一种巴洛沙韦酯干混悬剂及其制备方法和应用与流程

1.本发明涉及药物制剂技术领域，尤其涉及一种巴洛沙韦酯干混悬剂及其制备方法和应用。


背景技术：

2.巴洛沙韦酯(cas no.：1985606-14-1，结构式如下所示)，英文化学名称为：{(12ar)-12-[(11s)-7,8-difluoro-6,11-dihydrodibenzo[b,e]thiepin-11-yl]-6,8-dioxo-3,4,6,8,12,12ahexahydro-1h-[1,4]oxazino[3,4-c]pyrido[2,1-f][1,2,4]triazin-7-yl}oxy)methyl methyl carbonate(iupac)，中文化学名称为：({(12ar)-12-(11s)-7，8-二氟-6，11-二氢二苯并[b，e]硫卓-11-基]-6，8-二氧代-3，4，6，8，12，12a-六氢-1h-[1，4]嗯嗪[3，4-c]并吡啶[2，1-f][1，2，4]三嗪-7-yl}氧代)甲基碳酸甲酯，分子量为571.55。巴洛沙韦酯为白色至浅黄色的固体，旋光度为233.6度，几乎不溶于水，饱和水溶液(24℃)的ph值为5.80，分配系数logp为2.26，为低溶解度、高渗透性药物，即bcs ii类药物。
[0003][0004]
巴洛沙韦酯(baloxavir marboxil)是近20年来首创的新作用机制的抗流行性感冒(流感)病毒新药，由日本盐野义(shionogi)制药株式会社首先研制，作用于流感病毒基因组转录所必需的聚合酶酸性蛋白的内切酶，对甲型和乙型流感病毒均有很强的抑制活性。
[0005]
从日本盐野义制药株氏会(shionogi&co.,ltd.)上市的巴洛沙韦酯颗粒剂说明书，可以看出，该颗粒剂含有活性成分：baloxavir marboxil，非活性成分：d-甘露醇，麦芽糖，氯化钠，羟丙甲纤维素，聚维酮，二氧化硅，三氯蔗糖，滑石粉，香精。从处方组成来判断，巴洛沙韦酯颗粒剂采用的工艺为湿法制粒。
[0006]
巴洛沙韦酯的分子结构式中有一个羧酸酯，在有水的环境下，在一定的温度条件下会发生水解，生成降解产物，如巴洛沙韦。因此，在制剂开发过程中，尽可能不采用湿法制粒工艺，产品的包材选择也很重要，尽可能选择防潮材料。
[0007]
现有技术采用水作为溶剂进行湿法制粒，同时，在一定温度条件下干燥，巴洛沙韦酯就有可能水解产生降解产物，在加速试验和长期稳定性试验过程中，这种降解趋势会越来越明显，这也是产品稳定性不好的原因之一。


技术实现要素：

[0008]
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种巴洛沙韦酯干混悬剂及其制备方法和应用，制备的巴洛沙韦酯干混悬剂具有较高的稳定性。
[0009]
为达到上述目的，本发明提供了一种巴洛沙韦酯干混悬剂，包括：
[0010]
巴洛沙韦酯原料药；
[0011]
稀释剂；
[0012]
助悬剂；
[0013]
ph调节剂；
[0014]
助流剂；
[0015]
所述助悬剂为黄原胶和海藻酸钠。
[0016]
本发明优选的，所述巴洛沙韦酯原料药的粒径分布d90小于等于10um，d50小于等于5um。
[0017]
本发明优选的，所述巴洛沙韦酯原料药的单位剂量为10mg或20mg。
[0018]
本发明中，所述单位剂量指药品最小单元所含主药的量；如一片，一颗胶囊，一袋颗粒中所含的药品的重量。例如，当所述巴洛沙韦酯干混悬剂为颗粒剂时，所述单位剂量的单位是mg/袋。
[0019]
本发明优选的，所述巴洛沙韦酯原料药、稀释剂、黄原胶、海藻酸钠、ph调节剂、助流剂的质量比为(2.0～5.0)：(92.4～223.0)：(0.2～1.8)：(0.2～1.8)：(2.0～10)：(0.2～2.0)。
[0020]
本发明优选的，所述巴洛沙韦酯原料药在所述干混悬剂中的质量含量为1％～3％，更优选为2％。
