使用分流溶剂流的液相色谱的进样的制作方法

使用分流溶剂流的液相色谱的进样
1.相关申请本技术要求2019年11月25日提交的标题为“sample injection for liquid chromatography using split solvent flow”的美国临时专利申请序列号62/939,891的在先申请日的权益，该临时专利申请的全部内容以引用方式并入本文。
技术领域
2.本发明的技术整体涉及液相色谱法。更具体地，本发明的技术涉及在液相色谱系统中使用分流溶剂流稀释色谱样品的方法和系统。


背景技术：

3.液相色谱系统有时需要在将样品进样到流向色谱柱的流动相之前稀释样品。例如，可以将样品溶解于强溶剂中，该强溶剂可与流动相相互作用，并且对色谱产生负面影响。通常，期望将样品集中在色谱柱的顶部；然而，强溶剂可阻止至少一些样品保留在柱的顶部，从而导致峰加宽、峰畸变或样品穿透。
4.样品稀释可以由熟练的技术人员手动执行；然而，对于技术人员而言，这并不总是可行的。在许多情况下，用于执行稀释的技术人员和装备位于距液相色谱系统不方便的距离处，从而导致显著的延迟。此外，在稀释过程中存在污染和人为错误的风险。另外，其他不便之处在于经常需要跟踪所传送的样品。


技术实现要素：

5.在一个方面，可选择的流量限制装置包括限制阀和多个流量限制器。限制阀具有第一端口、第二端口、多个流体节点和可移动阀通道。该通道具有流体地联接到第二端口的第一端部和被构造成联接到流体节点中所选择的一个流体节点的第二端部。第一端口和第二端口中的一者是入口端口，并且第一端口和第二端口中的另一者是出口端口。
6.流量限制器中的每一个流量限制器可包括流体通道，该流体通道的直径不同于其他流量限制器的其他流体通道中的每一个流体通道的直径。流量限制器中的每一个流量限制器可包括流体通道，该流体通道的横截面积不同于其他流量限制器的其他流体通道中的每一个流体通道的横截面积。
7.限制阀可以是旋转阀。
8.流体节点中的每一个流体节点可以是外部端口。另选地，流体节点中的每一个流体节点可以是内部节点，并且每个流量限制器可以是形成在所述流体节点中的两个流体节点之间的限制阀内部的流体通道。
9.在另一方面，用于在进样期间进行色谱样品稀释的流体网络包括流量分流器、进样阀、第一流量组合器和第二流量组合器。流量分流器具有入口端口、第一出口端口和第二出口端口。流量分流器将在入口端口处接收的入口流分成第一出口端口处的第一出口流和第二出口端口处的第二出口流。进样阀具有多个进样阀端口。进样阀端口中的一个进样阀
端口是联接到流量分流器的第一出口端口的入口端口，并且另一个进样阀端口是出口端口。第一流量组合器具有联接到流量分流器的第二出口端口的入口端口，并且具有第二入口端口和出口端口。第二流量组合器具有联接到第一流量组合器的出口端口的第一入口端口，联接到进样阀的出口端口的第二入口端口，以及出口端口。
10.流量分流器可以被手动调节以控制分流比。流量分流器可以具有响应于来自流量计的信号的分流比。
11.流体网络还可以包括色谱柱，该色谱柱具有与第二流量组合器的出口端口流体连通的入口端口。
12.在又一个方面，用于在进样期间进行色谱样品稀释的流体网络包括限制阀、多个流量限制器、进样阀、第一流量分流器和第一流量组合器。限制阀具有第一端口、第二端口、多个流体节点和可移动阀通道。该通道具有流体地联接到第二端口的第一端部和被构造成联接到流体节点中所选择的一个流体节点的第二端部。第一端口和第二端口中的一者是入口端口，并且第一端口和第二端口中的另一者是出口端口。流量限制器中的每一个流量限制器具有联接到流体节点中的一个流体节点的第一端部和联接到流体节点中的另一个流体节点的第二端部。流量限制器被布置成形成从流量限制器中的第一流量限制器到流量限制器中的最后一个流量限制器限定的串联路径。在第一端口和第二端口之间限定了引导液体的流体路径，并且根据流体节点中的哪一个流体节点联接到第二端口来确定流体路径中的流量限制器。进样阀具有多个进样阀端口。进样阀端口中的一个进样阀端口是入口端口，并且另一个进样阀端口是出口端口。限制阀的出口端口与进样阀的入口端口流体连通。第一流量分流器具有入口端口，与限制阀的入口端口流体连通的第一出口端口，以及第二出口端口。第一流量组合器具有联接到第一流量分流器的第二出口端口的第一入口端口，第二入口端口，以及出口端口。
