno:16,西米普利单抗重链序列[0282]evqllesggvlvqpggslrlscaasgftfsnfgmtwvrqapgkglewvsgisgggrdtyfadsvkgrftisrdnskntlylqmnslkgedtavyycvkwgniyfdywgqgtlvtvssastkgpsvfplapcsrstsestaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtktytcnvdhkpsntkvdkrveskygppcppcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgk[0283]seqidno:17,西米普利单抗轻链序列[0284]diqmtqspsslsasvgdsititcraslsintflnwyqqkpgkapnlliyaasslhggvpsrfsgsgsgtdftltirtlqpedfatyycqqssntpftfgpgtvvdfrrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0285]seqidno:18,magea4肽[0286]gvydgrehtv[0287]seqidno:19；(cd8α)cdr粗体下划线，信号序列斜体下划线[0288][0289]seqidno:20；(cd8α)[0290]atggccttaccagtgaccgccttgctcctgccgctggccttgctgctccacgccgccaggccgagccagttccgggtgtcgccgctggatcggacctggaacctgggcgagacagtggagctgaagtgccaggtgctgctgtccaacccgacgtcgggctgctcgtggctcttccagccgcgcggcgccgccgccagtcccaccttcctcctatacctctcccaaaacaagcccaaggcggccgaggggctggacacccagcggttctcgggcaagaggttgggggacaccttcgtcctcaccctgagcgacttccgccgagagaacgagggctactatttctgctcggccctgagcaactccatcatgtacttcagccacttcgtgccggtcttcctgccagcgaagcccaccacgacgccagcgccgcgaccaccaacaccggcgcccaccatcgcgtcgcagcccctgtccctgcgcccagaggcgtgccggccagcggcggggggcgcagtgcacacgagggggctggacttcgcctgtgatatctacatctgggcgcccttggccgggacttgtggggtccttctcctgtcactggttatcaccctttactgcaaccacaggaaccgaagacgtgtttgcaaatgtccccggcctgtggtcaaatcgggagacaagcccagcctttcggcgagatacgtcggttcaagagctaaaagaagtggtagtggtgcccctgtga[0291]seqidno:21；(magea4tcrα链)cdr粗体下划线[0292][0293]seqidno:22；(magea4tcrα链编码序列)[0294]atgaagaagcacctgaccacctttctcgtgatcctgtggctgtacttctaccggggcaacggcaagaaccaggtggaacagagcccccagagcctgatcatcctggaaggcaagaactgcaccctgcagtgcaactacaccgtgtcccccttcagcaacctgcggtggtacaagcaggacaccggcagaggccctgtgtccctgaccatcctgaccttcagcgagaacaccaagagcaacggccggtacaccgccaccctggacgccgatacaaagcagagcagcctgcacatcaccgccagccagctgagcgatagcgccagctacatctgcgtggtgtccggcggcacagacagctggggcaagctgcagtttggcgccggaacacaggtggtcgtgacccccgacatccagaaccctgaccctgccgtgtaccagctgcgggacagcaagagcagcgacaagagcgtgtgcctgttcaccgacttcgacagccagaccaacgtgtcccagagcaaggacagcgacgtgtacatcaccgacaagaccgtgctggacatgcggagcatggacttcaagagcaatagcgccgtggcctggtccaacaagagcgacttcgcctgcgccaacgccttcaacaacagcattatccccgaggacacattcttcccaagccccgagagcagctgcgacgtcaagctggtggaaaagagcttcgagacagacaccaacctgaacttccagaacctgagcgtgatcggcttcagaatcctgctgctgaaggtggccggcttcaacctgctgatgaccctgagactgtggtccagcggcagccgggccaagaga[0295]seqidno:23；(magea4tcrβ链)cdr粗体下划线[0296][0297]seqidno:24；(magea4tcrβ链编码序列)[0298]atggccagcctgctgttcttctgcggcgccttctacctgctgggcaccggctctatggatgccgacgtgacccagaccccccggaacagaatcaccaagaccggcaagcggatcatgctggaatgctcccagaccaagggccacgaccggatgtactggtacagacaggaccctggcctgggcctgcggctgatctactacagcttcgacgtgaaggacatcaacaagggcgagatcagcgacggctacagcgtgtccagacaggctcaggccaagttcagcctgtccctggaaagcgccatccccaaccagaccgccctgtacttttgtgccacaagcggccagggcgcctacgaggagcagttctttggccctggcacccggctgacagtgctggaagatctgaagaacgtgttccccccagaggtggccgtgttcgagccttctgaggccgaaatcagccacacccagaaagccacactcgtgtgtctggccaccggcttctaccccgaccacgtggaactgtcttggtgggtcaacggcaaagaggtgcacagcggcgtgtccaccgatccccagcctctgaaagaacagcccgccctgaacgacagccggtactgcctgagcagcagactgagagtgtccgccaccttctggcagaaccccagaaaccacttcagatgccaggtgcagttttacggcctgagcgagaacgacgagtggacccaggacagagccaagcccgtgacacagatcgtgtctgccgaagcttgggggcgcgccgattgtggctttaccagcgagagctaccagcagggcgtgctgagcgccaccatcctgtacgagatcctgctgggaaaggccacactgtacgccgtgctggtgtctgccctggtgctgatggccatggtcaagcggaaggacagccggggc[0299]seqidno:25；(magea4tcrα链可变区域)136aa-cdr粗体下划线[0300][0301]seqidno:26；(magea4tcrβ链可变区域)133aa-cdr粗体下划线[0302][0303]seqidno:27；cdr1magea4tcrα链,(残基48-53)[0304]vspfsn[0305]seqidno:28；cdr2magea4tcrα链,(残基71-76)[0306]ltfsen[0307]seqidno:29；cdr3magea4tcrα链,(残基111-125)[0308]cvvsggtdswgklqf[0309]seqidno:30；cdr1magea4tcrβ链,(残基46–50)[0310]kghdr[0311]seqidno:31；cdr2magea4tcrβ链,(残基68-73)[0312]sfdvkd[0313]seqidno:32；cdr3magea4tcrβ链,(残基110–123)[0314]catsgqgayeeqff[0315]seqidno:33；cdr1cd8α(残基45-53)[0316]vllsnptsg[0317]seqidno:34；cdr2cd8α(残基72-79)[0318]ylsqnkpk[0319]seqidno:35；cdr3cd8α(残基118-123)[0320]lsnsim[0321]seqidno:36,magea4[0322]实施例[0323]实施例1.[0324]使用在t细胞输注前后从受试者滑膜肉瘤患者体内(表达magea4的肿瘤)采集的组织活检样本(speart细胞，即包含用特异于magea4癌-睾丸抗原的异源tcr工程化的受试者t细胞)，我们已证明在输注前组织中没有pd-l1表达。患者对speart细胞治疗有反应。在输注speart细胞后，在组织信号传导t细胞浸润和存在基因修饰t细胞中测量的cd3(成熟t淋巴细胞上t细胞受体(tcr)复合物的一部分)表达增加。此外，在与t细胞浸润相关的肿瘤中观察到pd-l1的诱导，如图1。来自对speart细胞治疗无反应的卵巢癌患者的活检数据表明，在输注前活检中pd-l1表达呈阳性，并且在输注speart细胞后，t细胞/基因修饰的t细胞浸润(由cd3表示)增加且观察到的相关的肿瘤中pd-l1的诱导更强，如图2。[0325]我们已经表明，与不具有异源tcr的非转导(ntd)t细胞相比，在用靶抗原mage-a4刺激后，将表达异源tcr的基因修饰t细胞暴露于mage-a4会使pd-1表达上调，如图3。在表达异源mage-a4和异源cd8的基因修饰t细胞中也可以看到相同的效果，如图4。数据表明，可以通过阻断pd1/pd-l1相互作用来增强工程化t细胞的活性。我们还表明，响应干扰素癌细胞系使pd-l1表达上调，如图5。图5的数据表明，在患者中临床观察到的情况也可以在体外癌细胞测定系统中观察到。作为对癌症免疫反应的一部分，t细胞通过靶细胞的jak/stat途径产生具有抗肿瘤作用的干扰素。在患者中，肿瘤对干扰素的pd-l1上调反应代表了肿瘤细胞免疫规避适应的一部分。[0326]我们使用预刺激方案和细胞因子elisa测定进一步检查了pd-1阻断对将针对mage-a4表达异源tcr的基因修饰t细胞(speart细胞)引起的细胞毒性和效应器细胞因子产生的影响。如图6所示，进行t细胞预激活，其中针对mage-a4表达异源tcr的基因修饰的t细胞(也对表达异源mage-a4和异源cd8的基因修饰t细胞进行)，用表达肿瘤细胞的靶标(辐照的a375mage-a4 黑色素瘤细胞)刺激，在没有用抗pd-1抗体阻断pd-1的情况下再刺激之前培养并与癌细胞分离。图7的数据显示，在7天的初始刺激期间，pd-1在预激活t细胞上的表达，对于在每个细胞群中的cd4 和cd8 细胞都增加。[0327]使用预刺激模型，我们已经表明在初始刺激期间工程化mage-a4tcr和工程化mage-a4tcr cd8t细胞的初始刺激期间都会产生ifn-γ、il-2和颗粒酶b，但在重新刺激时，在这个预激活步骤之后，这种能力就会丧失。然而，对于工程化mage-a4tcr和工程化mage-a4tcr cd8t-细胞，在抗pd-1抗体存在下的重新刺激部分恢复了这种细胞因子活性功能并恢复了ifnγ和颗粒酶b但不是il-2的产生，图8显示了mage-a4tcr和ifn-γ的数据。总之，我们已经展示了通过与抗pd-1抗体组合来挽救耗尽的工程化t细胞细胞因子功能的能力。[0328]实施例2，体内肿瘤模型[0329]我们使用1x106转导(adp-a2m4)mage-a4tcrt细胞的剂量在nsg品系小鼠a375(黑色素瘤)异种移植模型中进一步测试了该组合；10mg/kg腹膜内q4d(每天两次，共4天)抗pd-1抗体派姆单抗(keytruda)，并根据以下方案记录对肿瘤体积的影响。将72只荷瘤小鼠随机分为n＝8的9组，并按照下表1进行治疗。[0330]表1[0331][0332]第1组和第2组中的所有动物将从第0天(即第0、4、8、12、16、20天)开始，通过i.p.施用(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)同种型对照(第1组)或派姆单抗(第2组)q4d)。不会进行其他治疗。(第0天是按照第3至第9组施用t细胞的那一天)。[0333]第3组和第4组中的所有动物将在第0天通过i.v.接受一次推荐体积为5ml/kg的ntdt细胞施用。不会对第3组中的动物进行其他治疗。此外，第4组中的动物将从第1天(即第1、5、9、13、17天)通过i.p.(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)接受派姆单抗q4d。[0334]第5、6、7、8和9组中的所有动物将在第0天通过i.v.接受单次推荐体积为5ml/kg的t细胞施用，及第5、6、7、8和9组进行如下所述的第二次治疗：[0335]-第5组：通过i.p.(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)从第1天开始(即第1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57天)同种型对照q4d[0336]-第6组：通过i.p(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)从第-1天开始(即第-1、3、7、11、15、19、23、27、31、35、39、43、47、51、55、59天)派姆单抗q4d[0337]-第7组：通过i.p.(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)从第7天开始(即第7、11、15、19、23、27、31、35、39、43、47、51、55、59天)派姆单抗q4d[0338]-第8组：通过i.p.(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)从第14天开始(即第14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、58天)派姆单抗q4d[0339]-第9组：通过i.p(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)从第21天开始(即第21、25、29、33、37、41、45、49、53、57天)派姆单抗q4d[0340]在所有情况下，每周用卡尺测量肿瘤体积3次，并从治疗开始每周对动物称重3次。[0341]实施例3，临床研究[0342]设计一项研究以调查派姆单抗与adp-a2m4(speart细胞，经工程改造以表达magea4特异性tcr的t细胞)的联合治疗，用于治疗具有复发或转移性hnscc的患者，其中受试者之前未接受过转移性疾病的系统治疗或受试者在含铂化疗期间或之后出现疾病进展。根据recistv1.1，疾病可以是组织学或细胞遗传学证实和/或可测量的疾病。[0343]该研究是针对晚期/复发头颈鳞状细胞癌(hnscc)和未使用检查点抑制剂(na点抑制)患者的单臂ii期研究(n＝10名患者)，其中受试者已接受过0-1次先前的含铂系统线(line)用于转移性疾病，或受试者在治疗前在筛选时未接受过检查点抑制剂且即将开始派姆单抗治疗，或最近已开始派姆单抗治疗晚期疾病(已接受1-2剂)。受试者被确定为pd-l1 、hla-a2 、mage-a4表达：通过ihc在≥30％的细胞中2 /3 [即通过ihc(immunohistochemistry)(免疫组化)肿瘤显示mage-a4表达定义为≥30％的肿瘤细胞≥2 ]。根据recistv1.1，测量的主要终点是orr。在晚期/复发头颈鳞状细胞癌(hnscc)中，标准护理pd-1疗法、派姆单抗单药疗法的历史反应率产生orr＝19％。[0344]在开始派姆单抗治疗之前，受试者被分离以获得t细胞群，随后用对magea4抗原(特别是特异性magea4抗原肽seqidno：18)特异的adp-a2m4“spear”tcr转导细胞，扩增细胞并冷冻保存以备后用。此后，受试者接受最多3剂派姆单抗治疗(每3周30分钟内静脉输注200mg)，然后根据recistv1.1扫描疾病状态，例如可测量的疾病。具有进展性疾病或稳定性疾病的受试者继续接受淋巴细胞清除(lymphodepletion)方案，氟达拉滨(fludarabine)(30mg/m2/天，持续4天)和环磷酰胺(600mg/m2/天，持续3天)和speart细胞输注：adp-a2m4剂量为10亿至100亿个转导细胞，无剂量递增，并继续使用派姆单抗(200mgiv输注，每3周在30分钟内)直至疾病恶化或直至24个月，以较早者为准。扫描并确定有完全或部分反应的受试者不进行淋巴细胞清除和细胞输注，而是继续派姆单抗(200mgiv输注，每3周在30分钟内)直到疾病进展或直到24个月，以较早者为准，之后他们可能会经历淋巴细胞清除和细胞输注以及派姆单抗联合施用。任选地，在开始使用派姆单抗之前进行分离术(apheresis)。细胞输注后的第一剂派姆单抗可能在细胞输注后的第17天或第22天。[0345]对于本研究，受试者排除标准包括：(a)hla-a*02:05在任一等位基因中均为阳性。(b)hla-a*02:07(以及在抗原结合域中与a*02:07具有相同蛋白质序列的等位基因)或任何a*02无效等位基因(以“n”后缀命名，例如a*02:32n)作为唯一的hla-a*02等位基因(例如具有hla等位基因a*02:04和a*02:07的受试者符合条件)，(c)cns转移，(d)任何先前的检查点抑制剂疗法，(e)任何先前的细胞疗法，(f)如果接受化疗，则白细胞分离术或ld前所需的冲洗期为3周。[0346]根据recistv1.1，测量的主要终点是的orr。处理方案如图9所示。当前第1页12当前第1页12
