一种广谱抗病毒中药注射液及其制备方法与流程

1.本发明涉及兽用中药注射液技术领域，尤其涉及一种广谱抗病毒中药注射液及其制备方法。


背景技术：

2.病毒(virus)是由一个核酸分子(dna或rna)与蛋白质构成的非细胞形态的营寄生生活的生命体。由于环境恶化、气候反常、饲料伪劣导致畜禽多病原微生物的易感性增加，各种疾病的发生及危害也日益严重，并已成为严重影响养殖业发展和经济效益提升的主要因素。畜禽疾病的频发，不仅会造成畜禽大批死亡，造成养殖户的直接损失，且死亡的畜禽需要焚烧，进一步造成资源浪费。
3.目前，在畜禽防治疾病过程中，主要是使用大量抗生素、激素及化学合成药物。但使用大量的抗生素、激素及化学合成药物容易导致药物残留，影响畜禽的出栏品质，同时，在抗生素、激素等使用期间，也会造成畜禽食欲不振，体重下降。


技术实现要素：

4.有鉴于此，本发明的目的是提供一种广谱抗病毒中药注射液及其制备方法，通过多种中药成份提取后制备的注射液，有广谱抗病毒作用，配方科学合理，且在提取的过程中，分别对寒性和甘性药材进行分别提取，再使用纯化颗粒进行处理，能够有效去除提取物中的杂质和未知颗粒，尽可能保证提取物的纯度，从而提高注射液的稳定性以及减少发生副作用的几率。
5.本发明通过以下技术手段解决上述技术问题：
6.一种广谱抗病毒中药注射液，包括以下重量份的原料：金银花3-5份、穿心莲4-7份、黄芩2-5份、连翘6-10份、野菊花2-6份、大蒜2-4份、黄芪1-3份、贯众2-5份、西洋参0.5-2份、甘草1-3份、五味子1-2份、淫羊藿0.5-3份。
7.进一步，包括以下重量份的原料：金银花4份、穿心莲5.5份、黄芩3.5份、连翘8份、野菊花4份、大蒜3份、黄芪2份、贯众3.5份、西洋参1.2份、甘草2份、五味子1.5份、淫羊藿1.5份。
8.金银花：性甘、寒，味芳香，甘寒泄降，清热解毒，芳香疏泄为花主散，为外解内清之良药；
9.穿心莲：味苦、性寒，具有清热解毒，凉血消肿的效果；
10.黄芩：性苦、寒，具有清热燥湿，泻火解毒；
11.连翘：性凉、味苦，具有清热，解毒，散结，消肿的效果，是一味具有广谱抗病毒作用的中草药；
12.野菊花：味苦、微寒，具有清热解毒，泻火平肝的效果，与金银花合用，可促进外解内和，具有排毒解热的功效；
13.大蒜：具有广谱抗菌灭菌和消炎作用，有很强的抗病毒能力，能够提高免疫功能，
活化细胞，促进能量产生，加快新陈代谢，扩张血管，改善血液循环，缓解疲劳；
14.黄芪：味甘，性微温，可直接阻断病毒的核酸合成,从而杀灭病毒；同时具有免疫增强作用，可促进抗体的形成，增强巨噬细胞对病原体的吞噬作用，进而杀灭病原体，作用迅速持久，与黄芩合用，可促进内毒的分解、排出；
15.贯众：味苦、涩，性寒，具有杀虫、清热、解毒、凉血止血的效果；
16.甘草：味甘，性平，具有补脾益气、清热解毒、调和诸药的效果；
17.五味子：味酸、甘，性温，具有收敛固涩，益气生津，补肾宁心的效果；
18.淫羊藿：性辛、甘、温；具有补肾阳、强筋骨、增强免疫功能、抑菌、抗炎、抗病毒的效果；
19.西洋参：具有抗疲劳、调节内分泌、增强免疫力的功效；
20.本发明中注射液采用纯中药配方，诸药按君臣佐使原则配伍，安全可靠、无毒副作用，配方简单、材料易得，诸药合用可起到广谱杀菌、抗病毒的效果，同时，能够起到滋阴补阳，调和表里，提高畜禽的机体免疫力，促进畜禽的健康生长。