[0021]
本发明优选的，所述稀释剂选自蔗糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、麦芽糖醇中的一种或多种；更优选为蔗糖。
[0022]
所述稀释剂的质量含量优选为80％～95％，更优选为85％～95％。具体为89.2％、92.4％、93.4％，或以上述任意值为上限或下限的区间。
[0023]
本发明优选的，所述助悬剂为黄原胶和海藻酸钠的组合。
[0024]
实验结果表明，采用黄原胶和海藻酸钠作为巴洛沙韦酯干混悬剂的助悬剂，可以获得较其他组合，如海藻酸钠-阿拉伯胶，海藻酸钠-卡拉胶等更好的助悬效果，同时能够满足干混悬剂项下沉降体积比不低于0.90的要求。不仅能够增加分散介质的粘度以降低微粒的沉降速度，还能够被吸附在微粒表面，增加微粒的亲水性，形成保护膜，阻碍微粒合并和絮凝，使混悬剂更稳定。
[0025]
本发明优选的，所述黄原胶和海藻酸钠的质量比为(1～9)：(1～9)；优选为(1～9)：1，进一步优选为1:1、1:9、9:1，或以上述任意比值为上限或下限的区间。
[0026]
本发明优选的，所述黄原胶的质量含量为0.2％～1％，更优选为0.2％、0.72％、1％，或以上述任意值为上限或下限的区间。
[0027]
本发明优选的，所述海藻酸钠的质量含量为0.08％～2％，更优选为0.08％、1％、1.8％，或以上述任意值为上限或下限的区间。
[0028]
本发明优选的，所述ph调节剂选自柠檬酸及其水合物与其药学可接受的盐的混合物(如柠檬酸与柠檬酸钠的混合物、一水合柠檬酸与柠檬酸钠的混合物)、柠檬酸二氢碱金
属盐(包括但不限于钠盐、钾盐等)、乳酸钠、琥珀酸钠中的一种或多种；更优选为柠檬酸与柠檬酸钠的混合物。
[0029]
所述柠檬酸与柠檬酸钠的质量比优选为1:1。
[0030]
所述ph调节剂的质量含量优选为2％～4％。具体可以选自2％或4％。
[0031]
本发明优选的，所述助流剂选自微粉硅胶、滑石粉中的一种或多种，更优选为微粉硅胶。
[0032]
所述助流剂的质量含量优选为0.2％～1％，更优选为0.2％～0.8％，具体可以选自0.2％或0.8％。
[0033]
本发明优选的，所述巴洛沙韦酯干混悬剂还包括：
[0034]
调味剂、抑菌剂和着色剂。
[0035]
本发明优选的，所述调味剂选自橙粉末香精、水蜜桃香精、苹果香精、菠萝香精、香蕉香精中的一种或多种。更优选为橙粉末香精。
[0036]
所述调味剂的质量含量优选为1％～2％，具体可以选自1％、1.6％、2％，或以上述任意值为上限或下限的区间。
[0037]
本发明优选的，所述抑菌剂选自苯甲酸钠、苯甲酸、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯、山梨酸、山梨酸钾、山梨酸钙中的一种或多种；更优选为苯甲酸钠。
[0038]
所述抑菌剂的质量含量优选为0.2％～1％，具体可以选自0.2％、0.8％、1％，或以上述任意值为上限或下限的区间。
[0039]
本发明优选的，所述着色剂选自二氧化钛、氧化铁红、氧化铁黄中的一种或多种；更优选为二氧化钛。
[0040]
所述着色剂的质量含量优选为0.2％～1％，具体可以选自0.2％、0.8％、1％，或以上述任意值为上限或下限的区间。
[0041]
本发明优选的，所述巴洛沙韦酯原料药：稀释剂：助悬剂1(海藻酸钠)：助悬剂2(黄原胶)：ph调节剂：调味剂：抑菌剂：助流剂：着色剂的质量比为(2.0～5.0)：(92.4～223.0)：(0.2～1.8)：(0.2～1.8)：(2.0～10.0)：(1.0～4.0)：(0.2～2.0)：(0.2～2.0)：(0.2～2.0)。
[0042]
本发明优选的，所述巴洛沙韦酯干混悬剂，以质量含量计，包括：
[0043][0044]