背景技术：
：：2.肿瘤微环境中的免疫耐受、t细胞耗竭和功能抑制是对癌症免疫治疗的挑战，成功治疗癌症的一个目标是寻求旨在打破肿瘤微环境内的耐受并增强和维持t细胞活化的疗法。3.抗肿瘤免疫反应始于树突状细胞(dendriticcell，dc)引起的释放和摄取肿瘤抗原，该树突状细胞处理抗原并通过mhc将其呈递给呈递抗原特异性t细胞受体的t细胞，这种对t细胞的刺激导致它们的活化和增殖。有效的抗肿瘤免疫反应需要维持活化的t细胞反应才能有效消除肿瘤。问题仍然在于，肿瘤微环境被肿瘤细胞本身和髓源性抑制细胞(myeloid-derivedsuppressorcells，mdscs)和调节性t细胞(regulatorytcell，tregs)的抑制性免疫群体赋予免疫抑制；此外，免疫耐受可以源自于抗肿瘤免疫反应的任何关键阶段的抑制，即树突状细胞；抗原呈递，主要的组织相容性复合物；t细胞的启动、信号传导、激活或运输或t细胞渗透到肿瘤中，t细胞受体；mdsc、tregs和癌症相关的纤维细胞，其促进更高水平的抑制性配体和细胞因子。这个问题可能导致患者通过对过继转移免疫效应物(如抗肿瘤单克隆抗体、嵌合抗原受体(chimericantigenreceptor，car)t细胞、tcr工程t细胞)而对癌症疗法缺乏反应，或患者在治疗后仍复发，尽管循环中存在可测量的抗体或转导的t细胞。一些癌症，如食道癌、胃癌、肝癌、胆管癌、胰腺癌、头颈癌、肺癌、卵巢癌、乳腺癌，似乎在这方面存在特殊的问题。4.原发性和获得性耐药性对使用检查点抑制剂进行有效的癌症和肿瘤治疗也是一个越来越大的挑战，例如使用抗pd1或抗pd-l1抗体的pd-1轴结合拮抗剂治疗。人们认为这种抗性的基础是多种机制的，例如，肿瘤微环境抑制因子、低肿瘤免疫原性、肿瘤的pd1抗性、t细胞浸润或排斥机制、肿瘤对干扰素的抗性以及t细胞引起的对额外的检查点抑制剂受体的上调。一些癌症出现高度耐药的检查点抑制剂治疗、部分患者反应、无反应和患者对检查点抑制剂治疗产生获得性耐药是癌症疗法中的一个重要问题。5.因此，需要开发解决对癌症和肿瘤的检查点抑制剂疗法的原发性和获得性耐药性并改善t细胞功能、增强t细胞存活持久性和功效、激活免疫系统和/或克服局部免疫抑制性肿瘤微环境的疗法。6.本发明涉及癌症和/或肿瘤的联合治疗，其包括pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群，该联合治疗导致增强对癌症或肿瘤的免疫反应。技术实现要素：7.本发明涉及癌症和/或肿瘤的联合治疗，其包括pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。优选地，联合治疗导致增强对癌症或肿瘤的免疫反应。8.本发明提供了一种治疗、预防或延缓受试者癌症和/或肿瘤的进展的方法，包括向受试者施用有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。还提供了一种增强受试者对癌症和/或肿瘤的免疫反应的方法，包括向受试者施用有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。9.本发明还提供pd-1轴结合拮抗剂与表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群的组合，用于治疗、预防或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展或用于增强对癌症和/或肿瘤的免疫反应。10.本发明还提供了pd-1轴结合拮抗剂与表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群的组合在制造用于治疗、预防或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展或者用于增强对癌症和/或肿瘤的免疫反应的药剂中的用途。11.本发明还提供了一种用于治疗、预防或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展或用于增强对癌症或肿瘤的免疫反应的一种或多种药物的制造方法，包括使用pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。12.还提供了一种治疗、预防或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展的方法，包括向受试者施用治疗方案，该治疗方案包括有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。13.本发明还提供了一种pd-1轴结合拮抗剂，其用于治疗、预防或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展的方法中，该方法包括向受试者施用一种治疗方案，该治疗方案包括有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。14.还提供了一种用于增强受试者对癌症和/或肿瘤的免疫反应的方法，包括向受试者施用一种治疗方案，该治疗方案包括有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。15.本发明还提供了一种pd-1轴结合拮抗剂，用于增强受试者对癌症和/或肿瘤的免疫反应的方法中，该方法包括向受试者施用一种治疗方案，该治疗方案包括有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群。16.根据本发明，治疗导致在受试者的完全反应、部分反应或疾病稳定；和/或治疗期间或治疗停止后受试者的持续反应；任选地，相对于施用治疗之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞治疗，治疗得到改善。17.pd-1轴结合拮抗剂18.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂是一种分子，其抑制pd-1轴结合伴侣(bindingpartner)与其同类的(cognate)结合伴侣的相互作用或减少、阻止或抑制源自于pd-1与一个或多个pd-1的结合伴侣(例如pd-l1和pd-l2)的相互作用的信号转导。pd-1轴结合拮抗剂可以减少、抑制或阻止pd1轴对t细胞介导的抑制作用或克服t细胞功能障碍或耗竭，例如产生恢复或增强t细胞功能的结果，例如通过t细胞增殖、细胞因子产生、靶细胞杀伤、活化、cd28信号传导、浸润肿瘤、识别和结合树突状细胞呈递的抗原和/或产生干扰素的能力来指示。19.根据本发明，在其拮抗、阻断、抑制或降低其结合的抗原(例如pd-1相关靶标)的生物学活性的意义上，pd-1轴结合拮抗剂可以是拮抗剂。因此，pd-1轴结合拮抗剂可以拮抗、阻断、抑制或减少通过pd-1的信号传导，从而恢复t细胞的功能性反应，例如t细胞增殖、细胞因子产生、靶细胞杀伤，从而将t细胞从功能障碍状态拯救到抗原刺激状态，并增强t细胞功能，例如通过克服t细胞耗竭、无反应性(anergy)、功能障碍、肿瘤免疫、增强肿瘤免疫原性或改善持续反应。20.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以是(a)pd-1拮抗剂和/或结合拮抗剂，(b)pd-l1拮抗剂和/或结合拮抗剂，(c)pd-l2拮抗剂和/或结合拮抗剂。pd-1轴结合拮抗剂可以结合pd-1和/或结合到seqidno:1，或(b)结合pd-l1和/或结合到seqidno:2。21.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以(a)抑制pd-1与其配体结合伴侣的结合，(b)抑制pd-l1与其配体结合伴侣的结合。22.因此，当pd-1轴结合拮抗剂是pd-1结合拮抗剂时，它可以抑制pd-1与以下中的一者或多者的结合：(a)pd-l1，(b)pd-l2，或(c)pd-l1和pd-l2。pd-1结合拮抗剂可以包括抗pd-1抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白和寡肽，其由于pd-1与pd-l1和/或pd-l2的相互作用而抑制、减少、阻止或干扰信号转导。pd-1结合拮抗剂可以减少负共刺激信号，该负共刺激信号由t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导或通过t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导，和/或通过pd-1的信号传导来介导，从而使功能障碍的t细胞功能障碍降低，从而增强响应抗原的t细胞效应器功能，和/或增强t细胞功能，例如通过克服t细胞耗竭、无反应性、功能障碍、肿瘤免疫、增强肿瘤免疫原性和/或改善持续反应。23.因此，当pd-1轴结合拮抗剂是pd-l1结合拮抗剂时，它可以抑制pd-l1与其一种或多种结合伴侣(例如(a)pd1、(b)cd80、(c)b7-1)的结合，和/或减少、抑制、阻止或干扰由pd-l1与其一种或多种结合伴侣相互作用产生的信号转导。pd-l1结合拮抗剂可以包括抗pd-l1抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白或寡肽，和/或可以减少负共刺激信号，该负共刺激信号由在t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导或通过在t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导，和/或通过pd-l1的信号传导介导，从而使功能障碍的t细胞功能障碍降低，从而增强对抗原的t细胞效应器响应，和/或增强t细胞功能，例如通过克服t细胞耗竭、无反应性、功能障碍、肿瘤免疫、增强肿瘤免疫原性或改善持续反应。24.因此，当pd-1轴结合拮抗剂可以是pd-l2结合拮抗剂时，它可以结合pd-l2和/或结合seqidno:3，和/或它可以抑制pd-l2结合一个或多个其结合伴侣，例如pd-1，和/或减少、抑制、阻止或干扰由pd-l2与一个或多个其结合伴侣的相互作用产生的信号转导。pd-l2结合拮抗剂可以包括抗pd-l2抗体、其抗原结合片段、免疫粘附素、融合蛋白或寡肽，和/或可以减少负共刺激信号，该负共刺激信号由在t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导或通过在t淋巴细胞上表达的细胞表面蛋白介导，通过pd-l2的信号传导介导，从而使功能障碍的t细胞功能障碍减少，从而增强对抗原的t细胞效应器响应。25.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂、pd-1结合拮抗剂或pd-l1结合拮抗剂可以是抗体；任选其中26.(a)抗pd-l1抗体抑制pd-l1和pd-1之间的结合和/或pd-l1和b7-1之间的结合，27.(b)抗pd-l1抗体抑制癌细胞表面上的pd-l1将信号转导至细胞内通路，28.(c)抗pd-1抗体抑制pd-l1和pd-1之间的结合和/或pd-l2和pd-1之间的结合，29.(d)抗pd-1抗体抑制t细胞表面上的pd-1将信号转导至细胞内通路。在前述中，细胞内通路可以是t细胞细胞内通路，对其的刺激可以使t细胞功能障碍，从而降低t细胞效应器对抗原的反应功能。30.根据本发明，pd-l1结合拮抗剂可以选自：(a)德瓦鲁单抗(durvalumab)、imfinzi或medi4736，(b)阿替利珠单抗(atezolizumab)、tecentriq或mpdl3280a，(c)阿维鲁单抗(avelumab)、bavencio或msb0010718c，(d)mdx-1105、bms-936559。31.因此，pd-l1结合拮抗剂可以是抗体，包括：32.(a)包括seqidno:4的重链和包括seqidno:5的轻链，或其可变区或其cdr，33.(b)包括seqidno:6的重链和包括seqidno:7的轻链，或其可变区或其cdr，34.(c)包括seqidno:8的重链和包括seqidno:9的轻链，或其可变区或其cdr，或35.(d)包括seqidno:10的重链和包括seqidno:11的轻链，或其可变区或其cdr；或者36.(e)(a)至(d)中任一项的抗原结合区。37.根据本发明，pd-1结合拮抗剂可以选自：(a)派姆单抗(pembrolizumab)、keytruda、兰博利珠单抗(lambrolizumab)或mk-3475，(b)西米普利单抗(cemiplimab)、libtayo或regn-2810，(c)bms/ono、纳武利尤单抗(nivolumab)、欧狄沃(opdivo)、ono-4538、bms-936558或mdx1106。38.因此，pd-1结合拮抗剂可以是抗体，包括：39.(a)包括seqidno:12的重链和包括seqidno:13的轻链，或其可变区或其cdr，40.(b)包括seqidno:14的重链和包括seqidno:15的轻链，或其可变区或其cdr，或41.(c)包括seqidno:16的重链和包括seqidno:17的轻链，或其可变区或其cdr；或者42.(d)(a)至(c)中任一项的抗原结合区。43.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂，pd-1或pd-l1或pd-l2结合拮抗剂可以是抗体；例如抗体可以是单克隆的、人的或人源化的，全长的或其抗原结合片段，例如fv、fab、fab'、fab'-sh、f(ab')2；双链抗体(diabody)；线性抗体；单链抗体分子，或scfv。抗体同种型(isotype)可选自五类免疫球蛋白中的任何一种：iga、igd、ige、igg和igm，其重链分别称为α、δ、ε、γ和μ(m)。γ和α类抗体可以是任何亚类：igg1、igg2a、igg2b、igg3、igg4、iga1和iga2。44.根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂，其可以是pd-1结合拮抗剂、pd-l1结合拮抗剂或p2-l2结合拮抗剂，可以是免疫粘附素。免疫粘附素可以包括粘附素域，其包含结合特异性，例如受体或配体的结合位点，与免疫球蛋白恒定域，例如来自任何同种型，例如igg-1、igg-2、igg2a、igg2b、igg-3或igg-4亚型、iga、iga-1、iga-2、ige、igd或igm，和/或可包括免疫球蛋白分子的铰链区、ch2区和ch3区，或铰链区、ch1区、ch2区和ch3区。因此，免疫粘附素可以是包含pd-l1或pd-l2的细胞外或pd-1结合部分或pd-1的细胞外或pd-l1或pd-l2结合部分的多肽，其与免疫球蛋白序列的恒定结构域(例如pd-l1ecd-fc、pd-l2ecd-fc和pd-1ecd-fc)融合。45.免疫反应细胞46.根据本发明，修饰的免疫反应细胞可以是淋系的细胞，包括b、t或自然杀伤(naturalkiller，nk)细胞。