新组合物的制作方法

1.本发明涉及一种用于例如药物递送领域的新制剂。
2.现有技术和背景
3.明显现有已公布文件在本说明书中的列举或讨论不应必然地被视为承认所述文件是现有技术或公知常识的一部分。
4.在药物递送领域，控制药物释放曲线的能力至关重要。期望的是确保活性成分在施用后以期望和可预测的体内速率释放，以确保最佳的药代动力学曲线。
5.在持续释放组合物的情况下，药物递送组合物提供使活性成分的任何初始快速释放最小化的释放曲线也是至关重要的，即在施用后不久血浆中的大浓度药物。在治疗窗窄的药物的情况下，这种突发释放可能是危险的。
6.在可注射悬浮液的特定情况下，确保控制悬浮颗粒的大小以便它们可以通过针头注射也很重要。如果存在大的聚集颗粒，它们不仅会堵塞要注射的悬浮液通过的针头，而且不会在注射液中形成稳定的悬浮液(即，它们反而会易于沉到注射液的底部)。
7.因此，本领域普遍需要有效和/或改进的药物转运和递送系统。
8.原子后期沉积(ald)是一种用于在固体基材上沉积薄膜的技术，该薄膜包含多种材料，包括有机材料、生物材料、聚合物材料，尤其是无机材料，例如金属氧化物。
9.该技术通常在低压和升高的温度下进行。薄膜包衣是通过将ald反应器室内的固体基材交替暴露于气相中的汽化反应物而产生的。基材可以是硅晶片、粒状材料或小颗粒(例如微粒或纳米颗粒)。
10.固体包衣保护被包衣基材免受化学反应(分解)和物理变化的影响。ald还可以潜在地用于控制基材材料在溶剂中的释放速率，这使其在活性药物成分的制剂中具有潜在的用途。
11.在ald中，可以是含金属的第一前体被送入ald反应器室(在所谓的
‘
前体脉冲’中)，并在基材表面形成吸附的原子或分子单层。然后从反应器中吹扫过量的第一前体，然后将诸如水的第二前体脉冲输入反应器。这与第一前体反应，导致在基材表面上形成例如金属氧化物的单层。随后的吹扫脉冲之后是第一前体的另一个脉冲，因此开始了相同事件的新循环(所谓的
‘
ald循环’)。
12.薄膜包衣的厚度尤其受所进行的ald循环次数的控制。
13.在正常ald工艺中，由于在任何一个循环中仅产生原子或分子单层，因此这些单层之间没有形成可辨别的物理界面，这在基材表面基本上成为连续体。
14.在国际专利申请wo2014/187995中，描述了一种方法，其中执行多个ald循环，然后定期从反应器中取出所得的涂布的基材并重新分散/搅拌以呈现可用于前体吸附的新表面。
15.进行搅拌步骤主要是为了解决观察到的纳米颗粒和微米颗粒的问题，即在ald涂布过程中，颗粒发生聚集，导致这些颗粒之间的接触点形成
‘
针孔’。重新分散/搅拌步骤是通过将涂布的基材置于水中并进行超声处理来进行的，这导致解聚，并破坏涂布活性物质
的各个颗粒之间的接触点。
16.已经发现，如wo2014/187995中所述，执行ald涂布循环
‘
组’然后进行间歇分散的过程会产生由这些涂布层之间的清晰、可见的物理界面限定的清晰、独立的涂布层。通过诸如透射电子显微镜(tem)等技术可以清楚地看到这些界面，作为具有较高电子渗透性的区域。如下所述，当包衣从基材表面一次形成一个原子层时，类似的界面是不可见的。即使在连续的ald循环中将不同的前体送入ald反应器也是如此。
17.我们现在已经发现，在最终的再分散步骤之后，提供最终的、更薄的无机包衣材料
‘
密封’壳是有利的，因为这使得颗粒能够在不采用强力解聚技术例如超声处理的情况下解聚成初级颗粒，因此以易于加工成药物制剂的形式呈现它们。


技术实现要素：

18.根据本发明的第一方面，提供了一种组合物，其形式为基于重量、数量和/或体积的平均直径在10nm和约700μm之间的多个颗粒，其中颗粒包括(即由其构成)：
19.(a)实芯，其优选地包括生物活性剂；
20.(b)一个或多个离散层，其围绕(在多于一个这样的层的情况下，顺序地)所述芯，所述一个或多个层各自包含至少一种单独的(即单独施加的)包衣材料；和
21.(c)包衣材料的外(即最终)涂层(
‘
密封壳’)，该外涂层围绕、包围和/或封装所述芯和/或所述先前施加的包衣材料层，并且最终层的厚度小于所述先前施加的层，所述组合物在下文中统称为
‘
本发明的组合物’。
22.术语
‘
固体’将被本领域技术人员很好地理解为包含当不受限制时保持其形状和密度和/或其中分子通常被压缩紧到其之间的排斥力允许的程度的任何形式的物质。实芯具有至少一个固体外表面，包衣材料层可以沉积到所述至少一个固体外表面上。实芯的内部也可以是实心的或者可以是空心的。例如，如果颗粒在放置入到反应器容器中之前被喷雾干燥，由于喷雾干燥技术，所述颗粒可能是空心的。
23.本发明的组合物优选是药物组合物，在这种情况下，该组合物可以包含药理学有效量的生物活性剂。此外，所述实芯优选包含所述生物活性剂。
24.在这方面，实芯可以基本上由生物活性剂组成或包括所述生物活性剂(所述药剂在下文中可互换称为
‘
药物’和
‘
活性药物成分(api)’和/或
‘
活性成分’)。生物活性剂还包含生物药物和/或生物制剂。生物活性剂还可以包含不同api的混合物，如不同的api颗粒或包括多于一种api的颗粒。
25.通过“基本上由”生物活性剂组成，包含的是实芯基本上仅包含生物活性剂，即其不含非生物活性物质，如赋形剂、载体等(参见下文)。这意指芯可以包括小于约5％，如小于约3％，包含小于约2％，例如小于约1％的此类其它赋形剂。
26.在替代方案中，包括生物活性剂的芯可以包含与一种或多种药物成分混合的此类药剂，所述一种或多种药物成分可以包含药学上可接受的赋形剂，如佐剂、稀释剂或载体，和/或可以包含其它生物活性成分。
27.生物活性剂可以以结晶、部分结晶和/或无定形状态存在。生物活性剂可以进一步包括在约室温(例如约18℃)和约大气压下处于固态或可以转化为固态的而与物理形式无关任何物质。此类药剂在反应器中包衣时也应保持固体形式，并且在被至少一种上述包衣
材料层包衣时或被覆盖后也不应物理或化学分解至明显一致(即不超过约10％w/w)。生物活性剂可以进一步与另一种活性物质组合(例如混合或作为复合物)存在。
28.如本文所用，术语
‘
生物活性剂’或类似和/或相关的表达通常是指能够在活的受试者，包含具体是哺乳动物并且尤其是人类受试者(患者)中产生某种生理作用(无论是针对特定疾病状态或病状的治疗还是预防能力)的任何药剂或药物。
29.所述生物活性剂可以例如选自镇痛剂、麻醉剂、抗adhd剂、厌食剂、抗成瘾剂、抗菌剂、抗微生物剂、抗真菌剂、抗病毒剂、抗寄生虫剂、抗原生动物剂、驱虫剂、杀外寄生虫剂、疫苗、抗癌剂、抗代谢剂、烷化剂、抗肿瘤剂、拓扑异构酶、免疫调节剂、免疫刺激剂、免疫抑制剂、合成代谢类固醇、抗凝剂、抗血小板剂、抗惊厥剂、抗痴呆剂、抗抑郁剂、解毒剂、抗高血脂剂、抗痛风剂、抗疟疾剂、抗偏头痛剂、抗炎剂、抗帕金森剂、止痒剂、抗银屑病剂、止吐剂、抗肥胖剂、驱虫剂、抗心律失常剂、抗哮喘剂、抗生素、抗凝剂、抗抑郁剂、抗糖尿病剂、抗癫痫剂、抗纤维蛋白溶解剂、抗出血剂、抗组胺剂、镇咳剂、抗高血压剂、抗毒蕈碱剂、抗分枝杆菌剂、抗氧化剂、抗精神病剂、解热剂、抗风湿剂、抗心律失常剂、抗焦虑剂、催欲剂、强心苷、强心剂、宗教致幻剂、放心药(entactogen)、欣快剂、促食欲剂、抗甲状腺剂、抗焦虑镇静剂、催眠剂、精神安定剂、收敛剂、抑菌剂、β受体阻滞剂、钙通道阻滞剂、ace抑制剂、血管紧张素ii受体拮抗剂、肾素抑制剂、β-肾上腺素受体阻滞剂、血液制品、血液替代品、支气管扩张剂、心脏收缩剂、化疗剂、凝血剂、皮质类固醇、咳嗽遏抑剂、利尿剂、谵妄药、祛痰剂、生育剂、性激素、情绪稳定剂、粘液溶解剂、神经保护剂、促智剂、神经毒素、多巴胺能剂、抗帕金森病剂、自由基清除剂、生长因子、贝特类(fibrate)、胆酸螯合剂、愈合剂、糖皮质激素、盐皮质激素、止血剂、致幻剂、下丘脑-垂体激素、免疫剂、轻泻剂、止泻剂、脂质调节剂、肌肉松弛剂、拟副交感神经药、甲状旁腺降钙素、血清素、抑制素、兴奋剂、觉醒促进剂、减充血剂、膳食矿物质、双膦酸盐、咳嗽药、眼科药、本体剂、h1拮抗剂、h2拮抗剂、质子泵抑制剂、前列腺素、放射性药物、激素、镇静剂、抗过敏剂、食欲兴奋剂、食欲减退剂、类固醇、拟交感神经药、溶解血栓剂、甲状腺剂、血管扩张剂、黄嘌呤、勃起功能障碍改善剂、胃肠道剂、组胺受体拮抗剂、角质层分离剂、抗心绞痛剂、非甾体抗炎剂、cox-2抑制剂、白三烯抑制剂、大环内酯、nsaid、营养剂、阿片类镇痛剂、阿片拮抗剂、钾通道激活剂、蛋白酶抑制剂、抗骨质疏松剂、认知增强剂、抗尿失禁剂、营养油、抗良性前列腺肥大剂、必需脂肪酸、非必需脂肪酸、放射性药物、衰老治疗剂、维生素或任何这些的混合物。
30.所述生物活性剂还可以是细胞因子、肽模拟物、肽、蛋白质、类毒素、血清、抗体、疫苗、核苷、核苷酸、基因材料的一部分、核酸或其混合物。治疗性肽/蛋白质的非限制性实例如下：来匹卢定(lepirudin)、西妥昔单抗(cetuximab)、阿法链道酶(dornase alfa)、地尼白介素(denileukin diftitox)、依那西普(etanercept)、比伐卢定(bivalirudin)、亮丙瑞林(leuprolide)、阿替普酶(alteplase)、干扰素α-n1、阿法达贝泊汀(darbepoetin alfa)、瑞替普酶(reteplase)、阿法依泊汀(epoetin alfa)、鲑降钙素(salmon calcitonin)、干扰素α-n3、培非格司亭(pegfilgrastim)、沙格司亭(sargramostim)、分泌素、聚乙二醇干扰素α-2b、天冬酰胺酶、促甲状腺素α、抗血友病因子、阿那白滞素、短杆菌素d、静脉注射免疫球蛋白、阿尼普酶(anistreplase)、胰岛素(常规)、替奈普酶(tenecteplase)、尿促性素、干扰素γ-1b、干扰素α-2a(重组)、凝血因子viia、奥普瑞白介素、帕利夫明(palifermin)、胰高血糖素(重组)、阿地白介素、b型肉毒杆菌毒素、奥马珠单抗(omalizumab)、促黄体素α、赖脯