在本发明的一些具体实施例中，所述巴洛沙韦酯干混悬剂，以质量含量计，包括：
[0045][0046]
在本发明的一些具体实施例中，所述巴洛沙韦酯干混悬剂，以质量含量计，包括：
[0047][0048]
在本发明的一些具体实施例中，所述巴洛沙韦酯干混悬剂，以质量含量计，包括：
[0049][0050][0051]
在本发明的一些具体实施例中，所述巴洛沙韦酯干混悬剂，以质量含量计，包括：
[0052][0053]
本发明优选的，上述巴洛沙韦酯干混悬剂采用粉末过筛混合技术制备得到。
[0054]
具体的，将巴洛沙韦酯原料药、稀释剂、黄原胶、海藻酸钠、ph调节剂、助流剂等各原料经过粉碎、过筛、混合、填充、封口制备得到。
[0055]
在本发明的一些具体实施例中，所述巴洛沙韦酯干混悬剂的制备包括以下步骤：
[0056]
a)粉碎
[0057]
先将稀释剂、助悬剂1(海藻酸钠)、助悬剂2(黄原胶)、ph调节剂、调味剂、抑菌剂分别投入fgj-300型高效粉碎机(生产厂家：浙江小伦制药机械有限公司)中进行粉碎，筛网孔径不超过1mm；
[0058]
b)过筛、整粒
[0059]
分别将稀释剂、助悬剂1、助悬剂2、ph调节剂、调味剂、抑菌剂投入k200型粉碎机(生产厂家：雍义康科技(北京)有限公司)中进行整粒，设定设备转速400rpm，筛网孔径不超过1mm；
[0060]
c)混合
[0061]
依次将稀释剂、助悬剂1、助悬剂2、ph调节剂、调味剂、抑菌剂、助流剂、着色剂投入hda-1500型多向运动混合机(生产厂家：浙江小伦制药机械有限公司)中，设定混合机转速：45转/分钟，混合5分钟。最后，将符合粒径分布的巴洛沙韦酯原料药投入hda-1500型多向运动混合机中，设定混合机转速：45转/分钟，混合15分钟。
[0062]
d)填充、封口
[0063]
将混粉倒入vpa-p4l全智能多列粉剂/颗粒剂包装机(生产厂家：广州锐嘉工业股份有限公司)的料斗中，设置填充重量125mg/袋，填充速度5万袋/小时，选择铝层12um的复合膜材料作为包装材料，填充后进行封口。
[0064]
与湿法制粒制备的巴洛沙韦酯颗粒剂相比，本发明采用的制备方法不仅操作简单、生产成本低，而且解决了在湿法制粒、干燥过程中巴洛沙韦酯原料药遇到水和热发生的药物降解，提高了产品的质量和稳定性，同时，也可以降低生产成本。此外，由于巴洛沙韦酯不溶于水，制备成干混悬剂后，在水中的分散性更好，给药剂量更准确，与颗粒剂相比，给药操作更方便，可以提高患者的顺应性，具有很好的市场前景。
[0065]
本发明提供了上述巴洛沙韦酯干混悬剂在制备用于预防、治疗或减轻甲型流感或乙型流感病毒引起的流感，以及革登热病毒、寨卡病毒、hiv病毒、2019冠状病毒引起的疾病中的应用。
[0066]
更为优选的，本发明提供了上述巴洛沙韦酯干混悬剂在制备用于治疗儿童的甲型流感或乙型流感病毒引起的流感中的应用。
[0067]
与现有技术相比，本发明提供了一种巴洛沙韦酯干混悬剂，包括：巴洛沙韦酯原料药；稀释剂；助悬剂；ph调节剂；助流剂；所述助悬剂为黄原胶和海藻酸钠。本发明采用黄原胶和海藻酸钠作为巴洛沙韦酯干混悬剂的助悬剂，可以获得较其他组合，如海藻酸钠-阿拉伯胶，海藻酸钠-卡拉胶等更好的助悬效果，同时能够满足干混悬剂项下沉降体积比不低于0.90的要求。不仅能够增加分散介质的粘度以降低微粒的沉降速度，还能够被吸附在微粒表面，增加微粒的亲水性，形成保护膜，阻碍微粒合并和絮凝，使混悬剂更稳定。制备的巴洛沙韦酯干混悬剂获得了良好的溶出度和生物利用度。更适合临床应用。
附图说明
[0068]
图1为空腹的r和t的药时曲线图；
[0069]
图2为餐后的r和t的药时曲线图。
具体实施方式
[0070]
为了进一步说明本发明，下面结合实施例对本发明提供的巴洛沙韦酯干混悬剂及其制备方法和应用进行详细描述。
[0071]
实施例1巴洛沙韦酯干混悬剂中助悬剂的筛选
[0072]