修饰的免疫反应细胞可以是淋巴谱系系(lymphoidlineage)的细胞，包括b细胞、t细胞、自然杀伤(nk)细胞，及其前体，该前体包括胚胎干细胞和多能干细胞(例如，可以从中分化淋巴样细胞的那些细胞)。t细胞可以是在胸腺中成熟的淋巴细胞，且主要负责细胞介导的免疫，也参与适应性免疫系统。根据本发明，t细胞可以包括但不限于辅助t细胞、细胞毒性t细胞、记忆t细胞(包括中枢记忆t细胞、干细胞样记忆t细胞(或干样记忆t细胞)和两种类型的效应器记忆t细胞：例如tem细胞和temra细胞、调节性t细胞(也称为抑制性t细胞)、自然杀伤t细胞、粘膜相关的不变t细胞和γ-δt细胞。细胞毒性t细胞(ctl或杀伤t细胞)是t淋巴细胞的一个子集，其能够诱导受感染的体细胞或肿瘤细胞的死亡。可以通过引入tcr对受试者自身的t细胞进行基因修饰以靶向特定抗原。优选地，修饰的免疫反应细胞是t细胞，任选地是cd4 t细胞或cd8 t细胞。因此，修饰的免疫反应细胞可以是t细胞，任选地cd4 t细胞或cd8 t细胞，或者修饰的免疫反应细胞可以是修饰的t细胞群，任选地cd4 t细胞群；或cd8 t细胞群，或cd4 t细胞和cd8 t细胞的混合群体。47.异源tcr/car48.根据本发明，修饰的免疫反应细胞可以表达异源t细胞受体(tcr)或异源嵌合抗原受体(car)。在与抗原结合后，修饰的免疫反应细胞可对带有抗原的细胞表现出t细胞效应器功能和/或细胞溶解效应，和/或经历增殖和/或细胞分裂。在某些实施方式中，与包括靶向相同癌症和/或肿瘤抗原和/或肽(抗原肽)的嵌合抗原受体(car)的细胞相比，包括tcr的修饰的免疫反应细胞表现出相当的或更好的治疗效果。包括tcr或car的活化的修饰的免疫反应细胞可以分泌抗肿瘤细胞因子，其包括但不限于tnfα、ifnγ和il2。49.根据本发明，修饰的免疫反应细胞可以包括编码异源t细胞受体(tcr)或异源嵌合抗原受体(car)的核酸、构筑体或载体，或异源核酸、构筑体或载体。任选地，tcr可以是亲和性增强的tcr，例如特异性肽增强的亲和性受体(specificpeptideenhancedaffinityreceptor，spear)tcr。50.术语“异源的”或“外源的”是指这样的多肽或核酸，其对于特定的生物系统(如细胞或宿主细胞)而言是外来的，且不是天然存在于该系统中，且可以通过人工或重组手段引入系统。因此，异源的tcr或car的表达可由此改变t细胞的免疫原性特异性，使得它们对于存在于患有癌症的个体的癌症细胞表面上的一种或多种肿瘤或癌症抗原和/或肽识别或显示出改进的识别。t细胞的修饰及其随后的扩增可以在体外和/或离体进行。51.癌症抗原52.根据本发明，癌症抗原和/或肿瘤抗原或其肽抗原可以是癌症-睾丸抗原、ny-eso-1、mart-1(t细胞识别的黑色素瘤抗原)、wt1(wilms肿瘤1)、gp100(糖蛋白100)、酪氨酸酶、prame(黑色素瘤中优先表达的抗原)、p53、hpv-e6/hpv-e7(人乳头瘤病毒)、hbv、trail、dr4、甲状腺球蛋白(thyroglobin)、tgfbii移码抗原、lage-1a、kras、cmv(巨细胞病毒)、cea(癌胚抗原)、afp(甲胎蛋白)、mage-a1、mage-a2、mage-a3、mage-a4、mage-a6、mage-a8和mage-a9、mage-a10，或mage-a12，或其肽抗原。根据本发明，优选的肿瘤抗原是mage-a4，例如seqidno：36或其肽抗原。优选地，癌症和/或肿瘤抗原肽具有氨基酸序列gvydgrehtv，seqidno:18。53.共刺激配体54.根据本发明，修饰的免疫反应细胞还可以包括外源或重组(例如，细胞被转导)的至少一种共刺激配体，任选一种、两种、三种或四种。修饰的免疫反应细胞可以共表达tcr或car和至少一种外源共刺激配体。tcr或car与至少一种外源共刺激配体之间的相互作用可以提供非抗原特异性信号和细胞活化。共刺激配体包括但不限于肿瘤坏死因子(tnf)超家族成员和免疫球蛋白(ig)超家族配体。tnf是一种参与全身炎症的细胞因子，且刺激急性期反应。tnf超家族成员包括但不限于神经生长因子(ngf)、cd40l(cd40l)/cd154、cd137l/4-1bbl、tnf-α、cd134l/ox40l/cd252、cd27l/cd70、fas配体(fasl)、cd30l/cd153、肿瘤坏死因子β(tnfp)/淋巴毒素-α(lta)、淋巴毒素-β(ttb)、cd257/b细胞激活因子(baff)/blys/thank/tall-l、糖皮质激素诱导的tnf受体配体(gitrl)和tnf相关的凋亡诱导配体(trail)、light(tnfsf14)。免疫球蛋白(ig)超家族是一大类细胞表面和可溶性蛋白质，其参与细胞的识别、结合或粘附过程。这些蛋白质与免疫球蛋白具有相同的结构特征——它们具有免疫球蛋白结构域(折叠)。免疫球蛋白超家族配体包括但不限于cd80和cd86，两者都是cd28的配体。在某些实施方式中，至少一种共刺激配体选自由以下组成的组：4-1bbl、cd275、cd80、cd86、cd70、ox40l、cd48、tnfrsf14及其组合的组合。至少一种外源的或重组的共刺激配体可以是4-1bbl或cd80，优选地，至少一种外源的或重组的共刺激配体是4-1bbl。修饰的免疫反应细胞可包括两种外源或重组的共刺激配体，优选的两种外源或重组的共刺激配体是4-1bbl和cd80。55.修饰的免疫反应细胞可包括外源或重组(例如，细胞被转导)的至少一种克服免疫抑制性肿瘤微环境的构筑体。此类构筑体可以是但不限于环状amp磷酸二酯酶和显性负相(dominant-negative)转化生长因子β(tgfbeta)受体ii。修饰的免疫反应细胞、修饰t细胞或修饰t细胞群可以被工程化以释放对所述细胞的细胞溶解活性具有积极作用的细胞因子。这样的细胞因子包括但不限于白细胞介素7、白细胞介素15和白细胞介素21。56.特异性结合tcr/car57.根据本发明，修饰的免疫反应细胞，例如修饰的t细胞，可以被修饰以表达异源tcr或car，其结合或特异性结合到患有疾病症状或癌症症状的受试者、患者或癌症患者的肿瘤细胞和/或组织、和/或癌细胞和/或组织。随后可以用根据本发明的修饰的免疫反应细胞或修饰的t细胞或其种群来治疗受试者、患者或癌症患者。根据本发明的用修饰的免疫反应细胞或修饰的t细胞治疗的合适的癌症患者可以通过包括以下的方法来鉴定：从患有肿瘤和/或癌症的个体或受试者获得肿瘤和/或癌细胞的样本；将肿瘤和/或癌细胞鉴定为与由修饰的免疫反应细胞表达的tcr或car结合。58.根据本发明，异源tcr或car结合到或特异性结合到癌症抗原和/或肿瘤抗原或其肽抗原。根据本发明，异源tcr或car结合到或特异性结合到与癌性病症相关的和/或由肿瘤或癌细胞或组织呈递的癌症抗原和/或肿瘤抗原或其肽抗原。59.特异性描述了异源tcr或car与特定靶标癌症抗原和/或肿瘤抗原或其肽抗原之间的结合强度，并且可以通过解离常数kd、受体-配体系统的结合和未结合状态之间的比率来描述。此外，异源tcr或car可以结合的不同癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原越少，其结合特异性就越大。60.根据本发明，异源tcr或car可以结合少于10、9、8、7、6、5、4、3、2种不同的癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原，例如仅结合一种癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原。61.根据本发明，异源tcr或car可以以下面区间的解离常数结合：0.01μm和100μm之间、0.01μm和50μm之间、0.01μm和20μm之间、0.05μm和20μm之间，或0.01μm、0.02μm、0.03μm、0.04μm、0.05μm、0.06μm、0.07μm、0.08μm、0.09μm、0.19μm、0.15μm、0.25μm、0.25μm、0.35μm、0.35μm、0.45μm、0.45μm、0.55μm、0.55μm、0.65μm、0.65μm、0.75μm、0.75μm、0.85μm、0.85μm、0.95μm、0.95μm、1.05μm、1.55μm、2.05μm、2.55μm、3.05μm、3.55μm、4.05μm、4.55μm、5.05μm、5.55μm、6.05μm、6.55μm、7.05μm、7.55μm、8.05μm、8.55μm、9.05μm、9.55μm、10.0μm；或10.0μm和1000μm之间、10μm和50μm之间、50μm和5000μm之间，或10μm、20μm、30μm、40μm、50μm、60μm、70μm、80μm、90μm、100μm、150μm、200μm、250μm、300μm、350μm、400μm、450μm、500μm；任选地用表面等离子共振测量，任选地在25℃，任选地在ph为6.5和6.9之间或7.0和7.5之间。通过实验测量解离速率常数koff和结合速率常数kon来确定解离常数kd或koff/kon。tcr解离常数可以使用可溶形式的tcr来测量，其中tcr包括tcrα链可变域和tcrβ链可变域。因此，根据本发明使用的异源tcr或car能够有效和/或以高亲和性结合至hla展示gvydgrehtv，任选地与肽呈递分子，例如hla复合，例如与hla-a*02或hla-a*0201复合，或者不与肽呈递分子复合呈递，例如解离常数在0.01μm和100μm之间，例如50μm、100μm、200μm、500μm，优选0.05μm至20.0μm之间。62.根据本发明，修饰的免疫反应细胞，例如修饰的t细胞，可以包括异源tcr或car，其可以结合、特异性结合和/或以高亲和性结合癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原，任选地与癌性病症相关和/或由癌细胞或组织的肿瘤呈递；任选地，其中癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原被异源tcr或car识别，任选地与肽呈递分子例如hla复合，例如与hla-a*02或hla-a*0201复合，或者不与肽呈递分子例如或hla复合呈递。63.根据本发明，异源t细胞受体(tcr)或car，以及包括异源t细胞受体(tcr)或car的修饰的免疫反应细胞可以具有结合到内源性表达的肿瘤细胞表面、癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原的特性，任选地其中该结合不依赖于细胞表面抗原作为与肽呈递分子或抗原呈递分子的复合物的呈递，例如主要组织相容性复合物(majorhistocompatibilitycomplex，mhc)或人白细胞抗原(hla)或主要组织相容性复合物类相关蛋白(mr)1。64.根据本发明，任选地与密切相关的癌症和/或肿瘤抗原或肽抗原序列相比，tcr或car结合可以特异性针对一种癌症和/或肿瘤抗原，例如mage蛋白(诸如magea4)，或其肽抗原。密切相关的癌症和/或肿瘤抗原或肽抗原序列可以具有相似或相同的长度，和/或可以具有相似数量或相同数量的氨基酸残基。密切相关的肽抗原序列可具有50％至90％、或60％至90％、或70％至90％、或80％至90％的同一性，优选80至90％的同一性，和/或可相差1、2、3或4个氨基酸残基。密切相关的肽序列可以来源于序列gvydgrehtv，seqidno:18的多肽序列。65.结合亲和性可以通过平衡方法(例如酶联免疫吸附测定(elisa)或放射免疫测定(ria))，或动力学(例如biacoretm分析)来确定。亲合力(avidity)是两个分子在多个位点相互结合强度的总和，例如考虑到相互作用的化合价。根据本发明，与缺乏异源tcr或car或具有替代的异源tcr或car的免疫反应细胞相比，免疫反应细胞可以表现出对癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原、或由肿瘤或癌细胞或组织呈递并被异源tcr或car识别的癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原的改善的亲和性和/或亲合力。66.选择性结合tcr/car67.根据本发明，异源tcr或car可以选择性地结合癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原，任选地与癌症病症相关和/或由肿瘤或癌细胞或组织呈递；任选地，其中癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原被异源tcr或car识别，任选地与肽呈递分子(例如hla)复合，例如与hla-a*02或hla-a*0201复合，或者不与肽呈递分子或hla复合呈递，肽呈递分子或hla，优选由肿瘤细胞或癌细胞或组织表达。68.选择性结合表示异源tcr或car以比另一种更高的亲和性结合癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原。选择性结合由与异源tcr或car的复合物中一种配体抗原置换另一种配体抗原的平衡常数表示。69.特异性/选择性结合tcr/car70.根据本发明，异源tcr或car结合对于癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原具有选择性和/或特异性，所述癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原可以是癌症-睾丸抗原、ny-eso-1、mart-1(t细胞识别的黑色素瘤抗原)、wt1(wilms肿瘤1)、gp100(糖蛋白100)、酪氨酸酶、prame(黑色素瘤中优先表达的抗原)、p53、hpv-e6/hpv-e7(人乳头瘤病毒)、hbv、trail、dr4、甲状腺球蛋白、tgfbii移码抗原、lage-1a、kras、cmv(巨细胞病毒)、cea(癌胚抗原)、afp(甲胎蛋白)、mage-a1、mage-a2、mage-a3、mage-a4、mage-a6、mage-a8和mage-a9、mage-a10，或mage-a12，或其肽抗原。优选地，肿瘤抗原是mage-a4或其肽抗原。71.根据本发明，异源tcr或car可以结合、和/或特异性结合、和/或选择性结合肽呈递分子，例如呈递或展示癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原的hla，即癌症和/或肿瘤抗原的肽片段(phla)，其中hla对应于mhci类(a、b和c)，它们都是hla1类或其特定等位基因，或者hla对应于mhcii类(dp、dm、do、dq和dr)或其特定等位基因，优选hla是1类，优选等位基因是hla-a2、或hla-a*02、或hla-a2 、或hla-a*02阳性hla，优选hla-*0201。可替选地，异源tcr或car可以结合、和/或特异性结合、和/或选择性结合不由hla呈递或展示的癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原。72.优选地，异源tcr或car不是由免疫反应细胞天然表达的(即tcr或car是外源的或异源的)。异源tcr可以包括αβtcr异二聚体。异源tcr或car可以是重组的、或合成的、或人工的tcr或car，即自然界中不存在的tcr。例如，异源tcr可以被工程化以增加其对特定癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原的亲和性或亲合力(即亲和性增强的tcr或特定的肽增强的亲和性受体(spear)tcr)。亲和性增强的tcr或(spear)tcr可相对于天然存在的tcr包括一个或多个突变，例如在tcr的α和β链的可变区的高变互补决定区(cdr)中的一个或多个突变。这些突变可增加tcr对展示肿瘤抗原的肽片段的mhc的亲和性，任选地在由肿瘤和/或癌细胞表达这些mhc时。产生亲和性增强或成熟的tcr的合适方法包括使用噬菌体或酵母展示筛选tcr突变体，且是本领域众所周知的(参见例如robbins等人jimmunol(2008)180(9)：6116；sanmiguel等人(2015)cancercell28(3)281-283；schmitt等人(2013)blood122348-256；jiang等人(2015)cancerdiscovery5901)。优选的亲和性增强的tcr可以结合表达mage家族的肿瘤抗原的肿瘤或癌细胞，例如magea4或其肽抗原，例如序列gvydgrehtv，seqidno:18。73.根据本发明，异源tcr可以是magea4tcr，其可以包括seqidno：21的α链参考氨基酸序列或其变体，和seqidno：23的β链参考氨基酸序列或其变体。