胰岛素、甘精胰岛素、胶原酶、拉布立酶、阿达木单抗(adalimumab)、伊米苷酶、阿昔单抗(abciximab)、α-1-蛋白酶抑制剂、培门冬酶、干扰素β-1a、腺苷脱氨酶，人血清白蛋白、依替巴肽(eptifibatide)、血清白蛋白碘化、英利昔单抗(infliximab)、促卵泡素β、血管加压素、干扰素β-1b、透明质酸酶、利妥昔单抗(rituxima)、巴利昔单抗(basiliximab)、莫罗单抗(muromonab)、地高辛免疫fab(绵羊)、替伊莫单抗(ibritumomab)、达托霉素、托西莫单抗(tositumomab)、培维索孟(pegvisomant)、a型肉毒杆菌毒素、胰脂肪酶、链激酶、阿仑单抗(alemtuzumab)、阿糖脑苷酶、卡罗单抗(capromab)、拉罗尼酶、尿促卵泡素、依法珠单抗(efalizumab)、血清白蛋白、绒毛膜促性腺激素α、抗胸腺细胞球蛋白、非格司亭、凝血因子ix、贝卡普勒明、阿加糖酶β、干扰素α-2b、催产素、恩夫韦地(enfuvirtide)、帕利珠单抗(palivizumab)、达克珠单抗(daclizumab)、贝伐单抗(bevacizumab)、阿西莫单抗(arcitumomab)、依库丽单抗(eculizumab)、帕尼单抗(panitumumab)、兰尼单抗(ranibizumab)、艾度硫酸酯酶、阿糖苷酶α、艾塞那肽(exenatide)、美卡舍明(mecasermin)、普兰林肽(pramlintide)、加硫酶、阿巴西普(abatacept)、替可克肽(cosyntropin)、促肾上腺皮质激素、门冬胰岛素、地待胰岛素、谷赖胰岛素、哌加他尼钠(pegaptanib)、奈西立肽(nesiritide)、胸腺法新(thymalfasin)、去纤苷(defibrotide)、天然α干扰素/多扰素(multiferon)、醋酸格拉替雷(glatiramer acetate)、全长甲状旁腺激素(preotact)、替考拉宁(teicoplanin)、康纳单抗(canakinumab)、伊匹单抗(ipilimumab)、舒洛地特(sulodexide)、托珠单抗(tocilizumab)、特立帕肽(teriparatide)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、利纳西普(rilonacept)、地诺单抗(denosumab)、利拉鲁肽(liraglutide)、戈利木单抗(golimumab)、贝拉西普(belatacept)、布舍瑞林(buserelin)、维拉苷酶α(velaglucerase alfa)、替莫瑞林(tesamorelin)、本妥昔单抗(brentuximab vedotin)、塔利苷酶α、贝利单抗(belimumab)、阿柏西普(aflibercept)、天冬酰胺酶菊欧文氏菌(asparaginase erwinia chrysanthemi)、奥克纤溶酶(ocriplasmin)、谷卡匹酶(glucarpidase)、替度鲁肽(teduglutide)、瑞西巴库单抗(raxibacumab)、赛妥珠单抗(certolizumab pegol)、低精蛋白胰岛素、依泊汀ζ(epoetin zeta)、奥比妥珠单抗(obinutuzumab)、纤溶酶又名纤溶酶、促卵泡素α、罗米司亭(romiplostim)、芦西纳坦(lucinactant)、那他珠单抗(natalizumab)、阿利吉仑(aliskiren)、豚草花粉提取物、苏金单抗(secukinumab)、生长激素(重组)、替加色罗α(drotrecogin alfa)、阿法西普(alefacept)、ospa脂蛋白、尿激酶、阿巴瑞克(abarelix)、舍莫瑞林、抑肽酶、吉妥单抗(gemtuzumab ozogamicin)、萨托单抗(satumomab pendetide)、阿必鲁肽(albiglutide)、抗凝血酶α、抗凝血酶iii(人)、阿斯磷酶α、阿特珠单抗(atezolizumab)、自体培养的软骨细胞、贝拉克坦(beractant)、博纳吐单抗(blinatumomab)、c1酯酶抑制剂(人)、凝血因子xiii a-亚基(重组)、康斯泰特α(conestat alfa)、达雷木单抗(daratumumab)、地西芦定(desirudin)、度拉糖肽(dulaglutide)、硫酸酯酶α、依伏库单抗(evolocumab)、纤维蛋白原浓缩物(人)、非格司亭-sndz、胃内因子、乙型肝炎免疫球蛋白、人降钙素、人梭菌素免疫球蛋白、人狂犬病毒免疫球蛋白、人rho(d)免疫球蛋白、人rho(d)免疫球蛋白、透明质酸酶(人、重组)、伊达珠单抗(idarucizumab)、免疫球蛋白(人)、维多珠单抗(vedolizumab)、优特克单抗(ustekinumab)、培妥罗凝血素α(turoctocog alfa)、结核菌素纯化蛋白衍生物、塞莫凝血素α、司妥昔单抗(siltuximab)、
脂肪酶α(sebelipase alfa)、糖苷酶(sacrosidase)、雷莫芦单抗(ramucirumab)、凝血酶原复合物浓缩物、猪肺磷脂α(poractant alfa)、派姆单抗(pembrolizumab)、聚乙二醇干扰素β-1a、奥法木单抗(ofatumumab)、奥妥昔单抗(obiltoxaximab)、纳武单抗(nivolumab)、耐昔妥珠单抗(necitumumab)、美曲普汀(metreleptin)、甲氧基聚乙二醇-依泊汀β、美泊利单抗(mepolizumab)、伊克珠单抗(ixekizumab)、德谷胰岛素、胰岛素(猪)、胰岛素(牛)、甲状腺球蛋白、炭疽免疫球蛋白(人)、抗抑制剂凝血复合物、布罗达鲁单抗(brodalumab)、c1酯酶抑制剂(重组)、绒毛膜促性腺激素(人)，绒毛膜促性腺激素(重组)、凝血因子x(人)、地妥昔单抗(dinutuximab)、艾莫凝血素α(efmoroctocog alfa)、因子ix复合物(人)、甲型肝炎疫苗、人水痘-带状疱疹免疫球蛋白、替伊莫单抗(ibritumomab tiuxetan)、来格司亭(lenograstim)、培戈洛酶(pegloticase)、硫酸鱼精蛋白、蛋白质s(人)、西普鲁塞t(sipuleucel-t)、生长激素(somatropin)(重组)、苏克托格α(susoctocog alfa)和血栓调节蛋白α。
31.可以根据本发明使用的药物的非限制性实例是全反式维甲酸(维甲酸)、阿普唑仑(alprazolam)、别嘌呤醇(allopurinol)、胺碘酮(amiodarone)、氨氯地平(amlodipine)、天冬酰胺酶、阿司咪唑(astemizole)、阿替洛尔(atenolol)、硫唑嘌呤(azathioprine)、氮卓汀(azelatine)、倍氯米松(beclomethasone)、苯达莫司汀(bendamustine)、博来霉素(bleomycin)、布地奈德(budesonide)、丁丙诺啡(buprenorphine)、布他比妥(butalbital)、卡培他滨(capecitabine)、卡巴西平(carbamazepine)、卡比多巴(carbidopa)、卡铂(carboplatin)、头孢噻肟(cefotaxime)、头孢氨苄(cephalexin)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、消胆胺(cholestyramine)、环丙沙星(ciprofloxacin)、西沙必利(cisapride)、顺铂(cisplatin)、克拉霉素(clarithromycin)、氯硝西泮(clonazepam)、氯氮平(clozapine)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、环孢菌素(cyclosporin)、阿糖孢苷(cytarabine)、达卡巴嗪(dacarbazine)、更生霉素(dactinomycin)、道诺霉素(daunorubicin)、地西泮(diazepam)、双氯芬酸钠(diclofenac sodium)、地高辛(digoxin)、双嘧达莫(dipyridamole)、双丙戊酸(divalproex)、多巴酚丁胺(dobutamine)、多西他赛(docetaxel)、多柔比星(doxorubicin)、多沙唑嗪(doxazosin)、依那普利(enalapril)、表柔比星(epirubicin)、埃罗替尼(erlotinib)、雌二醇(estradiol)、依托度酸(etodolac)、依托泊苷(etoposide)、依维莫司(everolimus)、法莫替丁(famotidine)、非洛地平(felodipine)、枸橼芬太尼(fentanyl citrate)、非索非那定(fexofenadine)、非格司亭(filgrastim)、非那雄胺(finasteride)、氟康唑(fluconazole)、氟尼缩松(flunisolide)、氟脲嘧啶(fluorouracil)、氟比洛芬(flurbiprofen)、氟雷拉纳(fluralaner)、氟伏沙明(fluvoxamine)、呋塞米(furosemide)、吉西他滨(gemcitabine)、格列吡嗪(glipizide)、格列本脲(gliburide)、布洛芬(ibuprofen)、异环磷酰胺(ifosfamide)、伊马替尼(imatinib)、吲哚美辛(indomethacin)、伊立替康(irinotecan)、硝酸异山梨酯(isosorbide dinitrate)、异维甲酸(isotretinoin)、依拉地平(isradipine)、依曲康唑(itraconazole)、酮康唑(ketoconazole)、酪洛芬(ketoprofen)、拉莫三嗪(lamotrigine)、兰索拉唑(lansoprazole)、洛派丁胺(loperamide)、氯雷他定(loratadine)、劳拉西泮(lorazepam)、洛伐他汀(lovastatin)、甲羟孕酮(medroxyprogesterone)、甲芬那酸(mefenamic acid)、巯嘌呤(mercaptopurine)、美司钠
