免疫球蛋白E用逆向侧流免疫分析的制作方法

技术特征：
1.一种逆向侧流免疫分析方法，所述方法专门设计用于检测人抗原特异性免疫球蛋白e(ige)，其中所述逆向侧流免疫分析包括以下部件和过程：a.所述逆向侧流免疫分析方法为试纸条，所述试纸条由以下部分组成：样品垫；缀合垫或作为替代物用于样品垫和缀合垫目的的组合垫；蛋白结合膜；以及安装在基底支架上的吸收垫；所述样品垫和所述缀合垫之间、所述缀合垫和所述蛋白结合膜之间以及所述蛋白结合膜和所述吸收垫之间相互重叠；b.缀合物预先分配并在所述缀合垫上全部弄干；另选地，所述缀合物能够为与待测样品混合的液体，随后施加到侧流设备的样品口；c.抗人ige抗体预先分配到所述蛋白结合膜的测试线位置；d.抗抗原(例如抗花生)抗体预先分配到所述蛋白结合膜的控制线位置；e.所述试纸条能够容纳在盒中或以试纸条的形式收纳；f.所述测试过程为直接将所述样品施加到所述样品垫上或者在组合样品垫和缀合垫的情况下将所述样品施加到所述缀合垫上，随后在添加样品后立即或间隔预定时间间隔将电泳缓冲液施加到所述样品垫/所述缀合垫上；另选地，所述待测样品能够与电泳缓冲液预混，随后施加到所述侧流设备的所述样品口上；以及g.测试结果能够直观得到或由设计的侧流读取器机器读取。2.根据权利要求1所述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述逆向侧流免疫分析方法为容纳在盒中或以试纸条形式收纳的试纸条。3.根据权利要求1所述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述“逆向”特指直接地或间接地、化学地或物理地将抗原偶连或缀合到比色纳米粒子的过程。4.根据权利要求1所述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述缀合物特指与比色纳米粒子缀合的具有抗原的复合物。5.根据权利要求1所述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述比色纳米粒子包括但不限于胶体金纳米粒子、银纳米粒子、乳胶纳米粒子、磁性纳米粒子和荧光标记纳米粒子。6.根据权利要求1所述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述蛋白结合膜为能够固定的固体载体以及结合蛋白和抗体，所述蛋白结合膜包括但不限于硝酸纤维膜和聚偏氟乙烯(pvdf)膜。7.根据权利要求1所述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述抗原包括但不限于过敏原、自然环境抗原、致病性抗原、自身抗原、糖抗原、脂抗原、合成药抗原和半抗原。8.根据权利要求7所述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述过敏原包括但不限于食品过敏原诸如花生、牛奶、蛋白、贝类、甲壳类、鱼、树坚果、红肉、小麦、大豆、芝麻籽；环境过敏原诸如尘螨、花粉、蟑螂、宠物毛屑、霉菌；昆虫过敏原诸如蜜蜂、黄蜂、大黄蜂、胡峰、火蚁的毒液、过敏原混合物以及它们的组合。9.根据权利要求7所述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述自身抗原包括但不限于人可溶性蛋白、细胞表面膜蛋白、胞内蛋白、dna、rna以及dna/rna和蛋白的复合物。10.根据权利要求7所述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述致病性抗原包括但不限于寄生虫抗原如蠕虫和其他寄生虫、细菌抗原、真菌抗原、病毒抗原如新冠病毒2019(sars-cov-2)刺突和核衣壳蛋白。11.根据权利要求7所述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述合成药抗原和半抗原包括
但不限于抗生素、抗真菌药、抗病毒药、抗肿瘤药以及其他合成小分子和半抗原。12.根据权利要求1述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述抗人ige抗体包括但不限于源于小鼠、兔、大鼠、仓鼠、马、绵羊、山羊、鸡、骆驼、美洲驼、软骨鱼、人类及人重组体的人ige fc区域的多克隆或单克隆抗体。13.根据权利要求1述的逆向侧流免疫分析方法，其中所述抗抗原抗体包括但不限于源于小鼠、兔、大鼠、骆驼、人类及人重组体的抗原的多克隆或单克隆抗体。

技术总结
本发明公开了利用逆向侧流免疫分析检测和量化人抗原特异性免疫球蛋白E(IgE)的方法和组合物。在本发明的一个实施例中，从包括全血、干血、血清、血浆、唾液、眼泪、胃肠道、来自消化道及发炎部位的分泌液的体液获得的试样中的人抗原特异性IgE与纳米粒子结合的抗原反应，抗原包括过敏原、自然环境抗原、致病性抗原、自身抗原、糖抗原、脂抗原、合成药抗原和半抗原。所形成的IgE-抗原-纳米粒子复合物由分配到测试线位置的抗人IgE抗体捕获，因此形成了肉眼可见且能被侧流读数计检测到的色谱色，而剩余的抗原-纳米粒子复合物则由分配到控制线位置的抗抗原特异性抗体获得作为分析对照。术语“逆向”特指与捕获利用测试线位置的固定抗-IgE抗体形成的抗原特异性IgE-抗原-纳米颗粒相结合，抗原缀合或偶连到用于人IgE检测和量化的该侧流免疫分析用纳米颗粒。量化的该侧流免疫分析用纳米颗粒。量化的该侧流免疫分析用纳米颗粒。


技术研发人员：张克
受保护的技术使用者：张克
技术研发日：2020.10.02
技术公布日：2022/8/29