变体的氨基酸序列可与参考氨基酸序列具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。tcr可由seqidno：22的α链参考核苷酸序列或其变体和seqidno：24的β链参考核苷酸序列或其变体编码。变体的核苷酸序列可以与参考核苷酸序列具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。74.根据本发明，tcr可以包括tcrα链可变域和tcrβ链可变域，其中：75.(i)α链可变域包括具有以下序列的cdr：76.vspfsn(αcdr1)，seqidno:27，或seqidno:21的氨基酸48-53，77.ltfsen(αcdr2)，seqidno:28，或seqidno:21的氨基酸71-76，和78.cvvsggtdswgklqf(αcdr3)，seqidno:29，或seqidno:21的氨基酸111-125，和79.(ii)β链可变域包括具有以下序列的cdr80.kghdr(βcdr1)，seqidno:30，或seqidno:23的氨基酸46-50，81.sfdvkd(βcdr2)，seqidno:31，或seqidno:23的氨基酸68-73，和82.catsgqgayeeqff(βcdr3)，seqidno:32，或seqidno:23的氨基酸110-123或与其具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％，至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性的序列，任选地具有100％的序列同一性的序列。83.因此，tcr可以包括一种tcr，其中，α链可变域包括与seqidno:25具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性的氨基酸序列或者seqidno:22的氨基酸残基1-136的序列；和/或β链可变域包括与seqidno:26具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性的氨基酸序列或者seqidno:23的氨基酸残基1-133的序列。84.术语“祖细胞tcr”在本文中用于指包括分别具有seqidno：21和23的magea4tcrα链和magea4tcrβ链的tcr。期望提供相对于祖细胞tcr突变或修饰的tcr，与祖细胞tcr相比，其对肽-hla复合物具有相等的、等效的或更高的亲和性和/或相等的、等效的或较慢的解离速率。根据本发明，相对于祖细胞tcr，异源tcr可以在α链可变域和/或β链可变域中具有一个以上的突变，并且可以表示为“工程化tcr化或“突变tcr变。这些突变可以提高对magea4或其肽抗原的结合亲和性、和/或特异性、和/或选择性、和/或亲合力。在某些实施方式中，在α链可变域中存在1、2、3、4、5、6、7或8个突变，例如4或8个突变，和/或在β链可变域中存在1、2、3、4或5个突变，例如5个突变。在一些实施方式中，本发明的tcr的α链可变域可以包括氨基酸序列，其与seqidno:25的氨基酸残基的序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性。在一些实施方式中，本发明的tcr的β链可变域可以包括氨基酸序列，其与seqidno:26的氨基酸残基的序列具有至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％或至少99％的同一性。85.根据本发明，tcr可包括一种tcr，其中α链可变域包括seqidno：25或seqidno：21的氨基酸残基1-136的氨基酸序列；或一种氨基酸序列，其中其氨基酸残基1-47、54-70、77-110和126-136分别与seqidno：25的氨基酸残基1-47、54-70、77-110和126-136的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性，和/或其中，氨基酸残基48-53、71-76和111-125，cdr1、cdr2、cdr3分别与seqidno:25的氨基酸残基48-53、71-76和111-125，cdr1、cdr2、cdr3的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性。86.根据本发明，tcr可以包括一种tcr，其中，在α链可变域中，序列：87.(i)其氨基酸残基1-47可以(a)与seqidno:25的氨基酸残基1-47的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:25的残基1-47，可具有插入或缺失的一个、两个或三个氨基酸残基，88.(ii)氨基酸残基48-53是vspfsn、cdr1、seqidno:27或seqidno:25的氨基酸48-53，89.(iii)其氨基酸残基54-70可以具有(a)与seqidno:25的氨基酸残基54-70的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:25的氨基酸残基54-70的序列，可具有一个、两个或三个插入或缺失的氨基酸残基，90.(iv)氨基酸残基71-76可以是ltfsen、cdr2、seqidno:28或seqidno:25的氨基酸71-76，91.(v)其氨基酸残基77-110可以与seqidno:25的氨基酸残基77-70的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:25的氨基酸残基77-110的序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失、或取代，92.(vi)氨基酸111-125可以是cvvsggtdswgklqf、cdr3、seqidno:29或seqidno:25的氨基酸111-125，93.(vii)其氨基酸残基126-136可以与seqidno:25的氨基酸残基126-136的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:25的氨基酸残基126-136的序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失、或取代。94.根据本发明，tcr可包括一种tcr，其中β链可变域包括：seqidno：26的氨基酸序列或一种氨基酸序列，其中，其氨基酸残基1-45、51-67、74-109和124-133分别与seqidno：26的氨基酸残基1-45、51-67、74-109和124-133的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，且其中，氨基酸残基46-50、68-73和110-123分别与seqidno:26的氨基酸残基46-50、68-73和110-123、cdr1、cdr2、cdr3具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性。95.根据本发明，tcr可以包括一种tcr，其中在α链可变域中，序列：96.(i)其氨基酸残基1-45可以(a)与seqidno:26的氨基酸残基1-45的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:26的残基1-45，可具有插入或缺失的一个、两个或三个氨基酸残基，97.(ii)氨基酸残基46-50是kghdr、cdr1、seqidno:30或seqidno:26的氨基酸46-50，98.(iii)其氨基酸残基51-67可以(a)具有与seqidno:26的氨基酸残基51-67的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:26的氨基酸残基51-67序列，可具有插入或缺失的一个、两个或三个氨基酸残基，99.(iv)氨基酸残基68-73可以是sfdvkd、cdr2、seqidno:31或seqidno:26的氨基酸68-73，100.(v)其氨基酸残基74-109可以具有与seqidno:26的氨基酸残基74-109的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:26的氨基酸残基74-109的序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失、或取代；101.(vi)氨基酸110-123可以是catsgqgayeeqff、cdr3、seqidno:32或seqidno:26的氨基酸110-123，102.(vii)其氨基酸残基124-133可以具有与seqidno:26的氨基酸残基124-133的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:26的氨基酸残基124-133的序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失、或取代。103.氨基酸和核苷酸序列的同一性通常参考算法gap(gcgwisconsinpackagetm,accelrys,sandiegoca)定义。gap使用needleman&wunsch算法(j.mol.biol.(48):444-453(1970))比对两个完整的序列，使匹配的数量最大化并使空位的数量最小化。通常，使用默认参数，空位创建罚分(gapcreationpenalty)＝12，空位扩展罚分(gapextensionpenalty)＝4。使用gap可能是优选的，但也可以使用其他算法，例如blast、psiblast或tblastn(使用altschul等人(1990)j.mol.biol.215:405-410的方法)、fasta(使用pearson和lipman(1988)pnasusa85:2444-2448的方法)或smith-waterman算法(smith和waterman(1981)j.molbiol.147:195-197)，通常采用默认参数。104.特定氨基酸序列变体可通过插入、添加、取代或缺失1个氨基酸、2、3、4、5-10、10-20或20-30个氨基酸而不同于参考序列。在一些实施方式中，变体序列可包括具有1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多个插入、缺失或取代的残基的参考序列。例如，可以插入、删除或取代多达15个、多达20个、多达30个或多达40个残基。105.在一些优选的实施方式中，变体可以与参考序列相差1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或更多个保守取代。保守取代涉及用具有相似性质的不同氨基酸取代氨基酸。例如，脂肪族残基可以被另一个脂肪族残基取代，非极性残基可以被另一个非极性残基取代，酸性残基可以被另一个酸性残基取代，碱性残基可以被另一个碱性残基取代，极性残基可以被另一个极性残基取代，或者芳族残基可以被另一个芳族残基取代。例如，保守取代可以在以下组内的氨基酸之间发生：106.(i)丙氨酸和甘氨酸；107.(ii)谷氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺和天冬酰胺；108.(iii)精氨酸和赖氨酸；109.(iv)天冬酰胺、谷氨酰胺、谷氨酸和天冬氨酸；110.(v)异亮氨酸、亮氨酸和缬氨酸；111.(vi)苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；112.(vii)丝氨酸、苏氨酸和半胱氨酸。113.cd8α辅助受体114.根据本发明，表达或呈递异源tcr或car的修饰的免疫反应细胞群可进一步表达或呈递异源辅助受体。异源辅助受体可以是cd8辅助受体。cd8辅助受体可以包括二聚体或cd8链对，cd8链对包括cd8-α和cd8-β链或cd8-α和cd8-α链。优选地，cd8辅助受体是包括cd8-α和cd8-α链的cd8αα辅助受体。cd8α辅助受体可包括与seqidno：19至少80％同一性的氨基酸序列、seqidno：19或其变体。cd8α辅助受体可以是同型二聚体(homodimer)。115.cd8辅助受体与1类mhc结合并增强tcr信号传导。根据本发明，cd8辅助受体可以包括seqidno：19的参考氨基酸序列或者可以是其变体。变体的氨基酸序列可与参考氨基酸序列seqidno:19具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。cd8辅助受体可以由seqidno：20的参考核苷酸序列编码或者可以是其变体。变体的核苷酸序列可以与参考核苷酸序列seqidno:20具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％的序列同一性。116.根据本发明，异源cd8辅助受体可以包括cd8辅助受体，其中在ig样的v型结构域中包括具有以下序列的cdr：117.(i)vllsnptsg、cdr1、seqidno:33，或seqidno:19的氨基酸45-53，118.(ii)ylsqnkpk、cdr2、seqidno:34，或seqidno:19的氨基酸72-79，119.(iii)lsnsim、cdr3、seqidno:35，或seqidno:19的氨基酸80-117，120.或与其具有至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％、至少98％或至少99％序列同一性的序列。121.根据本发明，异源cd8辅助受体可包括cd8辅助受体，其包括或其中在ig样的v型结构域中包括：seqidno:19的氨基酸序列的残基22-135；或一种氨基酸序列，其中其氨基酸残基22-44、54-71、80-117、124-135分别与seqidno:19的氨基酸残基22-44、54-71、80-117、124-135、cdr1、cdr2、cdr3的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，且其中其氨基酸残基45-53、72-79和118-123分别与seqidno:19的氨基酸残基45-53、72-79和118-123的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性。122.根据本发明，cd8辅助受体可包括cd8辅助受体，其中，或在ig样v型结构域中，序列为：123.(i)其氨基酸残基22-44可以(a)具有与seqidno:19的氨基酸残基22-44的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:19的残基22-44，可具有一个、两个或三个插入或缺失的氨基酸残基，124.(ii)氨基酸残基45-53是vllsnptsg、seqidno:33、cdr1或seqidno:19的氨基酸45-53，125.(iii)其氨基酸残基54-71可以(a)具有与seqidno:19的氨基酸残基54-71的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性；或(b)相对于seqidno:19的氨基酸残基54-71的序列，可具有一个、两个或三个插入或缺失的氨基酸残基，126.(iv)氨基酸残基72-79可以是ylsqnkpk、cdr2、seqidno:34或seqidno:19的氨基酸72-79，127.(v)其氨基酸残基80-117可以与seqidno:19的氨基酸残基80-117的序列具有至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:19的氨基酸残基80-117序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失或取代；128.(vi)氨基酸118-123可以是lsnsim、cdr3、seqidno:35或seqidno:19的氨基酸80-117，129.(vii)其氨基酸残基124-135可以具有与seqidno:19的氨基酸残基124-135的序列至少70％、75％、80％、85％、90％或95％的同一性，或相对于seqidno:19的氨基酸残基124-135的序列，可具有一个、两个或三个插入、缺失或取代。130.表达异源cd8辅助受体的修饰的免疫反应细胞可以显示出对抗原肽、肿瘤或癌抗原的刺激或在抗原肽、肿瘤或癌抗原刺激时的亲和性和/或亲合力的提高和/或t细胞活化的提高，如通过本文公开的测定法确定的，任选地当相对于不表达异源cd8辅助受体的修饰的免疫反应细胞，在hla上呈递。