(mesna)、甲氨蝶呤(methotrexate)、甲基泼尼松龙(methylprednisolone)、咪达唑仑(midazolam)、丝裂霉素(mitomycin)、米托蒽醌(mitoxantrone)、莫西克汀(moxidectine)、莫美他松(mometasone)、萘丁美酮(nabumetone)、萘普生(naproxen)、尼麦角林(nicergoline)、硝苯地平(nifedipine)、诺氟沙星(norfloxacin)、奥美拉唑(omeprazole)、奥沙利铂(oxaliplatin)、紫杉醇(paclitaxel)、苯妥英(phenyloin)、吡罗昔康(piroxicam)、丙卡巴肼(procarbazine)、喹那普利(quinapril)、雷米普利(ramipril)、利培酮(risperidone)、利妥昔单抗(rituximab)、舍曲林(sertraline)、辛伐他汀(simvastatin)、舒林酸(sulindac)、舒尼替尼(sunitinib)、替西罗莫司(temsirolimus)、特比萘芬(terbinafine)、特非那定(terfenadine)、硫鸟嘌呤(thioguanine)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、曲安西龙(triamcinolone)、丙戊酸(valproic acid)、长春花碱(vinblastine)、长春新碱(vincristine)、长春瑞滨(vinorelbine)、唑吡坦(zolpidem)或任何这些的药学上可接受的盐。
32.本发明的组合物可以包括苯并二氮杂卓(benzodiazipine)，如阿普唑仑、氯氮卓(chlordiazepoxide)、氯巴占(clobazam)、氯氮卓(clorazepate)、地西泮、艾司唑仑(estazolam)、氟西泮(flurazepam)、劳拉西泮(lorazepam)、奥沙西泮(oxazepam)、夸西泮(quazepam)、替马西泮(temazepam)、三唑仑(triazolam)和任何这些的药学上可接受的盐。
33.也可以用于本发明组合物的麻醉剂可以是局部的或全身的。可以提及的局部麻醉剂包含阿米卡因(amylocaine)、氨布卡因(ambucaine)、阿替卡因(articaine)、苯唑卡因(benzocaine)、苯佐那酯(benzonatate)、布比卡因(bupivacaine)、布大卡因(butacaine)、布坦卡因(butanilicaine)、氯普鲁卡因(chloroprocaine)、辛可卡因(cinchocaine)、可卡因(cocaine)、环美卡因(cyclomethycaine)、地布卡因(dibucaine)、狄帕鲁卡因(diperodon)、二甲卡因(dimethocaine)、优卡因(eucaine)、依替卡因(etidocaine)、海克卡因(hexylcaine)、福莫卡因(fomocaine)、光卡因(fotocaine)、羟普鲁卡因(hydroxyprocaine)、异布卡因(isobucaine)、左布比卡因(levobupivacaine)、利多卡因(lidocaine)、马比佛卡因(mepivacaine)、美普卡因(meprylcaine)、美布卡因(metabutoxycaine)、硝卡因(nitracaine)、奥索卡因(orthocaine)、奥昔卡因(oxetacaine)、奥布卡因(oxybuprocaine)、对乙氧卡因(paraethoxycaine)、霍洛卡因(phenacaine)、哌罗卡因(piperocaine)、哌啶卡因(piridocaine)、普莫卡因(pramocaine)、丙胺卡因(prilocaine)、阿替卡因(primacaine)、普鲁卡因(procaine)、普鲁卡因胺(procainamide)、丙美卡因(proparacaine)、丙氧卡因(propoxycaine)、吡咯卡因(pyrrocaine)、奎尼卡因(quinisocaine)、罗哌卡因(ropivacaine)、三甲卡因(trimecaine)、托利卡因(tolycaine)、托哌可卡因(tropacocaine)或任何这些的药学上可接受的盐。
34.精神药物也可以用于本发明的组合物中。可以提到的精神药物包含5-htp、阿坎酸(acamprosate)、阿戈美拉汀(agomelatine)、阿利马嗪(alimemazine)、安非他命(amfetamine)、右苯丙胺(dexamfetamine)、氨磺必利(amisulpride)、阿米替林(amitriptyline)、异戊巴比妥(amobarbital)、异戊巴比妥/司可巴比妥(secobarbital)、阿莫沙平(amoxapine)、安非他明、阿立哌唑(aripiprazole)、阿塞那平(asenapine)、阿托西汀(atomoxetine)、巴氯芬(baclofen)、苯哌利多(benperidol)、溴哌利多
(bromperidol)、安非他酮(bupropion)、丁螺环酮(buspirone)、丁巴比妥(butobarbital)、卡马西平(carbamazepine)、水合氯醛(chloral hydrate)、氯丙嗪(chlorpromazine)、氯普噻吨(chlorprothixene)、西酞普兰(citalopram)、氯美噻唑(clomethiazole)、氯米帕明(clomipramine)、氯压定(clonidine)、氯氮平(clozapine)、环己巴比妥(cyclobarbital)/地西泮、赛庚啶(cyproheptadine)、金雀花碱(cytisine)、地昔帕明(desipramine)、地文拉法辛(desvenlafaxine)、右苯丙胺、盐酸右哌甲酯(dexmethylphenidate)、苯海拉明(diphenhydramine)、双硫仑(disulfiram)、双丙戊酸钠(divalproex sodium)、多塞平(doxepin)、多西拉敏(doxylamine)、度洛西汀(duloxetine)、庚酸盐(enanthate)、依他普仑(escitalopram)、右旋佐匹克隆(eszopiclone)、氟西汀(fluoxetine)、三氟噻吨(flupenthixol)、氟非拉嗪(fluphenazine)、氟司必林(fluspirilen)、氟伏沙明(fluvoxamine)、加巴喷丁(gabapentin)、格鲁米特(glutethimide)、胍法辛(guanfacine)、氟哌啶醇(haloperidol)、羟嗪(hydroxyzine)、伊潘立酮(iloperidone)、丙咪嗪(imipramine)、拉莫三嗪(lamotrigine)、左乙拉西坦(levetiracetam)、左美丙嗪(levomepromazine)、左旋体米那普仑(levomilnacipran)、右苯丙胺(lisdexamfetamine)、锂盐、鲁拉西酮(lurasidone)、褪黑素(melatonin)、美哌隆(melperone)、甲丙氨酯(meprobamate)、去氧麻黄碱(metamfetamine)、美沙酮(nethadone)、哌醋甲酯(methylphenidate)、米安色林(mianserin)、米氮平(mirtazapine)、吗氯贝胺(moclobemide)、纳美芬(nalmefene)、纳曲酮(naltrexone)、尼普拉嗪(niaprazine)、去甲替林(nortriptyline)、奥氮平(olanzapine)、昂丹司琼(ondansetron)、奥卡西平(oxcarbazepine)、帕潘立酮(paliperidone)、帕罗西汀(paroxetine)、五氟利多(penfluridol)、戊巴比妥(pentobarbital)、培拉嗪(perazine)、哌氰嗪(pericyazine)、佩吩嗪(perphenazine)、苯乙肼(phenelzine)、苯巴比妥(phenobarbital)、匹莫齐特(pimozide)、普瑞巴林(pregabalin)、异丙嗪(promethazine)、丙硫喷地(prothipendyl)、普罗替林(protriptyline)、奎硫平(quetiapine)、瑞美替昂(ramelteon)、瑞波西汀(reboxetine)、利血平(reserpine)、利培酮(risperidone)、氯化铷(rubidium chloride)、司可巴比妥(secobarbital)、司来吉兰(selegiline)、舍吲哚(sertindole)、舍曲林(sertraline)、羟丁酸钠(sodium oxybate)、丙戊酸钠(sodium valproate)、丙戊酸钠、舒必利(sulpiride)、硫利达嗪(thioridazine)、替沃噻吨(thiothixene)、噻奈普汀(tianeptine)、替托尼定(tizanidine)、托吡酯(topiramate)、强内心百乐明(tranylcypromine)、曲唑酮(trazodone)、三氟吡啦嗪(trifluoperazine)、三甲丙咪嗪(trimipramine)、色氨酸(tryptophan)、缬草(valerian)、2.3:1比率的丙戊酸、伐尼克兰(varenicline)、文拉法辛(venlafaxine)、维拉佐酮(vilazodone)、沃替西汀(vortioxetine)、扎来普隆(zaleplon)、齐拉西酮(ziprasidone)、唑吡坦(zolpidem)、佐匹克隆(zopiclone)、佐替平(zotepine)、珠氯噻醇(zuclopenthixol)以及任何这些的药学上可接受的盐。
