一种厚朴碱与荷叶碱药物组合物及其制备方法

1.本发明涉及一种药物组合物，尤其涉及一种厚朴碱与荷叶碱药物组合物及其制备方法，属于农药复配技术领域。


背景技术：

2.李褐腐病由链核盘菌属(monilinia)和丛梗孢属(monilia)真菌引起，其中主要致病菌为美澳型核果链核盘菌(m.fructicola)。该病侵染位点分布在果实表面和蒂部，果实被侵害后产生黄褐色病斑，病斑逐渐扩大并伴有灰色绒状颗粒突起，病害加重后果实表面变深褐色至黑色，病斑周围逐渐长出灰色霉层，最后病果腐烂，失水枯死，引起落果和僵果。该病以菌丝体在树上及落地的僵果内或枝梢的溃疡部越冬。翌年春季产生大量的分生孢子，借助风雨或昆虫传播，通过病虫伤、机械伤或自然孔口侵入进行初侵染，在多雨雾天气时，病部表面产生大量孢子进行再侵染；花期低温，潮湿多雨，易引起花腐；果实成熟期温暖多雨雾易造成果腐。目前李褐腐病的防治仍然以化学药剂为主，但是这就容易造成病原菌抗药性提高，而且频繁用药还易造成环境污染和农药残留，所以研究和开发植物活性物质防治李褐腐病对李产业发展具有重要意义。