修饰的免疫反应细胞的异源cd8可以与mhc相互作用或特异性结合，mhc可以是i类或ii类，优选i类主要组织相容性复合物(mhc)、hla-i分子或mhci类hla-a/b2m二聚体，优选cd8-a与i类mhc的α3部分(残基223和229之间)相互作用，优选通过cd8的igv样结构域。因此，与缺乏异源cd8的免疫反应细胞相比，异源cd8提高了免疫反应细胞与由hlapmhci或phla结合或呈递的hla和/或抗原肽的tcr结合，任选地位于抗原呈递细胞、树突细胞和/或肿瘤或癌细胞、肿瘤或癌症组织的表面上。因此，与缺乏异源cd8的细胞相比，异源cd8可以改善或增加免疫反应细胞的细胞(tcr)/肽-主要组织相容性复合物i类(pmhci)相互作用的解离率(koff)且因此其半衰期，任选地位于抗原呈递细胞、树突细胞和/或肿瘤或癌细胞，或肿瘤或癌组织的表面上，因此也可以提供改善的连接亲和性和/或亲合力。异源cd8可以改善tcr在免疫反应细胞表面上的组织，以实现phla结合的协同性，并且可以改善的治疗亲合力。因此，异源cd8辅助受体修饰的免疫反应细胞可能以锌依赖性方式与lck(淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶)结合或相互作用，导致转录因子，如nfat、nf-κb和ap-1的激活。131.根据本发明，任选地响应癌症和/或肿瘤抗原或其肽抗原，任选地由癌细胞或组织的肿瘤呈递时，与缺乏异源cd8辅助受体的免疫反应细胞相比，修饰的免疫反应细胞可具有改善或增加的cd40l表达、细胞因子产生、细胞毒活性、诱导树突细胞成熟或诱导树突细胞细胞因子产生。132.治疗效果133.根据本发明和本发明的方法和用途，相对于治疗或干预之前，或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞的治疗，t细胞功能增强了至少10％，或者20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、120％、150％、200％或更多。例如，通过cd8 t细胞分泌γ-干扰素增加、t细胞增殖增加、内部信号传导增加、抗原反应性增加、细胞因子和/或干扰素分泌增加、靶细胞杀伤增加、t细胞活性增加，cd28信号传导增加、t细胞浸润肿瘤的能力增加、识别和结合呈递抗原的树突状细胞能力增加来判断。134.根据本发明以及本发明的方法和用途，可以减弱肿瘤免疫或肿瘤规避免疫识别，从而提高免疫系统对肿瘤的识别和攻击，从而治疗例如由肿瘤结合、肿瘤缩小和肿瘤清除来测量的肿瘤免疫。因此，相对于治疗或干预之前或相对于单独使用pd1轴结合拮抗剂或单独使用表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞的治疗的水平，本发明提供的肿瘤免疫的治疗和/或提供的肿瘤免疫的治疗增强了至少10％，或者20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、120％、150％、200％或更多，例如，通过肿瘤结合、肿瘤缩小和肿瘤清除中的任何一个或多个来测量的。135.根据本发明和本发明的方法和用途，相对于治疗或干预之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞的治疗的水平，提供了改善或增强的肿瘤免疫原性，例如通过对肿瘤或肿瘤抗原引起免疫反应的能力来测量的，例如肿瘤免疫原性增强了至少10％、或者20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、120％、150％、200％或更多，例如，根据细胞因子和/或干扰素分泌增加、t细胞增殖增加、抗原反应性增加、靶细胞杀伤、t细胞激活、cd28信号传导、t细胞浸润肿瘤的能力、识别和结合呈递抗原的树突状细胞的能力中的任何一个或多个来判断。136.根据本发明以及本发明的方法和用途，提供了在停止治疗后降低肿瘤生长或肿瘤生长速率或维持肿瘤大小的改善的持续反应，例如，如通过肿瘤大小或肿瘤数量的测量中的任一项或多项来确定，相对于治疗或干预之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞的治疗的水平，优选持续反应增强了至少10％，或者20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％、100％、120％、150％、200％或更多。例如，持续反应可以具有至少与治疗持续时间相同的持续时间，是治疗持续时间长度的至少1.5、2.0、2.5或3.0或更多倍。137.在t细胞活性的上下文中，术语“功能障碍”是指对抗原刺激的免疫反应性降低的状态，包括t细胞耗竭和/或无反应性，由此t细胞可以识别和结合抗原，但在进行的免疫反应或对抗肿瘤生长过程中表现出有效性的降低。功能障碍的t细胞表现出将抗原识别转化为下游t细胞效应器功能的能力受损，例如增殖、细胞因子和干扰素的产生或靶细胞杀伤，和/或对抗原识别表现出难以驾驭或无反应，这是t细胞功能障碍的特征。“t细胞功能障碍”可能与通过pd-1不当增加的t细胞信号传导；t细胞增殖和/或产生细胞因子和/或细胞溶解活性的能力降低；t细胞无反应性；肿瘤免疫有关。[0138]“t细胞耗竭(exhaustion)”包括由于持续的作为对癌症反应的一部分的tcr信号传导而导致的t细胞功能障碍状态，并阻止对肿瘤的最佳反应。耗竭可以通过细胞内在负调节(共刺激)途径(例如pd-1、pd-1轴、b7-h3、b7-h4)或通过细胞外在负调节途径(免疫调节细胞因子)发挥作用。t细胞耗竭的特征是效应器功能差、抑制性受体持续表达和不同于功能性效应器或记忆t细胞的变化的转录活性。t细胞无反应性是通过t细胞受体的信号传导缺陷以及由此产生的对抗原刺激无反应的状态来发生的，甚至在共刺激的情况下，因此此类t细胞不会经历克隆扩增和/或获得效应器功能。[0139]施用[0140]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂和修饰的免疫反应细胞可以单独地、依次地或同时地施用。[0141]因此，[0142](a)pd-1轴结合拮抗剂可以在修饰的免疫反应细胞之前、与修饰的免疫反应细胞同时、或在修饰的免疫反应细胞之后施用，或[0143](b)pd-1轴结合拮抗剂可以在修饰的免疫反应细胞之前和与修饰的免疫反应细胞同时施用，或[0144](c)pd-1轴结合拮抗剂可以在修饰的免疫反应细胞之前和在修饰的免疫反应细胞之后施用，或[0145](d)pd-1轴结合拮抗剂可以与修饰的免疫反应细胞同时和在修饰的免疫反应细胞之后施用，或[0146](e)pd-1轴结合拮抗剂可在修饰的免疫反应细胞后施用，或[0147](f)pd-1轴结合拮抗剂可以在修饰的免疫反应细胞之前、与修饰的免疫反应细胞同时和在修饰的免疫反应细胞之后施用。[0148]例如，pd-1轴结合拮抗剂在施用修饰的免疫反应细胞后的第一次施用可以在施用修饰的免疫反应细胞后第14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34或35天中的任何一天，优选第14至16天、或17至21天、或22至26天，优选第17至22天，优选第17天、第21天或第22天。[0149]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂和/或修饰的免疫反应细胞可以连续施用，任选地作为单剂量，或间歇地施用，任选地作为多于一剂的剂量。[0150]根据本发明，修饰的免疫反应细胞可以作为单剂量施用。修饰的免疫反应细胞可以约5亿至以下任一个之间的剂量施用：约10亿细胞、约20亿细胞、约30亿细胞、约40亿细胞、约50亿细胞、约60亿细胞、约70亿细胞、约80亿细胞、约90亿细胞、约100亿细胞、约110亿细胞、约120亿细胞、约130亿细胞、约140亿细胞、约150亿细胞、约160亿细胞、约170亿细胞、约180亿细胞、约190亿细胞、约200亿细胞、或约210亿细胞。修饰的免疫反应细胞可以下列剂量施用：约1亿至约2亿细胞、约3亿至约4亿细胞、约5亿至约6亿细胞、约7亿至约8亿细胞、或约9亿至约10亿细胞，任选地约5亿至约10亿细胞，约20亿至约50亿细胞、或约60亿至约100亿细胞。[0151]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂和/或修饰的免疫反应细胞可以通过静脉内、肌内、皮下、局部、口服、经皮、腹膜内、眶内(intraorbitally)、植入、吸入、鞘内、心室内、或鼻内、或通过静脉输注施用。优选地，pd-1轴结合拮抗剂和/或修饰的免疫反应细胞可以静脉内或通过静脉内输注施用。[0152]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以以约0.5、1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59、或60mg/kg中的任一剂量施用。pd-1轴结合拮抗剂可以以约0.5mg/kg至约1.5mg/kg、约1mg/kg至约2mg/kg、约3mg/kg至约5mg/kg、约6mg/kg至约9mg/kg、约10mg/kg至约15mg/kg、约16mg/kg至约20mg/kg、约20mg/kg至约25mg/kg、约1mg/kg至约9mg/kg、约10mg/kg至约20mg/kg的任一剂量施用。根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以以约10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、350、360、370、380、390、400、410、420、430、440、450、460、470、480、490、500、510、520、530、540、550、560、570、580、590、600、650、700、750、800、850、900、950、1000mg中的任一剂量施用，优选200mg、250mg或300mg。根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以以固定剂量施用，或者可以改变剂量，例如在多于一个剂量的情况下或在一施用周期(dosingcycle)中。[0153]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以以下列形式施用：[0154](a)在一个或多个施用周期中的每一个施用周期中单剂量，[0155](b)在一个或多个施用周期中的每一个施用周期中一个或多个剂量，[0156](c)在一个或多个施用周期的每一个施用周期中第一天单剂量，[0157](d)在一个或多个施用周期的每一个施用周期中一个或多个剂量，包括在一个或多个施用周期的每一个施用周期中的第一天单剂量，[0158](e)在一个或多个施用周期中的每一个施用周期中一个或多个剂量，在每个周期的第一天至少一个剂量。[0159]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以在施用周期中施用，其中施用周期可以是5天、6天、7天、8天、9天、10天、11天、12天、13天、14天、15天、16天、17天、18天、19天、20天、21天、22天、23天、24天、25天、26天、27天、28天、29天、30天、31天、1个月、2个月、3个月、4个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月或12个月中任何一个。因此，施用周期可以是10至12天、11至13天、14至17天、14至17天、18至21天、22至24天、24至27天、28至30天或31天、一周、两周、三周、四周或1个月、2个月、6个月中的任一个，优选3周或21天。[0160]根据本发明，在施用修饰的免疫反应细胞之前，pd-1轴结合拮抗剂可以在一个或多个施用周期中的每一个施用周期中以一个或多个剂量施用，且在施用修饰的免疫反应细胞后，在一个或多个施用周期中的每个施用周期中以一个或多个剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量。可替选地，pd-1轴结合拮抗剂可以在施用修饰的免疫反应细胞之前在一个或多个施用周期的每一个施用周期内以一个或多个剂量施用，与施用修饰的免疫反应细胞同时施用(任选地以单剂量施用)，和在施用修饰的免疫反应细胞后在一个或多个施用周期的每一个施用周期内以一个或多个剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量。可替选地，在施用修饰的免疫反应细胞后，pd-1轴结合拮抗剂可以在一个或多个施用周期的每一个施用周期内以一个或多个剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量。[0161]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以在施用修饰的免疫反应细胞之前在一个或多个施用周期中的每个施用周期中以单剂量施用，且在施用修饰的免疫反应细胞之后，在一个或多个施用周期中的每个施用周期中以单剂量施用，任选其中可以在每个周期的第一天施加单剂量。可替选地，pd-1轴结合拮抗剂可以在施用修饰的免疫反应细胞之前在一个或多个施用周期的每一个施用周期中以单剂量施用，与施用修饰的免疫反应细胞同时施用(任选地，其中修饰的免疫反应细胞以单剂量施用)，和在施用修饰的免疫反应细胞后，在一个或多个施用周期的每一个施用周期内以单剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天以单剂量施用。可替选地，在施用修饰的免疫反应细胞之后(任选地其中修饰的免疫反应细胞以单剂量施用)，pd-1轴结合拮抗剂可以在一个或多个施用周期的每个施用周期中以单剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天以单剂量施用。根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以在一个或多个施用周期的每个施用周期的第一天以约200mgs的单一固定剂量施用，其中施用周期为21天和/或其中修饰的免疫反应细胞以约50亿至约100亿细胞的单剂量施用，任选地其中施用修饰的免疫反应细胞后的第一剂pd-1轴结合拮抗剂是在施用免疫反应细胞后的第17天、第21天或第22天施用。[0162]根据本发明，pd-1轴结合拮抗剂可以在特定时期施用，也意味着pd-1轴结合拮抗剂施用周期可以在特定时期施用，例如在施用修饰的免疫反应细胞后的特定时期。特定时期可以是1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31个月中的任何一个，优选24个月。[0163]根据本发明的方法可以包括以下步骤，其中[0164](a)在施用修饰的免疫反应细胞之前，pd-1轴结合拮抗剂在一个或多个施用周期的每一个施用周期以一个或多个剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量，[0165](b)在施用修饰的免疫反应细胞之前，在施用pd-1轴结合拮抗剂之后的时间点确定疾病状态，并与施用pd-1轴结合拮抗剂之前的状态进行比较，其中如果确定了稳定的疾病或进行性疾病，则[0166](c)施用修饰的免疫反应细胞，并且在施用修饰的免疫反应细胞之后或与施用修饰的免疫反应细胞同时和施用修饰的免疫反应细胞之后，在一个或多个施用周期的每一个施用周期以一个或多个剂量施用pd-1轴结合拮抗剂；任选地，其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量，进一步任选地，pd-1轴结合拮抗剂可以在特定时期施用。进一步任选地，在施用修饰的免疫反应细胞后的第一剂pd-1轴结合拮抗剂是在施用免疫反应细胞后的第17天、第21天或第22天施用。[0167]根据本发明的方法可以包括以下步骤，其中[0168](a)在施用修饰的免疫反应细胞之前，pd-1轴结合拮抗剂在一个或多个施用周期的每一个施用周期以一个或多个剂量施用，任选地其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量，[0169](b)在施用修饰的免疫反应细胞之前，在施用pd-1轴结合拮抗剂之后的时间点确定疾病状态，并且与pd-1轴结合拮抗剂施用之前的状态进行比较，其中如果确定完全反应或部分反应，则。