先将稀释剂、助悬剂、ph调节剂、调味剂、抑菌剂分别在实验型粉碎机中进行粉碎，筛网孔径不超过1mm。分别将稀释剂、助悬剂、ph调节剂、调味剂、抑菌剂在实验型粉碎机中进行整粒，设定设备转速400rpm，筛网孔径不超过1mm。按下表1处方量依次称取经过上述粉碎和整粒的蔗糖、助悬剂(海藻酸钠、黄原胶、阿拉伯胶、卡拉胶)、柠檬酸钠、无水柠檬酸、橙粉末香精、苯甲酸钠、微粉硅胶、二氧化钛投入实验型多向运动混合机中，设定混合机转速：45转/分钟，混合5分钟。最后，将粒径分布d90《10um、d50《5um的巴洛沙韦酯原料药投入实验型多向运动混合机中，设定混合机转速：45转/分钟，混合15分钟。
[0073]
表1巴洛沙韦酯干混悬剂中助悬剂的筛选
[0074][0075][0076]
按照《中国药典》(2020年版)四部0100制剂通则——0123口服混悬剂的项下要求，检查沉降体积比。本品为干混悬剂，取处方a、b、c、d样品各5.0g，投入具塞量筒中，加入温水，至50ml，用力振摇1分钟，记下混悬物的开始高度h0，静置3小时，计算沉降体积比，结果如表2所示。
[0077]
表2不同处方样品的沉降体积比
[0078][0079]
以上研究结果表明，仅用海藻酸钠作为助悬剂，其沉降体积比最小，说明其在以上4个处方样品中助悬作用最小；与阿拉伯胶、卡拉胶相比，海藻酸钠与黄原胶配伍使用，其助悬效果最好，也能够满足干混悬剂项下沉降体积比不低于0.90的要求。因此，优选海藻酸钠与黄原胶配伍，作为巴洛沙韦酯干混悬剂的助悬剂。
[0080]
实施例2巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1)的制备
[0081]
先将稀释剂、助悬剂1、助悬剂2、ph调节剂、调味剂、抑菌剂分别投入fgj-300型高效粉碎机(生产厂家：浙江小伦制药机械有限公司)中进行粉碎，筛网孔径不超过1mm。分别将稀释剂、助悬剂1、助悬剂2、ph调节剂、调味剂、抑菌剂分别投入k200型粉碎机(生产厂家：雍义康科技(北京)有限公司)中进行整粒，设定设备转速400rpm，筛网孔径不超过1mm。按处方量(表3所示)依次称取经过上述粉碎和整粒的蔗糖92.4kg、黄原胶0.2kg、海藻酸钠1.8kg、柠檬酸钠1.0kg、无水柠檬酸1.0kg、橙粉末香精1.0kg、苯甲酸钠0.2kg、微粉硅胶0.2kg、二氧化钛0.2kg投入hda-1500型多向运动混合机(生产厂家：浙江小伦制药机械有限公司)中，设定混合机转速：45转/分钟，混合5分钟。最后，将粒径分布d90《10um、d50《5um的巴洛沙韦酯原料药2.0kg投入hda-1500型多向运动混合机中，设定混合机转速：45转/分钟，混合15分钟。将上述混粉倒入vpa-p4l全智能多列粉剂/颗粒剂包装机(生产厂家：广州锐嘉工业股份有限公司)的料斗中，设置填充重量500mg/袋，填充速度5万袋/小时，选择铝层12um的复合膜材料作为包装材料，填充后进行封口。
[0082]
实施例3巴洛沙韦酯干混悬剂(处方2)的制备
[0083]
先将稀释剂、助悬剂1、助悬剂2、ph调节剂、调味剂、抑菌剂分别投入fgj-300型高效粉碎机(生产厂家：浙江小伦制药机械有限公司)中进行粉碎，筛网孔径不超过1mm。分别将稀释剂、助悬剂1、助悬剂2、ph调节剂、调味剂、抑菌剂投入k200型粉碎机(生产厂家：雍义康科技(北京)有限公司)中进行整粒，设定设备转速400rpm，筛网孔径不超过1mm。按处方量(表3所示)依次称取经过上述粉碎和整粒的蔗糖223.0kg、黄原胶1.8kg、海藻酸钠0.2kg、柠檬酸钠5.0kg、无水柠檬酸5.0kg、橙粉末香精4.0kg、苯甲酸钠2.0kg、微粉硅胶2.0kg、二氧化钛2.0kg投入hda-1500型多向运动混合机(生产厂家：浙江小伦制药机械有限公司)中，设定混合机转速：45转/分钟，混合5分钟。最后，将粒径分布d90《10um、d50《5um的巴洛沙韦酯原料药5.0kg投入hda-1500型多向运动混合机中，设定混合机转速：45转/分钟，混合15分钟。将上述混粉倒入vpa-p4l全智能多列粉剂/颗粒剂包装机(生产厂家：广州锐嘉工业股份有限公司)的料斗中，设置填充重量500mg/袋，填充速度5万袋/小时，选择铝层12um的复合膜材料作为包装材料，填充后进行封口。