技术实现要素：

3.本发明要解决的技术问题是：提供一种厚朴碱与荷叶碱药物组合物及其制备方法，通过将厚朴碱与荷叶碱添加不同的组分组合成不同的剂型，具有协同增效作用、使用成本低、效果好，绿色无污染的特性，可用于防治李褐腐病，有效的解决了上述存在的问题。
4.本发明的技术方案为：一种厚朴碱与荷叶碱药物组合物，所述组合物包含有厚朴碱和荷叶碱，所述厚朴碱与荷叶碱的质量配比为：1:9～9:1。
5.厚朴碱是从木兰科落叶乔木植物厚朴或凹叶厚朴的干皮、根皮或枝皮中分离提取得到的一种苄基异喹啉类生物碱，具有杀菌、杀虫和除草活性，对许多病原真菌表现出较强的敏感性以及较好耐药消减作用，在环境中易降解，对环境安全且对人畜无害，具有巨大的杀菌剂开发潜力。厚朴碱分子式为c19h24no3 ，结构式是：
[0006][0007]
荷叶碱是来源于睡莲科植物莲干燥叶中的一种阿朴啡类生物碱，也是《中国药典》收载荷叶这味中药的质控成分。具有良好的杀虫、抗菌及抗病毒作用。荷叶碱可通过破坏细菌和真菌的细胞结构、抑制其有丝分裂、影响能量代谢等多种途径，达到杀菌效果。荷叶碱分子式为c19h21no2，结构式是：
[0008][0009]
所述组合物的剂型包含有乳油、可湿性粉剂、悬浮剂及水分散粒剂，所述组合物可用于防治李褐腐病。
[0010]
所述组合物的乳油剂型质量百分比为：厚朴碱1-20％、荷叶碱1-20％、乳化剂5-20％、溶剂5-30％、增稠剂0.5-10％、防腐剂0.5-10％，余量为蒸馏水。
[0011]
所述乳化剂可选用蓖麻油聚氧乙烯醚、十二烷基苯磺酸钙、脂肪酸聚氧乙烯醚、苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚、脂肪酸聚氧乙烯基酯中任一种，所述溶剂为二甲基亚砜、二甲苯、甲苯、甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇、甲酯化植物油、二甲基甲酰胺中任一种，所述增稠剂为甲基纤维素、黄原胶、聚乙烯醇、硅酸镁铝、羧甲基纤维素﹑羧乙基纤维素中任一种，所述防腐剂为乳酸链球菌素或2-溴基-2-硝基-1,3-丙烷二醇中的任一种。
[0012]
一种厚朴碱与荷叶碱药物组合物的制备方法，所述方法为：将厚朴碱和荷叶碱按比例混合均匀并用溶剂完全溶解，依次加入乳化剂、增稠剂和防腐剂，搅拌均匀，即制得厚朴碱和荷叶碱乳油。
[0013]
所述组合物的可湿性粉剂质量百分比为：厚朴碱1-20％、荷叶碱1-20％、润湿剂1-5％、分散剂1-10％、渗透剂0.5-10％，余量为用填料补足。
[0014]
所述润湿剂为十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钙、萘磺酸盐、烷基磺酸盐、烷基苯磺酸盐聚氧乙烯三苯依稀苯基磷酸盐中任一种；分散剂为木质素磺酸盐、聚羧酸盐、烷基萘甲醛缩合物磺酸盐、脂肪酸聚氧乙烯酯、脂肪胺聚氧乙烯醚、甘油脂肪酸酯聚氧乙烯醚中任一种，渗透剂为脂肪醇聚氧乙烯醚；填料可选用高岭土、硅藻土、膨润土、白炭黑、海泡石、滑石粉、陶土中任一种。
[0015]
一种厚朴碱与荷叶碱药物组合物的制备方法，所述方法为：将厚朴碱、荷叶碱、润湿剂、分散剂、渗透剂和填料混合，经气流粉碎机粉碎后再混合均匀，即制得厚朴碱和荷叶碱可湿性粉剂。
[0016]
所述组合物的悬浮剂质量百分比为：厚朴碱1-20％、荷叶碱1-20％、分散剂1-10％、乳化剂1-10％、润湿剂0.1-5％、增稠剂0.5-5％、消泡剂0.1-2％、防冻剂0.1-5％，余量为蒸馏水。
[0017]
所述分散剂为木质素磺酸盐、聚羧酸盐、烷基萘甲醛缩合物磺酸盐、脂肪酸聚氧乙烯酯、脂肪胺聚氧乙烯醚、甘油脂肪酸酯聚氧乙烯醚中任一种，乳化剂为蓖麻油聚氧乙烯醚、十二烷基苯磺酸钙、脂肪酸聚氧乙烯醚、苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚、脂肪酸聚氧乙烯基酯中任一种；润湿剂为十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钙、萘磺酸盐、烷基磺酸盐中任一种；增稠剂为甲基纤维素、黄原胶、聚乙烯醇、硅酸镁铝、羧甲基纤维素﹑羧乙基纤维素中任一种；消泡剂为硅油、硅酮类化合物、c10-20饱和脂肪酸类化合物、c8-10脂肪醇类、己醇、丁醇、辛醇中任一种；防冻剂为丙三醇、聚乙二醇、山梨醇、尿素、甘油、乙二
醇、丙二醇中任一种。
[0018]
一种厚朴碱与荷叶碱药物组合物的制备方法，所述方法为：将分散剂、乳化剂、润湿剂、增稠剂、消泡剂和防冻剂混合均匀，加入厚朴碱和荷叶碱，搅拌均匀至完全溶解，即制得厚朴碱和荷叶碱悬浮剂。
[0019]
所述组合物的水分散粒剂质量百分比为：厚朴碱1-20％、荷叶碱1-20％、载体40-80％、分散剂1-10％、润湿剂1-10％、崩解剂0.5-10％，余量用填料补足。
[0020]
所述载体可选用高岭土或黑碳土；分散剂为木质素磺酸盐、聚羧酸盐、烷基萘甲醛缩合物磺酸盐、脂肪酸聚氧乙烯酯、脂肪胺聚氧乙烯醚、甘油脂肪酸酯聚氧乙烯醚中任一种；润湿剂为十二烷基硫酸钠、十二烷基苯磺酸钙、萘磺酸盐、烷基磺酸盐中任一种；崩解剂为蔗糖、膨润土、尿素、葡萄糖、硫酸铵、氯化铝、柠檬酸、丁二酸中任一种。
[0021]
一种厚朴碱与荷叶碱药物组合物的制备方法，所述方法为：将厚朴碱和荷叶碱、载体、分散剂、崩解剂混合均匀后粉碎，再与加水溶解后的润湿剂混合得到悬浮液，将悬浮液干燥后与硅藻土进行高速混合造粒，即制得厚朴碱和荷叶碱水分散粒剂。
[0022]
本发明的有益效果是：与现有技术相比，采用本发明的技术方案，制备的药物组合物具有研发成本低，使用便捷，易推广的特点，经过室内筛选和田间试验表明，厚朴碱和荷叶碱复配能提高药物对李褐腐病的毒力作用和田间防效，有很好的使用效果。