[0170](c)在一个或多个施用周期中的每一个施用周期以一个或多个剂量施用pd-1轴结合拮抗剂，而不施用修饰的免疫反应细胞；任选地，其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量，进一步任选地，其中pd-1轴结合拮抗剂在特定时期或确定疾病进展中的较短者施用。进一步任选地，当在步骤(c)中确定稳定性疾病或进行性疾病时，则(d)施用修饰的免疫反应细胞，且施用修饰的免疫反应细胞后或者与修饰的免疫反应细胞施用修饰的免疫反应细胞同时且在施用修饰的免疫反应细胞后，在一个或多个施用周期的每个施用周期以一个或多个剂量施用pd-1轴结合拮抗剂；任选地，其中可以在每个周期的第一天施用至少一个剂量，进一步任选地，pd-1轴结合拮抗剂可以在特定时期施用。进一步任选地，在施用修饰的免疫反应细胞后的第一剂pd-1轴结合拮抗剂是在施用免疫反应细胞后的第17天、第21天或第22天施用。[0171]根据本发明，当所有目标病变或肿瘤已被评估或测量为已消失时，确定“完全反应”(completeresponse，cr)。当测量到目标病变或肿瘤的最长直径总和(sld)至少减少30％时确定“部分反应”(partialresponse，pr)，例如参考对照或治疗前比较。当测量到目标病变或肿瘤的最长直径总和(sld)至少增加20％时确定“进行性疾病”(progressivedisease，pd)，例如自治疗开始或存在一个或多个新病变以来，参照对照或治疗前比较。采取治疗开始以来最小的sld作为参考，在确定目标病变或肿瘤的最长直径总和(sld)既没有足够的减少或降低以符合pr标准，也没有足够的增加以符合pd标准时，确定“稳定性疾病”(stabledisease，sd)。[0172]根据本发明，癌症可以是复发性癌症(relapsedcancer)、或难治性癌症、或复发癌(recurrentcancer)、或局部复发癌、或转移性癌症、不可切除的癌症、或局部局限的癌症、没有手术或放射疗法选择的癌症、或不可手术的癌症、或其任何组合。受试者可能患有复发性癌症、或难治性癌症、或复发癌、或局部复发癌、或转移性癌症、或局部受限或不能手术的癌症，或其任何组合。[0173]根据本发明，癌症和/或肿瘤可以表达mage蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]，任选地mage-a4蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]。[0174]根据本发明，癌症可以选自：肺癌，非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer，nsclc)、转移性或晚期nsclc、鳞状nsclc、腺癌nsclc、腺鳞状nsclc、大细胞nsclc、卵巢癌、胃癌、尿路上皮癌、食管癌、食管胃结合部癌(esophagogastricjunctioncancer，egj)、黑色素瘤、膀胱癌、头颈癌、头颈鳞状细胞癌(headandnecksquamouscellcarcinoma，hnscc)、口腔癌、口咽癌、下咽癌、咽喉癌(cancerofthethroat)、喉癌(cancerofthelarynx)、扁桃体癌症、舌癌、软腭癌、咽癌、滑膜肉瘤、粘液样圆形细胞脂肪肉瘤(myxoidroundcellliposarcoma，mrcls)，任选地其中癌症或肿瘤表达mage蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]，任选地mage-a4蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]，cps指组合的阳性得分。[0175]根据本发明，癌症可以选自以下任一种：乳腺癌、转移性乳腺癌、肝癌、肾细胞癌、滑膜肉瘤、尿路上皮癌或肿瘤、胰腺癌、结肠直肠癌、转移性胃部癌(metastaticstomachcancer)、转移性胃癌(metastaticgastriccancer)、转移性肝癌、转移性卵巢癌、转移性胰腺癌、转移性结直肠癌、转移性肺癌、结直肠癌或腺癌、肺癌或腺癌、胰腺癌或腺癌、粘液性腺瘤、胰腺导管癌、血液恶性肿瘤，任选地其中癌症或肿瘤表达mage蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]，任选地mage-a4蛋白、肽、抗原或其肽抗原，和/或表达pd-l1或pd-l2[任选地具有cps≥1]。根据本发明，癌症可以是在含铂化疗后疾病仍具有疾病进展的复发或转移性hnscc。[0176]进一步提供了根据本发明的方法或用途，其中受试者之前未接受过癌症治疗，或者其中受试者已经接受过先前的癌症治疗和/或对先前的癌症治疗没有反应，或者其中疾病在先前的治疗期间或在先前的治疗之后已经进展。[0177]根据本发明，先前的治疗可以包括全身和/或局部疗法，例如以下的任何一种或多种：手术、放射疗法、冷冻疗法、激光疗法、局部疗法、化学疗法、激素疗法、靶向药物或免疫疗法。因此，在先的治疗可以包括局部疗法，例如手术、放射疗法、冷冻疗法、激光疗法、局部疗法和/或全身疗法中的任何一种或多种，例如化学疗法、激素疗法、靶向药物或免疫疗法中的任何一种或多种。[0178]根据本发明，先前的治疗可以包括pd-1轴结合拮抗剂、pd-l1结合拮抗剂或pd-1结合拮抗剂。因此，先前的治疗可以包括以下任何一种：[0179](a)抗pd-l1抗体，其抑制pd-l1和pd-1之间和/或pd-l1和b7-1之间的结合，[0180](b)抗pd-l1抗体，其抑制癌细胞表面上的pd-l1将信号转导至细胞内途径，[0181](c)抗pd-1抗体，其抑制pd-l1和pd-1之间和/或pd-l2和pd-1之间的结合，[0182](d)抗pd-1抗体，其抑制t细胞表面上的pd-1将信号转导至细胞内途径，[0183](e)pd-l1结合拮抗剂，其选自：[0184](i)德瓦鲁单抗、imfinzi或medi4736，[0185](ii)阿替利珠单抗、tecentriq或mpdl3280a，[0186](iii)阿维鲁单抗、bavencio或msb0010718c，[0187](iv)mdx-1105、bms-936559，[0188](f)pd-1结合拮抗剂选自：[0189](i)派姆单抗、keytruda、兰博利珠单抗或mk-3475，[0190](ii)西米普利单抗、libtayo或regn-2810，[0191](iii)bms/ono、纳武利尤单抗、opdivo、ono-4538、bms-936558或mdx1106。[0192]根据本发明，先前的治疗可以包括表皮生长因子受体拮抗剂，任选地西妥昔单抗(cetuximab)。根据本发明，当先前的治疗包括化学疗法时，其可以包括一种或多种铂化合物，任选地选自利铂(lipoplatin)、顺铂(cisplatin)、卡铂(carboplatin)、奥沙利铂(oxaliplatin)、奈达铂(nedaplatin)、四硝酸三铂(triplatintetranitrate)、菲铂(phenanthriplatin)、沙铂(satraplatin)、吡铂(picoplatin)。另外或可替选地，当先前的治疗包括化学疗法时，其可以包括一种或多种化学治疗剂，其选自甲氨蝶呤、卡培他滨、紫杉烷、蒽环类、紫杉醇、多西他赛、紫杉醇蛋白结合颗粒、多柔比星、表柔比星、5-氟尿嘧啶、环磷酰胺、阿法替尼、长春新碱、依托泊苷或其组合。另外或可替选地，当先前的治疗包括化学疗法时，其可以包括一种或多种化学治疗剂，其选自：fec：5-氟尿嘧啶、表柔比星、环磷酰胺；fac：5-氟尿嘧啶、多柔比星、环磷酰胺；ac：多柔比星、环磷酰胺；ec：表柔比星、环磷酰胺。[0193]根据本发明，受试者可能在自最后一次治疗后小于或等于12个月复发，或自最后一次治疗后小于或等于6个月复发中，未接受过先前的治疗。[0194]根据本发明，受试者可以是未接受pd-1轴结合拮抗剂，例如派姆单抗、西米普利单抗、纳武利尤单抗或opdivo的或治疗前，可能已接受1、2、3、4、5、6或7次先前剂量的pd-1轴结合拮抗剂。根据本发明，在治疗之前受试者可能已经接受了1、2或3次先前的铂疗法线，或者在治疗之前已经接受了最多1次先前的铂疗法线。[0195]根据本发明，在距最后一次治疗少于或等于12个月时复发，或距最后一次治疗少于或等于6个月时复发的情况下，受试者可能未接受任何先前的辅助疗法(手术后进行放射和/或化疗)。[0196]根据本发明，与单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗相比，治疗延伸或改善或有效延伸或有效改善以下任何一项或多项：[0197](a)无进展生存期(progressionfreesurvival)，[0198](b)进展时间，[0199](c)反应的持续时间，[0200](d)总生存期，[0201](e)客观反应或客观反应率，[0202](f)总体反应或总体反应率，[0203](g)部分反应或部分反应率，[0204](h)完全反应或完全反应率；[0205](i)稳定性疾病率或中值(median)稳定性疾病[0206](j)中值无进展生存期，[0207](k)中值进展时间，[0208](l)中值反应持续时间，或[0209](m)中值总生存期；[0210](n)中值客观反应或中值客观反应率，[0211](o)中值总体反应或中值总体反应率，[0212](p)中值部分反应或中值部分反应率，[0213](q)中值完全反应或中值完全反应，[0214](r)中值稳定性疾病率或中值稳定性疾病。[0215]根据本发明，与单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗相比，治疗延伸、或改善、或有效延伸、或有效改善以下任何一项或多项：[0216](a)最佳总体反应(bestoverallresponse，bor)、(b)确认反应时间(timetoconfirmedresponse，ttr)、(c)反应持续时间(durationofresponse，dor)、(d)稳定性疾病持续时间(durationofstabledisease，dosd)、(e)无进展生存期(progressionfreesurvival，pfs))、或(f)总生存期(overallsurvival，os)。[0217]最佳总体反应(bor)可定义为记录从t细胞输注之日起到疾病进展的最佳反应。确认反应时间(ttr)，可定义为t细胞输注与确认反应的初始日期之间的持续时间。反应持续时间(dor)，可定义为从确认反应的初始日期到pd、进行性疾病(或死亡)的日期的持续时间。疾病稳定持续时间(dosd)，可定义为从t细胞输注日期到pd、进行性疾病(或死亡)日期的持续时间。无进展生存期(pfs)，可定义为t细胞输注日期与基于recistv1.1的疾病进展最早日期或任何原因导致的死亡之间的间隔。总生存期(os)，可以定义为t细胞输注和任何原因导致的死亡之间的持续时间。[0218]“无进展生存期”(pfs)是指从治疗(或随机化)到首次疾病进展或死亡的时间。“进展时间”(ttp)不计算死于被治疗的癌症或肿瘤以外的其他原因的患者，但在其他方面等同于pfs。“反应持续时间”(dor)是癌症、肿瘤或病变在不生长或扩散的情况下继续对治疗产生反应的时间长度。根据本发明，dor、ttp和pfs可以通过实体瘤反应评估标准(responseevaluationcriteriainsolidtumors，recist)来评估，或者可以通过ca-125水平来评估作为进展的决定因素。[0219]根据本发明，例如与单独使用pd-1轴结合拮抗剂(对照)或单独使用修饰的免疫反应细胞(对照)治疗相比，pfs和/或ttp和/或dor或其中值可以是、或者可以被延长或改善至少2周、3周、1个月、2个月、2.3个月、2.5个月、2.9个月、3个月、3.5个月、3.8个月、4个月、4.5个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、16个月、18个月、20个月、22个月、2年、3年、4年、5年、6年、7年、8年、9年、10年。在一个实施方式中，与对照相比，pfs和/或ttp和/或dor或其中值延长了约2.9个月至3.8个月。在一个实施方式中，与对照相比，pfs和/或ttp和/或dor或其中值延长了至少约3.8个月。在另一个实施方式中，与对照相比，pfs和/或ttp和/或dor或其中值延长约2.3个月；在一个实施方式中，与对照相比，pfs和/或ttp和/或dor或其中值延长约6个月。[0220]“总生存期”是指受试者在规定的时间段内保持存活。根据本发明，从根据本发明的方法或治疗开始或从初始诊断开始，总生存期或其中值可以是、或者可以被提高或延长了约6个月、约1年、约1.5年、约2年、约3年、约4年、约5年、约6年、约7年、约8年、约9年、约10年，任选地，用于生存分析的事件可以是任何原因导致的死亡。“生存期”是指受试者保持存活并且包括无进展生存期(pfs)和总生存期(os)。“总生存期”是从疾病、肿瘤和/或癌症的诊断日期或开始治疗之日起，被诊断患有该疾病的受试者仍然活着的时间长度。可以通过kaplan-meier方法估计生存期，并且使用分层对数秩检验(stratifiedlog-ranktest)计算生存期的任何差异；“延长生存期”或“增加生存期的可能性”是指与单独使用pd-1轴结合拮抗剂(对照)或单独使用修饰的免疫反应细胞(对照)的治疗相比，增加治疗受试者的pfs和/或os。根据本发明，例如与单独使用pd-1轴结合拮抗剂(对照)或单独使用修饰的免疫反应细胞(对照)的治疗相比，总生存期或生存期可以延长或提高至少1个月、2个月、2.3个月、2.5个月、2.9个月、3个月、3.5个月、3.8个月、4个月、4.5个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月、10个月、11个月、12个月、16个月、18个月、20个月、22个月、2年、3年、4年、5年、6年、7年、8年、9年、10年。[0221]“客观反应率”(objectiveresponserate，obrr)是肿瘤大小减少预定量的受试者比例，任选地由最短时间段内目标病变或肿瘤的最长直径的总和(sld)确定。“总体反应率(overallresponserate，orr)”定义为对治疗有部分或完全反应的受试者比例；它不包括稳定性疾病。orr通常定义为在指定时间段内完全响应(cr)和部分响应(pr)的总和。根据本发明，例如与单独使用pd-1轴结合拮抗剂(对照)或单独使用修饰的免疫反应细胞(对照)的治疗相比，obrr和/或orr和/或pr和/或cr和/或sd可以是或可以延长或提高至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％。[0222]根据本发明，该方法可以进一步包括确定来自受试者的样本中生物标志物的表达水平，其中将生物标志物的水平与参考水平进行比较以确定受试者对治疗作出反应的可能性；或者确定受试者对治疗的反应水平，其中样本在治疗之前、治疗期间或治疗后获得。参考水平可以是受试者治疗前的水平或者可以是与癌症的存在或癌症的不存在相关的水平。生物标志物可以是t-效应器相关基因，例如cd8a、穿孔素(prf1)、粒酶a(gzma)、粒酶b(gzmb)、干扰素-γ(ifn-γ)、cxcl9或cxcl10。生物标志物可以是活化的基质相关基因，例如转化生长因子-β(transforminggrowthfactor-β，tgf-β)、纤维细胞活化蛋白(fibroblast-activatedprotein，fap)、podplanin(pdpn)、胶原基因或双糖链蛋白聚糖(bgn)。生物标志物可以是一种或一种源自髓鞘(myelokj)的抑制细胞相关基因，例如cd68、cd163、foxp3或雄激素调节基因1。或者，生物标志物可以是pd-l1、cd8或雄激素受体(ar)基因。[0223]本发明进一步提供了增强患有癌症和/或肿瘤的受试者的免疫功能的方法，包括向受试者施用治疗方案，该治疗方案包括有效量的pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群，例如如上文描述的参考治疗方法以及与其相关的方面、实施方式和特征。