[0084]
表3巴洛沙韦酯干混悬剂的处方
[0085]
[0086][0087]
实施例4体外溶出试验
[0088]
取实施例2和实施例3生产的巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1和处方2)，以及日本上市销售的原研品(日本盐野义制药株氏会开发，商品名为xofluza，规格为10mg)，按照溶出度测定法(《中国药典》2015年版四部通则0931溶出度与释放度测定法第二法)进行操作：量取900ml溶出介质，转速为每分钟50转，依法操作，经5min、10min、15min、20min、30min、45min、60min时，各取溶液10ml，并同时补充相同温度及体积的溶出介质，滤过，精密量取续滤液适量，加溶出介质定量稀释制成每1ml中约含10μg巴洛沙韦酯的溶液，紫外-可见分光光度法(《中国药典》2015年版四部通则0401紫外-可见分光光度法)测定最大吸收波长处的吸光度；另精密称取巴洛沙韦酯对照品(medchem express，批号：hy-109025，纯度为99.82％)，用溶出介质溶解并定量稀释制成每1ml中约含10μg巴洛沙韦酯的溶液，同法测定，分别计算每袋干混悬剂和颗粒剂在不同时间点的溶出量。测定结果见表4、表5。
[0089]
表4处方1的平均累积溶出度测定结果(n＝12)
[0090]
[0091][0092]
表5处方2的平均累积溶出度测定结果(n＝12)
[0093][0094][0095]
由表4、5结果可得，本发明生产的巴洛沙韦酯干混悬剂在水、ph1.0、ph4.5、ph6.8
四种不同ph介质中的溶出曲线均较原研品更高、更快。可以预见，本发明生产的巴洛沙韦酯干混悬剂在人体内起效较原研品更快，疗效更好。
[0096]
实施例5加速稳定性试验
[0097]
取实施例2和3生产的巴洛沙韦酯干混悬剂，以及日本上市销售的原研品(日本盐野义制药株氏会开发，商品名为xofluza，规格为10mg)，置于加速试验条件(40℃
±
2℃，rh75％
±
5％)下，分别在0、1、2、3、6个月时，考察其性状、含量、溶出度及有关物质，结果如表6所示。溶出度测定方法与实施例4一致，取样时间为30min。
[0098]
含量测定方法：按照高效液相色谱法(《中国药典》2015年版四部通则0512高效液相色谱法)，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸二氢钾水溶液-甲醇为流动相测定。精密称取样品适量，用稀释液稀释至0.05mg/ml，作为供试品溶液；另取巴洛沙韦酯对照品适量，精密称定，用稀释液稀释至0.05mg/ml，作为对照品溶液。分别精密吸取20μl上述溶液注入液相色谱仪，记录色谱图按外标法峰面积进行计算。
[0099]
有关物质测定方法：按照高效液相色谱法(《中国药典》2015年版四部通测0512高效液相色谱法)，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以磷酸二氢钾水溶液-甲醇为流动相测定。精密称取样品适量，用稀释液稀释至0.5mg/ml，作为供试品溶液；精密吸取供试品溶液1ml至100ml量瓶中，用稀释液定容，作为对照溶液。精密吸取20μl上述溶液注入液相色谱仪，记录色谱图并进行计算。
[0100]
结果如表6所示。
[0101]
表6处方1、2与原研品的加速试验数据
[0102]
[0103][0104]