13.流体网络还可以包括样品环，该样品环具有联接到进样阀的阀端口中的一个阀端口的第一端部和联接到进样阀的阀端口中的另一个阀端口的第二端部。
14.流体网络还可以包括第二流量组合器。第二流量组合器可以具有联接到限制阀的出口端口的第一入口端口，第二入口端口和联接到进样阀的入口端口的出口端口，并且第一组合器的第二入口端口可以联接到进样阀的出口端口。流体网络还可以包括色谱柱，该色谱柱具有与第一流量组合器的出口端口流体连通的入口端口。另选地，第二流量组合器可以具有联接到第一流量组合器的出口端口的第一入口端口，联接到进样阀的出口端口的第二入口端口，以及出口端口，并且流体网络还可以包括色谱柱，该色谱柱具有与第二流量组合器的出口端口流体连通的入口端口。
15.限制阀可以是第一限制阀，多个限制器可以是多个第一限制器，并且流体网络还可以包括第二限制阀、多个第二流量限制器、第二流量组合器，以及第二流量分流器。第二限制阀具有第一端口、第二端口、多个流体节点和可移动阀通道。该通道具有流体地联接到第二端口的第一端部和被构造成联接到流体节点中所选择的一个流体节点的第二端部。第一端口和第二端口中的一者是入口端口，并且第一端口和第二端口中的另一者是出口端口。第二流量限制器中的每一个第二流量限制器具有联接到第二限制阀中的流体节点中的一个流体节点的第一端部和联接到第二限制阀中的流体节点中的另一个流体节点的第二端部。第二流量限制器被布置成形成从第二流量限制器中的第一流量限制器到第二流量限
制器中的最后一个流量限制器限定的串联路径，并且通过第二流量限制器中的至少一个第二流量限制器在第二限制阀的第一端口和第二端口之间限定用于引导液体的流体路径。该流体路径中的第二流量限制器根据流体节点中的哪一个流体节点联接到第二限制阀的第二端口来确定。第二流量组合器具有联接到第一限制阀的出口端口的第一入口端口，联接到第二限制阀的出口端口的第二入口端口，以及联接到进样阀的入口端口的出口端口。第二流量分流器具有入口端口，联接到第二限制阀的入口端口的第一出口端口，以及联接到第一组合器的第二入口端口的第二出口端口。流体网络还可以包括色谱柱，该色谱柱具有与第一流量组合器的出口端口流体连通的入口端口。
附图说明
16.通过结合附图参考下面的描述，可以更好地理解本发明的上述优点和其他优点，附图中相同的附图标号是指各个附图中相同的元件和特征。为清楚起见，并非每个元件都在每个附图中标记。附图不一定按比例绘制，而重点在于示出本发明的原理。
17.图1是液相色谱系统的框图，该液相色谱系统可包括本文所述的用于在进样期间进行色谱样品稀释的流体网络的示例中的一个示例。
18.图2是示出用于执行色谱分离的二元溶剂的常规形成的示意图。
19.图3是示出流体网络的示例的示意图，其中弱溶剂被分成用于色谱样品稀释的两个单独的流。
20.图4是示出流体网络的另一示例的示意图，其中弱溶剂被分成用于色谱样品稀释的两个独立的流。
21.图5是示出用于稀释色谱样品的流体网络的示例的示意图，其中网络将弱溶剂分成两个单独的流并且将强溶剂分成两个单独的流。
22.图6是示出流体网络的另一示例的示意图，其中流动相被分成用于色谱样品稀释的两个独立的流。
23.图7示出了用具有如图5所示的流体网络的系统执行的样品的三种不同色谱分离所获得的色谱图。