21.本发明还公开了一种广谱抗病毒中药注射液的制备方法，包括以下步骤：
22.s1：将金银花、穿心莲、黄芩、连翘、野菊花和贯众按照比例置于清水中，清洗并去除杂质，烘干，烘干后，阴干，阴干后置于提取器中，加入碱性处理液，进行浸渍提取，浸渍提取过程中，温度保持在32-45℃，得到提取液一，对提取液一进行过滤，备用；
23.s2：将大蒜、黄芪、西洋参、甘草、五味子和淫羊藿按照比例置于清水中，清洗并去除杂质，烘干，烘干后，阴干，阴干后置于提取器中，加入酸性处理剂和乙醇，进行浸渍提取，得到提取液二，对提取液二进行过滤，备用；
24.s3：将s1步骤和s2步骤中浸渍提取后的药材用去离子水清洗3-5次，清洗后烘干，烘干后粉碎，将粉碎后的药材置于提取器中，加入80-90％的乙醇和纯化颗粒，进行重渗漉提取，得到提取液三；
25.s4：将提取液一、提取液二和提取液三混合，再次加入纯化颗粒，静置10-24h，再将纯化颗粒去除，调节ph、瞬间冷冻，然后加入苯甲醇和注射用水进行灌封、灭菌得到注射液。
26.通过在中药材的提取过程中，对寒性药材进行碱性处理液浸泡后，再进行浸渍提取，一方面，碱性处理液能够增加寒性药材的细胞壁通透性，另一方面，能够使寒性药材中的生物酸充分提取，从而充分得到寒性的有效成分的提取液一；对性平及性甘的药材通过酸性处理剂以及乙醇进行浸渍提取，一方面，能够增强性平及性甘的药材的细胞壁通透性，另一方面，能够使性平及性甘的药材中的生物碱充分提取，进而得到甘性的有效成分的提取液二；再将两者药材混合，通过重渗漉提取，将所用中药材中的有效成分完全提取，并采用纯化颗粒对提取液三进行纯化，去除提取液三中的杂质和未知颗粒，再将三种提取液混合后，再次纯化，尽可能保证提取液的纯度，从而提高注射液的稳定性以及减少发生副作用的几率，再通过对提取液进行瞬间冷冻处理，降低提取液中有效成分的活性，避免在未使用时，失去活性。
27.进一步，所述s1步骤中，碱性处理液包括氨水、丙酮和水，所述氨水、丙酮和水的质量比为：5:80:15，过滤时，采用微滤膜过滤，过滤压力为0.5-1.5mpa。
28.通过控制氨水、丙酮和水的比例，形成碱性缓冲体系，加快提取效率。通过采用加压的方式进行微滤，将提取液一种的杂质和位置颗粒去除。
29.进一步，所述s2步骤中，酸性处理剂包括：苹果酸、乙酸和蒙脱土，所述酸性处理剂的制备包括以下步骤：
30.s201：将蒙脱土置于去离子水中，加入0.2mol/l的稀盐酸，超声波分散5-10min，分散完成后、抽滤、干燥，得到去除杂质的蒙脱土；
31.s202：将经过s201步骤处理的蒙脱土置于去离子水中，加入十二烷基硫酸钠，超声波分散5-10min，加入苹果酸和乙酸，于35-50℃的条件下，继续超声波分散3-5min，抽滤、冷冻干燥，得到中间体；
32.s203：将s202步骤中制备的中间体制备成颗粒状，将颗粒状中间体置于带孔的胶囊皮中，得到酸性处理剂。
33.通过将蒙脱土除杂，再将苹果酸和乙酸插接在蒙脱土的间层中，再将蒙脱土制备成颗粒状，并用胶囊包覆，一方面，使蒙脱土可持续性释放酸性物质，另一方面，使蒙脱土能够重新吸附酸性物质，节省成本，且还能吸附中药材中存在的重金属离子，减轻中药材中提取液的重金属含量。
34.进一步，所述s203步骤中，中间体经过挤压制备成颗粒状，挤压的压力为3-5mpa，所述颗粒状中间体的粒径为20-30mm，所述胶囊皮为无毒的聚乙烯塑料，所述胶囊皮上的孔径为1-3mm。