表6结果表明：本发明生产的巴洛沙韦酯干混悬剂在加速条件下放置6个月，性状、含量、溶出度及有关物质均未发现有明显变化，而原研品巴洛沙韦酯颗粒剂(商品名：xofluza，规格：10mg)的有关物质在加速条件下放置6个月增长趋势较为明显，溶出度的下降趋势也较为明显，说明本发明生产的巴洛沙韦酯干混悬剂质量稳定，较原研品的质量和稳定性更优。
[0105]
实施例6处方1与原研品在空腹条件下的药代动力学研究
[0106]
受试者筛选与分组：将30名受试者按照随机编码表随机等分为a、b两组，每组15名受试者。采用两序列、两周期、交叉设计的方法，用字母t代表实施例2生产的巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1，10mg)，字母r代表原研品巴洛沙韦酯颗粒剂(xofluza，10mg)。a、b两组的受试者两个周期的服药顺序分别为tr和rt，每两个试验周期期间的清洗期为7天。
[0107]
给药：筛选合格的健康受试者，服药前在上肢静脉安置留置针。受试者服药前禁食不禁水至少10h，但服药前1h至服药后2h内禁止饮水(试验药物给药时给予的水除外)，服药2h后至12h内，每2h固定饮水不超过200ml，且两周期的饮水量保持一致。在每周期给药当天
空腹服用试验药物，按照随机表，每周期分别给予t或r10mg(将t或r倒入杯中，加入4.5ml温水，摇匀，用注射器吸入，打入口腔中)，用约240ml温水送服。服药后4.5h内保持上半身直立的状态，服药后4.5h内禁食，用药4.5h和10h后分别进食标准午餐和晚餐(如与采血时间冲突，先进行采血)。
[0108]
血样血集：受试者于服药前(即0h，服药前60min内)及服药后1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h、4.0h、5.0h、6.0h、8.0h、10.0h、12.0h、24.0h、36.0h、48.0h、72.0h、96.0h、120.0h分别抽取静脉血约4ml，置于肝素钠抗凝管中，每周期共采集18管静脉血。采血表需清楚记录实际采血时间，精确到秒，采血时间窗范围如表7所示。
[0109]
表7空腹采血点与采血时间窗要求
[0110]
采血点采血时间窗0h-60min内1.0-8.0h(含8.0h)
±
2min10.0-120.0h(含120.0h)
±
3min
[0111]
生命体征测量：服药前1h内和服药后6
±
0.5h、12
±
0.5h、24
±
0.5h、48
±
0.5h、72
±
0.5h、96
±
0.5h、120
±
0.5h。
[0112]
血样处理：血样采集至已标记好的、并提前在冰水浴中预冷过的含有肝素钠抗凝剂的真空采血管中，并立刻置于冰水浴。血样采集后转运至样本处理室离心，离心后将血浆分装为检测样本和备份样本，于分装后先转移到-30℃～-50℃冰箱中暂存，随后转移进超低温冰箱(-70～-90℃)中，直到送往分析中心时取出。血样自离体至存入-30℃～-50℃冰箱应控制在2h内。以时间点为准对样品分检测样本和备份样本进行冻存。
[0113]
血样药物浓度检测：通过采集受试者服药后不同时间点的血浆样本，采用高效液相色谱质谱(hplc-ms/ms)法检测血浆中巴洛沙韦的药物浓度。生物样本分析方法学验证和临床试验样本检测依据《化学药物临床药代动力学研究技术指导原则(nmpa，编号【h】gcl1-2)》、《生物样品分析方法验证指导原则(2015版药典)》等相关指导原则开展检测工作。
[0114]
结果如表8、9所示。
[0115]
[0116]
[0117]
[0118][0119]
药代动力学参数的计算：主要药代动力学参数为：auc
0-t
、auc
0-∞
、c
max
，其他指标还包括：λz、t
1/2
、t
max
。药代动力学(pk)参数的计算，将按照预定的时间点采集测定的血样数