24.图8是可选择的流量限制装置的示例的示意图。
25.图9是具有可调节流量限制装置的流体网络的示例的示意图。
26.图10是具有可调节流量限制装置的流体网络的另一示例的示意图。
27.图11是具有两个可调节流量限制装置的流体网络的示例的示意图。
具体实施方式
28.在本说明书中提到“示例”或“具体实施”表示结合示例或具体实施描述的特定特征、结构或特性包括在本教导的至少一个示例或具体实施中。对本说明书内的特定示例或具体实施的引用不一定都指代相同的示例或具体实施。
29.流动相是用于携带样品穿过液相色谱系统的固定相的溶剂或溶剂混合物。流动相可为梯度流动相，在该梯度流动相中流动相的组成随时间变化。如本文所用，词语“样品”是指包含待进样到液相色谱系统的系统流中的样品组分的样品溶液。样品通常在样品贮存器或样品容器中可用。样品溶液还可包含样品稀释剂。
30.如本文所用，溶剂有时被称为“强溶剂”或“弱溶剂”以指示溶剂相对于一种或多种其他溶剂的相对洗脱强度。如果流动相是强溶剂，则溶解于强溶剂中的样品将对流动相具有比固定相大的亲和力。强溶剂通常能够溶解比弱溶剂量大的样品；然而，在使用强溶剂的情况下，可存在较短的保留时间，并且样品在固定相中的保留很少或没有。相反，如果流动相为弱溶剂，则溶解于弱溶剂中的样品将对固定相具有比流动相大的亲和力。因此，样品组分更好地保留在固定相中，并且具有较长的保留时间。通过反相色谱法的非限制性示例，主要由甲醇、乙腈、乙醇、异丙醇或四氢呋喃组成的溶剂通常被认为是强溶剂，而水通常被认为是弱溶剂。通过正相色谱法和超临界流体色谱法的非限制性示例，己烷和庚烷通常被认为是弱溶剂，而甲醇、乙醇和水通常被认为是强溶剂。
31.为了使色谱柱中的固定相优先保留样品组分，流动相最初由足够低的或中等强度的弱溶剂组成，以防止样品组分在很少或没有保留或分离的情况下简单地通过柱。梯度流动相随着时间的推移逐渐增加强度，以在不同时间洗脱样品组分。
32.在各种应用中，样品可以在包含强稀释剂的溶液中提供，该强溶剂可干扰样品组分在固定相中的保留。为了使样品组分能够保留或“聚焦”在色谱柱的顶部处，通常期望使用较弱溶剂进一步稀释样品溶液，但由此增加了稀释的样品的体积。短语“稀释率”的使用在本文中用于描述稀释的程度或量，并且是指样品相对于由一种或多种稀释剂贡献的单位体积的数量的单位体积贡献。
33.如本文所用，“分流器”或“流量分流器”是指用于将所接收的液体流分成两个或更多个流的部件，每个流以比所接收的液体的流速更小的体积流速（下文通常称为“流速”）流动。对于将输入流分成两个分开的输出流的分流器，“分流”比是指离开分流器的一个流与离开分流器的另一个流的流速的比率。“组合器”或“流量组合器”是指用于将两个或更多个入口流组合成具有作为入口流的流速之和的流速的单个流的部件。“三通管”是可用作分流器或组合器的流体部件。例如，对于具有三个端口并且用作分流器的三通管，在一个端口处接收的流可以作为两个分开的流从其他两个端口离开。相反，三端口三通管可用作组合器，其中在两个端口中的每一个端口处接收流，并且单个组合流在第三端口处离开三通管。“样品塞（sample plug）”是指具有恒定的组成特性的流体流的离散连续部分。流量限制器是指对流体流提供限制的部件，诸如具有对于恒定压力对传导液体的流速进行限制的内径的一段管材。另选地，流量限制器可以是在装置中形成的限制流经该装置的液体流的特征部。例如，流量限制器可以是形成在装置内部的通道，其中通道的直径或横截面积限制流经该装置的液体流。本文中与流体部件和流体网络一起使用的术语“联接到”是指所联接到的元件、特征部或部件流体地联接（即，流体连通）或机械联接，以便通过联接建立流体通路。