35.可以用于本发明的组合物的阿片类镇痛剂包含丁丙诺啡(buprenorphine)、布托啡诺(butorphanol)、可待因(codeine)、芬太尼(fentanyl)、氢可酮(hydrocodone)、氢吗啡酮(hydromorphone)、哌替啶(meperidine)、美沙酮(methadone)、吗啡(morphine)、诺美沙酮(nomethadone)、鸦片(opium)、羟考酮(oxycodone)、羟吗啡酮(oxymorphone)、喷他佐辛
(pentazocine)、他喷他多(tapentadol)、曲马多(tramadol)以及任何这些的药学上可接收的盐。
36.可以用于本发明的组合物的阿片类拮抗剂包含纳洛酮(naloxone)、纳洛啡(nalorphine)、尼洛啡(niconalorphine)、双丙诺啡(diprenorphine)、左旋吗啡(levallorphan)、沙米多芬(samidorphan)、纳洛因(nalodeine)、阿维莫泮(alvimopan)、甲基纳曲酮(methylnaltrexone)、纳洛昔醇(naloxegol)、6β-纳曲醇(6β-naltrexol)、阿昔洛普兰(axelopran)、贝韦诺普(bevenopran)、甲基沙胺吗啡(methylsamidorphan)、纳尔美啶(naldemedine)，优选地纳美芬(nalmefeme)，并且尤其是纳曲酮(naltrexone)，以及任何这些的药学上可接受的盐。
37.可以包含在本发明的组合物中的抗癌剂包含以下：放线菌素、阿法替尼、全反式维甲酸、氨沙林、阿那格雷、三氧化二砷、阿西替尼、阿扎胞苷、硫唑嘌呤、苯达莫司汀、贝沙罗汀、博来霉素、硼替佐米、波舒替尼、白消安、卡巴他赛、卡培他滨、卡铂、克拉屈滨、氯法拉滨、阿糖胞苷、达拉非尼、达卡巴嗪、更生霉素、达沙替尼、柔红霉素、地西他滨、多西紫杉醇、多西氟尿苷、多柔比星、表柔比星、埃博霉素、厄洛替尼、雌莫司汀、依托泊苷、氟达拉波利莫司、瓜地他滨、吉西他滨、羟基脲、羟基脲、伊达比星、艾代拉里斯(idelalisib)、异环磷酰胺、伊马替尼、伊立替康、伊沙佐米、卡博替尼、卡非佐米、克唑替尼、拉帕替尼、洛莫司汀、氯胺酮、美法仑、巯嘌呤、美司钠、甲氨蝶呤、米托坦、米托替尼、米托替尼、尼拉帕尼、奥拉帕尼、奥沙利铂、紫杉醇、帕比司他、帕唑帕尼、培美曲塞、匹克蒽醌、波纳替尼、丙卡巴肼、瑞戈非尼、鲁索替尼、索尼德吉布、索拉非尼、舒尼替尼、替加氟、替莫唑胺、替尼泊苷、硫鸟嘌呤、噻替派(tiotepa)、拓扑替康、曲贝替定、伐柔比星、凡德他尼、维莫非尼(vemurafenib)、维奈托克(venetoklax)、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春氟宁、长春瑞滨、维莫德吉(vismodegib)以及任何这些的药学上可接受的盐。优选的生物活性剂是阿扎胞苷。
38.此类化合物可以用于以下癌症中的任何一种：腺样囊性癌、肾上腺癌、淀粉样变性病、肛门癌、共济失调毛细血管扩张症、非典型痣综合征、基底细胞癌、胆管癌、伯特-霍格-杜贝(birt-hogg dub
é
)、管综合征、膀胱癌、骨癌、脑肿瘤、乳腺癌(包含男性乳腺癌)、类癌瘤、宫颈癌、结直肠癌、导管癌、子宫内膜癌、食管癌、胃癌、胃肠道间质瘤、her2阳性、乳腺癌、胰岛细胞瘤、幼年性息肉病综合征、肾癌、喉癌、急性淋巴细胞白血病、各类急性淋巴细胞白血病、急性髓系白血病、成人白血病、儿童白血病、慢性淋巴细胞白血病、慢性粒细胞白血病、肝癌、小叶癌、肺癌、小细胞肺癌、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、恶性胶质瘤、黑色素瘤、脑膜瘤、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征、鼻咽癌、神经内分泌肿瘤、口腔癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、胰腺神经内分泌肿瘤、甲状旁腺癌、阴茎癌、腹膜癌、珀茨-杰格斯综合征(peutz-jeghers syndrome)、垂体肿瘤、真性红细胞增多症、前列腺癌、肾细胞癌、视网膜母细胞瘤、唾液腺癌、肉瘤、卡波西肉瘤、皮肤癌、小肠癌、胃癌、睾丸癌、胸腺瘤、甲状腺癌、子宫(子宫内膜)癌、阴道癌、维尔姆斯瘤(wilms'tumor)。
39.可以提及用于本发明的组合物的其它药物包含免疫调节性酰亚胺药物，如沙利度胺(thalidomide)和其类似物，如泊马度胺(pomalidomide)、来那度胺(lenalidomide)和阿普司特(apremilast)，以及任何这些的药学上可接受的盐。许多被提及的其它药物包含血管紧张素ii受体2型激动剂，如化合物21(c21；3-[4-(1h-咪唑-1-基甲基)苯基]-5-(2-甲基丙基)噻吩-2-[(n-丁氧基氨基甲酸酯)-磺酰胺]和其药学上可接受的(例如钠)盐。
[0040]
本发明的组合物可以包含药理学有效量的生物活性剂。术语
‘
药理学有效量’是指此类活性成分的量，其能够赋予接受治疗的患者期望的生理变化(如治疗效果)，无论是单独还是以与另一种活性成分组合的方式施用。患者的此类生物学或医学应答或此类效应可以是客观的(即可通过某些测试或标志物进行测量)或主观的(即受试者给出或感觉到效应的指示)，并且包含至少部分缓解所治疗的疾病或病症的症状，或治愈或预防所述疾病或病症。
[0041]
因此，可以施用于患者的活性成分的剂量应足以在合理和/或相关的时间范围内影响治疗应答。本领域技术人员将认识到，精确剂量和组合物的选择以及最适当的递送方案将不仅受活性成分的性质影响，还受制剂的药理学性质、施用途径、所治疗的病状的性质和严重性以及接受者的身体状况和精神敏锐度，以及要治疗的患者的年龄、病状、体重、性别和应答以及疾病的阶段/严重性以及患者之间的基因差异的影响。
[0042]
本发明的组合物的施用可以是连续的或间歇的(例如，通过推注)。还可以通过施用的时间和频率来确定活性成分的剂量。
[0043]
在任何情况下，执业医师或其它技术人员将能够常规地确定最适合个体患者的任何特定活性成分的实际剂量。
[0044]
可替代地，如本文所描述的组合物还可以包括，代替(或除了)生物活性剂，诊断剂(即本身没有直接治疗活性但可以用于诊断病状的药剂，如用于生物成像的造影剂或造影介质)。
[0045]
可以用于根据本发明的要包衣的芯中的非生物活性佐剂、稀释剂和载体可以包含可溶于水的药学上可接受的物质，如碳水化合物，例如糖类，如乳糖和/或海藻糖，以及糖醇，如甘露醇、山梨醇和木糖醇；或药学上可接受的无机盐，如氯化钠。优选的载体/赋形剂材料包含糖和糖醇。当生物活性剂是复杂的大分子，如肽、蛋白质或基因材料的部分等，例如通常描述的和/或上文描述的特定肽/蛋白质时，此类载体/赋形剂材料特别有用。以这种方式将复杂的大分子嵌入赋形剂中通常会导致用于包衣的芯更大，因此包衣颗粒更大，从而更有益于应用可包含例如氧化铝的密封壳。
[0046]
本发明组合物的芯不要求包含生物活性剂。无论芯是否包括生物活性剂，所述芯都可以包括非生物活性辅助剂、稀释剂和载体，包括润滑剂，和/或其他具有功能特性的赋形剂，例如缓冲剂和/或ph调节剂(ph modifying agent)(例如柠檬酸)和/或基本上由这些组成。
[0047]
芯以纳米颗粒或更优选地以微粒的形式提供。优选的基于重量、数量或体积的平均直径在约50nm(例如约100nm，例如约250nm)和约30μm之间，例如在约500nm和约100μm之间，更特别地在约1μm和约50μm之间，例如约25μm，举例而言约20μm。
[0048]
如本文所用，术语
‘
基于重量的平均直径’将被技术人员理解为包含平均粒度由按重量计的粒度分布表征和定义，即其中每个大小等级中的现有分数(相对量)被定义为如通过例如筛分获得(例如湿法筛分)的重量分数的分布。如本文所用，术语
‘
基于数量的平均直径’将被技术人员理解为包含平均粒度由按数量计的粒度分布表征和定义，即其中每个大小等级中的现有分数(相对量)被定义为如通过例如显微术测量的数量分数的分布。如本文所用，术语
‘
基于体积的平均直径’将被技术人员理解为包含平均粒度由按体积计的粒度分布表征和定义，即其中每个大小等级中的现有分数(相对量)被定义为如通过例如激光衍射
测量的体积分数的分布。可以使用本领域众所周知的其它仪器来测量粒度，如由例如马尔文仪器公司(malvern instruments,ltd)(英国伍斯特郡)和岛津公司(shimadzu)(日本京都)出售的设备。
[0049]
颗粒可以是球形的，即所述颗粒的纵横比小于约20，更优选地小于约10，如小于约4，并且尤其是小于约2，和/或在至少约90％的颗粒中，半径的变化(从重心到颗粒表面测量的)可以不超过平均值的约50％，如不超过所述值的约30％，例如不超过所述值的约20％。