35.通过将中间体制备成颗粒状，在用带孔的胶囊皮将其包覆，便于酸性处理剂与中药材分离。
36.进一步，所述s3步骤中的纯化颗粒的制备包括以下步骤：将沸石置于稀盐酸溶液中，超声波震荡1-3min，超声波震荡后，取出沸石，钻孔，再机械打磨成颗粒状，将颗粒状沸石置于清水中，超声波震荡1-3min，超声波完成后，干燥，得到纯化颗粒。
37.通过对沸石的孔隙进行酸修饰，酸修饰后再进行钻孔，扩大孔径，使沸石能够充分吸附提取液中的杂质和未知颗粒，提高提取液的纯度，且沸石可再生，节约资源。
38.进一步，所述纯化颗粒的制备过程中，钻孔采用机械钻孔，孔数大于3，孔径为0.2-2um。
39.进一步，所述s3步骤中，粉碎后药材的粒径为200-320目，所述纯化颗粒的粒径为400-500目。
40.进一步，所述s4步骤中，采用氢氧化钾调节ph，所述ph值的范围为6.2-6.8。
41.本发明的有益效果：通过采用纯中药配方，并将中药提取形成注射液，使注射液可起到广谱杀菌、抗病毒的效果，同时，能够起到滋阴补阳，调和表里，提高畜禽的机体免疫力，促进畜禽的健康生长。在注射液的提取过程中，通过分别对不同性质的药材进行处理，一方面，能够充分提取药材中的有效成分，另一方面，提高提取效率，同时，采用纯化颗粒对提取液进行纯化，去除提取物中的杂质和未知颗粒，尽可能保证提取物的纯度，从而提高注射液的稳定性以及减少发生副作用的几率，并对纯化的提取液进行瞬间冷冻，降低提取液中有效成分的活性，避免在未使用时，失去活性。
具体实施方式
42.以下将结合具体实施例对本发明进行详细说明：
43.实施例1，广谱抗病毒中药注射液的制备一
44.包括以下重量份的原料：金银花3份、穿心莲4份、黄芩2份、连翘6份、野菊花2份、大蒜2份、黄芪1份、贯众2份、西洋参0.5份、甘草1份、五味子1份、淫羊藿0.5份。
45.其中，酸性处理剂的制备包括以下步骤：
46.s201：将10kg蒙脱土置于去离子水中，加入足量0.2mol/l的稀盐酸，超声波以80khz的功率分散3-5min，分散完成后、抽滤、干燥，得到去除杂质的蒙脱土；
47.s202：将经过s201步骤处理的10kg蒙脱土置于去离子水中，加入1.8kg十二烷基硫酸钠，超声波以120khz的功率分散5-10min，加入2.5l苹果酸和1.5l乙酸，于35-50℃的条件下，超声波以120khz的功率继续分散3-5min，抽滤、冷冻干燥，得到中间体；
48.s203：将s202步骤中制备的中间体经过挤压设备以3-5mpa的压力挤压成粒径为20-30mm的颗粒，将颗粒状中间体置于的聚乙烯胶囊皮中，聚乙烯胶囊皮上通过钻孔，得到大量孔洞，孔洞的直径为1-3mm，从而得到酸性处理剂。
49.s1：将3重量份的金银花、4重量份的穿心莲、2质量份的黄芩、6重量份的连翘、2重量份的野菊花和2重量份的贯众按照比例置于清水中，清洗并去除杂质，烘干，烘干后，阴干，阴干后置于提取器中，加入50重量份的氨水、丙酮和水的混合液，于32℃的条件下进行浸渍提取，得到提取液一，对提取液一进行过滤，过滤时，采用微滤膜进行过滤，过滤压力为0.5mpa，得到去除杂质的提取液一，备用；