[0023]
本发明所含有效成分为厚朴碱和荷叶碱，两者皆是从植物中提取出来的有效成分，在自然环境下能够分解，无化学残留，对人畜绿色健康，大大提高农产品质量安全。
[0024]
本发明的组合物复配后，在一定的范围内具有明显的协同增效作用，与单个活性成分相比，组合物的防效有明显的提高；
[0025]
本发明的组合物中活性成分在有效防治作物病害的同时，可以延缓病原菌抗药性的产生，有利于延缓农药活性成分的使用寿命，进一步降低了生产成本和使用成本，有利于抗性病害的综合防治；
[0026]
本发明的组合物制备工艺简单，适合实际生产中大范围的推广应用。
具体实施方式
[0027]
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面对本发明作进一步的详细描述。
[0028]
实施例1：一种厚朴碱与荷叶碱药物组合物，所述厚朴碱和荷叶碱的有效成分比为1:9～9:1。
[0029]
所述组合物剂型包括乳油、可湿性粉剂、悬浮剂、水分散粒剂。
[0030]
具体实施方法如下：
[0031]
1材料与方法
[0032]
1.1供试材料
[0033]
厚朴碱(长沙上禾生物科技公司，纯度≥98％)，荷叶碱(成都仪睿生物科技公司，纯度≥98％)。美澳型核果链核盘菌(monilinia.fructicola)，由贵州大学作物保护研究所保藏提供。
[0034]
1.2试验方法
[0035]
1.2.1室内毒力测定：采用菌丝生长速率抑制法，将厚朴碱与荷叶碱按照比例1:1、
1:3、1:5、1:7、1:9、9:1、7:1、5:1、3:1进行混合，分别以单剂作为对照，稀释到试验所需要的各浓度处理，向灭菌的pda培养基(冷却至50℃左右)中加入一定配好浓度的供试药剂，充分振荡混匀后制为不同浓度梯度的含药平板，以添加同等质量无菌水的pda平板作为对照(ck)。用直径5mm打孔器在活化7d后的病原菌菌落边缘打取菌饼，接种菌饼至不同浓度梯度的含药pda平板中央，置于25℃恒温培养箱中黑暗培养，每个处理3次重复，待空白对照组菌落占培养皿2/3左右时，采用十字交叉法测量各处理菌落直径，按下列公式计算各药剂处理对病原菌生长的抑制率。
[0036]
抑制率(％)＝[(对照菌落直径一处理菌落直径)/对照菌落直径]
×
100
[0037]
利用农药室内生物测定数据处理系统软件，计算出各药剂对不同病原菌的毒力回归曲线方程，并计算相关系数r、有效抑制中浓度ec50、标准误差、置信区间。
[0038]
用孙云沛法求出毒力指数、理论毒力指数、实际毒力指数及混剂的共毒系数ctc值，并据此作出综合评价，ctc》120表示增效作用，80《ctc《120表示相加作用，ctc《80表示拮抗作用。共毒系数ctc值计算公式如下:
[0039]
实测药剂毒力指数(ati)＝(标准药剂的ec50/供试药剂的ec50)
×
100
[0040]
混剂的理论毒力指数(tti)＝(药剂a的毒力指数
×
ax) (药剂b的毒力指数
×
bx)
[0041]
共毒系数(ctc)＝(ati/tti)
×
100
[0042]
ax——药剂a在混剂中的百分含量；
[0043]
bx——药剂b在混剂中的百分含量。
[0044]
1.2.2田间防效试验：选用增效作用最显著的复配比例进行田间药效试验，同时以两种单剂作为对照，并喷洒等量清水作为空白对照(ck)。共计4个处理，每个处理3次重复，总共12个小区，采取随机排列，李树密度株行距为3m
×
4m，小区间设有保护行。分别在坐果期和近成熟期，采取常规喷雾法各喷施一次，将药液均匀地喷施在果实和叶片的表面。
[0045]
距离采收前10d调查防治效果。每小区调查5株，每株按东、西、南、北、中5点取样，每个点固定调查30个果实。记录总果数、病果数，计算防治效果。
[0046]
病果率(％)＝(病果数/调查总果数)
×
100
[0047][0048]
2试验结果
[0049]
2.1厚朴碱与荷叶碱复配对m.fructicola菌丝生长的抑制作用数据见表1表2所示。
[0050]
表1厚朴碱与荷叶碱及其混剂对m.fructicola的毒力测定结果
[0051][0052]
由表1可以看出，厚朴碱与荷叶碱复配后对m.fructicola所得的共毒系数在116.82～550.07之间，ec50值在1.2849～9.7781mg
·
l-1，所有配比对m.fructicola均表现出较好的抑菌效果。厚朴碱：荷叶碱有效成分比为1:1、1:3、1:5、1:7、9:1、7:1、5:1、3:1组合ctc均大于120，协同增效作用均表现为增效作用，其中有效成分比为1:1时，ctc值最大为550.07；ec50值最小为1.2849mg
·
l-1。
[0053]
表2不同处理对李褐腐病的田间防效
[0054][0055]
由表2可以看出，厚朴碱与荷叶碱复配可以降低李褐腐病的发病率，提高田间防效。厚朴碱与荷叶碱的复配制剂对李褐腐病的防治效果明显优于单个活性成分的制剂防治效果，且在用药范围内，未发现所述组合物制剂对作物产生药害，表明本发明的组合物安全性也较好，值得在生产上推广应用。
[0056]
本发明测定了厚朴碱与荷叶碱药物组合物对美澳型核果病原菌的室内抑菌效果以及对李褐腐病的田间防效。两种生物碱成本低廉、无毒无害，可作为一种潜在的生物农药，具有广阔的开发应用前景。
[0057]
本发明未详述之处，均为本技术领域技术人员的公知技术。最后说明的是，以上实
施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。