[0050]
然而，根据本发明也可以以任何形状对颗粒进行包衣。例如，可以对不规则形状(例如
‘
葡萄干’形)、针形或长方体形的颗粒进行包衣。对于非球形颗粒，尺寸可以表示为例如相同重量、体积或表面积的相应球形颗粒的尺寸。根据本发明，也可以对空心颗粒以及具有孔、裂缝等的颗粒，如纤维状或
‘
缠结’颗粒进行包衣。
[0051]
颗粒可以以其适合包衣的形式获得或以所述形式获得，例如通过粒度减小工艺(例如压碎、切割、研磨或研磨到指定的基于重量的平均直径(如上文所定义)，例如通过湿法研磨、干法研磨、空气喷射研磨(包含低温微粉化)、球磨，如行星式球磨，以及利用端辊研磨机、辊磨机、振动磨机、锤磨机、辊磨机、流体能磨机、针磨机等)。可替代地，颗粒可以直接制备成合适的大小和形状，例如通过喷雾干燥、沉淀，包含使用超临界流体或其它自上而下的方法(即通过例如研磨等减小大颗粒的大小)或自下而上的方法(即通过例如溶胶-凝胶技术等增加小颗粒的大小)。纳米颗粒可以可替代地通过众所周知的技术制作，如气体冷凝、摩擦、化学沉淀、离子注入、热解、水热合成等。
[0052]
可能有必要(取决于最初提供包括芯的颗粒的方式)清洗和/或清洁所述颗粒以去除可能来自其生产的杂质，并且然后将其干燥。干燥可以通过本领域技术人员已知的多种技术进行，包含蒸发、喷雾干燥、真空干燥、冷冻干燥、流化床干燥、微波干燥、ir辐射、转鼓干燥等。如果干燥，则可以通过研磨、筛选、研磨和/或干式超声处理使芯解聚。可替代地，可以对芯进行处理以去除任何可能吸附到其表面上的挥发性材料，例如通过使颗粒暴露于真空和/或升高的温度。
[0053]
芯的表面可以在施加第一包衣材料层之前化学活化，例如通过用过氧化氢、臭氧、含自由基的反应物处理或通过施加等离子体处理，以在芯的表面处产生氧自由基。这进而可以在芯上为ald前体产生有利的吸附/成核位点。
[0054]
优选地，将多于一层的涂布材料依次施加到芯上。将包衣施加到包含生物活性剂的芯的优选方法包括气相技术，例如ald或相关技术，例如原子层外延(ale)、分子层沉积(mld)；与ald类似的技术，不同之处在于在每个脉冲中沉积分子(通常是有机分子)而不是原子)、分子层外延(mle)、化学气相沉积(cvd)、原子层cvd、分子层cvd、物理气相沉积(pvd)、溅射pvd、反应溅射pvd、蒸发pvd和二元反应序列化学。ald是根据本发明的优选包衣方法。
[0055]
优选地，将多于一个单独的层、包衣或壳(这些术语在本文中可互换使用)施加(即
‘
单独施加’)到包含生物活性剂的实芯。
‘
单独的层、包衣或亚壳’的这种
‘
单独施加’是指用第一层包衣材料包衣实芯，然后对所得包衣芯进行某种形式的解聚过程。在这方面，本文定义的包衣材料的离散层(也称为“亚壳”)的数量对应于这些间歇性解聚步骤的数量，其中最后的解聚步骤在施加包衣材料的外涂层之前进行。
[0056]
包衣的芯可以经受上述解聚过程而不通过连续过程从所述设备中取出。这样的过
程将包括迫使通过包衣所述芯形成的固体产物块通过位于反应器内的筛子，并且被配置为在通过施加在所述反应器内的强制装置对包衣的芯施加强制时使任何颗粒聚集体解聚，然后进行第二次和/或进一步的包衣。在施加如本文所述的最终外涂层之前，该过程根据需要和/或适当的次数继续进行。
[0057]
使筛子定位于反应器容器内意指可以通过不需要将颗粒从反应器中去除的连续工艺来施加包衣。因此，不需要人工处理颗粒，并且也不需要外部机械来使聚集体颗粒解聚。这不仅大幅减少了进行包衣工艺的时间，而且更加方便并降低了人员处理有害(例如有毒)材料的风险。其还通过限制手工劳动和降低污染风险来提高工艺的可重复性。
[0058]
或者，可从诸如ald反应器的涂布装置中取出包衣的芯，然后对其进行外部解聚步骤，例如如国际专利申请wo 2014/187995中所述。这样的外部解聚步骤可以包括搅拌，例如在湿态或干态下的超声处理，或者优选可以包括使已经从反应器排出的所得固体产物块经受筛分，例如通过迫使其通过筛子或筛网以使颗粒解聚，例如如下文所述，然后将颗粒放回涂布装置中进行下一包衣步骤。同样，在施加如本文所述的最终外涂层之前，该过程可根据需要和/或适当的次数继续进行。
[0059]
在外部解聚过程中，解聚可以通过使湿态或干态的包衣颗粒经受喷嘴气溶胶产生、研磨、磨碎、搅拌、高剪切混合和/或均质化，可选地实现(附加地和/或代替上述过程)解聚。如果解聚的步骤是在湿态的颗粒上进行的，则解聚的颗粒应该在下一个包衣步骤之前干燥(如上文关于芯所描述)。
[0060]
然而，我们更喜欢在这样的外部过程中，解聚步骤包括一个或多个筛分步骤，其可以包括喷射筛分、手动筛分、振动筛子振动、水平筛子振动、敲击筛分，或(优选地)下文所述的声波筛分或类似方法，包括这些筛分步骤的任何组合。
[0061]
我们发现，在外部解聚后施加单独的包衣材料层会产生可见和可辨别的界面，这些界面可以通过分析根据本发明的包衣的颗粒观察到，并且通过例如tem观察为具有较高电子渗透性的区域，例如，如在图1和2所见。
[0062]
这与连续ald工艺形成对比，在连续ald工艺中，包衣的颗粒在重新包衣之前不从反应器中移除。因为，在ald包衣工艺中，包衣发生在原子水平，即使顺序使用不同的包衣材料(例如在ald循环之间从一种金属氧化物前体切换到另一种)，也没有观察到清晰的物理界面，例如图1和图2中所示的那些。因此，可以在图1和2中看到的界面之间的层厚度直接对应于在ald反应器内执行的每个系列中的循环数，以及各个外部搅拌步骤之间的循环数。不受理论限制，认为，从ald反应器的真空条件中去除包衣的颗粒并将新包衣的表面暴露在大气中会由于最外层原子层的弛豫和重建而导致结构重排。这种过程被认为涉及表面(和近表面)原子的重排，这是由降低表面自由能的热力学趋势驱动的。
[0063]
此外，物质的表面吸附，例如总是存在于空气中的碳氢化合物，由于与碳氢化合物以及大气氧等形成的涂层的反应，可能导致这种现象，表面改性也会造成这种现象。因此，如果对这些界面进行化学分析，它们可能含有痕量的污染物，这些污染物并非源自包衣工艺，例如ald。
[0064]
无论是在反应器内部还是外部进行，颗粒聚集体优选通过迫使它们通过筛子的强制装置破碎，从而将聚集体分离成单个颗粒或具有所需和预定尺寸的聚集体(并由此实现解聚)。在后者方面，在一些情况下，单独的初级粒度非常小(即《1μm)使得实现
‘
完全’解聚
(即其中聚集体分解成单独的颗粒)是不可能的。相反，解聚是通过将较大的聚集体分解成具有期望大小的次级颗粒的较小聚集体来实现的，所述期望大小由筛孔的大小指定。然后通过气相技术包衣较小的聚集体以形成呈小聚集体颗粒形式的完全包衣的
‘
颗粒’。以此方式，术语
‘
颗粒’在本发明的上下文中指已经解聚和包衣的颗粒时，是指具有期望大小的单独(初级)颗粒和聚集体(次级)颗粒。
[0065]
在任何情况下，期望的粒度(无论是单独颗粒还是期望大小的聚集体)都保持不变，并且此外，在通过筛子进行此类解聚之后，将气相包衣机构继续施加到颗粒意指在颗粒上形成完整的包衣，从而形成完全包衣的颗粒(期望大小的单独颗粒或聚集体颗粒)。
[0066]
无论在反应器内部或外部进行，上面所述的重复的包衣和解聚工艺可以进行至少1次，优选地2次，更优选地3次，如4次，包含5次，更特别地6次，例如7次，并且不超过约100次，例如不超过约50次，如不超过约40次，包含不超过约30次，如介于2与20次之间，例如介于3与15次之间，如10次，例如9或8次，更优选地6或7次，并且特别是4或5次。
[0067]
包衣的总厚度(意味着所有单独的层/包衣/壳)将平均在约0.5nm和约2μm之间的范围内。
[0068]
每个单独的亚壳的最小厚度将平均在约0.5nm的范围内(例如约0.75nm，例如约1nm)。
[0069]
每个单独的亚壳的最大厚度将取决于芯的大小(开始时)，然后取决于先前已施加包衣的芯的大小，并且平均约为平均直径(即该芯或具有先前施加包衣的芯的基于重量、数量或体积的平均直径)的百分之一。
[0070]
优选地，对于平均直径在约100nm和约1μm之间的颗粒，亚壳应该平均在约1nm和约5nm之间；对于平均直径在约1μm和约20μm之间的颗粒，包衣厚度平均应在约1nm和约10nm之间；对于平均直径在约20μm和约700μm之间的颗粒，包衣厚度平均应在约1nm和约100nm之间。
[0071]
最终的外涂层/包衣或密封壳(这些术语在本文中可互换使用)的厚度必须比亚壳薄。因此，该厚度可以平均不超过先前施加的最宽亚壳的厚度的约0.7(例如约0.6)倍。或者，该厚度可以平均不超过所施加的最后亚壳的厚度的约0.7(例如约0.6)倍，和/或可以平均不超过所有先前施加的亚壳的平均厚度的约0.7(例如约0.6)倍。对于高达约20μm的颗粒，厚度可以平均在约0.3nm至约10nm的范围内。对于较大的颗粒，厚度可以平均不超过包衣颗粒的基于重量、数量或体积的平均直径的约1/1000。
[0072]
我们已经发现，施加亚壳，然后进行一个或多个解聚步骤，例如超声处理，在亚壳包衣中产生了磨损、针孔、断裂、间隙、裂纹和/或空隙(下文称为
‘
裂纹’)，这是由于在施加较厚的包衣后被包衣的颗粒基本上直接更紧密地
‘
粘结’或
‘
粘合’在一起。一旦发生解聚，这可能使包含生物活性成分的芯暴露于元件。
[0073]
密封壳的作用是在颗粒上提供
‘
密封’外涂层，覆盖这些裂纹，因此产生的颗粒不仅完全被该密封壳覆盖，而且覆盖的方式使颗粒能够以不破坏在药物制剂下方、之前和/或过程中形成的亚壳的方式容易地解聚(例如使用非侵蚀性技术，例如涡旋)。
[0074]
例如，如果打算在施用至患者之前提供悬浮液中的样品，则必须提供包衣中没有针孔或裂纹的解聚的初级颗粒。