据，用winnonlin(版本8.1)程序以非房室模型进行pk分析。
[0120]
结果如表10～12所示。
[0121]
表10 30名健康受试者空腹口服巴洛沙韦酯颗粒剂(原研品，r药，10mg)体内药代动力学参数
[0122][0123][0124]
表11 30名健康受试者空腹口服巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1，t药，10mg)体内药代动力学参数
[0125][0126]
表12 30名健康受试者空腹口服巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1，t药，10mg)与巴洛沙韦酯颗粒剂(原研品，r药，10mg)的体内药代动力学参数对比
[0127]
以上人体空腹研究数据表明：受试者空腹口服巴洛沙韦酯颗粒剂(原研品，r药，10mg)血药浓度达峰时间tmax平均为4.428小时，达峰浓度cmax平均为29.340ng/ml，auc
0-∞
平均为1954.609ng
·
h/ml；而受试者空腹口服巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1，t药，10mg)血药浓度达峰时间tmax平均为2.706小时，达峰浓度cmax平均为34.858ng/ml，auc
0-∞
平均为2585.040ng
·
h/ml。以上数据表明，本发明的巴洛沙韦酯干混悬剂空腹口服后达峰时间更早，起效更快；达峰浓度更高，疗效更好；体内生物利用度也更高。因此，本发明的巴洛沙韦酯干混悬剂空腹口服应用的临床优势更为明显，疗效更优。
[0128]
r和t的药时曲线图如图1所示，可以更清楚的说明本发明的巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1，t药，10mg)餐后服用优于巴洛沙韦酯颗粒剂(原研品，r药，10mg)。
[0129]
实施例7处方1与原研品在餐后条件下的药代动力学对比研究
[0130]
受试者筛选与分组：将30名受试者按照随机编码表随机等分为a、b两组，每组15名受试者。采用两序列、两周期、交叉设计的方法，用字母t代表实施例1生产的巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1，10mg)，字母r代表原研品巴洛沙韦酯颗粒剂(xofluza，10mg)。a、b两组的受试者两个周期的服药顺序分别为tr和rt，每两个试验周期期间的清洗期为10天。
[0131]
给药：筛选合格的健康受试者，服药前在上肢静脉安置留置针。受试者服药前禁食不禁水至少10h。服药前1h至服药后2h内禁止饮水(高脂餐中的饮品及服药时给予的水除外)，服药2h后至12h内，每2h固定饮水不超过200ml，且两周期的饮水量保持一致。于服药前60min内由留置针取空白血约4ml后，受试者于服药前进食高脂早餐，并于30min内用餐完毕，在开始进餐后30min时，按照随机表，每周期分别给予受试制剂或参比制剂10mg(将t或r倒入杯中，加入4.5ml温水，摇匀，用注射器吸入，打入口腔中)，用约240ml温水送服。服药后4.5h内保持上半身直立状态。服药后4.5h内禁食，用药4.5h和10h后分别进食标准午餐和晚餐(如与采血时间冲突，先进行采血)。试验过程中由临床医师进行监护，注意观察和询问受试者的各种反应，对于出现的不良反应，应密切监护观察，必要时进行对症治疗。
[0132]
血样血集：受试者于服药前(即0h，服药前60min内)及服药后1.0h、1.5h、2.0h、2.5h、3.0h、3.5h、4.0h、5.0h、6.0h、8.0h、10.0h、12.0h、24.0h、36.0h、48.0h、72.0h、96.0h、120.0h分别抽取静脉血约4ml，置于肝素钠抗凝管中，每周期共采集18管静脉血。采血表需清楚记录实际采血时间，精确到秒，采血时间窗范围如表13所示。