34.简言之，本文所公开的示例涉及用于在进样期间进行色谱样品稀释的可选择的流量限制装置和流体网络。可选择的流量限制装置与分流器结合使用，以限定可调节的分流器，用于将高压溶剂流分成具有相同溶剂组成的两个分开的溶剂流。第一溶剂流传送至样品管理器，在该样品管理器处，样品作为进样阀处的离散流体塞被进样到包含至少一种溶剂的流中。该第二溶剂流在进样位置下游与携带该样品流体塞的该第一溶剂合并。第二溶剂流在两种溶剂流的混合期间稀释样品塞。因此，对于包含溶解于强样品溶剂中的样品的样品塞，在样品塞到达色谱柱之前，第二溶剂流稀释样品塞中的强样品溶剂，并且可以防止峰加宽、峰畸变和样品穿透。
35.有利地，不需要用于供应稀释剂的附加的泵，因为用于流动相的溶剂流也用于稀释。此外，可以调节溶剂分流比以控制稀释率。在一些具体实施中，通过控制流体阀来选择若干流量限制路径中的一个流量限制路径来实现宽范围的稀释率。
36.现在将参考如附图所示的示例更详细地描述本教导。虽然结合各种示例描述了本教导，但并非旨在将本教导限于此类示例。相比之下，本教导涵盖各种替代、修改和等同物，如本领域的技术人员将理解。能够使用本文教导的普通技术人员将认识到在本公开的范围内的附加具体实施、修改和示例，以及其他使用领域。
37.图1是液相色谱系统10的框图，该液相色谱系统可以被修改以实践本发明的方法的实施方案。系统10包括与用户界面装置14连通的系统处理器12（例如，微处理器和控制器），该系统处理器用于接收输入参数并向操作者显示系统信息。系统处理器12与为流动相提供一种或多种溶剂的溶剂管理器16通信。例如，溶剂管理器16可以提供梯度流动相。来自样品源20的样品在进样阀24处从色谱柱22上游进样到流动相中。样品源20可以是容纳一定体积样品的样品贮存器、小瓶或其他容器。在一些情况下，样品源20提供包括样品和稀释剂的稀释样品。色谱柱22联接到向系统处理器12提供信号的检测器26。该信号响应于在来自柱22的洗脱液中检测到的各种组分。在行进穿过检测器26之后，系统流离开至废弃物端口；然而，当用于馏分收集时，使用分流阀30将系统流引导到一个或多个收集贮器28。
38.图2是示出用于执行色谱分离的二元溶剂的常规形成的示意图。来自第一泵（泵a）的弱溶剂（溶剂a）的流和来自第二泵（泵b）的强溶剂（溶剂b）的流在组合器（三通管）40处组合成单一梯度流动相。控制两种溶剂a和b的流速以获得流向进样阀24的所需溶剂组成。对于典型的梯度流动相，一种溶剂的流速降低，而另一种溶剂的流速增加，使得溶剂组成随着时间的推移而变化，并且组合溶剂的流速保持恒定。进样阀24将样品塞进样到流向色谱柱的组合溶剂流中。
39.如上所述，样品塞可包括溶解样品的强溶剂。当样品塞到达色谱柱时，强溶剂可以防止在柱的顶部装载样品，并且峰加宽、峰畸变或样品穿透在色谱图中可以是明显的。
40.图3是示出流体网络的示例的示意图，其中弱溶剂a在分流器42处被分成两个单独的流：被引导至第一组合器40a的第一流和被引导至第二组合器40b的第二流。第一组合器40a还接收强溶剂b的流并且向进样阀24提供组合溶剂流，在进样时，该组合溶剂流将样品塞（即，已知体积的样品和样品溶剂）从联接到进样阀24或在该进样阀中形成的样品环推动。样品塞是样品和样品溶剂的离散流体塞。因此，来自进样阀24的组合溶剂流包括在组合器40a处与嵌入的样品塞一起接收的溶剂的混合物。第二组合器40b接收并且合并来自进样阀24的组合溶剂流和来自分流器42的第二流。合并的流离开第二组合器40b并且流向色谱柱。在嵌入在组合流中的样品塞行进穿过第二组合器40b期间，该样品塞与来自分流器42的第二弱溶剂流合并。因此，样品塞用弱溶剂来稀释。
41.根据来自进样阀24的组合溶剂流和弱溶剂的第二流的流速来确定样品塞的稀释率。换句话讲，稀释率由为来自分流器42的第一流和第二流定义的分流比确定。例如，来自分流器42的弱溶剂的第二流的增加导致样品塞的稀释增加。因为在单位时间内较弱的溶剂与样品塞合并，并且因为第一流减少，从而使样品塞更缓慢地移动穿过第二组合器40b，所以出现稀释率的增加。