[0075]
我们发现，如果不应用最终的、更薄的密封壳，则通常不可能获得可接受的具有充
分解聚的颗粒的用于施用的悬浮液，除非应用像超声处理这样的激进技术。这类方法在包衣和/或样品中引入了上述裂纹，其中一些壳完全破裂。这将在施用后直接导致活性成分的血浆浓度出现不希望的初始峰值(突增)。
[0076]
相反，我们发现，使用较薄的外涂层(密封壳)可以使颗粒重新悬浮在溶剂中，而无需事先应用这种激进的解聚步骤。
[0077]
相反，我们发现只需对悬浮液进行较不剧烈的处理就足够了，例如涡旋、搅拌或温和的声波处理，并且这会导致解聚的包衣颗粒基本上没有活性成分可以通过其以不受控制的方式释放的所述裂纹。包衣中的
‘
基本上没有所述裂纹’，我们是指小于约1％的包衣颗粒表面包含活性成分可能通过其暴露(例如，暴露于元件)的磨损、针孔、断裂、间隙、裂纹和/或空隙。
[0078]
亚壳和较薄的外壳一起可以在颗粒的表面积上具有基本均匀的厚度。
‘
基本上均匀’的厚度是指如通过tem测量的为存在于本发明组合物中的包衣颗粒的至少约10％，例如约25％，例如约50％的无机包衣的厚度的变化程度不超过约
±
20％。
[0079]
可施加于芯的包衣材料可以是药学上可接受的，因为它们应该基本上是无毒的。
[0080]
包衣材料可以包括有机或聚合材料，如聚酰胺、聚酰亚胺、聚脲、聚氨酯、聚硫脲、聚酯或聚亚胺。包衣材料还可以包括混合材料(如有机材料与无机材料之间)，包含金属或另一种元素与醇、羧酸、胺或腈之间的组合的材料。然而，我们更喜欢包衣材料包含无机材料。无机包衣材料可以包括一种或多种金属或类金属，或可以包括一种或多种含金属或含类金属的化合物，如金属或类金属、氧化物、氮化物、硫化物、硒化物、碳酸盐和/或其它三元化合物等。金属和类金属、氢氧化物，并且尤其是氧化物是优选的，尤其是金属氧化物。可以提及的金属包含碱金属、碱土金属、贵金属、过渡金属、过渡后金属。可以提及的金属和类金属包含铝、钛、镁、铁、镓、锌、锆、铌、铪、钽、镧和/或硅；更优选地铝、钛、镁、铁、镓、锌、锆和/或硅；尤其是铝、钛和/或锌。
[0081]
如上所述，由于本发明的组合物包含一个或多个离散的无机包衣材料层，这些层的性质和化学组成可因层而异。
[0082]
单独的层还可以包括两种或更多种无机材料的混合物，如金属氧化物或类金属氧化物，和/或可以包括不同无机或有机材料的多层或复合物，以改变层的性质。
[0083]
可以提及的包衣材料包含包括氧化铝(al2o3)、二氧化钛(tio2)、氧化铁(fe
x
oy，例如feo和/或fe2o3和/或fe3o4)、氧化镓(ga2o3)、氧化镁(mgo)、氧化锌(zno)、氧化铌(nb2o5)、氧化铪(hfo2)、氧化钽(ta2o5)、氧化镧(la2o3)、二氧化锆(zro2)和/或二氧化硅(sio2)的那些。优选的包衣材料包含氧化铝、二氧化钛、氧化铁、氧化镓、氧化镁、氧化锌、二氧化锆和二氧化硅。更优选的包衣材料包含氧化铁，以及二氧化钛、硫化锌、氧化锌和氧化铝。
[0084]
本发明的组合物中的包衣材料层(单独或总和)可以基本上(例如大于约80％，例如大于约90％，例如约95％，例如约98％)由氧化铁、氧化铝、氧化锌或二氧化钛组成。氧化锌(和氧化铁)的包衣可比相应的氧化铝或钛的包衣更厚，因为它们更易溶解。因此，当应用的包衣材料包括例如氧化锌时，可以应用更厚的材料包衣，从而产生更大的包衣颗粒，从而更有利地应用密封壳，该密封壳可以包括相同的材料或不同的材料(例如氧化铝)。
[0085]
在ald中，包衣材料层可以在约20℃到约800℃或约40℃到约200℃，例如约40℃到约150℃，如约50℃到约100℃的工艺温度下施加。最佳工艺温度取决于前体和/或芯中采用
的物质(包含生物活性剂)的反应性和/或芯物质的熔点。
[0086]
在大多数情况下，连续反应中的第一反应将涉及要包衣的表面的一些官能团或自由电子对或自由基，如羟基(-oh)或伯氨基或仲氨基(-nh2或-nhr，其中r例如是脂肪族基团，如烷基)。单独的反应有利地单独进行并且在使得所有过量的试剂和反应产物在进行随后的反应之前基本上被去除的条件下进行。
[0087]
尽管根据本发明的多个包衣颗粒在所施加的包衣中基本上没有活性成分可能通过其暴露(例如，暴露于元件)的上述裂纹，但是可以对多个包衣颗粒应用进一步的任选步骤，然后对其进行进一步的药物配制处理。该任选步骤可包括确保对少数具有破碎和/或破裂壳/包衣的剩余颗粒进行处理，其中将所有颗粒都悬浮在活性成分可溶于其中的溶剂中(例如溶解度至少为约1mg/ml)，但包衣中溶解度最低的材料是不溶的(例如溶解度不超过约0.1μg/ml)，然后通过例如离心、沉降、絮凝和/或过滤将固体物质颗粒与溶剂分离，导致主要留下完整颗粒。如上文所讨论的，上述任选步骤提供了一种潜在地进一步降低活性成分的血浆浓度中(可能)不希望的初始峰值(突发)的可能性的方法。
[0088]
在该过程结束时，可以使用一种或多种上文描述的用于干燥芯的技术来干燥包衣的颗粒。干燥可以在不存在或存在一种或多种药学上可接受的赋形剂(例如糖或糖醇)的情况下进行。或者，在该过程结束时，可将分离的颗粒重新悬浮在溶剂(例如水，其中存在或不存在本文定义的一种或多种药学上可接受的赋形剂)中，用于随后的储存和/或施用给患者。
[0089]
在施加第一层包衣材料之前或在连续包衣之间，芯和/或部分包衣的颗粒可以经受一个或多个替代的和/或预备的表面处理。在这方面，可以将一个或多个包含不同材料(即除无机材料之外)的中间层施加到相关表面，例如以保护芯或部分包衣的颗粒在包衣步骤/沉积处理期间免受与前体的不希望的反应，以提高包衣效率，或减少聚集。
[0090]
例如，中间层可以包含一种或多种表面活性剂，以减少待包衣颗粒的聚集并提供适合后续包衣的亲水性表面。在这方面合适的表面活性剂包括众所周知的非离子、阴离子、阳离子或两性离子表面活性剂，例如吐温系列，例如吐温80。或者，如果用作所述芯的一部分(或作为芯)的活性成分易于与一种或多种在包衣(例如ald)过程期间可能存在于气相中的前体化合物反应，则可以对芯进行预备性表面处理。
[0091]
具有这种性质的
‘
中间’层/表面处理的应用可替代地通过液相非包衣技术实现，然后是冻干、喷雾干燥或其他干燥方法，以使颗粒具有后面可以施加包衣材料的表面层。
[0092]
本发明的组合物颗粒的外表面也可以被衍生化或官能化，例如通过将一种或多种化合物或部分连接到包衣材料的最终层的外表面，例如利用在施用纳米颗粒的患者体内增强靶向递送颗粒的化合物或部分。这样的化合物可以是有机分子(如peg)聚合物、抗体或抗体片段、或受体结合蛋白或肽等。
[0093]
或者，所述部分可以是锚定基团，例如包含硅烷官能团的部分(参见，例如，herrera et al,j.mater.chem.,18,3650(2008)和us 8,097,742)。另一种化合物，例如期望的靶向化合物，可以通过共价键或非共价键，包括键、氢键或范德华键，或它们的组合，连接到这样的锚定基团。这种锚定基团的存在可以提供一种通用工具，用于靶向递送到身体中的特定部位。或者，使用peg等化合物可导致颗粒在血流中循环更长的时间，确保它们不会积聚在肝脏或脾脏(人体消除颗粒的自然机制，这可能阻止递送到病变组织)中。
[0094]
本发明的组合物适合在它们制备时施用给患者(即，作为多个颗粒)，或者优选地与一种或多种药学上可接受的赋形剂一起配制，包括佐剂、稀释剂或载体，用于医药或兽医领域(包括用于治疗和/或，如果芯包含诊断材料，则用于诊断)。
[0095]
还提供了用于医学、诊断学和/或兽医实践的本发明组合物和包含本发明组合物和药学-(或兽医学-)可接受的佐剂、稀释剂或载体的药物(或兽医学)制剂。
[0096]
本发明的组合物可以局部性地、局部地或全身施用，例如口服(肠内)、通过注射或输注、静脉内或动脉内(包含通过血管内或其它血管周围装置/剂型(例如支架))、肌肉内、骨内、脑内，脑室内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内、颅内、瘤内、皮肤、皮内、皮下、经粘膜(例如舌下或口腔)、直肠、经皮、鼻、肺(例如通过吸入、气管、支气管)、局部或通过任何其它肠胃外途径，如皮下或肌肉内，任选地以药物(或兽用)制剂(包括呈药学上(或兽医学上)可接受的剂型的化合物)的形式施用。
[0097]
将本发明的组合物结合到药物制剂中可以适当考虑预期的施用途径和标准药物实践来实现。药学上可接受的赋形剂，如载体，对于生物活性剂可以是化学惰性的，并且在使用条件下可能没有有害的副作用或毒性。此类药学上可接受的载体还可以赋予本发明的组合物的立即释放或改变释放。
[0098]
包括本发明的组合物的药物(或兽用)制剂可以包含不同类型的颗粒，例如包括不同活性成分，包括不同的官能化(如上文所描述的)、不同大小的颗粒和/或不同厚度的包衣材料层的颗粒，或其组合。通过在单一药物制剂中将具有不同包衣厚度和/或不同芯大小的颗粒组合，可以在特定时间段内控制(例如改变或延长)向患者施用后的药物释放。
[0099]
对于经口施用(即通过吞咽向胃肠道施用)，本发明的组合物可以被配制成多种剂型。药学上可接受的载体或稀释剂可以是固体或液体。固体制剂包含颗粒剂(其中在存在例如载体和其它赋形剂如结合剂或ph调节剂(ph adjusting agent)的情况下，颗粒剂可以包括本发明的组合物的多个颗粒中的一些或全部)、压制片剂、丸剂、锭剂、胶囊、扁囊剂等。载体包含本领域技术人员公知的材料，包含上文公开的与芯内的生物活性剂的制剂相关的那些材料，以及碳酸镁、果胶、糊精、淀粉、明胶、黄蓍胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、低熔点蜡、可可脂、乳糖、微晶纤维素、低结晶纤维素等。