50.s2：将1重量份的黄芪、2重量份的大蒜、0.5重量份的西洋参、1重量份的甘草、1重量份的五味子和0.5重量份的淫羊藿按照比例置于清水中，清洗并去除杂质，烘干，烘干后，阴干；阴干后置于提取器中，加入5重量份的酸性处理剂和足量的95wt％的乙醇，进行浸渍提取，得到提取液二，对提取液二进行过滤，过滤时，采用微滤膜进行过滤，过滤压力为0.5mpa，得到去除杂质的提取液二，备用；
51.s3：将s1步骤和s2步骤中浸渍提取后的全部中药材采用去离子水清洗3-5次，清洗后烘干，烘干后机械粉碎，粉碎至200目，将粉碎后的药材置于提取器中，加入80-90％的乙醇和纯化颗粒，进行重渗漉提取，得到提取液三；其中，纯化颗粒采用沸石颗粒，沸石颗粒在制备时，将沸石置于0.2mol/ml的稀盐酸溶液中，超声波以20khz的频率震荡1min，超声波震荡后，取出沸石，机械钻孔，孔数随意分布在沸石表面，且为4个，孔径为2um，再机械打磨成粒径为400目的颗粒状，将颗粒状沸石置于清水中，超声波以25khz的频率震荡1min，超声波完成后，干燥，得到纯化颗粒；
52.s4：将s1步骤制备的提取液一、s2步骤制备的提取液二和s3步骤制备的提取液三混合均匀，再次加入足量的纯化颗粒，静置10-24h，静置完成后，将纯化颗粒捞出，采用氢氧化钾调节ph，使混合提取液的ph为6.2，然后将混合提取液瞬间冷冻至3℃，然后加入苯甲醇和注射用水进行灌封、灭菌得到注射液。
53.实施例2，广谱抗病毒中药注射液的制备二
54.包括以下重量份的原料：金银花4份、穿心莲5.5份、黄芩3.5份、连翘8份、野菊花4份、大蒜3份、黄芪2份、贯众3.5份、西洋参1.2份、甘草2份、五味子1.5份、淫羊藿1.5份。
55.其中，酸性处理剂的制备步骤与实施例1中的制备步骤相同。
56.s1：将4重量份的金银花、5.5重量份的穿心莲、3.5质量份的黄芩、8重量份的连翘、4重量份的野菊花和3.5量份的贯众按照比例置于清水中，清洗并去除杂质，烘干，烘干后，阴干，阴干后置于提取器中，加入80重量份的氨水、丙酮和水的混合液，于40℃的条件下进
行浸渍提取，得到提取液一，对提取液一进行过滤，过滤时，采用微滤膜进行过滤，过滤压力为1mpa，得到去除杂质的提取液一，备用；
57.s2：将2重量份的黄芪、3重量份的大蒜、1.2重量份的西洋参、2重量份的甘草、1.5重量份的五味子和1.5重量份的淫羊藿按照比例置于清水中，清洗并去除杂质，烘干，烘干后，阴干后后置于提取器中，加入8重量份的酸性处理剂和足量的95wt％的乙醇，进行浸渍提取，得到提取液二，对提取液二进行过滤，过滤时，采用微滤膜进行过滤，过滤压力为1mpa，得到去除杂质的提取液二，备用；
58.s3：将s1步骤和s2步骤中浸渍提取后的全部中药材采用去离子水清洗3-5次，清洗后烘干，烘干后机械粉碎，粉碎至260目，将粉碎后的药材置于提取器中，加入80-90％的乙醇和纯化颗粒，进行重渗漉提取，得到提取液三；其中，纯化颗粒采用沸石颗粒，沸石颗粒在制备时，将沸石置于0.2mol/ml的稀盐酸溶液中，超声波以20khz的频率震荡2min，超声波震荡后，取出沸石，机械钻孔，孔数随意分布在沸石表面，且为6个，孔径为1um，再机械打磨成粒径为450目的颗粒状，将颗粒状沸石置于清水中，超声波以25khz的频率震荡2min，超声波完成后，干燥，得到纯化颗粒；
59.s4：将s1步骤制备的提取液一、s2步骤制备的提取液二和s3步骤制备的提取液三混合均匀，再次加入足量的纯化颗粒，静置10-24h，静置完成后，将纯化颗粒捞出，采用氢氧化钾调节ph，使混合提取液的ph为6.5，然后将混合提取液瞬间冷冻至3℃，然后加入苯甲醇和注射用水进行灌封、灭菌得到注射液。