42.可以使用具有固定流量限制的毛细管或管材来控制第一流和第二流的流速。对于
特定构型，可以手动调节、改变或替换从分流器42引导液体的一个或两个流体路径的流量限制，以控制随后的分离所需的分流比。相反地，可以通过对流动路径中的一个流动路径施加可选择的流量限制来选择特定的分流比。该选择可以通过使用可以在离散的限制值之间切换的限制阀来实施，如下文更详细描述的。在一个示例中，限制阀可以由设置在引导来自分流器42的流的流体路径中的一个流体路径中的流量计生成的反馈信号来控制。限制阀的这种反馈控制可以在下文描述的流体网络的其他示例中实施。
43.图4是示出流体网络的示例的示意图，其中弱溶剂a在分流器42处被分成如上关于图3中所示的构型所述的两个单独的流；然而，代替将强溶剂b的流与去往进样器阀42的第一流合并，强溶剂在第一组合器44a处与第二流合并以产生第一合并的流。仅弱溶剂a的第一流用于从进样阀24推动样品塞。第二组合器44b接收来自进样阀24的包含样品塞的弱溶剂的第一流和分别来自第一组合器44a的弱溶剂a和强溶剂b的合并的流，并且产生流向色谱柱的第二合并的流。在嵌入来自进样阀24的第一流中的样品塞行进穿过第二组合器44b期间，该样品塞分别由来自第一组合器44a的流中的弱溶剂a和强溶剂b的组合稀释。
44.根据弱溶剂a的第一流的流速和来自第一组合器44a的第一合并的流的流速来确定样品塞的稀释。因此，样品塞的稀释由对来自分流器42的第一流和第二流限定的分流比来确定。虽然用图4的流体网络实现的样品塞的稀释可以与用图3的流体网络实现的稀释相同，即，在两种构型的合并期间添加到样品塞的溶剂的体积可以相同，但所得色谱图可以不同。这种差异可能是由稀释溶剂的溶剂强度的差异导致的。
45.图5是示出用于稀释样品的流体网络的另一示例的示意图。在这种构型中，弱溶剂a的流在分流器46a处分离成第一弱溶剂流和第二弱溶剂流。类似地，强溶剂b的流在分流器46b处分离成第一强溶剂流和第二强溶剂流。第一弱溶剂流和第一强溶剂流在第一组合器48a处组合成在进样阀24处接收的第一合并的流。第二弱溶剂流和第二强溶剂流在第二组合器48b处组合成第二合并的流。进样阀24将样品塞进样到传送至第三组合器48c的第一合并的流中。第二合并的流也在第三组合器48c处被接收，该第三组合器将第一合并的流和第二合并的流合并成流向色谱柱的第三合并的流。在嵌入在来自进样阀24的第一合并的流中的样品塞行进穿过第三组合器48c期间，该样品塞分别由来自第二组合器48b的第二合并的流中的弱溶剂a和强溶剂b的组合稀释。
46.根据弱溶剂a的第一流和第二流以及强溶剂b的第一流和第二流的流速来确定样品塞的稀释。因此，样品塞的稀释由两个分流器46a和46b所实施的分流比来确定。用例示的结构执行的色谱分离的改进取决于溶剂的洗脱强度，因此如果使用不同的溶剂，即使稀释率可能相同，使用相同样品的两次分离的色谱图也可能不同。
47.图6是示出用于稀释样品的流体网络的另选示例的示意图。与上述构型相比，该构型在结构上没有那么复杂，并且包括单个分路器42和单个组合器40。在这种情况下，弱溶剂a和强溶剂b分别在分流器42的上游合并成二元梯度流动相。流动相的起始组成是弱溶剂，因此在强样品稀释剂中含有样品的样品塞仍然使用这种分流构型被稀释成较弱的样品塞。
48.图7示出了用具有如图5所示的流体网络的系统执行的样品的三种不同色谱分离获得的三种色谱图a、b和c。每个色谱图显示检测器对以下五种样品分析物的存在的响应：(1)乙酰苯胺、(2)香豆素、(3)安息香、(4) 1,1-联-2-萘酚，以及(5)邻苯二甲酸二丁酯。用acquity uplc
™ 2.1mm
×
50mm, 1.7
µ
m beh c18柱（购自马萨诸塞州米尔福德市的waters公