[0100]
固体剂型可以包括其它赋形剂，如调味剂、润滑剂、结合剂、防腐剂、崩解剂和/或包封材料。例如，本发明的组合物可以包封在例如软壳或硬壳胶囊中，例如明胶胶囊。
[0101]
被配制用于直肠施用的本发明的组合物，其可以包含栓剂，所述栓剂可以含有例如合适的非刺激性赋形剂，如可可脂、合成甘油酯或聚乙二醇，其在常温下为固体，但在直肠腔中液化和/或溶解以释放本发明的组合物的颗粒。
[0102]
对于肠胃外施用，如皮下和/或肌内注射，本发明的组合物可以呈无菌可注射和/或可输注剂型的形式，例如本发明的组合物的无菌水性或油性悬浮液。
[0103]
此类悬浮液可以根据本领域技术人员熟知的技术通过采用合适的分散剂或润湿剂(例如吐温，例如吐温80)和悬浮剂来配制。
[0104]
无毒的肠胃外可接受的稀释剂还包含1,3-丁二醇、甘露醇、林格氏溶液、等渗氯化钠溶液、无菌固定油(包焊任何温和的固定油，如合成甘油单酯或甘油二酯)的溶液。脂肪酸，如油酸和其甘油酯衍生物可以用于制备可注射制剂，以及天然药学上可接受的油，如橄榄油或蓖麻油，以及其聚氧乙烯化版本和ph调节剂。这些油悬浮液也可以含有长链醇稀释
剂或分散剂。适用于注射的本发明的组合物还可以包括呈液体、溶胶或凝胶(例如包括透明质酸)形式的组合物，其可通过外科施用设备施用，例如针、导管等，以形成储库制剂。本发明的组合物的使用可以通过减少如上文定义的任何爆发效应和/或通过增加生物活性成分从所述制剂中释放的长度来控制溶解速率和药代动力学曲线。
[0105]
本发明的组合物还可以配制成用于吸入，例如作为与干粉吸入器一起使用的吸入粉末(参见例如，kumaresan等人,《制药时报(pharma times)》,44,14(2012)和mack等人,《吸入法(inhalation)》,6,16(2012)，其相关公开内容在此通过引用并入。用于吸入肺的本发明的组合物中的多个颗粒的合适粒度在约2到约10μm的范围内。
[0106]
本发明的组合物还可以配制用于局部施用至皮肤或粘膜。对于局部施加，药物制剂可以以例如洗剂、凝胶、糊剂、酊剂、透皮贴剂、用于透粘膜递送的凝胶的形式提供，所有这些都可以包括本发明的组合物。所述组合物还可以用含有悬浮在载体中的本发明的组合物的合适软膏配制，所述载体如矿物油、液体石油、白色石油、丙二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯化合物、乳化蜡或水。洗剂或霜剂的合适载体包含矿物油、脱水山梨糖醇单硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鲸蜡酯蜡、鲸蜡醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。
[0107]
药物制剂可以包括本发明的组合物的重量的约1％到约99％之间，如约10％(如约20％，例如约50％)到约90％之间，其余部分由药学上可接受的赋形剂制成。
[0108]
在任何情况下，本发明的组合物可以与本领域中用于制备药物制剂的常规药物添加剂和/或赋形剂一起配制，并且然后使用标准技术结合到各种药物制剂和/或剂型中(参见例如，lachman等人,
‘
工业药学理论与实践(the theory and practice of industrial pharmacy)’,lea和febiger,第3版(1986)；
‘
《雷明顿：药学科学与实践(remington:the science and practice of pharmacy)’,troy(编辑),费城科学大学(university of the sciences in philadelphia),第21版(2006)；和/或
‘
奥尔顿制药：药物的设计和制造(aulton’s pharmaceutics:the design and manufacture of medicines)’,aulton和taylor(编辑),爱思唯尔出版公司(elsevier),第4版,2013)，以及其中提及的文件，所有这些文件中的相关公开内容通过引用并入本文。否则，合适制剂的制备可以由技术人员使用常规技术非发明性地实现。
[0109]
无论在何处采用
‘
约’一词，例如在量(例如浓度、尺寸(大小和/或重量)、大小比率、纵横比、比例或分数)、温度或压力的上下文中，应当理解，此类变量是近似的，并且因此可以与本文指定的数字相差
±
15％，如
±
10％，例如
±
5％，并且优选地
±
2％(例如
±
1％)。即使此类数字首先以百分比形式呈现，情况也是如此(例如，
‘
约15％’可以意指关于数字10的
±
15％，即介于8.5％与11.5％之间的任何值)。
[0110]
本发明的组合物允许配制大量不同的药学活性化合物。取决于所包含的生物活性剂，本发明的组合物可以用于有效治疗多种病症。
[0111]
本发明的组合物可以进一步配制为具有均匀的并且能够在注射液中形成稳定悬浮液(即不沉降)的大小分布的包衣颗粒的可注射悬浮液形式，并且可以通过针头注射。
[0112]
此外，本发明的组合物可以提供使任何爆发效应最小化的释放和/或药代动力学曲线，所述爆发效应由施用之后不久的浓度最大值表征。
[0113]
本文所描述的组合物和方法可以具有以下优点：在用特定生物活性剂治疗相关病状时，与可以在现有技术中针对相同活性成分描述的的类似治疗相比，所述组合物和方法
对医师和/或患者而言可能更方便、更有效、毒性更小、具有更广泛的活性、更有效、产生更少的副作用，或者其可以具有其它有用的药理学性质。
[0114]
本发明通过参考附图的以下实施例进行说明，但绝非限制，其中：图1和2是tem图像，显示了通过采用本文描述的方法形成的清晰可见的物理界面(较高电子渗透率的区域)；图3和图4显示了在施加密封壳之前(图3)和之后(图4)从氧化铝包衣的颗粒中的吲哚美辛释放；图5显示了吲哚美辛从颗粒中的释放，其具有密封壳、也经过最后的洗涤步骤；图6显示了吲哚美辛从经过最终洗涤步骤但没有密封壳的颗粒中释放；图7显示了大鼠体内血浆浓度-时间曲线之间的比较，大鼠被注射了包衣的吲哚美辛颗粒，存在(白色方块)和不存在(黑色三角形)密封壳；图8显示了大鼠体内血浆浓度-时间曲线之间的比较，大鼠被注射了不同剂量的包衣的吲哚美辛颗粒；图9显示了大鼠体内血浆浓度-时间曲线之间的比较，大鼠注射了相同剂量的由相同方法制备的包衣的吲哚美辛颗粒，经过和不经过最后洗涤步骤；图10和11显示了在施加氧化铝密封壳之前(图10)和之后(图11)，吲哚美辛从具有氧化锌亚壳的包衣颗粒中的体外释放；图12和13显示了在施加氧化铝密封壳之前(图12)和之后(图13)，吲哚美辛从具有二氧化钛亚壳的包衣颗粒中的体外释放；图14和15显示了在施加密封壳之前(图14)和之后(图15)从包衣颗粒中的苯丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸三肽的体外释放。
实施例
[0115]
实施例1
[0116]
包衣吲哚美辛微粒i
[0117]
通过湿式球磨(德国fritsch,premium line,pulverisette 7,idar-oberstein)制备吲哚美辛微粒(中国杭州apichem technology co.ltd.)。经激光衍射(shimadzu,sald-7500nano,kyoto,japan)测定，球磨的吲哚美辛颗粒的平均直径为5.9μm。
[0118]
研磨后，将悬浮液洗涤并干燥以形成由吲哚美辛微粒组成的粉末。使用干筛法(100μm目)分散干燥的微粒。
[0119]
将粉末装载到ald反应器(picosun，sunale
tm r-series，espoo，finland)。在50℃的反应器温度下进行了15次ald循环。三甲基铝和水用作前体，形成氧化铝的第一亚壳。第一亚壳的厚度约为4到5nm(根据ald循环数估计)。
[0120]
从反应器中提取粉末并通过筛分100μm目筛然后筛分20μm目来解聚。
[0121]
将粉末装载到ald反应器中。在50℃的反应器温度下进行了15次ald循环。三甲基铝和水用作前体，形成氧化铝的第二亚壳。第二亚壳的厚度约为4到5nm(根据ald循环数估计)。从反应器中提取粉末并通过筛分解聚，其中首先使用100μm目筛，然后使用20μm目筛。解聚度通过激光衍射测量，平均粒径为6μm。
[0122]
进一步重复包衣-解聚步骤两次以在颗粒上形成具有相同厚度的第三和第四亚壳。
[0123]
将40mg粉末置于试管中，并添加3ml的包含水和0.5％tween-80(merck,kenilworth,nj,usa)的分散溶液。将悬浮液轻轻涡旋(vortex-genie 2(scientific industries ltd.,new york,usa))1分钟，并通过激光衍射测量粒度分布。平均粒径测量为6μm。
[0124]
将悬浮液添加到含有1l磷酸盐缓冲溶液(ph 7.2，25mm，37℃)的溶解浴中。在2、5、10、20、60和120分钟时从浴槽中取出样品，并通过0.2μm过滤器过滤。使用在320nm波长下操作的uv/vis光谱仪(ultrospec 2100pro(amersham biosciences,little chalfont,uk))分析过滤后的样品的吲哚美辛含量。吲哚美辛的释放，由吸光度随时间确定的，绘制在图3中。
[0125]
干燥后，将粉末装入ald反应器。在50℃的反应器温度下，使用三甲基铝和水作为前体，再进行10次ald循环，形成氧化铝的
‘
密封’壳。所得密封壳的厚度约为3nm(根据ald循环数估计)。
[0126]