[0224]因此，本发明还提供了一种增强免疫功能的方法，其中：[0225](a)相对于治疗施用前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，个体中的cd8t细胞具有增强的启动、活化、增殖和/或细胞溶解活性，[0226](b)相对于治疗施用前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，cd8t细胞的数量增加，[0227](c)相对于施用治疗之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞治疗，受试者中的癌症和/或肿瘤细胞选择性地具有升高的mhci类抗原的表达，任选地其中受试者的pbmc细胞不具有升高的mhci类抗原的表达，[0228](d)相对于治疗施用之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，受试者中的抗原呈递细胞具有增强的成熟和活化，任选地其中抗原呈递细胞是树突细胞，[0229](e)相对于治疗施用前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，个体中的il-10和/或il-8的血清水平降低，[0230](f)相对于施用治疗之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，受试者的癌症和/或肿瘤具有升高的t细胞浸润水平，[0231](g)相对于施用治疗之前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，受试者的t细胞具有降低的t细胞pd-1表达水平。[0232]因此，(a)相对于治疗施用前或相对于单独使用pd-1轴结合拮抗剂或单独使用修饰的免疫反应细胞的治疗，cd8t细胞活化的特征可以是γ-ifn cd8t细胞的频率升高和/或细胞溶解活性的增强；(b)抗原呈递细胞的成熟可以cd83 树突细胞频率增加为特征；(c)抗原呈递细胞的活化可以树突细胞上cd80和cd86的表达升高为特征；(d)cd8t细胞可以是抗原特异性cd8t细胞。[0233]根据本发明，提供了；[0234](a)一种试剂盒，其包括pd-1轴结合拮抗剂和包装说明书，该说明书包括使用pd-1轴结合拮抗剂与表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群的组合以治疗或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展的说明，[0235](b)一种试剂盒，其包括pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群，以及包装说明书，其包括使用pd-1轴结合拮抗剂和表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群以治疗或延缓受试者的癌症和/或肿瘤的进展的说明，[0236](c)一种试剂盒，其包括表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群和包装说明书，其包括使用该表达或呈递异源tcr的修饰的免疫反应细胞群与pd-1轴结合拮抗剂的组合以治疗或延缓受试者癌症和/或肿瘤的进展的说明；[0237]任选地，其中所述pd-1轴结合拮抗剂是抗pd-l1抗体、抗pd-1抗体、抗pd-1免疫粘附素。[0238]根据本发明，受试者，即受试者癌症和/或肿瘤，可以是pd-l1表达阳性(pd-l1 )和/或hla-a2表达阳性(hla-a2 )，和/或mage-a4表达阳性(mage-a4 )。根据本发明，受试者(a)在任一等位基因中不是hla-a*02:05阳性，(b)不是hla-a*02:07(并且在抗原结合域中具有与a*02:07相同的蛋白质序列的等位基因)或任何a*02无效等位基因(用“n”后缀指定，例如a*02:32n)作为唯一的hla-a*02等位基因(例如具有hla等位基因a*02:04和a*02:07的受试者符合条件)，(c)没有cns转移。[0239]将通过参考以下附图和实施例进一步描述本发明。附图说明[0240]图1.在响应者的输注后肿瘤中检测到cd3和pd-l1的增加；[0241]图2.无响应者中输注后cd3和pd-l1的增加；[0242]图3.与非转导(non-transduced，ntd)t细胞相比，mage-a4speart细胞在刺激后上调pd-1表达；[0243]图4.与非转导(ntd)t细胞相比，mage-a4 cd8speart细胞在刺激后上调pd-1表达；[0244]图5.在a375细胞(a375.gfpmage-a4 黑色素瘤细胞系)中pd-l1被表达且由于ifn-γ而上调；[0245]图6.用于刺激和上调speart细胞(异源mage-a4tcr或异源mage-a4tcr 异源cd8表达t细胞)上pd-1表达的预激活测定方案；[0246]图7.通过预激活在a2m4speart细胞上使pd-1表达上调；[0247]图8.(a)在初始刺激期间和(b)在使用或不使用抗pd-1抗体的再刺激期间a2m4培养物的上清液；此处显示了ifn-γelisa数据(n＝6小规模捐赠者)；[0248]图9.a2m4speart细胞与pd-1轴的拮抗剂(派姆单抗)的组合治疗癌症受试者的方案。[0249]序列[0250]seqidno:1,pd1-人类程序性细胞死亡蛋白(智人(homosapiens)[0251]mqipqapwpvvwavlqlgwrpgwfldspdrpwnpptfspallvvtegdnatftcsfsntsesfvlnwyrmspsnqtdklaafpedrsqpgqdcrfrvtqlpngrdfhmsvvrarrndsgtylcgaislapkaqikeslraelrvterraevptahpspsprpagqfqtlvvgvvggllgslvllvwvlavicsraargtigarrtgqplkedpsavpvfsvdygeldfqwrektpeppvpcvpeqteyativfpsgmgtssparrgsadgprsaqplrpedghcswpl[0252]seqidno:2,pd1l1-人类程序性细胞死亡配体1(智人)[0253]mrifavfifmtywhllnaftvtvpkdlyvveygsnmtieckfpvekqldlaalivywemedkniiqfvhgeedlkvqhssyrqrarllkdqlslgnaalqitdvklqdagvyrcmisygg[0254]adykritvkvnapynkinqrilvvdpvtseheltcqaegypkaeviwtssdhqvlsgkttttnskreeklfnvtstlrintttneifyctfrrldpeenhtaelvipelplahppnerthlvilgaillclgvaltfifrlrkgrmmdvkkcgiqdtnskkqsdthleet[0255]seqidno:3,pd1l2-人类程序性细胞死亡1配体2(智人)[0256]miflllmlslelqlhqiaalftvtvpkelyiiehgsnvtlecnfdtgshvnlgaitaslqkvendtsphreratlleeqlplgkasfhipqvqvrdegqyqciiiygvawdykyltlkvkasyrkinthilkvpetdeveltcqatgyplaevswpnvsvpantshsrtpeglyqvtsvlrlkpppgrnfscvfwnthvreltlasidlqsqmeprthptwllhifipfciiafifiatvialrkqlcqklysskdttkrpvtttkrevnsai[0257]seqidno:4,德瓦鲁单抗重链序列[0258]evqlvesggglvqpggslrlscaasgftfsrywmswvrqapgkglewvanikqdgsekyyvdsvkgrftisrdnaknslylqmnslraedtavyycareggwfgelafdywgqgtlvtvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkrvepkscdkthtcppcpapefeggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpasiektiskakgqprepqvytlppsreemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk[0259]seqidno:5,德瓦鲁单抗轻链序列[0260]eivltqspgtlslspgeratlscrasqrvsssylawyqqkpgqaprlliydassratgipdrfsgsgsgtdftltisrlepedfavyycqqygslpwtfgqgtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0261]seqidno:6,阿替利珠单抗重链序列[0262]evqlvesggglvqpggslrlscaasgftfsdswihwvrqapgkglewvawispyggstyyadsvkgrftisadtskntaylqmnslraedtavyycarrhwpggfdywgqgtlvtvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqyastyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsreemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk[0263]seqidno:7,阿替利珠单抗轻链序列[0264]diqmtqspsslsasvgdrvtitcrasqdvstavawyqqkpgkapklliysasflysgvpsrfsgsgsgtdftltisslqpedfatyycqqylyhpatfgqgtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0265]seqidno:8,阿维鲁单抗重链序列[0266]evqllesggglvqpggslrlscaasgftfssyimmwvrqapgkglewvssiypsggitfyadtvkgrftisrdnskntlylqmnslraedtavyycariklgtvttvdywgqgtlvtvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkthtcppcpapellggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvshedpevkfnwyvdgvevhnaktkpreeqynstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkalpapiektiskakgqprepqvytlppsrdeltknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflyskltvdksrwqqgnvfscsvmhealhnhytqkslslspgk[0267]seqidno:9,阿维鲁单抗轻链序列[0268]qsaltqpasvsgspgqsitisctgtssdvggynyvswyqqhpgkapklmiydvsnrpsgvsnrfsgsksgntasltisglqaedeadyycssytssstrvfgtgtkvtvlgqpkanptvtlfppsseelqankatlvclisdfypgavtvawkadgspvkagvettkpskqsnnkyaassylsltpeqwkshrsyscqvthegstvektvaptecs[0269]seqidno:10,mdx1105重链序列[0270]qvqlvqsgaevkkpgssvkvscktsgdtfstyaiswvrqapgqglewmggiipifgkahyaqkfqgrvtitadeststaymelsslrsedtavyfcarkfhfvsgspfgmdvwgqgttvtvssastkgpsvfplapsskstsggtaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtqtyicnvnhkpsntkvdkkvepkscdkt[0271]seqidno:11,mdx1105轻链序列[0272]eivltqspatlslspgeratlscrasqsvssylawyqqkpgqaprlliydasnratgiparfsgsgsgtdftltisslepedfavyycqqrsnwptfgqgtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0273]seqidno:12,派姆单抗-db09037》重链序列[0274]qvqlvqsgvevkkpgasvkvsckasgytftnyymywvrqapgqglewmgginpsnggtnfnekfknrvtlttdsstttaymelkslqfddtavyycarrdyrfdmgfdywgqgttvtvssastkgpsvfplapcsrstsestaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtktytcnvdhkpsntkvdkrveskygppcppcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgk[0275]seqidno:13,派姆单抗轻链序列[0276]eivltqspatlslspgeratlscraskgvstsgysylhwyqqkpgqaprlliylasylesgvparfsgsgsgtdftltisslepedfavyycqhsrdlpltfgggtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0277]seqidno:14,纳武利尤单抗重链序列[0278]qvqlvesgggvvqpgrslrldckasgitfsnsgmhwvrqapgkglewvaviwydgskryyadsvkgrftisrdnskntlflqmnslraedtavyycatnddywgqgtlvtvssastkgpsvfplapcsrstsestaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtktytcnvdhkpsntkvdkrveskygppcppcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgk[0279]seqidno:15,纳武利尤单抗轻链序列[0280]eivltqspatlslspgeratlscrasqsvssylawyqqkpgqaprlliydasnratgiparfsgsgsgtdftltisslepedfavyycqqssnwprtfgqgtkveikrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0281]seqidno:16,西米普利单抗重链序列[0282]evqllesggvlvqpggslrlscaasgftfsnfgmtwvrqapgkglewvsgisgggrdtyfadsvkgrftisrdnskntlylqmnslkgedtavyycvkwgniyfdywgqgtlvtvssastkgpsvfplapcsrstsestaalgclvkdyfpepvtvswnsgaltsgvhtfpavlqssglyslssvvtvpssslgtktytcnvdhkpsntkvdkrveskygppcppcpapeflggpsvflfppkpkdtlmisrtpevtcvvvdvsqedpevqfnwyvdgvevhnaktkpreeqfnstyrvvsvltvlhqdwlngkeykckvsnkglpssiektiskakgqprepqvytlppsqeemtknqvsltclvkgfypsdiavewesngqpennykttppvldsdgsfflysrltvdksrwqegnvfscsvmhealhnhytqkslslslgk[0283]seqidno:17,西米普利单抗轻链序列[0284]diqmtqspsslsasvgdsititcraslsintflnwyqqkpgkapnlliyaasslhggvpsrfsgsgsgtdftltirtlqpedfatyycqqssntpftfgpgtvvdfrrtvaapsvfifppsdeqlksgtasvvcllnnfypreakvqwkvdnalqsgnsqesvteqdskdstyslsstltlskadyekhkvyacevthqglsspvtksfnrgec[0285]seqidno:18,magea4肽[0286]gvydgrehtv[0287]seqidno:19；(cd8α)cdr粗体下划线，信号序列斜体下划线[0288][0289]seqidno:20；(cd8α)[0290]atggccttaccagtgaccgccttgctcctgccgctggccttgctgctccacgccgccaggccgagccagttccgggtgtcgccgctggatcggacctggaacctgggcgagacagtggagctgaagtgccaggtgctgctgtccaacccgacgtcgggctgctcgtggctcttccagccgcgcggcgccgccgccagtcccaccttcctcctatacctctcccaaaacaagcccaaggcggccgaggggctggacacccagcggttctcgggcaagaggttgggggacaccttcgtcctcaccctgagcgacttccgccgagagaacgagggctactatttctgctcggccctgagcaactccatcatgtacttcagccacttcgtgccggtcttcctgccagcgaagcccaccacgacgccagcgccgcgaccaccaacaccggcgcccaccatcgcgtcgcagcccctgtccctgcgcccagaggcgtgccggccagcggcggggggcgcagtgcacacgagggggctggacttcgcctgtgatatctacatctgggcgcccttggccgggacttgtggggtccttctcctgtcactggttatcaccctttactgcaaccacaggaaccgaagacgtgtttgcaaatgtccccggcctgtggtcaaatcgggagacaagcccagcctttcggcgagatacgtcggttcaagagctaaaagaagtggtagtggtgcccctgtga[0291]seqidno:21；(magea4tcrα链)cdr粗体下划线[0292][0293]seqidno:22；(magea4tcrα链编码序列)[0294]atgaagaagcacctgaccacctttctcgtgatcctgtggctgtacttctaccggggcaacggcaagaaccaggtggaacagagcccccagagcctgatcatcctggaaggcaagaactgcaccctgcagtgcaactacaccgtgtcccccttcagcaacctgcggtggtacaagcaggacaccggcagaggccctgtgtccctgaccatcctgaccttcagcgagaacaccaagagcaacggccggtacaccgccaccctggacgccgatacaaagcagagcagcctgcacatcaccgccagccagctgagcgatagcgccagctacatctgcgtggtgtccggcggcacagacagctggggcaagctgcagtttggcgccggaacacaggtggtcgtgacccccgacatccagaaccctgaccctgccgtgtaccagctgcgggacagcaagagcagcgacaagagcgtgtgcctgttcaccgacttcgacagccagaccaacgtgtcccagagcaaggacagcgacgtgtacatcaccgacaagaccgtgctggacatgcggagcatggacttcaagagcaatagcgccgtggcctggtccaacaagagcgacttcgcctgcgccaacgccttcaacaacagcattatccccgaggacacattcttcccaagccccgagagcagctgcgacgtcaagctggtggaaaagagcttcgagacagacaccaacctgaacttccagaacctgagcgtgatcggcttcagaatcctgctgctgaaggtggccggcttcaacctgctgatgaccctgagactgtggtccagcggcagccgggccaagaga[0295]seqidno:23；(magea4tcrβ链)cdr粗体下划线[0296][0297]seqidno:24；(magea4tcrβ链编码序列)[0298]atggccagcctgctgttcttctgcggcgccttctacctgctgggcaccggctctatggatgccgacgtgacccagaccccccggaacagaatcaccaagaccggcaagcggatcatgctggaatgctcccagaccaagggccacgaccggatgtactggtacagacaggaccctggcctgggcctgcggctgatctactacagcttcgacgtgaaggacatcaacaagggcgagatcagcgacggctacagcgtgtccagacaggctcaggccaagttcagcctgtccctggaaagcgccatccccaaccagaccgccctgtacttttgtgccacaagcggccagggcgcctacgaggagcagttctttggccctggcacccggctgacagtgctggaagatctgaagaacgtgttccccccagaggtggccgtgttcgagccttctgaggccgaaatcagccacacccagaaagccacactcgtgtgtctggccaccggcttctaccccgaccacgtggaactgtcttggtgggtcaacggcaaagaggtgcacagcggcgtgtccaccgatccccagcctctgaaagaacagcccgccctgaacgacagccggtactgcctgagcagcagactgagagtgtccgccaccttctggcagaaccccagaaaccacttcagatgccaggtgcagttttacggcctgagcgagaacgacgagtggacccaggacagagccaagcccgtgacacagatcgtgtctgccgaagcttgggggcgcgccgattgtggctttaccagcgagagctaccagcagggcgtgctgagcgccaccatcctgtacgagatcctgctgggaaaggccacactgtacgccgtgctggtgtctgccctggtgctgatggccatggtcaagcggaaggacagccggggc[0299]seqidno:25；(magea4tcrα链可变区域)136aa-cdr粗体下划线[0300][0301]seqidno:26；(magea4tcrβ链可变区域)133aa-cdr粗体下划线[0302][0303]seqidno:27；cdr1magea4tcrα链,(残基48-53)[0304]vspfsn[0305]seqidno:28；cdr2magea4tcrα链,(残基71-76)[0306]ltfsen[0307]seqidno:29；cdr3magea4tcrα链,(残基111-125)[0308]cvvsggtdswgklqf[0309]seqidno:30；cdr1magea4tcrβ链,(残基46–50)[0310]kghdr[0311]seqidno:31；cdr2magea4tcrβ链,(残基68-73)[0312]sfdvkd[0313]seqidno:32；cdr3magea4tcrβ链,(残基110–123)[0314]catsgqgayeeqff[0315]seqidno:33；cdr1cd8α(残基45-53)[0316]vllsnptsg[0317]seqidno:34；cdr2cd8α(残基72-79)[0318]ylsqnkpk[0319]seqidno:35；cdr3cd8α(残基118-123)[0320]lsnsim[0321]seqidno:36,magea4[0322]实施例[0323]实施例1.[0324]使用在t细胞输注前后从受试者滑膜肉瘤患者体内(表达magea4的肿瘤)采集的组织活检样本(speart细胞，即包含用特异于magea4癌-睾丸抗原的异源tcr工程化的受试者t细胞)，我们已证明在输注前组织中没有pd-l1表达。患者对speart细胞治疗有反应。在输注speart细胞后，在组织信号传导t细胞浸润和存在基因修饰t细胞中测量的cd3(成熟t淋巴细胞上t细胞受体(tcr)复合物的一部分)表达增加。此外，在与t细胞浸润相关的肿瘤中观察到pd-l1的诱导，如图1。来自对speart细胞治疗无反应的卵巢癌患者的活检数据表明，在输注前活检中pd-l1表达呈阳性，并且在输注speart细胞后，t细胞/基因修饰的t细胞浸润(由cd3表示)增加且观察到的相关的肿瘤中pd-l1的诱导更强，如图2。[0325]我们已经表明，与不具有异源tcr的非转导(ntd)t细胞相比，在用靶抗原mage-a4刺激后，将表达异源tcr的基因修饰t细胞暴露于mage-a4会使pd-1表达上调，如图3。在表达异源mage-a4和异源cd8的基因修饰t细胞中也可以看到相同的效果，如图4。数据表明，可以通过阻断pd1/pd-l1相互作用来增强工程化t细胞的活性。我们还表明，响应干扰素癌细胞系使pd-l1表达上调，如图5。图5的数据表明，在患者中临床观察到的情况也可以在体外癌细胞测定系统中观察到。作为对癌症免疫反应的一部分，t细胞通过靶细胞的jak/stat途径产生具有抗肿瘤作用的干扰素。在患者中，肿瘤对干扰素的pd-l1上调反应代表了肿瘤细胞免疫规避适应的一部分。[0326]我们使用预刺激方案和细胞因子elisa测定进一步检查了pd-1阻断对将针对mage-a4表达异源tcr的基因修饰t细胞(speart细胞)引起的细胞毒性和效应器细胞因子产生的影响。如图6所示，进行t细胞预激活，其中针对mage-a4表达异源tcr的基因修饰的t细胞(也对表达异源mage-a4和异源cd8的基因修饰t细胞进行)，用表达肿瘤细胞的靶标(辐照的a375mage-a4 黑色素瘤细胞)刺激，在没有用抗pd-1抗体阻断pd-1的情况下再刺激之前培养并与癌细胞分离。图7的数据显示，在7天的初始刺激期间，pd-1在预激活t细胞上的表达，对于在每个细胞群中的cd4 和cd8 细胞都增加。[0327]使用预刺激模型，我们已经表明在初始刺激期间工程化mage-a4tcr和工程化mage-a4tcr cd8t细胞的初始刺激期间都会产生ifn-γ、il-2和颗粒酶b，但在重新刺激时，在这个预激活步骤之后，这种能力就会丧失。然而，对于工程化mage-a4tcr和工程化mage-a4tcr cd8t-细胞，在抗pd-1抗体存在下的重新刺激部分恢复了这种细胞因子活性功能并恢复了ifnγ和颗粒酶b但不是il-2的产生，图8显示了mage-a4tcr和ifn-γ的数据。总之，我们已经展示了通过与抗pd-1抗体组合来挽救耗尽的工程化t细胞细胞因子功能的能力。[0328]实施例2，体内肿瘤模型[0329]我们使用1x106转导(adp-a2m4)mage-a4tcrt细胞的剂量在nsg品系小鼠a375(黑色素瘤)异种移植模型中进一步测试了该组合；10mg/kg腹膜内q4d(每天两次，共4天)抗pd-1抗体派姆单抗(keytruda)，并根据以下方案记录对肿瘤体积的影响。将72只荷瘤小鼠随机分为n＝8的9组，并按照下表1进行治疗。[0330]表1[0331][0332]第1组和第2组中的所有动物将从第0天(即第0、4、8、12、16、20天)开始，通过i.p.施用(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)同种型对照(第1组)或派姆单抗(第2组)q4d)。不会进行其他治疗。(第0天是按照第3至第9组施用t细胞的那一天)。[0333]第3组和第4组中的所有动物将在第0天通过i.v.接受一次推荐体积为5ml/kg的ntdt细胞施用。不会对第3组中的动物进行其他治疗。此外，第4组中的动物将从第1天(即第1、5、9、13、17天)通过i.p.(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)接受派姆单抗q4d。[0334]第5、6、7、8和9组中的所有动物将在第0天通过i.v.接受单次推荐体积为5ml/kg的t细胞施用，及第5、6、7、8和9组进行如下所述的第二次治疗：[0335]-第5组：通过i.p.(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)从第1天开始(即第1、5、9、13、17、21、25、29、33、37、41、45、49、53、57天)同种型对照q4d[0336]-第6组：通过i.p(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)从第-1天开始(即第-1、3、7、11、15、19、23、27、31、35、39、43、47、51、55、59天)派姆单抗q4d[0337]-第7组：通过i.p.(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)从第7天开始(即第7、11、15、19、23、27、31、35、39、43、47、51、55、59天)派姆单抗q4d[0338]-第8组：通过i.p.(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)从第14天开始(即第14、18、22、26、30、34、38、42、46、50、54、58天)派姆单抗q4d[0339]-第9组：通过i.p(通过i.p.的最大施用量为10ml/kg)从第21天开始(即第21、25、29、33、37、41、45、49、53、57天)派姆单抗q4d[0340]在所有情况下，每周用卡尺测量肿瘤体积3次，并从治疗开始每周对动物称重3次。[0341]实施例3，临床研究[0342]设计一项研究以调查派姆单抗与adp-a2m4(speart细胞，经工程改造以表达magea4特异性tcr的t细胞)的联合治疗，用于治疗具有复发或转移性hnscc的患者，其中受试者之前未接受过转移性疾病的系统治疗或受试者在含铂化疗期间或之后出现疾病进展。根据recistv1.1，疾病可以是组织学或细胞遗传学证实和/或可测量的疾病。[0343]该研究是针对晚期/复发头颈鳞状细胞癌(hnscc)和未使用检查点抑制剂(na点抑制)患者的单臂ii期研究(n＝10名患者)，其中受试者已接受过0-1次先前的含铂系统线(line)用于转移性疾病，或受试者在治疗前在筛选时未接受过检查点抑制剂且即将开始派姆单抗治疗，或最近已开始派姆单抗治疗晚期疾病(已接受1-2剂)。受试者被确定为pd-l1 、hla-a2 、mage-a4表达：通过ihc在≥30％的细胞中2 /3 [即通过ihc(immunohistochemistry)(免疫组化)肿瘤显示mage-a4表达定义为≥30％的肿瘤细胞≥2 ]。根据recistv1.1，测量的主要终点是orr。在晚期/复发头颈鳞状细胞癌(hnscc)中，标准护理pd-1疗法、派姆单抗单药疗法的历史反应率产生orr＝19％。[0344]在开始派姆单抗治疗之前，受试者被分离以获得t细胞群，随后用对magea4抗原(特别是特异性magea4抗原肽seqidno：18)特异的adp-a2m4“spear”tcr转导细胞，扩增细胞并冷冻保存以备后用。此后，受试者接受最多3剂派姆单抗治疗(每3周30分钟内静脉输注200mg)，然后根据recistv1.1扫描疾病状态，例如可测量的疾病。具有进展性疾病或稳定性疾病的受试者继续接受淋巴细胞清除(lymphodepletion)方案，氟达拉滨(fludarabine)(30mg/m2/天，持续4天)和环磷酰胺(600mg/m2/天，持续3天)和speart细胞输注：adp-a2m4剂量为10亿至100亿个转导细胞，无剂量递增，并继续使用派姆单抗(200mgiv输注，每3周在30分钟内)直至疾病恶化或直至24个月，以较早者为准。扫描并确定有完全或部分反应的受试者不进行淋巴细胞清除和细胞输注，而是继续派姆单抗(200mgiv输注，每3周在30分钟内)直到疾病进展或直到24个月，以较早者为准，之后他们可能会经历淋巴细胞清除和细胞输注以及派姆单抗联合施用。任选地，在开始使用派姆单抗之前进行分离术(apheresis)。细胞输注后的第一剂派姆单抗可能在细胞输注后的第17天或第22天。[0345]对于本研究，受试者排除标准包括：(a)hla-a*02:05在任一等位基因中均为阳性。(b)hla-a*02:07(以及在抗原结合域中与a*02:07具有相同蛋白质序列的等位基因)或任何a*02无效等位基因(以“n”后缀命名，例如a*02:32n)作为唯一的hla-a*02等位基因(例如具有hla等位基因a*02:04和a*02:07的受试者符合条件)，(c)cns转移，(d)任何先前的检查点抑制剂疗法，(e)任何先前的细胞疗法，(f)如果接受化疗，则白细胞分离术或ld前所需的冲洗期为3周。[0346]根据recistv1.1，测量的主要终点是的orr。处理方案如图9所示。当前第1页12当前第1页12
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