司）执行三次分离。流动相流速为0.5ml/min，并且柱温度保持在40℃。二元流动相为水和乙腈，具有在2.5分钟内从5%乙腈转变为95%乙腈的线性梯度。
49.第一色谱图a表现出由样品塞中的强溶剂引起的严重峰畸变。第二色谱图b使用经过调节的分离流以实现2.22倍于程序化进样体积的稀释。第三色谱图c使用经过调节的分离流以实现八倍于程序化进样体积的稀释。可以看出，较大的稀释产生具有最小峰畸变的色谱图。
50.图8是可选择的流量限制装置52的示意图。该装置包括限制阀53，该限制阀可以与流体三通管结合使用，作为具有可调节分流比的流量分流器。例如，图3中的分流器42可以实现为流体三通管，其中出口流中的一者被引导穿过装置52。阀53可以在不同的阀状态下操作，其中每个状态实现不同的分流比。
51.限制阀53可以被实施为旋转阀；然而，在其他具体实施中，阀53可以是允许输入流被引导穿过阀53内的两个或更多个流体路径的任何其他可控阀。阀53包括入口端口53-1和出口端口53-7。示出了四个分立的流量限制器56a至56d。流量限制器56可以通过流体节点53-2至53-6从外部联接到阀53，其中每个节点是流量限制器56的端部可以联接到的外部端口。在另选的示例中，流体节点中的一个或多个流体节点可以是内部节点，即，在外部端口处不可直接访问的节点。在例示的示例中，入口端口53-1通过内部阀通道诸如旋转阀的定子中的通道60直接联接到流体节点53-2。在一个示例中，每个流量限制器56是在其端部联接到一对外部端口的一段管材。管材的内径可以不同，以提供不同的流量限制值。另选地，流量限制器56可以在阀53的内部。例如，流量限制器56可以是形成在阀主体中的内部流体路径，这些内部流体路径在流体节点53-2至53-6中的每一个流体节点的每个端部处终止。内部流体路径的横截面积可以不同，以提供不同的流量限制值。阀53包括可移动阀通道58，该可移动阀通道在出口端口53-7和流体节点53-2至53-6中的一个流体节点之间提供径向流体路径。可移动阀通道58围绕出口端口53-7处的一个端部顺时针或逆时针旋转，使得另一个端部联接到流体节点中的一个流体节点。
52.流量限制器56布置在从限制器56a中的第一限制器到限制器56d中的最后一个限制器限定的串联路径中。通过将阀53构造成使得径向流体路径58将端口53-7联接到端口53-3、53-4、53-5和53-6中的一者以实现分别由限制器56a、56a至56b、56a至56c和56a至56d限定的流量限制，将可选择的流量限制添加到溶剂流动路径。因此，在入口端口53-1和出口端口53-7之间限定了引导液体的流体路径，其中根据流体节点53-2至53-6中的哪一个流体节点联接到出口端口53-7来确定包括在流体路径中的流量限制器56。如图所示，在入口端口53-1处接收的溶剂流行进穿过定子通道60到达节点53-2，然后穿过流量限制器56a、56b和56c，之后从流体节点53-5穿过可移动阀通道58，并且通过出口端口53-7离开。
53.流量限制可基于进样到液相色谱系统的流动相时样品的所需稀释来选择。在一些具体实施中，选择四个限制器56的流量限制，使得最小限制和最大限制之间的差为一个数量级，但在某些具体实施中，该差可超过两个数量级。
54.图9是具有可调节流量限制装置52的流体网络的示例的示意图。该网络可用于实施图3所示的构型，并且包括旋转阀53和进样阀54。流体三通管51和可调节流量限制装置52的串联布置对应于图3的分流器42，其中所接收的溶剂流的分流比可调节并且由进样阀53的状态确定。进样阀53对应于图3的阀24。