[0133]
表13餐后采血点与采血时间窗要求
[0134]
采血点采血时间窗0h-60min内1.0-8.0h(含8.0h)
±
2min10.0-120.0h(含120.0h)
±
3min
[0135]
生命体征测量：服药前1h内和服药后6
±
0.5h、12
±
0.5h、24
±
0.5h、48
±
0.5h、72
±
0.5h、96
±
0.5h、120
±
0.5h。
[0136]
血样处理：血样采集至已标记好的、并提前在冰水浴中预冷过的含有肝素钠抗凝剂的真空采血管中，并立刻置于冰水浴。血样采集后转运至样本处理室离心，离心后将血浆分装为检测样本和备份样本，于分装后先转移到-30℃～-50℃冰箱中暂存，随后转移进超低温冰箱(-70～-90℃)中，直到送往分析中心时取出。血样自离体至存入-30℃～-50℃冰箱应控制在2h内。以时间点为准对样品分检测样本和备份样本进行冻存。
[0137]
血样药物浓度检测：通过采集受试者服药后不同时间点的血浆样本，采用高效液相色谱质谱(hplc-ms/ms)法检测血浆中巴洛沙韦的药物浓度。生物样本分析方法学验证和临床试验样本检测依据《化学药物临床药代动力学研究技术指导原则(nmpa，编号【h】gcl1-2)》、《生物样品分析方法验证指导原则(2015版药典)》等相关指导原则开展检测工作。
[0138]
结果如表14、15所示。
[0139]
[0140]
[0141]
[0142][0143]
药代动力学参数的计算：主要药代动力学参数为：auc
0-t
、auc
0-∞
、c
max
，其他指标还包括：λz、t
1/2
、t
max
。药代动力学(pk)参数的计算，将按照预定的时间点采集测定的血样数
据，用winnonlin(版本8.1)程序以非房室模型进行pk分析。
[0144]
结果如表16～18所示。
[0145]
表16 30名健康受试者餐后口服巴洛沙韦酯颗粒剂(原研品，r药，10mg)体内药代动力学参数
[0146][0147][0148]
表17 30名健康受试者餐后口服巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1，t药，10mg)体内药代动力学参数
[0149][0150]
表18 30名健康受试者餐后口服巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1，t药，10mg)与巴洛沙韦酯颗粒剂(原研品，r药，10mg)的体内药代动力学参数对比
[0151]
以上人体空腹研究数据表明：受试者餐后口服巴洛沙韦酯颗粒剂(原研品，r药，10mg)血药浓度达峰时间tmax平均为4.489小时，达峰浓度cmax平均为14.696ng/ml，auc
0-∞
平均为977.476ng
·
h/ml；而受试者空腹口服巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1，t药，10mg)血药浓度达峰时间tmax平均为2.706小时，达峰浓度cmax平均为17.548ng/ml，auc
0-∞
平均为1232.379ng
·
h/ml。以上数据表明，本发明的巴洛沙韦酯干混悬剂餐后口服后达峰时间更早，起效更快；达峰浓度更高，疗效更好；体内生物利用度也更高。因此，本发明制备的巴洛沙韦酯干混悬剂在餐后口服应用的临床优势也更为明显，疗效同样也更优。
[0152]
r和t的药时曲线图如图2所示，可以更清楚的说明本发明的巴洛沙韦酯干混悬剂(处方1，t药，10mg)餐后服用优于巴洛沙韦酯颗粒剂(原研品，r药，10mg)。
[0153]
以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利要求的保护范围内。