60.实施例3，广谱抗病毒中药注射液的制备三
61.包括以下重量份的原料：金银花5份、穿心莲7份、黄芩5份、连翘10份、野菊花6份、大蒜4份、黄芪3份、贯众5份、西洋参2份、甘草3份、五味子2份、淫羊藿3份。
62.其中，酸性处理剂的制备步骤与实施例1中的制备步骤相同。
63.s1：将5重量份的金银花、7重量份的穿心莲、5质量份的黄芩、10重量份的连翘、6重量份的野菊花和5量份的贯众，按照比例置于清水中，清洗并去除杂质，烘干，烘干后，阴干，阴干后置于提取器中，加入100重量份的氨水、丙酮和水的混合液，于50℃的条件下进行浸渍提取，得到提取液一，对提取液一进行过滤，过滤时，采用微滤膜进行过滤，过滤压力为1.5mpa，得到去除杂质的提取液一，备用；
64.s2：将3重量份的黄芪、4重量份的大蒜、2重量份的西洋参、3重量份的甘草、2重量份的五味子和3重量份的淫羊藿按照比例置于清水中，清洗并去除杂质，烘干，烘干后，阴干；阴干后置于提取器中，加入10重量份的酸性处理剂和足量的95wt％的乙醇，进行浸渍提取，得到提取液二，对提取液二进行过滤，过滤时，采用微滤膜进行过滤，过滤压力为1.5mpa，得到去除杂质的提取液二，备用；
65.s3：将s1步骤和s2步骤中浸渍提取后的全部中药材采用去离子水清洗3-5次，清洗后烘干，烘干后机械粉碎，粉碎至320目，将粉碎后的药材置于提取器中，加入80-90％的乙醇和纯化颗粒，进行重渗漉提取，得到提取液三；其中，纯化颗粒采用沸石颗粒，沸石颗粒在制备时，将沸石置于0.2mol/ml的稀盐酸溶液中，超声波以20khz的频率震荡3min，超声波震荡后，取出沸石，机械钻孔，孔数随意分布在沸石表面，且为8个，孔径为0.2um，再机械打磨成粒径为500目的颗粒状，将颗粒状沸石置于清水中，超声波以25khz的频率震荡3min，超声波完成后，干燥，得到纯化颗粒；
66.s4：将s1步骤制备的提取液一、s2步骤制备的提取液二和s3步骤制备的提取液三混合均匀，再次加入足量的纯化颗粒，静置10-24h，静置完成后，将纯化颗粒捞出，采用氢氧化钾调节ph，使混合提取液的ph为6.8，然后将混合提取液瞬间冷冻至3℃，然后加入苯甲醇和注射用水进行灌封、灭菌得到注射液。
67.实施例4(对比实施例)，广谱抗病毒中药注射液的制备四
68.包括以下重量份的原料：金银花5份、穿心莲7份、黄芩5份、连翘10份、野菊花6份、大蒜4份、黄芪3份、贯众5份、西洋参2份、甘草3份、五味子2份、淫羊藿3份。
69.s1：将3重量份的金银花、4重量份的穿心莲、2质量份的黄芩、6重量份的连翘、2重量份的野菊花、1重量份的黄芪、2重量份的贯众、2重量份的大蒜、0.5重量份的西洋参、1重量份的甘草、1重量份的五味子和0.5重量份的淫羊藿按照比例置于清水中，清洗并去除杂质，烘干，烘干后，阴干；
70.s2：将s1步骤中的中药材置于提取器中，加入70-85％的乙醇，于35℃的条件下，进行浸渍提取，得到提取液一，对提取液一进行过滤，过滤时，采用微滤膜进行过滤，过滤压力为0.5mpa，得到去除杂质的提取液一，备用；
71.s3：将s2步骤中浸渍提取后的全部中药材采用去离子水清洗3-5次，清洗后烘干，烘干后机械粉碎，粉碎至200目，将粉碎后的药材置于提取器中，加入80-90％的乙醇进行重渗漉提取，得到提取液二；