55.进样阀54被示出为旋转阀，诸如旋转剪切密封阀，并且包括六个端口54-1至54-6。样品环62被示出在一个端部处联接到端口54-1，并且在另一个端部处联接到端口54-6。样品环62保持固定体积的样品和等待进样到色谱系统的流动相中的任何样品稀释剂。进样阀54被示出为处于第一阀状态，其中端口54-1联接到端口54-2，端口54-3联接到端口54-4，并且端口54-5联接到端口54-6。阀可以切换到第二阀状态，例如，用于将样品进样到流动相中，其中端口54-1联接到端口54-6，端口54-2联接到端口54-3，并且端口54-4联接到端口54-5。尽管未示出，但端口54-2和54-3可以联接到附加的流体路径，当进样阀54处于第一阀状态时，附加的流体路径可以用于将样品装载到样品环中，如图所示。
56.根据例示的网络，流体三通管51的一个出口联接到阀53的端口53-1。阀53的出口端口53-7联接到第一组合器40a的入口中的一个入口。进样阀54的端口54-6和54-5联接到第一组合器40a的出口和第二组合器40b的入口。流体三通管51的第二出口联接到第二组合器40b的第二入口。在该布置中，来自泵b的强溶剂流与来自泵b的弱溶剂的分离部分在第一组合器40a处混合，并且用于将储存在样品环62中的样品从进样阀54推动。离开样品环62的样品在第二组合器40b处用弱溶剂的另一分离部分进行稀释。
57.图10是具有可调节流量限制装置52的流体网络的另一示例的示意图。该网络可用于实施图4所示的构型，并且包括旋转阀53和进样阀54。进样阀54类似于图9的进样阀构造，并且对应于图4的阀24。第一流体三通管51和可调节限流装置52的串联布置对应于图4的分流器42。
58.在例示的网络中，流体三通管51的一个出口联接到阀53的端口53-1。阀53的出口端口53-7联接到进样阀54的端口54-6。第一组合器44a具有联接到流体三通管51的第二出口的一个入口和接收来自泵b的强溶剂流的第二入口。第二组合器44b具有联接到进样阀54的端口54-5的第一入口、联接到第一组合器44a的出口的第二入口，以及联接到色谱柱的出口。在这种布置中，来自泵a的弱溶剂流的分离部分用于将储存在样品环62中的样品从进样阀54推动，然后在该进样阀处用来自泵b的强溶剂流和弱溶剂流的另一分离部分的混合物来稀释样品。
59.图11是具有两个可调节流量限制装置52a和52b的流体网络的示例的示意图。该网络可用于实施图5所示的构型，并且包括两个旋转阀53a和53b，以及进样阀54。进样阀54类似于图9的进样阀构造，并且对应于图5的阀24。
60.第一流体三通管51a和可调节流量限制装置52a的第一串联布置以及第二流体三通管51b和可调节流量限制装置52b的第二串联布置对应于图5的分流器46a和分流器46b。
61.第一流体三通管51a的一个出口联接到阀53a的端口53a-1。阀53a的出口端口53a-7联接到第一组合器48a的入口中的一个入口。第二流体三通管51b的一个出口联接到阀53b的端口53b-1，并且阀53b的出口端口53b-7联接到第一组合器48a的另一个入口端口。进样阀54的端口54-6和54-5联接到第一组合器48a的出口和第二组合器48bc的入口。应当认识到，第二组合器48bc对应于具有三个入口端口的单个组合器，并且是图5中的两个单独的组合器48b和48c的组合的替代方案。流体三通管51a和51b的第二出口分别联接到第二组合器48bc的第二入口和第三入口。第二组合器48bc的出口联接到色谱柱。在该布置中，来自泵a的弱溶剂流的一部分和来自泵b的弱溶剂流的一部分在第一组合器48a处混合，并且用于将储存在样品环62中的样品从进样阀54推动。来自泵a的弱溶剂流的另一部分和来自泵b的弱
溶剂流的另一部分用于在第二组合器48bc处稀释来自进样阀54的流中的样品塞。
62.虽然已经参考特定实施方案示出和描述了本发明，但是本领域的技术人员应理解，在不脱离如所附权利要求中叙述的本发明的范围的情况下，可以在形式和细节上进行各种改变。