将40mg所得粉末置于试管中并加入3ml相同分散溶液。将悬浮液涡旋1分钟并通过激光衍射测量解聚度。平均粒径测量为6μm。
[0127]
将悬浮液添加到含有1l磷酸盐缓冲溶液(ph 7.2，25mm，37℃)的溶解浴中。在2、5、10、20、60和120分钟时从浴槽中取出样品，通过0.2μm过滤器过滤。使用在320nm下操作的uv/vis光谱仪分析过滤后的样品的吲哚美辛含量。同样，吲哚美辛随时间的释放绘制在图4中。
[0128]
可以看到图3和4之间的释放曲线之间存在明显差异，图4中显示的速度要慢得多。这表明，在施加密封壳后，亚壳在更高程度上是完整的，较少的吲哚美辛暴露于溶解溶液中。
[0129]
实施例2
[0130]
包衣吲哚美辛微粒ii
[0131]
洗涤来自实施例1的样品，将40mg样品放入试管中并加入10ml二甲亚砜。将如此形成的悬浮液涡旋1分钟，然后在7000xg(biofuge primo r(heraeus,hanau,germany))下离心5分钟。倒出溶剂并将湿粉末保持在试管中。
[0132]
加入10ml 99.7％乙醇，重复涡旋、离心和倾析步骤。
[0133]
加入3ml与实施例1中所述相同的分散溶液。将悬浮液轻轻涡旋1分钟并通过激光衍射测量解聚程度。平均粒径测量为6μm。
[0134]
将悬浮液添加到含有1l磷酸盐缓冲溶液(ph 7.2，25mm，37℃)的溶解浴中。如实施例1那样抽取样品。释放曲线如图5所示。
[0135]
对比图4和5可以看出，样品经过上述洗涤时，吲哚美辛的释放速度更慢，表明在洗涤过程中吲哚美辛已从有裂纹的颗粒中去除，仅留下样品中具有完整和致密壳的颗粒。
[0136]
实施例3
[0137]
带密封壳和不带密封壳的颗粒之间的比较
[0138]
如实施例1中所述制备具有密封壳的样品，但没有施加密封壳的最后步骤。该样品的洗涤、溶解和分析如实施例2所述进行，释放曲线如图6所示。
[0139]
比较图5和6之间的释放曲线表明，在具有密封壳的样品中，洗涤样品中的吲哚美辛含量较高。对于没有密封壳的样品，
‘
浪费’的吲哚美辛量大约高出4倍(15.5％对4％)。
[0140]
实施例4
[0141]
体内大鼠模型i
[0142]
将类似于实施例1中所述的样品(四个没有密封壳的亚壳)悬浮在0.5％吐温80溶液中。用具有如前所述的带有密封壳的四个亚壳的样品制备第二悬浮液。
[0143]
在雄性sprague-dawley大鼠的背部区域皮下注射两种悬浮液并提取血浆样品。吲哚美辛含量通过hplc-ms/ms(xeco tds-micro(waters,milford,ma,usa))使用设置在254nm的二极管阵列检测器(shimadzu)测量。使用4.6*150mm,2.6μm粒径的苯基-己基色谱柱在设置为40℃的色谱柱烘箱中完成分离。流动相a是10g/l乙酸水溶液，流动相b是乙腈。应用梯度洗脱程序，流动相a从70％降至30％。使用六点校准曲线的直线方程进行定量，范围为0.5-100μg/ml。分析的运行时间为31分钟。
[0144]
图7中的实线和方形点显示了来自该第一测试组的血浆浓度分布，而虚线和三角形点显示了来自第二测试组的血浆浓度分布。
[0145]
图中的峰代表在施用悬浮液后最初几个小时吲哚美辛的初始突发释放。可以看出，第一悬浮液颗粒上的密封壳将突发释放降低了大约4倍。
[0146]
实施例5
[0147]
体内大鼠模型ii
[0148]
根据实施例1中描述的方法制备样品(四个亚壳和一个密封壳)。
[0149]
在雄性sprague-dawley大鼠的背部区域皮下注射悬浮液(剂量分别为1、10和100mg/kg体重(bw)，每组6只大鼠)，并与注射纯吲哚美辛(1mg/kg bw)比较。在不同时间提取血浆样品。通过hplc-ms/ms(xeco tds-micro(waters,milford,ma,usa))分析吲哚美辛含量。
[0150]
血浆样品分析结果见图8。左手血浆浓度时间曲线显示了纯吲哚美辛和1mg/kg包衣样品之间的比较。右手曲线显示了不同包衣样品之间的比较。当以10或100mg/kg皮下施用时，纳米壳包衣吲哚美辛的血浆浓度-时间曲线显示持续释放超过12周。纯吲哚美辛在一周内完全消除。
[0151]
实施例6
[0152]
体内大鼠模型iii
[0153]
根据实施例2中描述的方法制备样品(四个亚壳和一个密封壳，然后洗涤)。
[0154]
样品的悬浮液用于实施例5所述的大鼠模型(10mg/kg bw)。
[0155]
本研究的血浆样品分析结果见图9。为了比较，图9还包括来自实施例5的10mg/kg结果。从血浆浓度曲线可以看出，样品的洗涤显著降低了药物释放的初始突发。
[0156]
实施例7
[0157]
包衣吲哚美辛微粒iii
[0158]
如以上实施例1所述制备、洗涤、干燥和分散吲哚美辛微粒。
[0159]
将粉末加载到与实施例1中所述相同的ald反应器中。在50℃的反应器温度下进行15次ald循环，使用二乙基锌(dez)和水作为前体，形成氧化锌的第一亚壳。第一亚壳的厚度约为4到5nm(根据ald循环数估计)。
[0160]
从反应器中提取粉末并通过声波筛(tsutsui scientific sw-20at，中国)使用具有20μm目数的尼龙筛(tsutsui scientific，中国)解聚。
[0161]
将粉末再次加载到ald反应器中，再进行15次ald循环，形成氧化锌的第二亚壳。估计第二亚壳的厚度约为4至5nm。
[0162]
从反应器中提取粉末并使用如上所述的声波筛进行解聚。
[0163]
进一步重复包衣-解聚步骤两次以在颗粒上形成具有相同厚度的第三和第四亚
壳，从而形成没有密封壳的样品。
[0164]
如上文实施例4所述，通过hplc测量所生产的没有密封壳的样品中的总吲哚美辛含量。将41.09和39.74mg(重复测试)的样品放入试管中。加入3ml分散溶液并如实施例1所述涡旋混悬液。
[0165]
将两种悬浮液添加到溶解浴中，取出样品并通过实施例1中所述的0.2μm过滤器过滤。如实施例1所述分析过滤的样品的吲哚美辛含量。图10绘制了两个样品中吲哚美辛释放的平均值(有标准偏差；由于分析数据几乎相同，因此无法看到误差线)。
[0166]
将样品重新装入ald反应器，并在50℃的反应器温度下，使用三甲基铝和水作为前体，再进行15次ald循环，形成氧化铝的密封壳。所得密封壳的厚度约为4-5nm(根据ald循环数估计)。
[0167]
如上文实施例4所述，通过hplc测量所生产的具有密封壳的样品中的总吲哚美辛含量。将40.41和40.18mg(重复测试)的具有密封壳的样品置于试管中，加入3ml分散溶液并如上所述涡旋混悬液。
[0168]
然后将悬浮液添加到溶解浴中，并如上所述分析吲哚美辛的释放，如图11所示。
[0169]
可以看到图10和11之间的释放曲线之间存在明显差异，图11中显示的释放要慢得多。这表明，在将氧化铝密封壳施加到四个氧化锌亚壳上后，亚壳在高得多的程度上是完整的，较少的吲哚美辛暴露于溶解溶液中。
[0170]
实施例8
[0171]
包衣吲哚美辛微粒iv
[0172]
重复上述实施例7中所述的相同程序，但使用四氯化钛代替dez，以提供四个单独的二氧化钛亚壳。
[0173]
吲哚美辛的释放曲线如图12(没有氧化铝密封壳)和图13(有密封壳)所示。可以看出差异，图13所示的在开始较慢，体外突发释放要低得多。这再次表明，在将氧化铝密封壳施加到四个二氧化钛亚壳上后，亚壳在更高程度上是完整的，较少的吲哚美辛暴露于溶解溶液中。
[0174]
实施例9
[0175]
包衣的肽微粒使用mini spray dryer b-290(b
ü
chi,switzerland)，通过喷雾干燥，制备包含海藻糖和苯丙氨酸-甘氨酸-甘氨酸(pgg)(均为sigma-aldrich co.st.louis,usa)的微粒。
[0176]
pgg(0.5％)、海藻糖(9.7％)和tween(0.2％)的130ml水溶液。这产生了包含4.7％pgg的微粒。在入口温度为125℃、泵流量为4.2ml/min和所得出口温度为73℃的条件下进行喷雾干燥。
[0177]
将微粒粉末装载到ald反应器(picosun，sunale
tm r-series，espoo，finland)。在50℃的反应器温度下进行了25次ald循环。三甲基铝和水用作前体，形成氧化铝的第一亚壳。第一亚壳的厚度约为7到8nm(根据ald循环数估计)。
[0178]
如以上实施例7中所述，从反应器中提取粉末并使用声波筛解聚结。
[0179]
执行三个进一步的包衣-解聚步骤以提供总共四个具有相同厚度的亚壳。
[0180]
如上文实施例4所述，通过hplc测量如此产生的样品中的总pgg含量。
[0181]
然后将199.22mg样品置于试管中，加入3ml分散溶液，将悬浮液涡旋1分钟，加入溶
解浴中，如以上实施例1所述测量吲哚美辛释放。
[0182]
使用hplc分析释放的pgg，并绘制在图14中。
[0183]
将剩余的样品装回ald反应器，并如上所述进行另外15个ald循环，形成氧化铝的
‘
密封’壳(根据ald循环的数量估计，厚度约为4至5nm)。
[0184]
采用hplc测定制得的具有密封壳的样品中的总pgg含量。
[0185]
将199.12和200.28mg粉末(重复测试)添加到试管中并添加3ml分散溶液，然后将所得悬浮液轻轻涡旋1分钟，将悬浮液添加到溶解浴中，并进行释放的pgg含量的分析，如上所述。图15中绘制了pgg对时间的释放(两个值的平均值)。
[0186]
可以看到图14和15之间的释放曲线之间的明显差异，其中图15中显示的速度要慢得多，这再次表明四个亚壳上的密封壳使它们在更高程度上保持完整，更少的吲哚美辛暴露于溶解溶液。