72.s4：将s2步骤制备的提取液一和s3步骤制备的提取液二混合均匀，在混合过程中，采用氢氧化钾调节ph，使混合提取液的ph为6.2，然后加入苯甲醇和注射用水进行灌封、灭菌得到注射液。
73.利用实施例2所得兽用中药抗病毒注射液进行药效试验，具体过程如下：
74.1、试验药物：上述处方所述的注射液，规格：10ml。
75.2、对照药物：黄芪多糖注射液，规格：10ml:1g黄芪多糖，批号20211026，由诸城市华特兽药有限公司生产；实施例4制备出的注射液，规格：10ml；
76.3、供试动物：市郊猪场20-30日乳猪，体重4-8kg，常规饲养，母猪饲料为不含抗菌药物的全价饲料，仔猪均有自然发病状况，出现激烈咳嗽、眼鼻有黏液、体温升高、腹泻，发热，精神沉郁，食欲下降，耳部和体表皮肤发紫症状等症状，初步诊断为圆环病毒、伪狂犬病、链球菌等引起的细菌与病毒混合感染的急性传染病。
77.4、试验方法：80头患病仔猪，随机分成4组，每组20头，分别为试验组、试验对照组1、试验对照组2和空白对照组。
78.5、治疗方法：试验组：肌肉注射本发明产品，0.1ml/kg体重，一日一次，连用5天；试验对照组1和试验对照组2均采用0.1ml/kg体重，一日一次，连用5天；空白对照组不用药。
79.疗效指标
80.死亡率：凡在试验期间，出现上述发病症状，剖检有典型病变特征，并分离出相应病原菌者，治疗无效，判定感染死亡，根据死亡头数算出死亡率。
81.有效率：凡在试验期间，经用药后临床症状明显减轻至消失，体重较用药前增加，剖杀后无可见的病理变化，分离无相应病原菌者，判为有效，按此计算有效率。
82.试验结果：
83.试验组应用实施例2所得兽用中药抗病毒注射液紧急处理后，发病猪只死亡2头，3
头明显好转，其余15头治愈，有效率达90％，治愈率达75％，试验对照组1发病猪死亡5头，4头明显好转，其余11头治愈，有效率达75％，治愈率达55％，试验对照组2发病猪死亡4头，4头明显好转，其余12头治愈，有效率达80％，治愈率达60％，空白对照组发病猪死亡16头死亡，死亡率达到80％。具体见表1：
[0084][0085][0086]
由表1可见，试验组因注射实施例2所得兽用中药抗病毒注射液，对圆环病毒、伪狂犬病与链球菌混合感染的临床疗效确定，其效果明显优于试验对照组1的药物，与对照组1的药物相比差异极显著(p《0.01)。
[0087]
在死亡率及有效率上，注射本发明抗病毒注射液的试验组与对照组1相比，有效率高于对照组1，差异显著(p《0.06)。
[0088]
由试验组和试验对照组2中的数据可知，通过对本方案中的中药材按照药材的寒性以及甘性分别进行处理，再通过对提取液进行纯化处理，能够得到药效更充足的注射液，说明本方案中按照药材的寒性以及甘性分别进行处理，再通过对提取液进行纯化处理能够提升注射液的稳定性和药效。
[0089]
经上述药物临床试验表明，本发明中药抗病毒注射液对猪圆环病毒、伪狂犬病等引起的毒混合感染的急性传染病有良好的治疗效果，临床推荐剂量：每kg体重肌肉注射0.1ml。
[0090]
以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制，尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。本发明未详细描述的技术、形状、构造部分均为公知技术。